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南极钩虾Gammarussp.肠道共附生菌的分离及StreptomycesxiamenensisYF008的化学成分研究
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作者 代影 卢静容 +2 位作者 周美宏 杨帆 林厚文 《海洋渔业》 CSCD 北大核心 2023年第2期129-139,共11页
南极极端生境中蕴含着发掘特殊生物活性天然产物的巨大潜力。对采自南极海域水深6000m海区钩虾(Gammarussp.)的肠道共附生微生物进行分离,并对一株有价值菌株的代谢产物进行研究。采用稀释涂布法进行菌株分离,利用形态学观察及16SrRNA... 南极极端生境中蕴含着发掘特殊生物活性天然产物的巨大潜力。对采自南极海域水深6000m海区钩虾(Gammarussp.)的肠道共附生微生物进行分离,并对一株有价值菌株的代谢产物进行研究。采用稀释涂布法进行菌株分离,利用形态学观察及16SrRNA测序进行菌株种属鉴定;综合运用薄层色谱、正相硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、反相ODS柱色谱和半制备高效液相(HPLC)等色谱手段分离纯化得到单体化合物,采用波谱学和质谱技术鉴定其化学结构。从钩虾中分离得到17株菌,并将其从分类学角度归属于9个属,其中细菌11株,放线菌6株。从放线菌StreptomycesxiamenensisYF008的发酵产物中分离得到8个单体化合物,分别鉴定为:1(10)E,5E-germacradiene-2,11-diol(1),N-[2-(4-hydroxyphenyl)]ethylacetamide(2),环(L-苯丙氨酸-甘氨酸)(3),环(L-苯丙氨酸-L-丙氨酸)(4),环(D-苯丙氨酸-L-异亮氨酸)(5),环(L-羟脯氨酸-L-苯丙氨酸)(6),环(D-亮氨酸-L-脯氨酸)(7),环(L-苯丙氨酸-L-脯氨酸)(8)。化合物1、3~6系首次从该菌中分离得到,且化合物1为特殊的十元环germacrane型倍半萜类化合物。 展开更多
关键词 南极钩虾 放线菌 streptomyces xiamenensis 代谢产物 分离鉴定
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Primed Expression of Defense-Related Genes by Streptomyces cameroonensis-Based Bioformulation (SCaB) on Cocoa Seedlings in a Nursery Challenged with Phytophthora megakarya
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作者 Dzelamonyuy Aristide Téné Tayo Paul Martial +3 位作者 Alain Bopda Waffo Effa Onomo Pierre Ewané Cécile Annie Boudjeko Thaddée 《American Journal of Plant Sciences》 2023年第12期1480-1497,共18页
A Streptomyces cameroonensis based bioformulation (SCaB) has been developed and shown to be stable and effective in controlling the early proliferation of P. megakarya and promoting the growth of cocoa seedlings in nu... A Streptomyces cameroonensis based bioformulation (SCaB) has been developed and shown to be stable and effective in controlling the early proliferation of P. megakarya and promoting the growth of cocoa seedlings in nursery. This study was carried out to explore the molecular mechanisms associated with the interaction of SCaB, cocoa seedlings, and the pathogen during the early stages of seedling growth in the nursery. For this purpose, seedling treatment with 10% W/W SCaB under greenhouse conditions evaluated SCaB’s capacity to stimulate the defense mechanisms in cocoa. Agronomic growth parameters and the level of induction of defense-associated compounds were analyzed. Real-time (rt) PCR was used to assess the level of expression of defense genes. Here, we showed that the application of SCaB as a seedling treatment enhanced the growth of cocoa seedlings in the nursery by an average of 15.6% after 30 days of growth and led to an average reduction in disease severity of 64% when challenged with P. megakarya. The latter led to an increased synthesis of total phenolic compounds, flavonoids, chitinases, peroxidases, and β-1,3-glucanases and an induced up-regulation of TcChiB, TcGlu-1, TcPer-1, and TcMYBPA genes. This research provides a basis for the optimization of beneficial microorganisms as a viable alternative to chemical fungicides used in disease suppression. 展开更多
关键词 Cocoa Seedlings Phytophthora megakarya streptomyces cameroonensis Bioformulation PRIMING
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白刺链霉菌(Streptomyces albospinus)CT205菌株固体发酵及防控草莓根腐病的研究 被引量:14
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作者 沈婷 张园园 +1 位作者 王辰 王世梅 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期596-601,共6页
[目的]为了明确草莓根腐病的致病因子,降低其发病率,从草莓病株根部分离病原菌,并研究拮抗菌白刺链霉菌(Streptomyces albospinus)CT205固体制剂对草莓根腐病的防控效果。[方法]从草莓病株根部分离出了1株病原菌Y3,采用形态观察及r DNA-... [目的]为了明确草莓根腐病的致病因子,降低其发病率,从草莓病株根部分离病原菌,并研究拮抗菌白刺链霉菌(Streptomyces albospinus)CT205固体制剂对草莓根腐病的防控效果。[方法]从草莓病株根部分离出了1株病原菌Y3,采用形态观察及r DNA-ITS序列分析对病原菌Y3进行鉴定,用平板对峙培养测定拮抗菌CT205对菌株Y3的抑制作用,利用最佳固体发酵培养基及发酵条件对拮抗菌CT205进行固体发酵,通过连作致病土盆栽试验评价菌株CT205固体制剂对草莓根腐病的防控作用。[结果]初步鉴定病原菌Y3为尖孢镰刀菌(Fusarium sp.)。试验发现拮抗菌CT205对病原菌Y3的抑制作用较强,CT205固体发酵6 d,其制剂中菌含量达到2.2×109CFU·g-1。盆栽试验表明,施用CT205固体菌剂对草莓生长有一定的促生作用,对草莓根腐病的防治效果为61.18%。[结论]采用拮抗菌CT205固体制剂防控草莓根腐病具有较高的潜在应用价值。 展开更多
关键词 streptomyces albospinus CT205 固体发酵 草莓根腐病 鉴定 生防效果
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白刺链霉菌(Streptomyces albospinus)CT205菌株发酵条件优化及其次生代谢产物性质研究 被引量:10
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作者 王辰 张谷月 +2 位作者 张园园 沈婷 王世梅 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期304-310,共7页
[目的]为了获得白刺链霉菌(Streptomyces albospinus)CT205菌株摇瓶发酵最佳配方和适宜的发酵条件,并初步研究其次生代谢产物的性质。[方法]通过碳、氮源单因子试验、正交试验和主要发酵条件优化试验,以菌浓度和抑菌圈大小为指标确定... [目的]为了获得白刺链霉菌(Streptomyces albospinus)CT205菌株摇瓶发酵最佳配方和适宜的发酵条件,并初步研究其次生代谢产物的性质。[方法]通过碳、氮源单因子试验、正交试验和主要发酵条件优化试验,以菌浓度和抑菌圈大小为指标确定其最佳发酵培养基配方和发酵条件。通过GF254薄板层析、生物测定、紫外检测、稳定性试验,研究菌株CT205发酵产生的次生代谢产物性质。[结果]菌株CT205发酵最佳培养基配方:蔗糖20.0g·L^-1,可溶性淀粉30.0g·L^-1,蛋白胨2.0g·L^-1,黄豆粉8.0g·L^-1,MgSO4·7H2O0.5g·L^-1,K2HPO4·7H2O0.5g·L^-1,NaCl2.0g·L^-1,CaCO33.0g·L^-1;最佳发酵温度为28~30℃,初始pH8.0;CT205发酵产生的抗菌活性成分的Rf值为0.68,其在λ=258nm处有1个强紫外吸收峰。在不同温度(60、80和100℃)、紫外光照射不同时间(5、10和30min)处理下,活性成分的抗菌活性与对照相比变化不大,在用酸碱处理后,其抗菌活性比对照略有下降。[结论]获得了菌株CT205优化的发酵培养基配方及适宜的发酵条件,其次生代谢产物对热和紫外光均表现出较强的稳定性,但偏酸、偏碱的环境对其活性有一定的影响。 展开更多
关键词 streptomyces albospinus CT205 培养基组分 发酵条件 优化 次生代谢产物
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Streptomyces hygroscopicus产谷氨酰胺转胺酶摇瓶发酵条件的优化 被引量:14
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作者 柏映国 燕国梁 +1 位作者 堵国成 陈坚 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期27-32,共6页
介绍了吸水链霉菌 (Streptomyceshygroscopicus)WSH0 3 -1 3的筛选过程 ,重点考察了在摇瓶条件下 ,不同碳、氮源对吸水链霉菌生长和产酶的影响 ,利用正交实验 ,确定了复合碳、氮源的浓度 ,并对种龄、接种量、初始 pH值、培养温度和培养... 介绍了吸水链霉菌 (Streptomyceshygroscopicus)WSH0 3 -1 3的筛选过程 ,重点考察了在摇瓶条件下 ,不同碳、氮源对吸水链霉菌生长和产酶的影响 ,利用正交实验 ,确定了复合碳、氮源的浓度 ,并对种龄、接种量、初始 pH值、培养温度和培养时间等条件进行了研究。通过对发酵过程的优化 ,酶活达到 4 46u/mL ,比初始条件下提高了 3 0 9倍。 展开更多
关键词 菌种筛选 微生物谷氨酰胺转胺酶 优化 分批发酵 streptomyces HYGROSCOPICUS
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小白链霉菌(Streptomyces albulus)的原生质体制备研究 被引量:5
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作者 雷虹 曾伟民 +3 位作者 金忠斌 何堃 平文祥 周东坡 《黑龙江大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2007年第3期306-309,315,共5页
广谱天然防腐剂ε-多聚赖氨酸产生菌Streptomyces albulus的育种工作目前仅处于常规育种水平,为对其进行原生质体技术的育种改造,对影响S.albulus原生质体制备的几个重要因子进行了详细研究。测定了S.albulus的生长曲线,确定制备原生质... 广谱天然防腐剂ε-多聚赖氨酸产生菌Streptomyces albulus的育种工作目前仅处于常规育种水平,为对其进行原生质体技术的育种改造,对影响S.albulus原生质体制备的几个重要因子进行了详细研究。测定了S.albulus的生长曲线,确定制备原生质体的最佳菌龄为稳定期初期即培养40h;S发酵液中添加2·0%甘氨酸可使原生质体形成率最高;以破坏链霉菌细胞壁效果最好的溶菌酶进行酶解,确定最佳酶解温度为为35℃、最佳酶解时间为180min、最佳溶菌酶浓度为2.0mg·mL-1;在以上最佳原生质体制备条件下可获得纯净且量多的S.albulus原生质体,形成量达1.74×108cfu·mL-1,为S.albulus原生质体的进一步遗传育种奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 streptomyces albulus 原生质体 制备 影响因子
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海洋放线菌Streptomyces sp. 124092中的细胞毒活性成分 被引量:4
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作者 解修超 梅文莉 +4 位作者 曾艳波 林海鹏 庄令 戴好富 洪葵 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2008年第11期2183-2186,共4页
对海洋放线菌Streptomyces sp.发酵液的提取物进行柱层析分离,得到5个化合物.经MS,NMR,^1H-^1HCOSY,HSQC和HMBC等数据鉴定,其结构分别为3-氨基-丙酸对甲苯酯(1)、6-Amino-3-(4-hydroxy-benzyl)-1,4-diazonane-2,5-dione(2)、正丁... 对海洋放线菌Streptomyces sp.发酵液的提取物进行柱层析分离,得到5个化合物.经MS,NMR,^1H-^1HCOSY,HSQC和HMBC等数据鉴定,其结构分别为3-氨基-丙酸对甲苯酯(1)、6-Amino-3-(4-hydroxy-benzyl)-1,4-diazonane-2,5-dione(2)、正丁基-α-D-吡喃甘露糖苷(3)、大豆苷元(4)和1H-3-吲哚甲酸(5).其中化合物1和2为新化合物,细胞毒活性测试结果表明,化合物1~4对人肝癌细胞(SMMC-7721)具有不同程度的生长抑制活性. 展开更多
关键词 海洋放线菌 streptomyces sp. 细胞毒活性 分离和纯化
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Streptomyces eurocidicus JXJ 0089对铜绿微囊藻的抑制 被引量:4
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作者 李汉全 张炳火 +4 位作者 杨建远 查代明 过七根 石翔 郭静 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第5期1037-1044,共8页
采用藻平板法,筛选到1株对铜绿微囊藻具有抑制活性的放线菌。根据形态鉴定和16S rRNA基因序列分析,鉴定为Streptomyces eurocidicus JXJ 0089。研究了该放线菌培养时间、活性成分的极性、孢子或菌丝体与无细菌藻或有细菌藻的相互影响、... 采用藻平板法,筛选到1株对铜绿微囊藻具有抑制活性的放线菌。根据形态鉴定和16S rRNA基因序列分析,鉴定为Streptomyces eurocidicus JXJ 0089。研究了该放线菌培养时间、活性成分的极性、孢子或菌丝体与无细菌藻或有细菌藻的相互影响、附生细菌对藻细胞和放线菌的影响。结果表明,S.eurocidicus JXJ 0089培养11 d后,抑藻活性较强,活性成分含有多种极性不同的物质;放线菌孢子对藻细胞没有抑制作用,但菌丝体显著抑制藻细胞生长,且对无细菌藻的抑制活性显著高于有细菌藻;藻细胞亦抑制放线菌,尤其是抑制放线菌孢子萌发;附生细菌对铜绿微囊藻生长有促进作用,而对放线菌有抑制作用,这是放线菌菌丝体对有细菌藻的抑制活性低于无细菌藻的重要原因,也是放线菌的孢子和菌丝体在有细菌藻液中死亡的主要原因。 展开更多
关键词 铜绿微囊藻 streptomyces eurocidicus 抑制活性 附生细菌
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海洋放线菌Streptomyces sp.V5产生的一个新的八元环内酯 被引量:5
9
作者 陈光英 朱峰 林永成 《有机化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1159-1161,共3页
海洋放线菌Streptomyces sp.V5分离自南中国海红树根部土壤,从其培养液分离获得一个新的八元环内酯octalactin C(A),以及四个已知化合物2-甲基-3-呋喃甲酸(B)、环(脯-亮)二肽(C)、环(丙-缬)二肽(D)和尿嘧啶(E).通过完整的波谱数据解析... 海洋放线菌Streptomyces sp.V5分离自南中国海红树根部土壤,从其培养液分离获得一个新的八元环内酯octalactin C(A),以及四个已知化合物2-甲基-3-呋喃甲酸(B)、环(脯-亮)二肽(C)、环(丙-缬)二肽(D)和尿嘧啶(E).通过完整的波谱数据解析了它们的结构. 展开更多
关键词 海洋放线菌 streptomyces sp. 大环内酯 代谢产物
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新分离菌Streptomyces产小分子CMC液化酶的研究 被引量:8
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作者 李宪臻 徐德贵 +2 位作者 任钢弋 金凤燮 高培基 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第5期277-281,共5页
新分离纤维素分解菌经鉴定为链霉菌属中的新种,暂定名为StreptomycesspLX,革兰氏阳性,产气生孢子,好氧生长,最适生长温度和PH为30℃和7.2。该菌能够完全降解纤维素且不产生还原糖,并分泌一种分子量为9.... 新分离纤维素分解菌经鉴定为链霉菌属中的新种,暂定名为StreptomycesspLX,革兰氏阳性,产气生孢子,好氧生长,最适生长温度和PH为30℃和7.2。该菌能够完全降解纤维素且不产生还原糖,并分泌一种分子量为9.2ku的液化性质的内切纤维素液化酶,亦即CMC液化酶,该酶在裂解滤纸为短纤维的过程中既没有还原糖生成,也没有失重现象发生,而且纤维素的聚合度也几乎没有明显变化,推测可能是一种能打开氢键的小分子解链酶。 展开更多
关键词 链霉菌属 streptomyces CMC液化酶
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通过原生质体质粒转化提高Streptomyces actuosus诺西肽产量的研究 被引量:3
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作者 李继扬 史训龙 +4 位作者 冯美卿 万睿 文勇 刘晓会 周珮 《工业微生物》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期22-26,共5页
研究利用大肠杆菌-链霉菌穿梭质粒pSE34,构建vhb基因的重组质粒pSEVhb,采用原生质体质粒转化法,将携带vhb的重组质粒转入诺西肽产生菌Streptomyces actuosus中,获得重组菌S.actuosus/pSEVhb。通过CO结合试验,证明VHb在重组菌中成功表达... 研究利用大肠杆菌-链霉菌穿梭质粒pSE34,构建vhb基因的重组质粒pSEVhb,采用原生质体质粒转化法,将携带vhb的重组质粒转入诺西肽产生菌Streptomyces actuosus中,获得重组菌S.actuosus/pSEVhb。通过CO结合试验,证明VHb在重组菌中成功表达。限氧试验表明,重组菌S.ac-tuosus/pSEVhb诺西肽的的产量明显高于出发菌株。传代试验重组菌稳定,适合工业化大生产。 展开更多
关键词 活力链霉菌 streptomyces actuosus 诺西肽 原生质体质粒转化 Vitrecscilla血红蛋白
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深海来源链霉菌StreptomycesgriseorubensSCSIOZY0206多酚蒽酮类代谢产物的研究 被引量:3
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作者 周潇 张云 +4 位作者 黄洪波 宋永相 李洁 华燕 鞠建华 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期7-11,共5页
从中国南海北部3563 m深的沉积物中分离获得放线菌SCSIO ZY0206,经16S分子生物学鉴定为Strep-tomyces griseorubens。其发酵产物具有抗菌活性,进而以抗菌活性为指导,采用硅胶柱层析及半制备高效液相色谱法对其代谢产物进行追踪分离,得到... 从中国南海北部3563 m深的沉积物中分离获得放线菌SCSIO ZY0206,经16S分子生物学鉴定为Strep-tomyces griseorubens。其发酵产物具有抗菌活性,进而以抗菌活性为指导,采用硅胶柱层析及半制备高效液相色谱法对其代谢产物进行追踪分离,得到4个多酚蒽酮类化合物,经HR-ESI-MS、ESI-MS、1H及13C NMR和HMBC谱鉴定为resistoflavine(1)、resistomycin(2)、1-hydroxy-1-norresistomycin(3)和tetracenomycin D(4)。 展开更多
关键词 深海放线菌 streptomyces griseorubens SCSIO ZY0206 多酚蒽酮 抗菌活性
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刺五加内生放线菌Streptomyces tauricus CWJ-107活性次级代谢产物研究 被引量:4
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作者 席楠 郭文强 +3 位作者 王珊珊 何宁 袁丽杰 解云英 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期891-895,共5页
目的从药用植物刺五加内生放线菌Streptomyces tauricus CWJ-107次级代谢产物中发现抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)活性良好的天然产物。方法采用16S r RNA基因序列分析对菌株CWJ-107进行初步分类鉴定,大量发酵获得粗提物,通过硅胶... 目的从药用植物刺五加内生放线菌Streptomyces tauricus CWJ-107次级代谢产物中发现抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)活性良好的天然产物。方法采用16S r RNA基因序列分析对菌株CWJ-107进行初步分类鉴定,大量发酵获得粗提物,通过硅胶柱层析、LH20凝胶柱层析、薄层色谱以及高效液相色谱等方法,以抗MRSA活性导向进行目标化合物的分离纯化,利用核磁共振和质谱鉴定化合物结构,并利用微孔板法测定化合物最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC),对其抗MRSA活性进行评价。结果菌种鉴定结果显示菌株CWJ-107为Streptomyces tauricus,从菌株CWJ-107的菌丝体中分离得到1个抗MRSA活性化合物107-A,经波谱解析证实其结构为糖基化蒽醌类化合物cinerubin B,抗菌活性测定结果证实其具有良好的抗MRSA活性,MIC值为1μg/m L。结论从刺五加内生放线菌CWJ-107的代谢产物中分离到的107-A经结构鉴定为糖基化蒽醌类化合物cinerubin B,除此之外,本文首次报道了该化合物的抗MRSA活性。 展开更多
关键词 内生放线菌 streptomyces tauricus 分离纯化 结构鉴定 抗MRSA活性
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菌株Streptomyces capillispiralis 1070代谢产物的抗肿瘤机制 被引量:2
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作者 彭珧 杨静玉 +2 位作者 吴春福 田威 张怡轩 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期488-492,501,共6页
目的考察菌株Streptomyces capillispiralis 1070的代谢产物抑制肿瘤细胞A549增殖的作用机制。方法采用MTT法考察菌株Streptomyces capillispiralis 1070的活性代谢产物对A549细胞增殖的抑制作用,采用吖啶橙活细胞染色荧光显微镜观察法... 目的考察菌株Streptomyces capillispiralis 1070的代谢产物抑制肿瘤细胞A549增殖的作用机制。方法采用MTT法考察菌株Streptomyces capillispiralis 1070的活性代谢产物对A549细胞增殖的抑制作用,采用吖啶橙活细胞染色荧光显微镜观察法、罗丹明123活细胞染色流式细胞检测技术及扫描电镜技术、透射电镜技术观察A549细胞增殖受到抑制后的各种变化。采用全波长扫描与Molish反应对活性物质的成分做初步判断。结果该活性物质可使A549细胞存活率降低至25.79%,可使A549细胞线粒体膜电位明显下降,能使A549细胞胞浆内出现酸性自噬泡,但细胞膜结构完整、无细胞内容物外漏。结论推测该活性物质是通过诱导细胞自噬而发挥其抗肿瘤作用。菌株Streptomyces capillispiralis 1070的活性代谢产物为多糖类物质。 展开更多
关键词 streptomyces capillispiralis 1070 A549细胞 噻唑兰(MTT) 自噬 多糖 抗肿瘤
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抗生素Bagremycin生产菌Streptomyces sp. Tü4128接合转移系统的建立 被引量:2
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作者 朱云霞 廖思懿 +1 位作者 叶江 张惠展 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期160-164,共5页
基于噬菌体φC31 att/int系统,采用属间接合将来自大肠杆菌的DNA有效地导入菌株Tü4128的孢子中。通过条件优化,当融合温度为37℃时,在含80mmol/L MgCl2的ISP4培养基上使每个受体细胞的接合频率显著提高到7.3×10-3。Southern b... 基于噬菌体φC31 att/int系统,采用属间接合将来自大肠杆菌的DNA有效地导入菌株Tü4128的孢子中。通过条件优化,当融合温度为37℃时,在含80mmol/L MgCl2的ISP4培养基上使每个受体细胞的接合频率显著提高到7.3×10-3。Southern blot分析显示在受体菌染色体上存在单一的染色体附着位点(attB位点)。整合位点的DNA序列测序显示为保守。采用优化的方法建立了大肠杆菌和菌株Tü4128间高效的属间接合系统。 展开更多
关键词 attB位点 噬菌体φC31 bagremycin 属间接合 streptomyces sp. Tü4128
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海洋放线菌Streptomyces sp.大片段DNA基因组文库的构建 被引量:2
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作者 马艳玲 邓海 +4 位作者 刘中来 邓灵福 刘艳丽 郭建军 祁超 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期1-3,共3页
目的:构建稀有海洋放线菌Streptomyces sp.基因组文库。方法:以稀有海洋放线菌Streptomyces sp.为实验材料,随机剪切提取的总DNA,5'-磷酸末端补平回收40kb左右的DNA片段,与pWEBTM载体连接,经包装蛋白包装成噬菌体后侵染宿主细胞E.co... 目的:构建稀有海洋放线菌Streptomyces sp.基因组文库。方法:以稀有海洋放线菌Streptomyces sp.为实验材料,随机剪切提取的总DNA,5'-磷酸末端补平回收40kb左右的DNA片段,与pWEBTM载体连接,经包装蛋白包装成噬菌体后侵染宿主细胞E.coliEPI100,构建该菌株的基因组文库,并对该文库进行质量鉴定。结果:成功构建了稀有海洋放线菌Streptomyces sp.的基因组文库,效价达9.0×104CFU/mL,得到4000个阳性克隆子,远远大于按覆盖率为99%计算至少所需的837个阳性克隆子数,且平均插入片段长度为36kb,重组率100%。阳性克隆子保存于96孔板中,-80℃保存。结论:所构建文库的各项指标均达到要求,为了进一步评估Streptomyces sp.所能合成的所有潜在天然产物,还需要进一步检测该文库中包含有生物合成基因簇的大肠杆菌的表达情况。 展开更多
关键词 海洋放线菌streptomyces sp. 基因组文库 噬菌体
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Streptomyces hygroscopicus谷氨酰胺转胺酶的分离纯化及其性质研究 被引量:5
17
作者 尹少谦 王淼 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期26-29,共4页
将新筛选的吸水链霉菌生产的谷氨酰胺转胺酶发酵液抽滤、盐析、离心和冷冻干燥,制得粗酶产品,酶的比活力为5 4 0U/ g ,收率为77 90 %。对粗酶的研究发现,在2 5~4 0℃、pH 6 0~8 0范围内,该酶都有较高的反应活性和稳定性。粗酶经离子... 将新筛选的吸水链霉菌生产的谷氨酰胺转胺酶发酵液抽滤、盐析、离心和冷冻干燥,制得粗酶产品,酶的比活力为5 4 0U/ g ,收率为77 90 %。对粗酶的研究发现,在2 5~4 0℃、pH 6 0~8 0范围内,该酶都有较高的反应活性和稳定性。粗酶经离子交换层析后得到了较高的纯化,纯化倍数为13 1倍,收率6 3% ;再经凝胶过滤层析,酶纯化了1 14倍,收率6 5 % ;经SDS -PAGE电泳检测,得到了单一的区带,根据电泳标准分子量计算,该酶的相对分子质量约为38 32 4ku。 展开更多
关键词 谷氨酰胺转胺酶 streptomyces 性质研究 分离纯化 离子交换层析 凝胶过滤层析 相对分子质量 吸水链霉菌 分子量计算 冷冻干燥 反应活性 纯化倍数 电泳检测 PAGE 发酵液 比活力 收率 稳定性 酶纯化 SDS 抽滤
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Streptomyces albulus NK49合成ε-聚赖氨酸及其产物特征 被引量:1
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作者 耿伟涛 谷燕燕 +5 位作者 谢晨庚 王晓萌 杨超 徐道情 宋存江 王淑芳 《南开大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期28-34,共7页
从土壤中分离到一株ε-聚赖氨酸高产菌株.通过细胞、菌落形态特征研究、生理生化反应以及16SrDNA序列分析,对该菌株进行了分类鉴定.命名为小白色链霉菌NK49(StreptomycesalbulusNK49).利用摇瓶培养72h后检测到ε-聚赖氨酸产量达0... 从土壤中分离到一株ε-聚赖氨酸高产菌株.通过细胞、菌落形态特征研究、生理生化反应以及16SrDNA序列分析,对该菌株进行了分类鉴定.命名为小白色链霉菌NK49(StreptomycesalbulusNK49).利用摇瓶培养72h后检测到ε-聚赖氨酸产量达0.74g/L.通过1HNMR、13CNMR和MALDI—TOF—MS对ε-聚赖氨酸的结构进行了表征.小白色链霉菌NK49所合成的ε-聚赖氨酸的聚合度为21~34,聚合度28~31的£聚赖氨酸为主要组分.该聚合度与已报道的微生物产ε-聚赖氨酸的聚合度不同,具有独特性. 展开更多
关键词 小白色链霉菌(streptomyces albulus)NK49 Ε-聚赖氨酸 聚合度
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不同诱导物对Streptomyces olivaceovirdis E—86产高活性木聚糖酶的研究 被引量:1
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作者 王海 李里特 石波 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期23-26,共4页
研究了不同诱导物对StreptomycesolivaceovirdisE— 86产高活性木聚糖酶的影响。采用了 3种木聚糖 (桦木木聚糖、水不溶木聚糖和醇不溶木聚糖 )作为碳源进行发酵。在培养液中最适含量桦木木聚糖和水不溶木聚糖是 1 5 % ,醇不溶木聚糖 2 ... 研究了不同诱导物对StreptomycesolivaceovirdisE— 86产高活性木聚糖酶的影响。采用了 3种木聚糖 (桦木木聚糖、水不溶木聚糖和醇不溶木聚糖 )作为碳源进行发酵。在培养液中最适含量桦木木聚糖和水不溶木聚糖是 1 5 % ,醇不溶木聚糖 2 0 % ;产生的木聚糖酶酶活不同 ,水不溶木聚糖产酶酶活是桦木木聚糖的 3倍 ,是醇不溶木聚糖 4倍 ; 展开更多
关键词 诱导物 streptomyces olivaceovirdis E-86 高活性木聚糖酶 木聚糖 发酵 生产菌株 低聚木糖 桦木
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L-缬氨酸对Streptomyces natalensis HW-2合成纳他霉素的影响 被引量:1
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作者 王大红 张颖 +3 位作者 郑迎莹 陈亚欣 徐鹏 王子旭 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第4期708-714,共7页
以Streptomyces natalensis HW-2为研究对象,考察了添加L-缬氨酸对纳他霉素生物合成途径的影响。结果表明:在纳他霉素发酵至36 h时添加0.5 g/L L-缬氨酸,纳他霉素产量达到1.83 g/L,比对照组提高了84.85%。添加L-缬氨酸后引起菌体生物量... 以Streptomyces natalensis HW-2为研究对象,考察了添加L-缬氨酸对纳他霉素生物合成途径的影响。结果表明:在纳他霉素发酵至36 h时添加0.5 g/L L-缬氨酸,纳他霉素产量达到1.83 g/L,比对照组提高了84.85%。添加L-缬氨酸后引起菌体生物量降低和pH升高,而葡萄糖利用速率加快;胞内丙酮酸激酶(PK)、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)和丙酮酸羧化酶(PC)活性增强,柠檬酸合酶(CS)活力降低了26.57%;发酵液中丙酮酸(色谱法)、草酰乙酸(色谱法)和乙酰辅酶A(分光光度法)的含量分别提高了80.50%、53.28%和47.19%,乙酸(色谱法)、丙酸(色谱法)和α-酮戊二酸(色谱法)的含量分别提高了16.98%、10.65%和15.40%,而柠檬酸(色谱法)的含量降低了27.01%。 展开更多
关键词 纳他霉素 streptomyces natalensis HW-2 L-缬氨酸 前体 食品用化学品
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