油莎豆快速繁殖体系构建研究

为建立油莎豆(Cyperus esculentus)快速繁殖体系,本试验以黑油莎2号为试验材料,茎尖作为外植体,采用植物不同组织培养条件培养油莎豆无菌苗,以期筛选出最佳茎尖消毒方法、适宜茎尖分化培养基配方以及快速生根培养基配方。结果表明:随消毒时间的增加,黑油莎2号茎尖污染率呈现降低的趋势,而存活率则呈现先升后降的变化;MS+0.9 mg/L 6-苄基腺膘呤(6-BA)+0.3 mg/L萘乙酸(NAA)处理时,黑油莎2号茎尖分化成苗数量显著高于其他处理(P <0.05),且茎尖分化成苗率最高,为62.67%;1/2MS+0.2 mg/L吲哚丁酸(IBA)处理时,黑油莎2号无菌苗生根数量(29.00)最高,显著高于其他处理(P <0.05),且根系粗壮,根长为0.9~3.0 cm。最后得出75%酒精30s+0.1%升汞4 min为黑油莎2号最佳茎尖消毒方法,MS+0.9 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA为最佳茎尖分化培养基配方,MS+1.0 mg/L 6-BA和1/2MS+0.2 mg/L IBA分别是最佳快速繁殖和生根培养基配方。油莎豆快速繁殖体系构建为寒区高效繁育油莎豆优异种苗及种质资源创新提供依据。

激素配比对甘薯组织培养及试管苗移栽后生长的影响

研究植物外源激素6-BA和NAA不同配比对甘薯愈伤分化、继代扩繁、试管苗移栽后生长的影响,建立高效的甘薯茎尖离体脱毒培养和快速繁殖技术体系。以推广应用面积较大的甘薯品种‘烟薯25’、‘普薯32’、‘龙薯9号’和‘商薯19’为试验材料,在MS培养基中添加6个不同浓度配比的6-BA、NAA,配制愈伤分化培养基和继代扩繁培养基。探讨茎尖组织愈伤率、成苗率、愈伤组织直径、叶片数,同时调查试管苗移栽成活率、叶片数量、株高、基部茎粗等的差异,研究组培苗愈伤分化、继代扩繁和移栽后生长的最佳配方。‘烟薯25’和‘普薯32’的愈伤分化成苗率在A4处理(1.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA)下最高,‘龙薯9号’和‘商薯19’愈伤分化成苗率在A3处理(1.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA)下最高;‘烟薯25’在B4处理(0.5 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA)下继代扩繁培养长势较好,移栽后成活率高、生长快,‘普薯32’、‘龙薯9号’和‘商薯19’在B3处理(0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA)下继代扩繁培养长势较好、移栽后成活率最高、生长快。在甘薯茎尖组织愈伤分化、继代扩繁过程中,不同甘薯品种适宜的6-BA、NAA配比存在显著差异,实际生产过程中应充分考虑品种特性。

蜜薯茎尖脱毒快繁体系优化与脱毒效果的研究

针对蜜薯病毒病严重的问题,对蜜薯进行茎尖脱毒,研究不同消毒剂与消毒时间对蜜薯外植体消毒效果和脱毒率的影响。通过RT-PCR技术检测蜜薯苗所带病毒种类;针对检测出的病毒进行茎尖脱毒处理,研究不同消毒剂与消毒时间对蜜薯外植体消毒效果的影响;通过正交试验研究6-BA、NAA、GA_(3)和IAA激素浓度配比对茎尖诱导及根诱导的影响,以此优化蜜薯快繁体系;最后,用RT-PCR检测茎尖脱毒效果。结果表明:蜜薯病毒初检发现,蜜薯中主要携带SPVG、SPFMV和SPCSV 3种病毒,其中SPVG带毒率最高;茎尖诱导适宜的外植体消毒方式为:70%酒精清洗45 s,再用0.1%升汞溶液浸泡7~8 min;茎尖诱导适宜的培养基选择为:MS+1.0 mg·L^(–1)6-BA+0.1 mg·L^(–1)NAA+1.0 mg·L^(–1)GA_(3),生根诱导最适宜培养基为1/2 MS+0.1 mg·L^(–1)NAA+0.1 mg·L^(–1)IAA。经茎尖脱毒后SPFMV脱除效果最好,脱毒率为100%,SPVG次之,SPCSV脱除效果最差,仅降低了约3.33%。

尤加利茎尖组培快繁体系的建立

尤加利是当前国内外鲜切花市场上重要的切叶材料,筛选其茎尖生长及生根的最佳培养基,建立其组培快繁体系,可为尤加利组培苗工厂化生产提供参考。以尤加利无菌茎尖为试验材料,分析不同基础培养基、6-BA、NAA组合及其浓度处理下尤加利组培生长和生根情况,并对组培苗进行移栽试验。结果表明:基本培养基是影响尤加利组培苗褐化和增殖的主要因子,NAA是影响尤加利组培苗生根的主要因子;1/4 WPM+6-BA1.3 mg/L+NAA0.1 mg/L组合处理下尤加利茎尖组培褐化率(2.63%)较低,增殖率(115.79%)和生根率(97.37%)均达到最大,移栽后幼苗健壮,叶色浓绿,移栽成活率可达73.71%。可见,1/4 WPM+6-BA1.3 mg/L+NAA0.1 mg/L+蔗糖15 g/L+琼脂6.0 g/L作为最佳培养基,可建立高效的尤加利茎尖组培快繁体系。

甘薯脱毒及种薯(苗)繁育技术研究

中国是世界上最大的甘薯生产国,然而由于病毒病的存在,严重制约了甘薯产业的发展,建立通用的脱毒组培体系、高灵敏度的检测体系及高效的种薯(苗)繁育体系对甘薯产业发展具有重要意义。对12个主栽品种进行茎尖脱毒处理,建立了通用的脱毒组培体系MS+2 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA,大多数品种的再生率在58%以上;获得SPFMV、SPCSV、SPLV、SPCFV和SPVG这5种病毒的特异性引物,该引物对病毒检测极限依次为10^(-6)、10^(-1)、10^(-4)、10^(-3)和10^(-3),具有较高的灵敏性;对脱毒品系进行筛选,获得优良脱毒株系甘12和粉薯2-2;建立脱毒种薯(苗)的三级繁育体系,即组培苗(一级)扩繁,温网室基质苗(二级)扦插扩繁和网棚大田苗(三级)繁育生产用种;进行洗苗速率(带根和不带根)对比试验,移栽方式(带根和不带根)与每孔移栽棵数(1~3棵)的双因素试验,结果表明不带根处理可显著提升洗苗速率,育苗前期每孔移栽棵数(1~3棵)在株高、茎粗、节间数方面无显著差异,带根处理前期生长具有优势,但二者成活率无显著差异,并不影响育苗结果。因此,该研究有利于甘薯病毒病防治、脱毒种薯(苗)推广和育苗成本的降低。

安徽药菊茎尖组织培养技术的研究

目的 :研究安徽药菊茎尖组织培养技术 ,建立最佳培养条件。方法 :取药菊的茎尖 0 .5mm左右 ,分别在不同的培养基中培养 ,诱导其为完整植株。结果与结论 :以MS +6 BA 2mg·L-1+NAA 0 .2mg·L-1为茎尖诱导培养基较好 ,4 0d后 ,芽诱导率达 80 %以上 ;以MS +6 BA 2mg·L-1+NAA 0 .5mg·L-1为芽增殖培养基 ,2 5～ 30d后 ,芽增殖系数达 4～ 7倍 ;生根培养基以MS +NAA 0 .5mg·L-1为宜 ,生根率 10 0 % ,根系粗壮 。

怀山药茎尖脱毒培养与茎段增殖研究

以怀山药的茎尖、茎段为外植体,研究不同激素配比对山药茎尖分化及茎段快繁的影响,筛选适合于怀山药生长的培养基。结果表明:MS+BA 1mg/L+KT 2mg/L+NAA 0.2mg/L是怀山药茎尖分化较理想的培养基,成苗率较高(30%);MS+BA 1mg/L+NAA 0.5mg/L是怀山药茎段快繁最佳培养基,不定芽诱导率较高,成苗率最高,达到109.5%。添加0.01%聚乙烯吡咯烷酮(PVP)后茎段褐化现象得到了很大的改善。

地黄脱毒技术研究

从地黄种茎育出的无菌幼苗上切取下的茎尖,用组织培养方法可诱导成去病毒幼苗。本试验还研究出适宜地黄茎段苗消毒的消毒剂为0.05％HgCl_2。适宜于茎段苗生长的MS培养基的琼脂浓度为0.7％,pH为7。诱导茎尖成苗的培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L。繁殖脱毒苗所用的MS培养基为1/4大量元素+1/2微量元素,并用1/2食用白砂糖代替蔗糖,可使快繁成本降低48.7％。

大豆子叶节、胚尖再生植株的研究

为了获得高效的大豆再生体系,以大豆品种合丰35和北京小黑豆的成熟种子为材料,利用氯气和升汞两种消毒方法,研究不同浓度6-BA和2,4-D对子叶节和茎出芽的影响。结果表明:在大豆萌发时,加入1.0 mg L^(-1)6-BA和2.0 mg L^(-1)2,4-D,每个外植体分化的芽数较高;在茎尖再生系统中,6-BA和2,4-D诱导茎尖不定芽形成的最佳浓度是3.0 mg L^(-1)和3.5 mg L^(-1),最佳诱导时间是24-48 h。

大蒜茎尖脱毒技术及组织培养研究

采用山西栽培的５个地方名蒜茎尖离体培养，获得了无病毒蒜种。结果表明，茎尖大小为０．２～０．５ｍｍ，不定芽增殖培养基以Ｂ５或ＭＳ．附加１～２ｍｇ／Ｌ细胞分裂素和０．０１～０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ，效果最佳。根系诱导在原培养基中加入０．２ｍｇ／ＬＮＡＡ，出根率可达９０％以上。成苗后于１２月份移栽到节能日光温室，成活率达９０％以上。经对脱毒苗形态观察和染色体检测，没有发生异常变化，植株生长健壮，遗传性稳定，产量高。

741杨器官、体细胞胚胎发生的细胞组织学及生理学的研究

杨树是重要的造林树种之一，优良杂种无性系７４１杨［Ｐｏｐｕｌｕｓａｌｂａ×（Ｐ．ｄａｖｉｄｉａｎａ×Ｐ．ｓｉｍｏｎｉ）×Ｐ．ｔｏｍｅｎｔｏｓａ］更因其速生丰产、材质优良等特点在我国北方诸省有极广泛的栽培［１］。杨树的组织培养工作进展较快，在体细胞胚胎...

不同蔬菜型甘薯在不同种植密度下茎尖产量和品质

蔬菜型甘薯的茎尖产量、品质及经济效益不同品种间存在很大的差异,与普通甘薯品种南薯88相比,渝菜1号的茎尖产量和新增产值最高,且多酚氧化酶活性低,营养品质优。不同种植密度试验结果表明,高密度(1hm2104 948株)栽培条件下各参试品种(系)的茎尖产量均比低密度(1 hm252 474株)栽培条件下高,各品种(系)高密度栽培条件下1 hm2的新增产值平均比低密度栽培条件下的高15647.68元。

甘薯茎尖脱毒与快速繁殖技术研究

甘薯茎尖分生组织脱毒培养与茎段快速繁殖 ,对培养条件和几种主要培养因子的反应十分敏感。以MS为基本培养基对甘薯茎尖分生组织与茎段进行不同激素种类和浓度试验 ,结果表明 ,IAA∶6 -BA为 1∶5～ 2 0诱导效果好 ,最佳诱导分化培养基为 :MS +6 -BA 1mg/L +IAA 0 .1～ 0 .2mg/L +GA3 0 .1mg/L ;试管苗株系经指示植物、NCM -ELISA法检测 ,获得了 6个品种的脱毒苗。脱毒苗茎段试管快速繁殖时 ,不同品种之间有差异 ,单独使用IAA或与GA3 结合使用 ,在 2 8℃、光照 12h/d。

生姜茎尖组培快繁技术研究

以生姜茎尖为外植体,研究了用于生姜脱毒脱菌的组培快繁技术。试验结果表明:不同的激素组合,对生姜组培快繁有明显的影响。诱导生姜愈伤组织以2,4 D2mg/L+KT1mg/L组合的培养基效果较好,诱导生姜芽分化较好的培养基是KT2mg/L+NAA0 5mg/L。

抗茎枯病芦笋品种离体培养的研究

选用芦笋(Asparagus officinalis)茎枯病高抗品种格兰蒂为材料,研究各种生长素及细胞分裂素对其茎尖诱导的愈伤组织、不定芽增殖和生根的效果。实验结果表明,最适芦笋茎尖诱导愈伤组织的培养基为:MS+6-BA0.3 mg/L+2,4-D 1.5 mg/L+蔗糖25 g/L+琼脂7 g/L,pH 5.8;最适愈伤组织增殖诱导、分化不定芽的培养基为:MS+NAA 0.3 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L,pH 5.8;最适生根培养基为:1/2 MS+0.5 mg/L IBA+1 mg/L PP333+0.3 mg/L 6-BA+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L,pH 5.8。

玉米不同部位愈伤组织诱导及植株再生的比较研究

为建立稳定高效的玉米再生体系,选用6个玉米常用自交系的成熟胚、幼胚、茎尖和幼嫩叶段作为外植体,在含有不同外源激素的培养基中诱导愈伤组织及植株再生,比较研究这6个玉米自交系的诱愈率和分化率,并观察愈伤的形态。结果表明,在适宜的培养条件下,不同基因型、不同外植体均能分化出苗,但其再生率差别较大,其中玉米幼胚的诱愈率和分化率最高,其次为茎尖、成熟胚,幼嫩叶段相对较低。不同外植体的培养基类型和外源激素的浓度配比有着很大的不同,且不同基因型的愈伤差异也较大。本研究筛选出了3个愈伤胚性良好、分化率较高的玉米基因型辐80、综31和Mo17。玉米茎尖、成熟胚和幼嫩叶段的再生均找到了适宜的培养条件,完全能够代替幼胚作为愈伤组织诱导的初始材料,该结果为建立一套高效稳定的玉米再生体系提供了理论依据和技术参考。

烟草快速繁殖及培养的研究

通过对比试验，探讨了烟草组织培养快速繁殖种苗的最佳途径，对组培过程中激素的组成和数量对种苗的生长影响进行研究．结果表明：以Ｋ３２６、红大、Ｇ－２８这３种烟草的茎尖为外植体接种在ＭＳ＋６－ＢＡ０３＋ＩＢＡ００５的培养基上，芽的萌发势较好，继代增殖在ＭＳ＋６－ＢＡ３＋ＩＢＡ０２的培养基上经３５ｄ的振动液体培养，每芽可增殖近５０个幼芽，增殖芽在１／２ＭＳ生根培养基上培养３０ｄ，能长成健壮完整的植株，本试验还进行了一系列降低成本、简化培养方面的研究．

温度处理和茎尖培养结合脱除泡桐丛枝病类菌原体（MLO）

将患有丛枝病的泡桐组培苗进行温度处理，结合茎尖培养用来脱除病原ＭＬＯ。结果表明，在４５℃下，病茎段２４—４８小时内脱水枯死；在４０℃下３周内病苗黄化枯萎；但在３０℃和２５℃处理的茎段萌发新枝条仍表现典型丛枝症状。而在３５℃下处理的茎段，１周后，新生长茎叶外观恢复正常，继续处理至８０天，植株仍能正常生长。组织经ＤＡＰＩ染色后荧光显微镜检查显示出在３５－４０℃下处理的病苗体内ＭＬＯ４周之内的变化和降解情况。分别剪取３５℃下处理２９、３３、５５和８０天的组培苗０．５ｃｍ的茎尖，转入ＭＳ培养基或改良的ＭＳ培养基上，在２５℃下培养，长成的组培苗一直生长正常。荧光显微镜和电镜检察结果均显示病原ＭＬＯ已被脱除。

蝴蝶兰原球茎诱导与增殖研究

以蝴蝶兰试管苗茎尖为外植体，接种于添加不同浓度激素配比的1／2MS培养基上进行原球茎诱导。试验结果表明：在NAA与6-BA的不同浓度组合中，以1／2MS＋NAA2．0mg／L＋6-BA4．0mg／L诱导效果最好，诱导率达65％；在NAA与Ad的不同浓度组合中，以1／2MS＋NAA2．0mg／L＋AD4．0mg／L诱导效果最好，诱导率55％；在原球茎的增殖培养中，以1／2MS＋NAA2．0mg／L＋6．BA2．0～4．0mg／L＋AD2．0mg／L培养基增殖效果最好，最高增殖系数可达9．98。

马铃薯茎尖组织培养技术研究

[目的]提高离体马铃薯茎尖组织培养的成苗率和脱毒率。[方法]从马铃薯上取生长健壮的芽,经消毒后在显微镜下切取1.0到1.5 mm长度的茎尖,接种于诱导分化培养基上,研究了不同浓度的GA3、KT与6-BA和不同激素配比以及不同浓度的基础培养基的诱导效果,探讨了茎尖组织诱导分化的最适培养条件。[结果]低浓度的GA3可促进愈伤组织的形成,过高的GA3浓度会抑制愈伤组织的形成;KT比6-BA具有更好的诱导效果;在MS+GA30.1 mg/L+NAA 0.1 mg/L+6-BA 0.5 mg/L培养基中激素配比的诱导效果较好。[结论]MS+0.5 mg/L KT+0.2 mg/L GA3+0.1 mg/L NAA是最为适宜的茎尖组织培养基。在28℃、每天光照16 h、光照强度>2 000lx的培养条件下,经7 d左右即可得到形态良好愈伤组织,经15 d左右即可得到分化良好的试管植株。