用气孔保卫细胞周长鉴定辣椒植株的倍性

以辣椒花药培养的单倍体植株和种子来源的植株为试材,研究两者之间叶片气孔保卫细胞外围周长值的差异。结果表明:单倍体植株与二倍体种子来源植株之间叶片气孔保卫细胞外围周长值的差异极显著,周长值小于103.3μm的为单倍体,大于103.3μm的为二倍体。并且两者在第5片叶中不同部位的气孔保卫细胞外围周长值较稳定,可将其作为鉴定辣椒植株倍性的辅助指标。

白肋烟两个DH群体的构建与染色体倍性的鉴定

分别采用气孔保卫细胞叶绿体计数和流式细胞仪两种方法,鉴定了白肋烟烟碱含量和抗黑胫病两个杂交组合的杂种F1代经花药培养获得的再生植株的染色体倍性,结果发现叶绿体计数法可以简单经济地检测烟草花药培养再生植株的染色体倍性,但由于受混倍体植株的影响,鉴定结果的准确性较低。流式细胞仪则更加简便快速而且准确地鉴定出各种染色体倍性的再生植株,鉴定结果与开花结实情况完全一致。在此基础上构建了可用于白肋烟烟碱合成代谢和抗黑胫病遗传研究及基因定位的两个双单倍体(DH)遗传群体。

辣椒染色体倍性水平的快速检测

为了寻求简便、快速的辣椒染色体倍性鉴定方法,以辣椒纯系B19、B23花药培养产生的单倍体植株(n=x=12)及用其种子长成的二倍体植株为试材,对用气孔保卫细胞叶绿体计数法鉴定其倍数性进行了研究。结果表明,单倍体和二倍体辣椒植株气孔保卫细胞叶绿体数平均值的差异极显著,单倍体的叶绿体数在13以下,二倍体的叶绿体数等于或大于13;气孔叶绿体数目随染色体倍数性的增加而增加,用气孔保卫细胞叶绿体数目预测植株倍性的准确率可达92.68%。表明采用气孔保卫细胞叶绿体计数法可以在苗期快速、准确地确定植株的染色体倍性。

枇杷叶片气孔保卫细胞叶绿体数目分析

[目的]研究枇杷叶片保卫细胞的叶绿体数目差异,探讨其变化规律。[方法]取43份枇杷资源嫩叶进行处理,在20倍显微镜下进行统计,随机选择50个保卫细胞计算叶绿体数目。[结果]枇杷叶片保卫细胞叶绿体数目在11～17,平均为13.19个,品种间差异大。不同品种叶绿体数目变异幅度不同,在9～14,仅栎叶枇杷的叶绿体数目大于16。[结论]栎叶枇杷可能是多倍体,这可为枇杷资源的倍性鉴定提供参考。

γ-氨基丁酸经由细胞微丝骨架对拟南芥气孔开闭的负调控

为研究γ-氨基丁酸(GABA)信号在气孔开闭中的作用,将标记微丝的质粒35S-talin-GFP导入LBA4404农杆菌中,用浸花法转化哥伦比生态型(Columbia phenotype)拟南芥.通过卡那霉素抗性筛选,分别筛选到5个抗性株系.对T2代转基因幼苗根的荧光观察,证实了抗性株系均为转基因植株,在根的分生组织、伸长区、成熟区和气孔保卫细胞处都有较强的荧光表达.将GFP标记细胞骨架的转基因植株的叶片下表皮放在气孔张开液中充分反应2h,98%的气孔已经完全张开;将完全张开的气孔转移到含有1 mM GABA的溶液反应30 min,80%左右的气孔逐渐关闭,说明GABA信号是引起拟南芥气孔关闭的诱导因素,GABA能显著降低气孔开度,该信号促进气孔关闭是一个快速反应的过程.

不同十字花科作物气孔保卫细胞周长和叶绿体数目与其倍性的相关性研究

以油菜、青梗菜、春菜为试验材料,对其叶片气孔保卫细胞周长及叶绿体数目与其倍性关系进行了研究,结果表明:不同作物间气孔保卫细胞周长及叶绿体数目差异显著;相同作物二倍体与单倍体植株气孔保卫细胞周长及叶绿体数目差异显著;气孔保卫细胞叶绿体计数鉴定与植株形态观察鉴定植株倍性相结合,鉴定结果一致。利用植株气孔保卫细胞周长及叶绿体数目鉴定植株倍性,可作为早期快速鉴定植株倍性的一种方法。

燕麦不同品种染色体倍性的检测

研究了6个不同品种燕麦的染色体倍性差异,通过根尖染色体计数法和气孔保卫细胞横纵径及保卫细胞叶绿体计数法等方法对燕麦染色体倍性进行了观察鉴定。结果表明,6个不同品种燕麦中定燕1号、晋燕8号、晋燕17号、宁莜1号为六倍体(2n=6x=42),白燕6号、白燕7号为四倍体(2n=4x=28),同倍性不同种之间气孔保卫细胞叶绿体数目相近,不同倍性间气孔保卫细胞的大小差异较明显。经X2适合性检测,六倍体和四倍体植株气孔保卫细胞横径均值之比和保卫细胞叶绿体数的平均值之比符合其染色体数目之比3∶2,而纵径均值比值不符合。

观察柑橘叶片表皮细胞与气孔结构的简易制片方法

采用3mol·L^(-1)的NaOH溶液于70℃水浴锅中对柑橘幼嫩及完全伸展叶片进行预处理8~20min,结合透明胶带粘取与眼科镊刮取,能够获得效果良好的上下表皮临时装片;用Camoy’s固定液对柑橘叶片材料进行固定褪绿后,用3mol·L^(-2)NaOH溶液进行透明处理,I_2-KI染色后直接装片,对观察柑橘叶片下表皮气孔结构效果良好。

甘蓝游离小孢子培养及再生植株倍性鉴定研究

对108个甘蓝品种进行游离小孢子培养,计算出胚率,分析表型与出胚难易的关系。经流式细胞仪对其再生植株进行倍性鉴定,计算自然加倍率。以流式细胞仪的结果为基准对再生植株叶片气孔保卫细胞周围叶绿体数目,保卫细胞长、宽以及周长规律进行研究。结果表明：具有圆球、早熟、春甘蓝3个特性的甘蓝品种易出胚,而扁球、中熟、晚熟以及越冬甘蓝不易出胚;再生植株的自然加倍率会因基因型的不同而有较大差异;不同倍性的再生植株叶片保卫细胞周围叶绿体平均个数所得规律为：单倍体6~9个,二倍体9~12个,四倍体12~23个,且随着倍性的增加,叶绿体个数分布范围更加广泛。保卫细胞长度变化范围为：单倍体18~23μm,二倍体25~35μm,四倍体35~45μm。保卫细胞周长变化范围为：单倍体60~75μm,二倍体75~95μm,四倍体100~115μm。保卫细胞宽度随气孔大小变化而差异较大,规律不明显。在保卫细胞长度和周长均能说明倍性的情况下,显然通过测量保卫细胞的长度来判定倍性的方法更为简便。

枇杷叶片气孔保卫细胞叶绿体数目分析

为研究枇杷叶片保卫细胞的叶绿体数目变化规律，本文对43份枇杷资源进行了分析。结果表明：叶绿体数目平均在11—17之间，平均为13．19个，品种间差异大。不同品种其数目变异幅度不同，在9—14之间，仅栎叶枇杷的叶绿体数目大于16。