转录因子T-bet在慢性阻塞性肺疾病发病中作用的研究进展

慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种慢性进行性发展的呼吸系统疾病。转录因子T-bet在抗炎作用、免疫调节等方面参与COPD发病的炎性反应及肺功能改变,有望成为防治COPD发病的新靶点,为COPD的靶向研究提供新思路。

T-bet突变介导的淋巴细胞差异性表达在结核分枝杆菌感染中的研究进展

T-bet作为CD4+T细胞最重要的转录因子,在结核分枝杆菌(MTB)增殖中起到重要作用。T-bet/GATA-3参与调控辅助性T1细胞(Th1)/Th2细胞的平衡,其中T-bet可促进CD4+T细胞向Th1细胞定向分化,进而分泌γ干扰素(IFN-γ)和肿瘤坏死因子(TNF-α)等细胞因子,激活巨噬细胞直接清除MTB。T-bet突变会影响IFN-γ表达,不利于MTB的清除。最新研究结果发现,T-bet缺陷可抑制多种淋巴细胞亚型表达及其分泌的IFN-γ水平,但CD8+T细胞和非经典CD4+Th1*淋巴细胞表达不受影响。本文基于T-bet突变介导的淋巴细胞差异性表达,分析其在MTB感染中的研究进展。

哮喘患儿转录因子T-bet/GATA-3 mRNA比值及其与Th1/Th2平衡间的关系

【目的】研究转录因子T-bet/GATA-3在小儿哮喘发病以及Th1/Th2失衡中的作用。【方法】本实验拟通过半定量RT-PCR检测部分哮喘患儿外周血单个核细胞(PBMC)中T-bet、GATA-3 mRNA表达情况,同时采用三色荧光流式细胞仪检测哮喘患儿的Th1、Th2细胞数量,并对T-bet、GATA-3 mRNA表达水平与Th1、Th2细胞比率进行相关分析,了解T-bet/GATA-3对哮喘患儿的Th细胞分化的调节作用。【结果】哮喘患儿外周血淋巴细胞转录因子T-bet mRNA表达水平显著低于正常对照组,其中哮喘发作组显著低于缓解组(P<0.05);转录因子GATA-3 mRNA表达水平显著高于正常对照组,哮喘发作组又显著高于缓解组(P<0.05)。哮喘患儿外周血淋巴细胞亚群Th1百分率显著低于正常对照组,其中哮喘发作组又显著低于缓解组(P<0.05);Th2细胞百分率显著高于正常对照组,哮喘发作组又显著高于缓解组(P<0.05)。哮喘患儿T-bet mRNA表达量与Th1细胞比率呈正相关(r=0.731),与Th2细胞比率呈负相关(r=-0.685);GATA-3 mRNA表达量与Th1细胞比率呈负相关(r=-0.692),与Th2细胞比率呈正相关(r=0.717);T-bet/GATA-3 mRNA比值与Th1细胞比率呈正相关(r=0.793),与Th2细胞比率呈负相关(r=-0.639),与Th1/Th2比值呈正相关(r=0.801)。【结论】哮喘患儿T-bet/GATA-3 mRNA表达水平失调,与哮喘患儿Th1/Th2失衡密切相关,可作为衡量Th1/Th2平衡的新指标。

泡球蚴感染小鼠肝组织T-bet、GATA-3、ROR-γt和IL-17 mRNA表达水平的研究

目的:研究泡球蚴感染小鼠肝组织T-bet、GATA-3、ROR-γt和IL-17mRNA表达水平的变化特点,初步探讨Th17细胞与Th1/Th2在棘球蚴感染中的相互关系。方法:通过腹腔接种多房棘球绦虫的幼虫原头蚴混悬液制备泡球蚴感染小鼠模型,持续观察10个月,分别在感染2天、8天、1月、3月、6月和10月处死小鼠,收集肝脏组织。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组小鼠肝脏组织T-bet、GATA-3、ROR-γt和IL-17 mRNA的表达水平。结果:T-bet mRNA的表达水平在感染早期开始增高,1月时达高峰后又开始缓缓下降至感染前水平;GATA-3 mRNA的表达水平在感染1月时明显升高,随后一直保持较高的表达水平;ROR-γt mRNA的表达水平在感染早期开始增高,感染1月时达到高峰,随后缓慢下降。IL-17 mRNA表达水平自感染早期开始持续性增高,到感染3月时达高峰,之后又逐渐降低至感染前水平。各组小鼠肝组织ROR-γt mRNA表达水平与T-bet mRNA表达水平呈正相关(r=0.67),IL-17 mRNA表达水平与ROR-γt mRNA表达水平有相关性(r=0.35),P值均<0.05。结论:泡球蚴感染宿主早期,主要以Th1型和Th17型细胞免疫为主,感染中后期出现Th1向Th2转化,机体呈现出以Th2细胞为主的优势应答。

咳喘停贴剂穴位贴敷对慢性哮喘气道炎症大鼠肺组织T-bet、GATA-3 mRNA表达的影响

目的观察咳喘停贴剂穴位贴敷治疗对慢性哮喘气道炎症大鼠以Th1/Th2为主的上游特异性转录因子表达的影响。方法将50只Wistar雄性大鼠随机分成5组,每组10只,分别为正常组(A)、哮喘模型组(B)、地塞米松组(C)、假穴位贴敷组(D)、穴位贴敷组(E)。B、C、D、E组以卵蛋白(OVA)致敏和激发制作慢性哮喘气道炎症模型,观察治疗后各组大鼠肺组织Th1/Th2上游特异转录因子T-bet、GATA-3mRNA表达的差异性。结果与正常组比较,哮喘模型组、假穴位贴敷组T-bet mRNA含量降低,GATA-3mRNA含量升高,T-bet/GATA-3比值下降(P<0.05);地塞米松组、穴位贴敷组则差异无统计学意义。与哮喘模型组比较,地塞米松组、穴位贴敷组T-bet mRNA均升高,GATA-3mRNA均降低,T-bet/GATA-3比值均升高(P<0.05);假穴位贴敷组则差异无统计学意义。地塞米松组、穴位贴敷组之间差异无统计学意义。结论咳喘停贴剂穴位贴敷治疗慢性哮喘气道炎症,可通过增加Th1相关T-bet mRNA的表达,降低Th2相关GATA-3 mRNA的表达来调节Th1/Th2的失衡,从而起到改善慢性气道炎症的作用。咳喘停贴剂穴位贴敷治疗的疗效与地塞米松相似。

环孢菌素A对慢性再生障碍性贫血患者T-bet、GATA-3、相关信号分子、细胞因子及Th1/Th2的影响

本研究探讨转录因子T-bet、GATA-3及相关信号通路在慢性再生障碍性贫血(CAA)免疫发病中的作用,从Th细胞失衡、转录因子及相关信号通路水平研究环孢菌素(CsA)治疗慢性AA的免疫调节机理。采用实时荧光定量PCR(real-time FQ-PCR)检测慢性AA患者治疗前和CsA治疗6月后外周血单个核细胞(PBMNC)T-bet、GATA-3及STAT4、STAT6mRNA表达;采用流式细胞术、酶联免疫吸附法(ELISA)检测慢性AA患者治疗前和CsA治疗6月后外周血Th1、Th2比例及PBMNC培养上清IFN-γ、IL-12、IL-4水平,并与正常人进行比较。结果表明:慢性AA患者PBMNC T-bet、STAT4mRNA表达、T-bet/GATA-3比值、Th1比例、Th1/Th2比值、PBMNC培养上清IFN-γ、IL-12表达均明显高于正常组(p<0.01),经CsA治疗6月后,患者T-bet、STAT4表达、T-bet/GATA-3比值、Th1比例、IFN-γ、IL-12表达均有所下降,但T-bet、STAT4、T-bet/GATA-3比值、Th1比例、IFN-γ表达仍未达到正常水平,GATA-3、STAT6mRNA表达、Th2比例、IL-4表达在治疗前后与正常人比较均无明显差异(p>0.05)。结论:IFN-γ/T-bet、IL-12/STAT4通路的异常活化及Th平衡向Th1型偏移在AA免疫异常的发病过程中起到关键的作用;CsA能通过下调IFN-γ/T-bet、IL-12/STAT4通路的异常活化及纠正Th1过度极化而减轻AA异常亢进的细胞免疫,解除造血抑制。

原花青素对斑秃患者外周血单核细胞中IFN-γ、IL-12及转录因子T-bet基因表达的调节作用

目的探讨原花青素对斑秃患者外周血单核细胞(PBMC)中Th1型细胞因子(IFN-γ、IL-12)及转录因子T-bet基因表达的调节作用。方法用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法,分别检测8例轻型斑秃、12例重型斑秃患者及10例健康人外周血PBMC经原花青素(PC)刺激后IFN-γ、IL-12及T-bet mRNA的表达状况。结果植物血凝素(phytoaemagglutinin,PHA)及PC+PHA共同刺激重型斑秃患者PBMC后,转录因子T-bet mRNA分别为0.581±0.148、0.419±0.113;IFN-γ mRNA分别为0.689±0.219、0.430±0.162;IL-12 mRNA分别为0.198±0.056、0.136±0.035;与自身对照比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论PC可抑制重型斑秃患者PBMC中转录因子T-bet及Th1型细胞因子基因表达,逆转Th1型反应,含PC的中药松针治疗斑秃有效的机制可能部分与此相关。

生血合剂对慢性再生障碍性贫血患者T-bet/GATA-3、相关信号分子、细胞因子表达及Th_1/Th_2的影响

目的研究转录因子T-bet(T-box expressed in T cells)、GATA-3(GATA binding protein3)及相关信号通路在慢性再生障碍性贫血(chronic aplastic anemia,CAA)免疫发病中的作用,从辅助性T(helper T,Th)细胞失衡、转录因子及相关信号通路水平探讨生血合剂治疗CAA的免疫调控机制。方法 40例CAA患者均来自上海中医药大学附属岳阳医院,随机分为治疗组20例和对照组20例,选取体检健康者20名为正常组。治疗组患者辨证分为脾肾阳虚型和脾肾阴虚型,脾肾阳虚型患者服用生血合剂1号,脾肾阴虚型患者服用生血合剂2号,对照组服用环孢菌素A(CsA),采用实时荧光定量PCR(Realtime FQ-PCR)检测CAA患者治疗前后外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMNC)、T-bet、GATA-3及信号转导子及转录激活因子4(signal transducer and activator of transcription 4,STAT4)、STAT6 mRNA表达,采用流式细胞术、酶联免疫吸附法(ELISA)检测CAA患者治疗前后PBMNC Th_1、Th_2比例及PBMNC培养上清IFN-γ、IL-12、IL-4水平。结果 CAA患者PBMNC T-bet、STAT4 mRNA表达、T-bet/GATA-3比值、Th_1比例、Th_1/Th_2比值、PBMNC培养上清IFN-γ、IL-12表达均明显高于正常组(P<0.01),采用生血合剂或CsA治疗后,患者T-bet、STAT4表达、T-bet/GATA-3比值、Th_1比例、IFN-γ、IL-12表达均有所下降(P<0.01),但T-bet、STAT4、T-bet/GATA-3比值、Th_1比例、IFN-γ表达仍未达到正常水平,治疗组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),而GATA-3、STAT6 mRNA表达、Th_2比例、IL-4表达治疗前后与正常组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 IFN-γ/T-bet、IL-12/STAT4通路的异常活化,及Th_1/Th_2平衡向Th_1型偏移,在CAA免疫异常的发病过程中起关键的作用。生血合剂和CsA能通过下调IFN-γ/T-bet、IL-12/STAT4通路的异常活化,并纠正Th_1过度极化,从而减轻CAA异常亢进的细胞免疫,解除造血抑制。

变应性鼻炎小鼠模型鼻黏膜组织重塑和转录因子T-bet/GATA-3的表达

【目的】建立变应性鼻炎小鼠模型,了解鼻黏膜组织重塑情况,探讨核因子T-bet/GATA-3比值在变应性鼻炎免疫失衡中的意义。【方法】建立卵清蛋白(OVA)诱导的变应性鼻炎小鼠模型;20只BALB/c小鼠随机分为正常组和实验组。HE染色观察呼吸道黏膜炎症变化;ELISA法(酶联免疫吸附法)检测血浆中白细胞介素4(IL-4)和干扰素γ(IFN-γ)的水平;Western blot法检测T-bet、GATA-3蛋白在鼻黏膜组织的表达。【结果】变应性鼻炎小鼠鼻和支气管黏膜均存在组织重塑。与正常组相比,实验组鼻黏膜出现上皮脱落,杯状细胞增生,鳞状上皮组织转化,上皮坏死,固有层和黏膜下层腺体增生,血管扩张,组织水肿,并见特征性的嗜酸性粒细胞浸润。实验组血浆中IL-4和IFN-γ的水平分别是(16.5±4.1)pg/mL和(6.5±1.1)pg/mL,而对照组分别是(7.3±1.7)pg/mL,和(11.4±3.3)pg/mL;实验组血浆中IL-4的含量明显高于对照组,差异具有显著性(P<0.05),而IFN-γ的量低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组鼻黏膜T-bet/GATA-3蛋白表达量的比值(0.62±0.17),明显高于实验组(0.12±0.03;P<0.05)。【结论】变应性鼻炎小鼠模型鼻黏膜存在组织重塑,可能与转录因子T-bet/GATA-3表达失衡导致下游Th1/Th2细胞免疫失衡和细胞因子IL-4/IFN-γ分泌失调有关。

慢性乙型肝炎患者PBMCs中ROG、GATA3和T-bet mRNA水平及其意义

目的探讨慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)中转录因子ROG、GATA3和T-bet m RNA水平变化及意义。方法收集135例慢性乙型肝炎患者(轻度45例、中度42例、重度48例)和15例健康志愿者(正常对照组)的外周血,分离单个核细胞,提取总RNA,用实时定量PCR的方法检测ROG、GATA3和T-bet m RNA水平。应用SPSS16.0软件进行统计分析。结果慢性乙型肝炎轻度、中度组和重度组患者外周血PBMCs中T-bet m RNA表达水平均明显高于健康对照组人群,组内比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。慢性乙型肝炎重度组患者外周血PBMCs中ROG m RNA表达水平明显高于健康对照组人群、轻度组和中度组患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。而轻度组、中度组患者和健康对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。慢性乙型肝炎中度组和重度组患者外周血PBMCs中GATA3 m RNA表达水平明显高于健康对照组人群和轻度组患者,差异均具有统计学意义(P<0.05);而轻度组和健康对照、中度组患者和重度组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。慢性乙型肝炎轻度、中度组和重度组患者T-bet/GATA3比值明显高于健康对照组人群,差异均具有统计学意义(P<0.05);但3组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。ROG表达水平与GATA3和T-bet/GATA3比值均无相关性(P>0.05)。结论 ROG、GATA3和T-bet在慢性乙型肝炎患者外周血PBMCs中表达水平上调,并参与疾病的发生和疾病进展。ROG在纠正和维持Th1/Th2的新平衡状态过程中起重要作用。

T-bet佐剂对Ag85B抗结核DNA疫苗的免疫调节

目的:构建以Th1转录因子T-bet为基因佐剂的Ag85B新型DNA疫苗,并研究其免疫调控作用。方法:RT-PCR法扩增出Ag85B基因和T-bet基因,克隆入pcDNA3.1质粒构建T-bet和Ag85B真核表达质粒,脂质体法转染重组质粒至RAW264.7细胞系,Western blot法检测质粒蛋白表达情况。3次肌肉注射免疫BALB/c小鼠,末次免疫2周后,ELISA法检测血清中抗Ag85B抗体滴度。同时将脾脏淋巴细胞悬液于Ag85B刺激下培养,ELISA法检测培养液中细胞因子分泌情况。结果:质粒蛋白成功表达,并且质粒剂量与质粒蛋白表达水平呈正相关。此外,T-bet/Ag85B不仅诱导IgG2a滴度显著增高伴随IgG1显著降低,而且还刺激IL-2/IFN-γ(Th1类)分泌增加伴随IL-4/IL-10(Th2类)减少。结论:T-bet增强抗Ag85B特异性IgG2a抗体反应,并诱导显著的Th1细胞优势免疫。

腺病毒介导的T-bet基因转染诱导Th1型淋巴细胞分化

目的:构建含有T细胞转录因子T-bet(T-boxexpressedinTcells)的重组腺病毒Ad.T-bet,并诱导Th1型淋巴细胞分化。方法:采用RT-PCR的方法从健康人外周血淋巴细胞的总RNA中克隆T-bet基因,亚克隆入腺病毒穿梭载体成为pAdtrack-CMV.T-bet,与腺病毒基因组载体pAdeasy-1同源重组为pAd.T-bet,经PacI酶切后转染293细胞,用Westernblotting和RT-PCR的方法鉴定Ad.T-bet;联合腺病毒和脂质体以感染倍数(m.o.i)5000感染活化的淋巴细胞,用ELISA法检测培养液中IFN-γ含量。结果:采用RT-PCR方法从健康人外周血淋巴细胞中扩增出T-bet基因,构建出重组腺病毒Ad.T-bet,Westernblotting和RT-PCR均检测出细胞内T-bet蛋白表达;联合Ad.T-bet和脂质体感染淋巴细胞诱导Th1型细胞因子IFN-γ持续高表达。结论:重组腺病毒Ad.T-bet有效诱导Th1型细胞分化,有望成为改变肿瘤患者免疫抑制状态的有效方法。

小鼠T-bet基因真核表达载体的构建

目的构建小鼠T—bet基因重组真核表达载体pcDNA3一T—bet,为T—bet基因治疗研究提供有效的生物表达系统。方法采用内切酶切从质粒T—bet/GFP—RV中获得约1.7 kb的小鼠T—betcDNA片段,以单酶切非定向克隆方式与真核表达质粒pcDNA3连接,构建真核表达载体pcDNA3-T-bet。结果经PCR筛选阳性重组子,双酶切鉴定T—bet基因重组方向,并测序鉴定无错配及插入移位等DNA顺序改变。结论本实验成功构建了小鼠T—bet基因真核表达载体pcDNA3-T-bet。

T-bet基因转染对哮喘小鼠气道炎症的影响

目的:观察气道内T-bet基因转染对哮喘小鼠气道炎症的影响。方法:C57BL/6小鼠40只,随机分为4组,每组10只,分别为正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、空质粒干预组(C组)和T-bet质粒干预组(D组)。卵白蛋白(OVA)抗原溶液腹腔注射致敏,滴鼻造模。正常对照组用生理盐水代替OVA,空质粒干预组和T-bet质粒干预组OVA激发48h前,分别经鼻滴入50μg空质粒和重组T-bet质粒。观察各组实验小鼠的肺组织炎症以及BALF中各类炎症细胞以及IL-4、IFN-γ水平的变化。结果:Western blotting检测发现,小鼠气道转染pcDNA3-T-bet质粒48h后肺组织T-bet蛋白表达显著增加。pcDNA3-T-bet质粒转染能较好抑制给药后48hOVA激发的哮喘小鼠气道炎症(包括炎症细胞浸润,上皮细胞损伤、黏液分泌、血管壁水肿及管腔缩窄);下调小鼠BALF中Th2因子IL-4并上调Th1因子IFN-γ水平。结论:气道内转染T-bet质粒能有效改善哮喘小鼠的气道炎症。

转录因子T-bet、GATA-3、FoxP3及CD4~＋CD25~＋调节性T细胞在儿童过敏性紫癜发病机制中的作用

本研究旨在探讨转录因子T-bet、GATA-3和CD4+CD25+调节性T细胞及其转录因子FoxP3在儿童过敏性紫癜(HSP)发病机制中的作用。2009年2月-2010年2月在本院收治的46例急性期HSP患儿(HSP组)及30例健康对照儿童(对照组)纳入研究。采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法检测外周血单个核细胞T-bet、GATA-3及FoxP3 mRNA的表达。运用流式细胞术检测外周血中T淋巴细胞亚群CD4+CD25+的表达。结果表明,HSP组患儿GATA-3 mRNA相对表达水平(964.30±655.18)显著高于对照组儿童GATA-3 mRNA相对表达水平(78.09±57.20,P<0.01)。HSP组患儿T-bet mRNA(53.98±35.79)、FoxP3 mRNA(32.17±23.04)和CD4+CD25+(5.34±2.51)相对表达水平低于对照组儿童T-bet mRNA(181.56±96.90)、FoxP3 mRNA(147.91±99.15)和CD4+CD25+(7.85±1.97)相对表达水平(P<0.01)。结论:HSP患儿急性期存在Th1特异性转录因子T-betmRNA表达下调,Th2特异性转录因子GATA-3 mRNA表达上调。HSP患儿急性期存在CD4+CD25+调节性T细胞及其特异性转录因子FoxP3 mRNA表达下调,调节性T细胞的减少及由此引发的免疫抑制效应不足可能是HSP急性期免疫失衡的重要原因之一。本研究为从调节性T细胞及其调控的分子机制角度进一步阐明儿童HSP的发病机制提供了实验依据。

基于T-bet/GATA-3表达研究化痰祛瘀法对哮喘小鼠气道炎症及免疫失衡的影响

目的:研究转录因子T-bet和GATA-3在哮喘模型小鼠疾病进展过程中的改变及其意义及其在Th1/Th2失衡中的作用,探讨化痰祛瘀法对支气管哮喘防治作用的机理。方法:通过卵蛋白致敏、激发建立支气管哮喘小鼠模型,于激发后7天和21天分批取材,用RT-PCR法检测肺组织匀浆中T-bet、GATA-3 mRNA表达。结果:激发7天后:与空白组比较:模型组T-bet明显降低,GATA-3明显升高,T-bet/GATA-3比值明显降低;两用药组T-bet及T-bet/GATA-3比值均明显降低,组间无明显差异。与模型组比较:两用药组T-bet均无明显变化,GATA-3均明显降低,T-bet/GATA-3比值均明显升高;组间无明显差异。哮喘激发21天后:与空白组比较:模型组T-bet明显降低,GATA-3明显升高,T-bet/GATA-3比值明显降低;两用药组T-bet及T-bet/GATA-3比值均明显降低。与模型组比较:地塞米松组T-bet无明显差异,GATA-3明显降低,T-bet/GATA-3比值明显升高;中药组T-bet明显升高,GATA-3明显降低,T-bet/GATA-3比值明显升高;两组间无明显差异。结论:BALB/c小鼠经OVA致敏及雾化激发后,使转录因子T-bet/GATA-3表达失衡,模型小鼠出现气道炎症及气道重建的相关表现,符合中医病机中的"痰瘀互结"。化痰祛瘀法对T-bet/GATA-3表达失衡具有双向纠偏的调节作用。对改善气道慢性炎症及气道重建方面,其疗效与地塞米松相近,但作用环节较对照组更为广泛,且随用药时间延长,有累加效应。

转录因子T-bet和GATA-3对再生障碍性贫血免疫失衡的作用

目的探讨外周血中T-bet和GATA-3基因的表达在再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)中发病机制及意义。方法选择23例AA患者为再障组,其中重型再障(severe aplastic anemia,SAA)13例,轻型再障(mediate aplastic anemia,mAA)10例,再选择22例健康体检为对照组,对纳入对象采用流式细胞术检测其外周血Th1和Th2,同时运用RT-PCR技术检测外周血单个核细胞(PBMCs)中转录因子T-bet和GATA-3 mRNA基因表达。结果与对照组相比,再障组的lg(T-bet/β-actin)和Th1(%)升高,差异有统计学意义(P<0.05、P<0.01),lg(GATA-3/β-actin)和Th2(%)降低,差异有统计学意义(P<0.05、P<0.05);其中SAA组的lg(T-bet/β-actin)、lg(GATA-3/β-actin)和Th1(%)、mAA组的lg(T-bet/β-actin)、Th1(%)相比对照组明显升高(P<0.05、P<0.01、P<0.01、P<0.05、P<0.05);SAA组的Th2(%)、mAA组的lg(GATA-3/β-actin)和Th2(%)相比对照组显著降低(P<0.05、P<0.01、P<0.05)。结论T-bet和GATA-3表达异常在AA发生、发展过程中发挥重要作用,可能机制为增强Th1细胞功能,抑制Th2细胞功能,导致患者免疫功能异常,最终引起再障发生。

CpG-ODN对慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞T-bet表达的影响

目的探讨T-bet在乙型肝炎病毒(HBV)感染中的作用以及CpG-ODN对其表达的调节作用。方法应用半定量RT-PCR,对22例慢性乙型肝炎活动期患者、10例HBsAg阳性无症状携带者和12例正常对照外周血单个核细胞(PBMC)T-bet的表达进行检测;同时用CpG-ODN体外刺激以上3组实验对象的PBMC,RT-PCR观察T-bet的表达情况。结果无症状携带者T-bet表达最低,慢性乙型肝炎活动期患者T-bet表达最高;经CpG-ODN刺激后,无症状携带者和正常对照的T-bet表达明显上调。结论T-bet在HBV感染的不同状态中具有差异表达,提示T-bet可能参与了机体抗HBV的免疫应答,具体的机制有待进一步研究。CpG-ODN作为一种新型的免疫调节剂,可在一定程度上恢复HBV感染者特别是无症状携带者的Th1型细胞免疫应答。

老年非小细胞肺癌患者Th1/Th2漂移状态与T-bet/GATA3基因表达的关系

目的探讨老年非小细胞肺癌患者Th1/Th2漂移状态及其与T-bet、GATA3基因表达的关系。方法选取老年非小细胞肺癌患者及健康受试者各120例,双抗夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测各组血浆中Th1类细胞因子γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)和Th2类细胞因子IL-4、IL-10的浓度;梯度离心法分离出单个核细胞(PB-MC),采用RT-PCR方法检测其T-bet、GATA3mRNA水平。结果老年非小细胞肺癌患者Th1型细胞因子IFN-γ、IL-2水平与老年健康受试者比较明显下降[(10.28±0.88)pg/mL vs(16.94±1.05)pg/mL;(9.06±0.85)pg/mL vs(13.96±0.87)pg/mL)],差异均具有统计学意义;老年非小细胞肺癌患者Th2型细胞因子IL-4、IL-10水平与老年健康受试者比较明显升高[(5.98±0.98)pg/mL vs(3.89±0.28)pg/mL;(47.59±2.89)pg/mL vs(40.47±1.28)pg/mL)],差异均具有统计学意义。老年非小细胞肺癌患者Th1型核转录因子T-bet mRNA的表达水平较老年健康受试者下降[(0.85±0.11)vs(1.46±0.09)];老年非小细胞肺癌患者Th2型核转录因子GATA3mRNA的表达水平较老年健康受试者明显增高[(1.51±0.12)vs(0.89±0.10)],差异均具有统计学意义。结论老年非小细胞肺癌患者存在着Th2漂移现象,该现象可能与影响Th1/Th2的极化状态的关键因子T-bet和GATA3的表达失常有关。

川崎病患儿细胞免疫功能状况及转录因子T-bet和GATA3的调控作用

目的:研究川崎病患儿细胞免疫功能状况及转录因子T-bet和GATA3的调控作用。方法:选取41例川崎病患儿为研究对象,同时选取年龄和性别相匹配的因急性上呼吸道感染发热儿童40例为对照组,分别采用三色荧光流式细胞术和半定量逆转录-聚合酶链反应检测2组患儿外周血Th1、Th2细胞数量及单个核细胞中T-bet和GATA3 mRNA水平。结果:川崎病患儿外周血Th1、Th2细胞比率及单个核细胞转录因子T-bet mRNA、GATA3 mRNA转录水平分别为(10.36±3.69)%、(6.46±2.28)%、0.51±0.16和0.38±0.13,均显著低于对照组[(25.26±5.22)%、(16.87±4.35)%、0.62±0.21和0.46±0.12,P<0.05]。Spearman相关分析显示Th1和Th2细胞比率分别与T-bet mRNA和GATA3 mRNA水平呈正相关。结论:川崎病患儿急性期T细胞并非活化而是处于抑制状态,T-bet和GATA3分别对Th1和Th2细胞增殖具有调控作用。