TWO MINOR ALKALOIDS FROM THE ROOTS OF STEMONA TUBEROSA L.

Two new alkaloids namely tuberostemoninal and tuberostemoamide as minor components were isolated from the roots of Stemona tubeross.Their structures were determined by various 2D NMR and other spectra and finally confirmed by X-ray analysis.

对叶百部种子质量检验方法研究

以云南省文山、楚雄、普洱等地对叶百部种子为材料,参照GB/T 3543-1995《农作物种子检验规程》,研究对叶百部种子质量检验方法。结果表明,种子净度分析最少试验量为75 g,送检样品量不少于750 g;真实性鉴定采用种子外观形态比较;质量测定采用百粒法;水分含量测定采用高恒温(130±2)℃烘干5 h;种子生活力测定采用TTC染色法,0.5%TTC溶液,25℃染色24 h;光照12 h条件下以纸床作为发芽床进行发芽试验,试验计数时间为15~45 d。

酸性染料比色法测定对叶百部中总生物碱含量

采用酸性染料比色法测定不同发育时期的对叶百部(Stemona tuberosa Lour.)中总生物碱含量,采用酸性染料比色法,以对叶百部碱为对照品,溴麝香草酚蓝为酸性染料,甲醇、三氯甲烷提取,4%盐酸溶解,在413 nm波长下测定。结果表明,对叶百部碱的标准曲线为Y=0.003 7X+0.089(R2=0.995 9),在32~800μg/mL范围内线性关系良好;平均加样回收率为101.23%,平均加样回收率的RSD为2.63%。1年生对叶百部总生物碱含量为1.87~4.55 mg/g;2年生对叶百部总生物碱含量为4.52~9.63 mg/g。酸性染料比色法具有操作简便、重复性好、稳定性高的优点。

有机肥对林下种植大百部产量和品质性状的影响

[目的]探究不同肥料对加勒比松(Pinus caribaea)林下种植大百部(Stemona tuberosa)的生物量及可溶性糖含量的影响。[方法]在百部生长过程中施用稀释50倍和100倍的花生麸液、腐熟羊粪液和发酵猪粪,分别在首次施用后30、60、180、360 d取样进行根数量、鲜重、干重及可溶性糖含量的测定。[结果]各稀释倍数处理的肥料对根数量、鲜重和干重均有促进作用,其中发酵猪粪稀释50倍处理的根数量最多,发酵猪粪稀释50和100倍处理的百部根鲜质量最大,分别为(1 838.5±90.3)g和(1 762.1±90.1)g,分别较清水对照(CK)增加38.24%和32.49%,发酵猪粪稀释50倍和腐熟羊粪稀释50倍处理百部根干质量位居前列,分别较CK增加96.45%和74.86%;可溶性糖含量随着时间的推移先增加后减少,且与肥料浓度呈负相关,发酵猪粪稀释50倍处理含量最低,仅(340.80±17.50) mg/g。[结论]林下种植百部推荐施用发酵猪粪。

不同产地对叶百部的薄层色谱分析

目的:探讨对叶百部总生物碱薄层色谱法的展开条件,以对叶百部碱为对照药品,通过比较不同产地的对叶百部中百部生物碱成分,分析不同产地对叶百部生物碱成分的差异性。方法:采用薄层色谱法,以正己烷:三氯甲烷:甲醇(15∶8∶2)展开,碘化铋钾显色,对10个产地对叶百部中的对叶百部生物碱进行比较分析。结果:TLC显示与对照品对应位置显示相同颜色的棕红色斑点,各个样品斑点数量不同,斑点大小也不同,10个产地对叶百部中生物碱成分存在较大差异。结论:对叶百部含生物碱成分与生长环境有较大相关性。

不同产地对叶百部的薄层色谱分析

目的:探讨对叶百部总生物碱薄层色谱法的展开条件,以对叶百部碱为对照药品,通过比较不同产地的对叶百部中百部生物碱成分,说明不同产地对叶百部生物碱成分的差异性。方法:采用薄层色谱法,以正己烷:三氯甲烷:甲醇(15∶8∶2)展开,碘化铋钾显色,对10个产地对叶百部中的对叶百部生物碱进行比较分析。结果:TLC显示与对照品对应位置显示相同颜色的棕红色斑点,各个样品斑点数量不同,斑点大小也不同,10个产地对叶百部中生物碱成分存在较大差异。结论对叶百部含生物碱成分与生长环境有较大相关性。

对叶百部的分根繁殖技术研究

目的:研究对叶百部的繁育方式。方法:对对叶百部进行分根处理,对多年生的对叶百部母体的根、茎以及根茎等进行切分形成小株,栽种后观察并记录保留块根数目、切口是否晾干及是否消毒、地上茎保留长度等处理方式的植株成活情况。结果:第一次分根繁殖发现只有块根全部不发芽,只有茎盘及地上部分或块根有损伤全部腐烂;第二次分根繁殖发现一个月后,保留两个块根并带有不膨大根的植株有三种处理方式以及保留多个块根并带有不膨大根的植株所有处理方式皆长出完全叶;第三次分根繁殖发现成活率最高的是保留2个块根并带地上茎的小株;保留1个或者2个块根时,带地上茎的成活率是不带地上茎的2倍以上。结论:对叶百部去除块根,难成活;切口伤口进行草木灰消毒防腐草木灰,并晾干的更易成活;保留2个块根及以上,更易存活;保留一些不膨大块根,有利于提高成活率;保留茎,便于发芽。

基于JAK2/STAT3信号通路探讨对叶百部总生物碱对人结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡的影响

目的基于Janus激酶2(JAK2)/信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路,探讨对叶百部总生物碱对人结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡的影响。方法将人结肠癌HT-29细胞分为55μg/mL组、150μg/mL组和250μg/mL组进行实验,另设仅添加培养基的空白组(含细胞)。除空白组外,其他组给予相应浓度的对叶百部总生物碱进行干预。干预24 h、48 h、72 h后,采用四甲基偶氮唑蓝法检测各组细胞增殖抑制率;干预48 h后,采用Hoechst 33258染色法观察各组细胞凋亡情况,采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率,采用Western blot检测各组细胞JAK2、磷酸化JAK2(p-JAK2)、STAT3和磷酸化STAT3(p-STAT3)的蛋白表达水平。结果与空白组比较,各浓度组细胞增殖抑制率增加;经Hoechst 33258染色后在各浓度组中可观察到典型的细胞凋亡形态改变,凋亡细胞数及细胞凋亡率均增加(均P<0.05);流式细胞术检测结果显示150μg/mL组和250μg/mL组细胞凋亡率增加(均P<0.05)。与空白组比较,各浓度组的p-JAK2蛋白和p-STAT3蛋白表达水平均下调(均P<0.05)。55μg/mL组、150μg/mL组和250μg/mL组的细胞增殖抑制率、凋亡细胞数及细胞凋亡率依次增加,p-JAK2蛋白和p-STAT3蛋白表达水平依次降低(均P<0.05)。结论对叶百部总生物碱可能通过抑制JAK2/STAT3信号通路相关蛋白的活化,来抑制人结肠癌HT-29细胞增殖并促进其凋亡。

对叶百部总生物碱对H_(2)O_(2)所致CHL细胞凋亡的保护作用研究

目的:探讨对叶百部总生物碱对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导中国仓鼠肺细胞CHL凋亡的保护作用。方法:以对叶百部总生物碱为指标成分,通过采用MTT比色法检测不同的含药浓度(10、22、50、112、250μg/mL)对含H_(2)O_(2)药液致CHL氧化损伤细胞存活率的影响,从而确认最佳含药浓度进行染色试验,Hoechst 33258染色法检测对叶百部总生物碱对H_(2)O_(2)致CHL细胞损伤的细胞凋亡率的影响。结果:MTT比色法检测,经含H_(2)O_(2)药液处理24 h后,与空白组相比较,模型组CHL细胞存活率显著降低(P<0.01),与模型组相比较,对叶百部总生物碱各浓度均可增加H_(2)O_(2)所致CHL细胞损伤的细胞存活率,其中浓度在22~250μg/mL存活率显著增加(P<0.05,P<0.01);在荧光显微镜下观察细胞凋亡形态,空白组CHL细胞核有较微弱的淡蓝色荧光,与空白组相比较,经含H_(2)O_(2)药液处理24 h后,细胞核呈亮蓝色染色的数目显著增多、凋亡率显著增加(P<0.01),与模型组比较,H_(2)O_(2)诱导CHL细胞凋亡作用显著减弱,细胞核呈亮蓝色染色的数目显著减少、凋亡率显著减少(P<0.01),细胞凋亡数目减少与含药液浓度呈正相关,浓度越大,细胞凋亡数量越少。结论:在本实验条件下,对叶百部总生物碱(10~250μg/mL)对H_(2)O_(2)所致CHL细胞凋亡有一定的保护作用。

对叶百部总生物碱对CHL细胞活性的影响

目的:探讨对叶百部总生物碱对中国仓鼠肺细胞CHL活性的影响。方法:以对叶百部总生物碱为指标成分,通过采用MTT比色法检测不同的含药浓度(10μg/mL、22μg/mL、50μg/mL、112μg/mL、250μg/mL)对CHL细胞存活的影响。结果:MTT比色法检测,在不同药液浓度(10μg/mL、22μg/mL、50μg/mL、112μg/mL、250μg/mL)干预CHL细胞24 h后,与空白组比较,对叶百部总生物碱250μg/mL及以下药液浓度对存活率均无显著差异(P>0.05),说明对叶百部总生物碱浓度在250μg/mL及以下对CHL细胞无明显毒性作用。结论:在本实验条件下,对叶百部总生物碱(10~250μg/mL)对中国仓鼠肺细胞株CHL细胞无明显的细胞毒性作用。

UPLC-Q-TOF/MS法分析对叶百部蜜炙前后化学成分的变化

目的采用超高效液相-飞行时间质谱联用技术(UPLC-Q-TOF/MS)法分析对叶百部Stemona tuberosa Lour.蜜炙前后化学成分的变化。方法分析采用Acquity UPLC BEH C18色谱柱;以0.1%甲酸水-0.1%甲酸乙腈为流动相,梯度洗脱;正离子模式下采集数据。主成分分析(PCA)法和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)法进行数据处理。结果蜜炙后,百部宁、oxystemoninine、百部碱、N-氧-对叶百部碱及其同分异构体、对叶百部碱H含有量减少。结论对叶百部蜜炙前后化学成分差异显著,可能是该植物增效减毒的物质基础。

广西产百部的资源与生境调查

[目的]对广西产百部的种类、资源与生境进行初步调查。[方法]通过文献查阅、标本查阅和产地调查相结合的方法,对广西产百部的资源分布情况、植物形态和生境进行初步调查。[结果]广西产百部为对叶百部,野生,偶见移栽。百部一般生长在海拔30～1 600 m的石缝、石穴、杂木林和灌丛中,主要产地有百色、河池、桂林、防城港、崇左等;蕴藏量较大的为桂林、百色和河池等。由于近些年的破坏性采收以及生态环境的破坏,百部资源正在锐减,因此对百部的资源保护和研究已迫在眉睫。[结论]笔者调查研究了广西产百部的种类、资源分布情况与生境,为该药材的可持续发展和规范化种植提供参考依据。

对叶百部多糖的提取及其抗氧化活性研究

目的对对叶百部多糖(STP)的抗氧化作用进行研究。方法以水提醇沉法提取对叶百部多糖,采用分光光度法研究对叶百部多糖在不同体系中对超氧阴离子自由基(.O2-)、羟基自由基(.OH)、DPPH自由基(DPPH.)的清除作用。结果对叶百部多糖对.O2-、.OH和DPPH.均具有一定的清除作用,其IC50分别为(218.6±16.1),(319.1±18.2)和(375.3±16.4)μg/ml。结论对叶百部多糖对自由基的清除作用存在明显的量效关系,具有较好的抗氧化活性。

不同产地对叶百部中新对叶百部碱含量比较研究

目的:通过比较不同产地对叶百部中新对叶百部碱含量,说明百部生物碱成分的差异性。方法:采用HPLC测定10个产地对叶百部中新对叶百部碱含量并比较分析。结果:10个产地对叶百部中新对叶百部碱含量存在较大差异,其中河北最高,为0.68mg/g,广西最低,为0.06mg/g。结论:新对叶百部碱含量与生长环境有较大相关性。

对叶百部根的无机元素与氨基酸成分分析

研究无机元素及氨基酸对对叶百部根生物活性的影响,采用电感耦合等离子质谱和氨基酸自动分析仪对其进行检测,共检测27种无机元素和16种氨基酸。结果表明对叶百部中含有Fe,Zn,Mn,Se等多种对人体有益的无机元素和7种人体必需氨基酸,并对无机元素与氨基酸与百部药效的相关性进行探讨。

对叶百部中氧化对叶百部碱的分离鉴定及测定

目的分离纯化对叶百部药材指标成分氧化对叶百部碱,并建立其定量测定方法。方法对叶百部乙醇提取液浓缩后经盐酸溶解和氨水洗,再经三氯甲烷萃取。柱分离采用Phenomenex Gemini C18色谱柱（5μm,4.6 mm×250mm）,以乙腈-水（45∶55）为流动相,体积流量1.0 mL/min,检测波长242 nm,柱温30℃。结果分离得到氧化对叶百部碱单体化合物作为定量测定对照品,该成分在0.282～2.82μg范围内线性关系良好（r=0.999 7）,平均加样回收率为99.63%（RSD=1.9%）。结论方法快速简便,可靠,重复性好,为对叶百部药材的质量控制提供依据。

苦参与百部提取物对几种植物病原菌的抑制作用研究

试验研究苦参与百部农药活性提取物及其复配物对几种植物病原菌的抑制作用结果表明,各农药活性提取物及其复配物对稻胡麻叶斑病菌、立枯丝核菌、稻恶苗病菌、白菜黑斑病菌、十字花科蔬菜黑腐病病菌与十字花科蔬菜软腐病病菌、茄科蔬菜青枯病菌均有不同抑制作用;各提取物抑制效果随提取物浓度的提高而相应增强,最低抑制浓度多<0 .5mg/ mL ,并对白菜黑斑病菌孢子萌发也有明显抑制作用。与单一提取物相比,复配物对稻胡麻叶斑病菌和十字花科蔬菜软腐病病菌的抑制效果有所增强,但对十字花科蔬菜黑腐病病菌的作用较小。

手持式GPS在对叶百部资源调查中的应用

[目的]论述手持式GPS在对叶百部资源调查中的应用。[方法]在简要介绍GPS及其定位原理的基础上,阐述手持式GPS在对叶百部资源调查中定位、导航、求积、测距等方面的应用。[结果]GPS定位、导航功能优越,还有很好的求积、测距功能。[结论]手持式GPS在中药资源调查中具有广阔的推广应用价值。

百部生物碱对博来霉素诱导肺纤维化小鼠的保护作用

对叶百部总生物碱及其主要成分新对叶百部碱对博来霉素诱导肺纤维化小鼠的保护作用进行研究,并采用细胞模型初步探讨其作用机制。实验分为假手术组、模型组、总碱组(60 mg/kg)和新对叶百部碱低、高(10、20 mg/kg)剂量组,泼尼松(6.67 mg/kg)为阳性对照药,以肺组织羟脯氨酸含量、TGF-β1水平、炎性水平、胶原沉积和α-SMA表达等为指标考察其抗肺纤维化效果。结果表明,总碱和新对叶百部碱均能显著改善模型小鼠的肺组织炎症和损伤,降低羟脯氨酸含量和胶原沉积;新对叶百部碱能显著降低模型小鼠肺组织α-SMA表达和TGF-β1水平。初步机制研究表明,新对叶百部碱能抑制TGF-β1诱导的肺成纤维细胞中α-SMA的升高,表明抑制成纤维细胞向肌成纤维细胞转化是其作用机制之一。

广西不同产地对叶百部红外光谱学研究

目的探讨对叶百部药材红外光谱学特性,为其质量控制提供参考。方法采用红外光谱法对广西10个不同产地的对叶百部药材进行检测,并以其平均图谱为标准图谱(即标准图谱为1)检测各样品的相似度。结果获得对叶百部药材红外特征吸收峰,广西产10批样品的相似度在0.925 2～0.980 4范围,拟定其阈值为0.90。结论该法重复性和稳定性良好,具有简便、快速、灵敏特点,可以作为对叶百部药材定性检测方法。