微生物来源的免疫抑制活性化合物SIPI-18-1和SIPI-18-2的研究

目的 :从微生物代谢产物中筛选和分离新的免疫抑制药物。方法 :应用本实验室已经建立的免疫抑制活性体外筛选模型 ,从几千株放线菌中筛选出十几株免疫抑制活性阳性菌株包括链霉菌SIPI 97 84 ;通过链霉菌SIPI 97 84的发酵、上清液的乙酸乙酯提取和硅胶柱层析等方法 ,从其发酵液中分离出免疫抑制活性的化合物SIPI 1 8 1和SIPI 1 8 2 ,并测定化合物的特性和图谱数据及生物学活性。结果 :通过理化性质、质谱、紫外、红外和核磁共振等图谱数据的分析 ,确定SIPI 1 8 1和SIPI 1 8 2化合物的结构 ;生物学活性研究发现SIPI 1 8 1化合物具有中等强度的免疫抑制活性。结论 :链霉菌SIPI 97 84产生的两个活性化合物均属于安沙类抗生素 ,分别与文献报道的曲张链菌素 (Streptovaricin )C和G结构一致 ;

壮观链霉菌CCTCC M2017417次级代谢产物抗肿瘤活性的初步研究

目的研究壮观链霉菌CCTCC M2017417次级代谢产物对乳腺癌细胞MCF7和胃腺癌细胞MCG803增殖抑制作用。方法应用四甲基偶氮唑比色法(MTT)测定壮观链霉菌CCTCC M2017417次级代谢产物乙酸乙酯部位、氯仿部位以及环己烷部位、对乳腺癌细胞MCF7和胃腺癌细胞MCG803增殖抑制作用;对活性最强的氯仿部位采用硅胶柱色谱、半制备色谱等方法进行分离纯化,得化合物1;通过MS和NMR等波谱方法对化合物1结构进行鉴定;应用四甲基偶氮唑比色法(MTT)测定测定化合物1对乳腺癌细胞MCF7和胃腺癌细胞MCG803增殖抑制作用。结果化合物1鉴定为曲张链菌素C(Streptovaricin C),其对对乳腺癌细胞MCF7和胃腺癌细胞MCG803 IC50分别为14μmol/L和0.001μmol/L。结论壮观链霉菌CCTCCM2017417次级代谢产物具有较强的抗肿瘤作用。

曲张链菌素产生菌壮观链霉菌NRRL2494菌株遗传操作体系的建立

曲张链菌素属于安莎类抗生素,具有显著的生物活性.在从壮观链霉菌NRRL2494菌株的发酵产物中分离和鉴定了多组分曲张链菌素的基础上,探索和优化了外源DNA通过接合转移进入壮观链霉菌NRRL2494菌株的操作方法和培养条件.以游离型质粒pJTU1278为载体,在体外构建了一个曲张链菌素酰胺合酶基因svaF敲除的质粒,通过接合转移转入到壮观链霉菌NRRL2494野生型菌株中,所获得的svaF基因缺失突变株失去了产生曲张链菌素的能力.该遗传操作体系的成功建立和优化,使得在体内分析和鉴定曲张链菌素生物合成基因的功能成为可能,同时也为建立其他类似放线菌的遗传操作体系提供了参考.

大观霉素产生菌1043菌株的分类鉴定

在筛选新抗菌素的过程中,从我国杭州土壤中分离到一株链霉菌,编号1043.它可产生两种抗菌素.一种是碱性水溶性抗菌素——大观霉素(曾译为壮观霉素)actinospectacin.另一种是酸性酯溶性抗菌素,与曲张霉素streptovaricin相似.有关该菌株及其产生的抗菌素已作过简要报道.大观霉霉,是一广谱抗菌素,可用于治疗淋球菌.现正在进行试制研究,即将投入生产应用于临床.为此,对1043菌株的分类鉴定进行补充,现将其结果报告如下.