Survivin mRNA、Caspase-3mRNA在舌鳞癌中的表达及相关性

目的:检测舌鳞癌组织中凋亡抑制基因Survivin mRNA及Caspase-3 mRNA的表达,探讨其在舌鳞状细胞癌中的意义及相关性。方法:应用原位杂交方法检测10例正常舌黏膜、45例舌鳞状细胞癌标本中Survivin mRNA及Caspase-3 mRNA的表达情况。采用SPSS13.0软件包进行χ2检验及Fisher精确概率法检验,指标间关系采用Spearman等级相关分析。结果:舌鳞癌标本中Survivin mRNA阳性表达率为55.6%,正常对照组全部为阴性,两组差异显著(P<0.01);舌鳞癌标本中Caspase-3 mRNA阳性表达率为42.2%,明显低于正常对照组的80.0%(P<0.05);Survivin mRNA高表达及Caspase-3 mRNA低表达与舌鳞癌组织学分级、颈淋巴结转移相关(P<0.05);与TNM分期密切相关(P<0.01);经Spearman等级相关分析,两者之间呈显著负相关,r=-0.412,P=0.005。结论:在舌鳞癌中,Survivin mRNA参与了抑制Caspase-3m RNA的表达,且这种抑制作用与肿瘤的发生、发展相关。

RT-PCR技术检测尿液中survivin mRNA对膀胱癌诊断价值的系统评价

背景与目的:Survivin基因逐渐成为肿瘤诊断、判断预后和治疗的靶点。用RT-PCR技术检测尿液中survivin mRNA作为一种无创性手段用于膀胱癌的诊断,国内外相关研究较多,但其结果不一。本研究旨在应用系统评价方法对相关文献进行客观评价,以评估RT-PCR技术检测尿液中survivin mRNA对膀胱癌的诊断价值。方法:以膀胱肿瘤、生存素、逆转录-聚合酶链反应、敏感度、特异度、诊断等为主要检索词检索PubMed、EMBASE、SCI、Cochrane Library、中国生物医学文献数据库(CBM)、中国期刊全文数据库(CJFD)、中文科技期刊数据库(CSJD)、中华医学会数字化期刊等数据库,并结合Google Scholar等搜索引擎全面搜集1997年到2009年4月关于RT-PCR检测尿液survivin mRNA诊断膀胱癌的研究。根据QUADAS(quality assessment of diagnostic accuracy studies)质量评价标准评价纳入文献质量,用Meta-Disc软件对结果指标进行分析。结果:最终纳入26个研究,共2416例。Meta分析结果显示,RT-PCR技术检测尿液中survivin mRNA诊断膀胱癌与病理检查相比准确度指标合并敏感度、特异度、阳性似然比、阴性似然比及SROC曲线下面积分别为88%、94%、14.56、0.13、0.9736;巢式RT-PCR技术检测的敏感度、特异度及SROC曲线下面积最高,分别为91%、95%、0.9805;普通RT-PCR技术检测的敏感度和特异度次之,分别为87%和94%;定量RT-PCR技术检测的敏感度为80%,特异度为93%。结论:与病理检查相比,RT-PCR技术检测尿液中survivin mRNA诊断膀胱癌有较高的敏感度和特异度,可作为膀胱镜检查的主要辅助手段之一,用于膀胱癌的筛查及术后监测。

外周血Survivin mRNA表达与胃癌的关系

目的探讨外周血中Survivin mRNA表达与胃癌的关系。方法以GAPDH作内参照,应用实时定量RT-PCR技术检测55例胃癌化疗前及病情进展后患者外周血中Survivin mRNA表达水平。结果化疗前Survivin mRNA表达水平为0.6012±0.0496,疾病进展后Survivin mRNA表达水平为0.7190±0.0961(P<0.05)。回归分析发现,Survivin mRNA的表达水平及分期是影响胃癌预后的独立因素。结论外周血Survivin mRNA可以作为胃癌早期诊断,判断胃癌复发或转移及预后的客观指标之一。

食管癌外周血中Survivin mRNA表达对化疗敏感性及预后的影响

目的:探讨Survivin在食管癌患者外周血中的表达与化疗敏感性及预后的关系。方法:采用荧光定量RT-PCR法检测Survivin mRNA在103例食管癌患者和正常人外周血中的表达,分析食管癌患者外周血中Survivin mRNA表达水平高低与不同化疗方案敏感性的关系,以及对生存期的影响。结果:FP、TP方案的疗效与外周血Survivin mRNA表达水平呈负相关,而NP方案疗效与外周血Survivin mRNA表达水平无关。总生存期与外周血Survivin mRNA表达水平有关,外周血Survivin mRNA表达水平低,总生存期长。结论:检测外周血Survivin mRNA对食管癌生存期预测以及化疗方案选择具有一定的指导作用。

应用定量PCR方法动态检测膀胱癌患者尿脱落细胞中survivin mRNA的表达及其临床意义

背景与目的:膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤,目前临床上缺乏理想的早期诊断方法。本研究通过检测膀胱移行细胞癌(bladder transitional cell carcinoma,BTCC)患者手术前后尿脱落细胞中survivin mRNA的表达,探讨其在BTCC患者早期诊断和术后监测肿瘤复发中的意义。方法:采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)法检测10例健康志愿者、15例膀胱炎患者和30例初发BTCC患者术前及术后1周、1个月、6个月定期随访至15个月尿脱落细胞中survivin mRNA的表达情况。结果:30例BTCC患者术前尿脱落细胞中survivin mRNA的相对拷贝数为96.01±42.33,明显高于正常对照组及膀胱炎组(P<0.05)。术后1周(25.30±1.51)较术前显著下降(P<0.05);术后1个月(13.20±1.49)、术后6个月(13.90±1.36)与正常对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05);随访至15个月,3例复发患者复发时的相对拷贝数为97.83±27.47,与术后6个月相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:尿脱落细胞中survivin mRNA的表达作为诊断膀胱移行细胞癌的指标敏感性高,术后动态随访survivin mRNA表达变化可监测复发。

塞来昔布对胃癌细胞凋亡及survivin mRNA表达的影响

目的:探讨塞来昔布(celecoxib)对胃癌细胞株MGC803凋亡的影响,为寻求新的胃癌治疗策略提供理论依据。方法:MGC803细胞经塞来昔布处理后,用AO/EB荧光染色检测细胞凋亡率;RT-PCR检测凋亡相关基因survivin mRNA的表达。结果:荧光染色法显示塞来昔布可诱导MGC803细胞凋亡,并呈时间、剂量依赖性;RT-PCR检测发现塞来昔布可抑制凋亡相关基因survivin mRNA的表达。结论:塞来昔布诱导MGC803凋亡可能与survivin mRNA表达下调有关。

肺癌穿刺标本Survivin mRNA表达的研究

目的:研究肺癌穿刺标本中Survivin mRNA的定量表达情况。方法:用Trizol方法提取肺穿刺组织(54例)总RNA后,将其逆转录为cDNA,建立实时荧光定量RT-PCR方法,测定肺穿刺标本组织Survivin mRNA的表达。结果:(1)Sur-vivin mRNA在肺癌中高度表达(0.26±0.023)logcopies/μg(阳性率为91%),与良性肺病变中表达(0.05±0.009)log copies/μg(阳性率为12.5%)均有显著性差异(P<0.01);(2)肺癌穿刺敏感性、Survivin表达阳性率均为91%(42/46),细胞病理学与Survivin检测联合诊断,肺癌的检出率达100%。结论:运用RT-PCR法检测肺癌穿刺标本Survivin mRNA的表达,对提高肺癌的诊断有一定的帮助。

肾癌患者外周血中survivin mRNA的表达

目的探讨肾透明细胞癌患者外周血中survivin mRNA的表达及其临床意义。方法用RT-PCR方法检测30例肾透明细胞癌患者、10例正常健康人外周血中survivin mRNA的表达。结果30例肾透明细胞癌患者中有23例外周血中survivin mRNA表达阳性,阳性率为76.7%,与正常健康人(0%)相比差异有统计学意义(P<0.001);survivin mRNA的表达与临床分期密切相关(P<0.01);随肿瘤组织分化程度的降低,survivin阳性率有增加的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论肾透明细胞癌患者外周血中survivin mRNA可作为肾透明细胞癌微转移的一个监测指标。

实时荧光定量RT-PCR检测食管癌Survivin mRNA的表达

目的建立实时荧光定量RT-PCR方法检测SurvivinmRNA的表达。方法用Trizol方法提取食管癌组织总RNA后,将其逆转录为cDNA,建立实时荧光定量RT-PCR方法,检测人食管癌SurvivinmRNA的表达。结果SurvivinmR-NA在癌组织中高度表达,与正常食管粘膜有显著性差异。结论所建立的实时荧光定量RT-PCR方法用于检测检测人食管癌SurvivinmRNA的表达,是一种快速有效、灵敏度高、特异性好的定量检测方法。

急性非淋巴细胞白血病细胞survivin mRNA的表达

目的 :探讨急性非淋巴细胞白血病 (ANLL)细胞survivinmRNA表达及与疗效关系。方法 :应用RT -PCR方法检测 2 8例初发ANLL患者和 6例正常对照骨髓单个核细胞survivinmRNA的表达。结果 :ANLL患者survivinmRNA表达阳性率 75 .0 % (2 1/ 2 8)明显高于正常对照的 2 / 6 (χ2 =3.919,P <0 .0 5 ) ;survivinmRNA表达阴性的ANLL患者接受 1个疗程化疗后骨髓缓解 (BMR)率高于阳性者 (83.3%vs 2 5 .0 % ,P =0 .0 2 3)。结论 :survivin基因在ANLL细胞高表达 。

血中survivin mRNA表达水平的定量检测及其对食管癌预后的评估

目的探讨食管癌患者外周血中细胞凋亡抑制蛋白survivin mRNA定量检测对预后评估的价值。方法取36例食管癌患者在手术前、手术刚结束时和手术后第3d的外周血；将实时荧光RT-PCR绝对定量和相对定量技术合理结合，创建新的标准曲线，用于检测外周血survivin mRNA的表达水平；22例胸部良性肿瘤患者的同期系列血样为对照组。结果survivin mRNA阳性表达的平均值（拷贝数／μg总RNA）在3个取样时间点依次分别为：12219（95％ CI，7826-16612），6595（95％CI，2461-10729）和15018（95％ CI，7407-22628）。术后一年的随访结果显示，当术后第3dsurvivin mRNA的表达水平大于9000拷贝／μg总RNA时，患者的复发风险显著性增高（P=0．033）。结论术后第3d外周血中survivin mRNA的表达水平可作为一个新的判断指标用于食管癌患者预后的评估。

胃肠肿瘤患者手术前后外周血survivin mRNA定量检测的临床意义

目的研究胃肠肿瘤患者手术前后外周血survivin mRNA表达量的变化,分析其与复发转移的关系。方法采用实时荧光定量RT-PCR检测40例胃肠肿瘤患者手术前后外周血survivin mRNA表达量,并进行6月的随访;同时以10例患胆石症或阑尾炎的非癌手术病人作为对照。结果 40例胃肠肿瘤患者,手术前后外周血survivin mRNA阳性率分别为87.5%和45%,两者比较差异有统计学意义(P<0.01);5例术前未检出survivin mRNA表达的患者术后均未检出;35例survivin mRNA阳性表达的患者中术后17例未检出,12例survivin mRNA水平明显低于术前,6例survivin mRNA水平增高;6例术后survivin mRNA水平增高的患者在随访6月内有4例出现明显的肝转移。结论检测手术前后外周血survivin mRNA水平的变化,可作为观察胃肠肿瘤术后复发转移的一种非侵入性、可测量的客观指标。

定量检测膀胱尿路上皮癌患者手术前后外周血中survivin mRNA的临床意义

目的:研究膀胱移行细胞癌患者手术前后全血中survivin mRNA表达变化及其临床意义。方法:采用qRT-PCR检测47名非肌层浸润膀胱癌患者与25名正常人群手术前后外周血中survivin mRNA表达量并构建受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线。结果:术前膀胱癌患者survivin mRNA表达水平是正常人群的4.06倍(P<0.0 5),经ROC曲线分析,区别膀胱癌患者与正常人群的sur vivin表达临界值为1.4×10^(-2),患者组术后各时间点survivin表达水平明显低于术前水平(P<0.05),survivin mRNA水平高于临界值的术后患者较低于临界值的患者复发率高(P<0.05)。结论:qRT-PCR可简单敏感地检测全血中survivin mRNA水平,survivin可作为用于膀胱癌诊断及复发判断的标志物。

结直肠癌患者外周血中Survivin mRNA的表达及临床意义

目的探讨survivin mRNA在结直肠癌患者外周血的表达及临床意义。方法采用SPSS16.0软件进行统计分析。采取χ2检验,收集保定市第一中心医院普通外科收治的结直肠癌患者90例、结直肠腺瘤疾病患者60例,同期选择本院体检健康人60例为对照组,运用巢式RT-PCR技术检测并比较术前结直肠癌患者、结直肠腺瘤疾病患者、正常健康人3组血清中survivin mRNA表达水平。分析结直肠癌患者血清中survivin mRNA水平与肿瘤术后分期、病理类型、分化程度和是否远处转移等临床病理特征相关性。结果健康人中survivin mRNA不表达,结直肠良性腺瘤疾病患者中有2例survivin mRNA表达,表达率为3.33%,结直肠癌患者外周血中survivin mRNA有49例,表达率为54.44%,survivin mRNA表达率与肿瘤分期及肿瘤转移密切相关(P<0.05),与肿瘤的病理类型及分化程度无明显相关(P>0.05)。结论结直肠癌患者外周survivinmRNA表达明显上调,其与结肠癌分期及是否远处转移密切相关,可以作为检测结直肠癌患者外周血转移和评价肿瘤是否进展的良好的分子标记物。

Survivin mRNA在胃癌外周血中的表达及临床意义

背景与目的:Survivin在肿瘤的发生、发展中起重要作用。近年来,Survivin在胃癌研究领域备受关注。本研究探讨Survivin mRNA在胃癌外周血中的表达及其临床意义。方法:以GAPDH作内参照,应用实时定量RT-PCR技术检测胃炎及化疗前胃癌各50例外周血中Survivin mRNA表达水平。结果:正常对照组(胃炎患者)外周血中未检测到Survivin mRNA表达。胃癌组患者Survivin表达检测率为86%(43例),其中28例出现转移的患者阳性率为100%,22例未出现转移者为68.2%(P<0.05)。Survivin mRNA的表达与年龄、性别及淋巴结转移均无相关性(P>0.05)。回归分析发现,Survivin mRNA的表达水平是影响胃癌预后的独立预测因素。结论:外周血Survivin mRNA可作为临床评估胃癌患者预后的客观指标之一。

病理性瘢痕组织中微血管密度的测定及与survivin mRNA的表达关系

目的测定病理性瘢痕组织中CD105标记的微血管密度（microvesiel density，MVD）和survivin mRNA的表达，探讨病理性瘢痕组织中癌基因在血管形成中的作用。方法采用多相寡核苷酸探针原位杂交技术和免疫组织化学染色技术（SP法），分别检测survivin mRNA、CD105蛋白在40例病理性瘢痕、20例非病理性瘢痕和20例正常皮肤组织中的表达，并计数CD105标记的MVD。结果CD105-MVD、survivinmRNA在病理性瘢痕较非病理性瘢痕和正常皮肤的表达差异皆具有统计学意义（P〈0.05）。病理性瘢痕组中survivin mRNA表达与CD105-MVD表达有相关性（P〈0.05）。结论病理性瘢痕组织中，凋亡抑制基因survivin表达上调可能参与了其血管形成过程。

大鼠胃黏膜组织Syk、Survivin蛋白、P53及AMP-18 mRNA表达和胃癌病变程度的相关性

目的探讨大鼠胃黏膜组织Syk、P53、Survivin及AMP-18 mRNA表达和胃癌病变程度的相关性。方法将48只体重180~200 g SD大鼠分为A、B、C、D 4组。A组给予生理盐水作为对照组。B组、C组和D组,采用N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱导建立大鼠胃癌模型,1~8周给予大鼠自由饮水,水中的MNNG溶液浓度为100μg/ml(内含4 mg/l吐温20和20 mg/l的维生素D3);9~16周MNNG溶液浓度增加至150μg/ml,17~24周MNNG溶液浓度为180μg/ml。分别于第8周(B组)、第16周(C组)及第24周(D组)处死大鼠取材。HE染色切片观察大鼠胃黏膜组织病理改变,并采用Western blot检测胃黏膜Syk蛋白和Survivin蛋白水平,Q-PCR法测定胃黏膜P53和AMP-18 mRNA的表达。结果HE染色结果显示A组、B组胃黏膜组织结构正常,无炎性细胞浸润;C组胃黏膜局部有破损,细胞核增大、轻度异型,提示胃癌早期;D组胃黏膜下层及肌层有炎性细胞浸润,细胞形态不规则,核质比增大,表明胃癌进展期。免疫组化提示B组、C组和D组胃黏膜组织Syk蛋白水平明显下降(P<0.05),Survivin蛋白含量显著增加,与A组均有统计学差异(P<0.05)。Q-PCR表明C组和D组胃黏膜组织P53 mRNA表达上调,AMP-18 mRNA表达下调,且D组胃癌进展后,P53和AMP-18 mRNA水平与B组有统计学差异(P<0.05)。结论大鼠胃黏膜组织Syk蛋白、AMP-18 mRNA表达随着胃癌病变程度的进展明显下降,而Survivin蛋白、P53表达则显著上升。

Survivin mRNA和血清IL-8表达水平在大鼠肺鳞癌中的相关性研究

目的 探讨凋亡抑制蛋白Survivin和血清IL-8在肺鳞癌动物模型发生发展各阶段的表达水平及相关性.方法 Wistar大鼠48只,40只行左肺下叶支气管灌注含三甲基胆蒽（MCA）和二乙基亚硝胺（DEN）的碘油溶液0.lml,另8只灌注0.1ml碘油作为对照,分批处死前行心尖穿刺抽血4～6ml,然后摘除灌注部位肺组织,获取肺鳞癌发生过程各阶段标本;采用双抗体夹心免疫酶标法（ELISA）检测48只大鼠IL-8血清含量,原位杂交法检测各阶段病变组织中Survivin mRNA的转录水平并采用半定量法进行评分.结果 本试验共获取支气管黏膜上皮增生18例,不典型增生11例（含鳞状化生7例）,原位癌6例,侵袭癌7例,转移癌6例.根据原位杂交评分在鳞癌组织中Survivin mRNA表达高于癌前病变组、增生组及正常组（P＜0.01）;在鳞癌组中转移癌Survivin mRNA表达评分为5.00±0.707,非转移癌的评分为3.08±1.382,二者比较差异有统计学意义（P=0.01）.在阴性对照组血清IL-8的表达水平为（24.13±0.97） pg/ml,随着癌变进展而逐步上调,与不典型增生、肺鳞癌阶段IL-8的血清水平比较,差异有统计学意义（P=0.018,P＜0.01）.在大鼠肺癌组中,发生肿瘤转移组的血清IL-8水平明显高于非转移组（P =0.002）.此外,Survivin mRNA表达阳性的肺组织标本中IL-8浓度为45.910±20.232,Survivin mRNA表达阴性的肺组织标本中IL-8浓度为31.214±11.786,差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 Survivin和IL-8在大鼠肺鳞癌发生中发挥重要作用,并且协同促进肿瘤的浸润和转移.联合检测可能对肺癌的早期诊断、预后评估有着一定的临床价值.

前列腺癌Survivin mRNA的表达及意义

目的探讨Survivin mRNA的表达与前列腺癌发生及发展的关系。方法应用原位杂交技术检测45例前列腺癌组织和30例前列腺良性增生组织中凋亡抑制蛋白Survivin mRNA的表达。结果前列腺癌组织Survivin mRNA的平均光密度值（A）（0．4232±0．0085）显著高于前列腺良性增生（BPH）组（0．3303±0．0834）（P=0．001），且不同病理分级间Survivin mRNA表达[GI（0．3401±0．0474）、G2（0．4270±0．0074）、G，（0．4560±0．0883）]的差异有统计学意义（P=0．004），Survivin mRNA阳性表达与前列腺癌的淋巴结转移（0．4557±0．7921）呈正相关（P=0．005）。结论Survivin mRNA在前列腺癌组织中过度表达。推测Survivin参与前列腺癌的发生、发展以及与前列腺癌的预后密切相关。

检测膀胱肿瘤Survivin蛋白及其mRNA表达的临床意义

目的为明确Survivin作为膀胱肿瘤患者的肿瘤诊断和监测标志物的可能性,我们检测了Survivin在膀胱肿瘤和非肿瘤患者病变组织的Survivin蛋白及其mRNA表达情况。方法从我科住院病人和膀胱镜检患者中获取31例膀胱癌患者(实验组)和24例非肿瘤患者(对照组)的组织标本,用免疫组织化学法(IHC)和RT-PCR检测Survivin蛋白和基因在肿瘤组织和非肿瘤组织中的表达情况。并对结果行相应的统计学分析。结果IHC检测实验组和对照组Survivin蛋白的阳性率分别为74%(23/31)和4%(1/24),χ2检验P<0.001,IHC的阳性率与肿瘤的分级分期有一定的关系;实验组和对照组RT-PCR检测Survivin mRNA的表达阳性率分别为90%(30/31)和4%(1/24),χ2检验P<0.001。结论膀胱肿瘤组织Survivin蛋白和基因的表达量高于对照组,因此,Survivin有望成为膀胱瘤高危人群筛选,肿瘤诊断和监测的工具之一。