VDR基因启动子单核苷酸多态性与前列腺癌的关系

目的了解维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)基因启动子上存在的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)与前列腺癌的关系,进而探讨导致前列腺发病的遗传因素。方法提取60例前列腺癌及50例良性前列腺增生患者外周血标本中基因组DNA,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)检测并分析了VDR基因起始密码SNP在两组中的分布。常规病理方法分析前列腺癌的Gleason评分。对比分析VDR基因上存在的SNP与前列腺癌发生发展的相关性。结果前列腺癌组和前列腺增生组FokⅠ等位基因多态性分布差异有统计学意义(P<0.05),高危组和低危组前列腺癌中VDR基因SNP分布的的差异有统计学意义(P<0.05)。结论VDR基因起始密码SNP不同类型可能与前列腺癌的发生有相关性。不同SNP类型可能成为前列腺癌发展的危险因素。

PCR-RFLP检测维生素D受体基因启动子区多态性

目的建立一种简便、实用、重复性好的人维生素D受体(vitamin Dreceptor,VDR)基因5′端启动子区Fok1酶切位点多态性的检测方法,以利于VDR基因起始密码多态性与骨质疏松等疾病相关性的研究。方法应用聚合酶链反应(PCR)特异性扩增VDR基因5′端启动子区,扩增产物用限制性内切酶Fok1酶切,10%聚丙酰胺凝胶电泳观察酶切结果。结果应用PCR-RFLP法检测了98例健康汉族中老年人VDR基因型,FF、Ff、ff基因型分布频率分别为47%、43%、10%。结论该方法简便、准确、实用,适用于院校及医院实验室的研究和分子流行病学调查。

ABO基因c.2T>C突变致GTA翻译异常引起的A_xB表型一例及机制分析

目的:对1例ABO正反定型不一致患者的血标本进行鉴定,并探索其潜在的分子机制。方法:血清学标准方法鉴定ABO血型,并进行血浆总体A糖基转移酶(glucanotransferase,GTA)活性测定。对ABO基因7个外显子及其侧翼序列行PCR扩增、直接测序或克隆后测序分析。结果:本例血清学鉴定为A_xB亚型;血浆总体GTA活性明显下降(效价为±);ABO基因外显子1的第2位核苷酸存在T>C错义突变。结论:ABO基因c.2T>C突变导致翻译起始位点被跨膜结构域或茎区域中的Met替代,从而形成N端截短的GTA的表达,进而引起此例患者A_xB表型。