百部组织培养中不定根的诱导

对百部组织培养中影响不定根诱导的因素进行了研究。结果表明AgNO3 和IBA对生根诱导有较明显的影响 ,较优的浓度分别为 0 .5mg/L和 3 .0mg/L。随着继代培养代数的增加 ,生根率提高 ,第五代生根率达81 % ,比第一代提高 5 6%。继代培养基对生根诱导有较明显的影响 ,在IBA浓度为 0 .3mg/L的继代培养基下增殖的芽条 ,其生根率比IBA浓度为 0 .1mg/L和 0 .5mg/L的高 ,其根长亦比IBA浓度为 0 .1mg/L和 0 .5mg/L的长。在生根培养基中加入活性炭 ,对不定根的诱导起抑制作用 ,其生根率为 0。在生根培养基中加入碳素墨水可以提早百部生根时间 ,接种后第 1 0d即开始长根 ,且根的平均长度较长。愈伤组织对生根诱导有较明显的影响 ,基部带有愈伤组织的芽条的生根率明显高于基部没有愈伤组织的芽条。

直立百部药材中2种生物碱的含量测定

目的测定直立百部中二脱氢对叶百部碱、氧化对叶百部碱的质量分数。方法采用THERMOHypersil ODS-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-水为流动相梯度洗脱(0～45 min,体积比43∶57;45～50 min,体积比43∶57～55∶45;50～90 min,体积比55∶45。),检测波长为237 nm,柱温为室温。结果二脱氢对叶百部碱、氧化对叶百部碱的线性范围分别为23～161μg.mL-1(r=0.999 8),14～98μg.mL-1(r=0.999 9);平均加样回收率分别为100.9%、101.3%,RSD值分别为1.98%、1.66%(n=6)。3批药材中的二脱氢对叶百部碱质量分数分别为1.13、1.14、1.11 mg·g-1,氧化对叶百部碱质量分数分别为1.78、1.81、1.76 mg·g-1。结论该方法简便、准确、重复性好,适用于直立百部药材中二脱氢对叶百部碱、氧化对叶百部碱的质量控制。

药用植物百部的组织培养与快速繁殖

目的 探讨百部的组培快繁技术 ,为优良品种的快速繁殖奠定基础。方法 以带侧芽百部茎段为外植体 ,采用 MS为基本培养基 ,附加不同植物生产调节剂进行试验。结果 采用 MS+6 - BA 3.0 m g/ L +IBA 0 .2 mg/ L的培养基能成功地诱导芽的分化 ;对于芽增殖 ,以 MS+6 - BA3.0 mg/ L+IBA0 .3m g/ L 培养基较好 ;诱导生根以MS+IBA 2 .0 mg/ L +Ag NO3 0 .5 mg/ L培养基较好 ,培养 30 d后生根率可达 5 0 %以上 ;2 0 m g/ L多菌灵处理可明显提高移栽成活率。结论 初步建立了百部的组培快繁体系 ,使工厂化生产百部种苗成为可能。

蔓生百部组织培养快繁技术

对蔓生百部的茎段上侧芽进行组织培养,结果表明:初代培养在M S+6 BA 2m g/L+kT 1m g/L+NAA0.2m g/L培养基上,约10d茎段上侧芽开始萌发;继代繁殖在M S+6 BA 2m g/L+NAA 0.2m g/L培养基上,约30d几乎全部诱导形成多芽体,多芽体的芽数平均为3个左右;生根壮苗一般采用1/2M S+IBA 0.2m g/L培养基。

百部中单宁的提取工艺优化

通过对提取剂的浓度与PH值、提取时间等条件的调控,采用L9(34)正交实验,Folir-Denis法测定提取液中单宁含量。结果显示乙醇浓度为50%,PH值为3,提取3h为最佳提取工艺,所测百部的单宁含量为0.93%。该方法稳定可靠,RSD为2.96%,重现性良好,加样回收率为97.2%。

蔓生百部中新生物碱的结构研究

研究蔓生百部中微量生物碱的结构。方法 :减压柱层析、波谱分析和化学转化。结果 :得到 3种微量生物碱 ,分别为脱氢百部碱、百部碱、原百部碱。结论 :其中脱氢百部碱为一新生物碱 ,原百部碱是首次从蔓生百部中得到 ;

直立百部质量标准研究

目的：为控制直立百部药材的质量，建立直立百部药材的显微鉴别、薄层鉴别、水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物和含量测定标准。方法：采用横切面及粉末进行显微鉴别；采用TLC法对生物碱类成分进行薄层鉴别；采用中国药典附录方法，对水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物进行测定；采用HPLC法测定直立百部中原百部碱含量，色谱条件：色谱柱为Phenomenex Gemini C6-phenyl（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为乙腈-0.1%三乙胺（34：66），柱温为30 ℃，流速为1.0 mL·min-1，检测波长306 nm。结果：横切面及粉末的显微特征与中国药典及文献记载基本一致，唯中柱中韧皮部束与木质部束的个数不同于药典规定。薄层鉴别色谱斑点清晰，分离度较好。含量测定中原百部碱在6.257~156.42 mg·L-1浓度范围内线性关系良好（r=0.9998），平均回收率为100.2%（RSD为1.6%，n=6）。结论：本文采用的方法操作简便，准确，重复性好，可用于控制直立百部药材的质量。

蔓生百部质量标准研究

目的：为控制蔓生百部药材的质量,建立蔓生百部药材的显微和薄层鉴别、水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物以及含量测定标准。方法：从全国范围内收集10批蔓生百部药材,采用横切面及粉末进行显微鉴别;TLC法对生物碱类成分进行薄层鉴别;采用中国药典附录方法,对水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物进行测定;HPLC法测定蔓生百部中原百部碱含量,采用Phenomenex Gemini C6-phenyl色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.1%三乙胺（34∶66）,流速1.0 mL·min-1,检测波长306 nm,柱温为30℃。结果：与中国药典2010年版一部相比增加了质地、断面、气味、根被细胞的特征、中柱中韧皮部束与木质部束的个数和粉末特征等内容。增加的薄层色谱鉴别色谱斑点清晰,分离度较好。含量测定,原百部碱浓度在10.9~218.7 mg·L-1范围内线性关系良好（r=1.0000）,平均回收率为99.7%（RSD为1.6%,n=6）。结论：本文建立的显微鉴别、检查、TLC鉴别及含量测定方法,可用于蔓生百部药材的质量标准。