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Induction of Silencing Effect of Swedish Mutant Amyloid Precursor Protein by RNA interference
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作者 邱昕 陈国华 +2 位作者 潘纪安 陈宇 张苏明 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2006年第4期399-401,共3页
Summary: Over-expression of APP and Swedish mutation could cause some familial early onset AD. In this study, a primary screening was conducted of effective small interference RNAs (siRNAs) targeted wild type APP ... Summary: Over-expression of APP and Swedish mutation could cause some familial early onset AD. In this study, a primary screening was conducted of effective small interference RNAs (siRNAs) targeted wild type APP (APPwt) and Swedish mutant APP (APPswe). One siRNA targeting APPwt and the other siRNA targeting APPswe were designed, All these siRNAs were endogenously expressed by siRNAs expressing plasmids, COS-7 cells were transiently co-transfected with APP-GFP recombinant plasmids and siRNA expression vector, The silencing effect of each siRNA was quantitatively assessed by the level of expression of green fluorescent protein (GFP). It was found that the siRNAs silenced APPwt and APPswe to different degrees, siRNA directed against APPswe was more effective in suppressing the expression of fusion gene of APPswe than that of APPwt. The silencing effect of siRNA directed against APPswe indicating allele-specific silencing property of the siRNAs. Therefore, siRNAs directed against APP play an important role both in the therapeutic study of Alzheimer disease and functional exploration ofAPP gene. 展开更多
关键词 amyloid precursor protein small interference RNA wild type app swedish mutant app
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RNA干扰对阿尔茨海默病家族性瑞典型APP突变的沉默作用邱
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作者 邱昕 潘纪安 +3 位作者 陈宇 张玮莹 杨华静 张苏明 《神经科学通报》 CSCD 2005年第3期219-223,共5页
目的诱导小干涉RNA (small interference RNA, siRNA )对阿尔茨海默病淀粉样前体蛋白家族性瑞典型突变(APPswe)的沉默作用。方法设计一对针对APPswe的寡核苷酸,构建成内源性表达相应siRNA的质粒,与构建的APP-EGFP重组质粒瞬时共转染COS-... 目的诱导小干涉RNA (small interference RNA, siRNA )对阿尔茨海默病淀粉样前体蛋白家族性瑞典型突变(APPswe)的沉默作用。方法设计一对针对APPswe的寡核苷酸,构建成内源性表达相应siRNA的质粒,与构建的APP-EGFP重组质粒瞬时共转染COS-7细胞,利用GFP报告基因来间接观察siRNA对APPswe的沉默作用。结果siRNA可有效地下调突变型APP,相比APPwt而言,针对突变型APP的siRNA对APPswe的沉默作用更强。结论针对APPswe的siRNA可有效地沉默APPswe基因,并有一定的等位基因特异性。因此,针对APPswe的siRNA将在阿尔茨海默病治疗研究领域扮演重要角色。 展开更多
关键词 RNA干扰 阿尔茨海默病 家族性 瑞典型 app突变 沉默作用 SIRNA AD
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APP695^(K595N/M596L)突变转基因小鼠的建立和病理表型动态分析
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作者 王冬梅 李万波 +5 位作者 袁树民 全雄志 张海涛 马春梅 曹兴水 张连峰 《中国比较医学杂志》 CAS 2011年第12期5-9,25,92,共7页
目的建立APP695K595N/M596L(Swedish突变)转基因小鼠和评价痴呆表型的发生和发展过程。方法将APP695K595N/M596L突变基因插入到小鼠朊蛋白(mouse prion protein)启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立APP695K595N/M596L突... 目的建立APP695K595N/M596L(Swedish突变)转基因小鼠和评价痴呆表型的发生和发展过程。方法将APP695K595N/M596L突变基因插入到小鼠朊蛋白(mouse prion protein)启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立APP695K595N/M596L突变转基因C57BL/6J小鼠。PCR鉴定转基因小鼠的基因表型,Western blotting检测APP突变基因表达。Thioflavin-S染色检测不同年龄转基因小鼠大脑病理改变。Morris水迷宫动态观察小鼠行为学改变。结果建立了人APP695K595N/M596L转基因小鼠,Thioflavin-S染色显示转基因小鼠9月龄时在脑海马区可检测到老年斑形成,并且在11、12月龄时明显增多。Morris水迷宫结果发现与同月龄野生型小鼠相比,该转基因小鼠5月龄开始出现学习记忆能力缺陷,7、9、11月行为学结果证实转基因小鼠的学习记忆能力缺陷随年龄增加而日趋严重(P<0.05)。结论建立了人APP695K595N/M596L转基因小鼠,并能再现人类阿尔茨海默症的行为学及神经病理学特征,为阿尔茨海默病发病机制研究和药物研发提供了有价值的动物模型。 展开更多
关键词 朊蛋白 app瑞士突变 转基因小鼠 水迷宫
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