调节性T细胞与Th17细胞的失衡及其对大鼠肺纤维化的影响

目的研究调节性T细胞与Th17细胞的平衡关系及其对大鼠肺纤维化的影响。方法 SD大鼠10只,随机分为博来霉素(实验组)5只和生理盐水组5只(对照组),博来霉素组气管内给药复制大鼠肺纤维化动物模型(博来霉素5mg/kg),对照组气管内注射等量生理盐水。第28天处死动物,肺组织病理切片苏木精-伊红染色,免疫组织化学方法检测IL-2、IL-6、IL-17和TGF-β的表达,以IL-17的表达水平作为衡量Th17细胞功能和数量的指标,流式细胞术检测CD4+调节性T细胞和CD8+调节性T细胞的比例。结果博来霉素组肺纤维化明显;与对照组大鼠相比,Ashcroft评分差异有统计学意义。博来霉素组IL-2、IL-6、IL-17和TGF-β的表达水平明显上升,与对照组比较,差异具有统计学意义。总体样本数据行相关分析提示IL-6和IL-17表达水平具有正相关性,IL-17与TGF-β也具有正相关性。CD4+CD25+Foxp3+细胞占CD4+CD25+细胞百分比较对照组没有增高,差异无统计学意义。只有博来霉素组CD8+CD25+Foxp3+细胞占CD8+CD25+细胞百分比较对照组增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论博来霉素致肺纤维化大鼠中存在Th17细胞和调节性T细胞的数量功能的相对不平衡,这种不平衡可能导致肺纤维化病情进展。这种不平衡可能与影响Th17细胞和调节性T细胞分化的IL-2、IL-6、TGF-β等细胞因子表达水平改变有关。

阿胶对气道炎症小鼠Th17/Treg亚群失衡的逆转作用

目的探讨阿胶对烟尘所致气道炎症小鼠肺脏Th17/Treg亚群失衡的逆转作用。方法 24只C57BL/6小鼠,随机分为对照组、模型组和阿胶组。模型组、阿胶组利用香烟烟雾暴露法建立气道炎症模型,模型组小鼠每日0.2 mL PBS灌胃,阿胶组每日给予0.2 mL阿胶溶液(0.2 g/mL)灌胃,正常组常规饲养。24周后,观察各组小鼠肺组织病理情况,采用流式细胞术检测肺组织Th17细胞亚群及Treg细胞亚群比例,采用逆转录PCR法检测肺组织中IL-6、IL-17A、Foxp3 mRNA表达,采用酶联免疫吸附法检测血清IL-6、IL-17A、Foxp3水平。结果与正常组相比,模型组小鼠肺间质有大量炎性细胞浸润,肺泡破裂融合,肺组织Th17细胞、Treg细胞比例高,血清IL-17A、IL-6、Foxp3水平和肺组织IL-17A、Foxp3、IL-6 mRNA表达高(P均<0.05)。与模型组相比,阿胶组小鼠肺组织炎症情况明显改善,肺组织Th17细胞、Treg细胞比例低,血清IL-17A、IL-6、Foxp3水平和肺组织IL-17A、Foxp3、IL-6 mRNA表达低(P均<0.05)。结论烟尘能导致气道炎症小鼠肺组织Th17、Treg亚群比例升高,IL-6、IL-17A、Foxp3细胞因子表达上调,阿胶通过降低Th17、Treg亚群比例及IL-6、IL-17A、Foxp3细胞因子表达减轻气道炎症小鼠肺脏炎症。

自然杀伤T细胞与子宫内膜异位症分期的关系

目的探讨自然杀伤T细胞（NKT）在子宫内膜异位症（EMT）发病机制的作用及其与分期的关系。方法I～Ⅳ期EMT患者各15例，采用流式细胞术检测其外周血及腹腔积液内NKT含量，用ELISA法检查细胞因子IFN-γ及IL-4的含量，并选取同龄段的20例健康志愿者作为对照。结果与对照组比较，I～Ⅳ期EMT患者外周血NKT、IFN-γ及IL-4均明显降低，且外周血及腹腔积液内以上三者的含量均呈现Ⅰ〉Ⅱ〉Ⅲ〉Ⅳ的关系，两组间的含量存在统计学差异（P〈0．05）。Spearman相关性分析显示，NKT、IFN-γ，及IL-4当中任意一个因素均与I、Ⅱ、Ⅲ及Ⅳ的任意一期呈显著负相关性（r均大于0．06，P均小于0．05）。结论NKT及其细胞因子IFN—γ及1L-4在EMT发病机制当中具有重要作用，并且与EMT的分期密切相关，可能是该病的一组保护性因素。

小檗碱调节睡眠剥夺大鼠的肠道菌群结构以及Th17/Treg细胞平衡

目的研究小檗碱对睡眠剥夺大鼠肠道菌群以及辅助性T细胞17(Th17)和调解性T细胞(Treg)细胞的影响。方法将大鼠随机分为对照组、模型组、低和高剂量小檗碱组(BBR1和BBR2,100和200 mg/kg,灌胃10 d干预)。小站台水环境法建立睡眠剥夺模型。检测大鼠直肠内容物中细菌数量,流式细胞计量技术分析大鼠肠道Th17/Treg细胞比值,并检测肠道白介素17(IL-17)、RAR相关孤儿受体(ROR)C和叉头框蛋白P3(Foxp3)表达。结果模型组大鼠肠道内产气荚膜梭菌数量增加(P<0.05),而其他检测菌群数量降低(P<0.05);Th17/Treg细胞比值升高(P<0.05);IL-17和RORC表达升高(P<0.05),Foxp3表达降低(P<0.05)。小檗碱处理降低产气荚膜梭菌数量(P<0.05),增加其他检测菌群的数量(P<0.05);降低Th17/Treg细胞比值(P<0.05);下调IL-17和RORC表达(P<0.05),上调Foxp3表达(P<0.05)。结论小檗碱能够拮抗睡眠剥夺诱导的大鼠肠道菌群结构和Th17/Treg细胞失衡。

健康足月分娩母亲与新生儿T细胞亚群和NK细胞水平

目的:探讨健康足月分娩母亲、新生儿T细胞亚群、NK细胞的水平,为围产期母亲及新生儿系统保健提供基础免疫数据。方法:无菌采集健康足月分娩母亲静脉血、肝素抗凝、出生5min新生儿脐静脉及3天新生儿股静脉血、肝素抗凝。由美国RD有限公司提供试剂,采用间接免疫荧光技术和S.P法测定T细胞亚群及NK细胞的水平。结果:①健康足月分娩出生5min及3天新生儿与母亲的T细胞亚群、NK细胞水平差异均无显著性(P>0.05)。②出生3天新生儿CD4与正常参考值比较差异有显著性(P<0.02);出生5min新生儿CD3、CD4/CD8及母亲的CD3、CD4、CD4/CD8与正常参考值比较差异均有非常显著性(P<0.01)。③出生5min新生儿NKCD16、NKCD57,出生3天新生儿及母亲的NKCD16与正常参考值比较差异均有非常显著性(P<0.01)。结论:明确了深圳健康足月分娩母亲、新生儿T细胞亚群、NK细胞表达水平;为围产期的母亲、新生儿系统保健提供基础免疫数据。

Foxp3转染小鼠CD4^+CD25^-T细胞抑制NK细胞活性

目的:通过逆转录病毒载体转染Foxp3基因到小鼠CD4+CD25-T细胞,以研究体外诱导获得的调节性T细胞对NK细胞免疫活性的调节作用及其机制。方法:携带Foxp3基因的逆转录病毒转染初始CD4+CD25-T细胞,以获得持续性高表达Foxp3的CD4+T细胞模型。CD4+Foxp3+T细胞与NK细胞共培养后,用[51Cr]标记的YAC-1细胞检测NK细胞的杀伤毒性。在TGF-β阻断实验中,通过Transwell共培养实验以及向细胞共培养体系加入抗TGF-β抗体,并检测NK细胞杀伤毒性。结果:逆转录病毒转染初始CD4+CD25-T细胞,成功建立了表达Foxp3的CD4+T细胞模型,转染后1周Foxp3阳性表达的T细胞比例为38.0%。CD4+Foxp3+T细胞在与NK细胞共培养的24 h和48 h后,对NK细胞的细胞毒性杀伤效应的抑制率分别为42.9%和22.7%。在CD4+Foxp3+T细胞与NK细胞的共培养体系中加入抗TGF-β抗体后,其抑制率分别由原来的42.9%(24 h)、22.7%(48 h)变为3.2%(24 h)、2.1%(48 h)。在Transwell共培养实验中与NK细胞直接接触的Foxp3+CD4+T细胞可以诱导NK细胞免疫抑制,而没有直接接触的Foxp3+CD4+T细胞则不能抑制NK细胞的杀伤作用。结论:强制性表达Foxp3的CD4+CD25-T细胞可以在体外发挥免疫抑制作用,可以抑制NK细胞的细胞毒性杀伤作用。转染Foxp3的CD4+CD25-T细胞对NK细胞发挥作用依赖于细胞之间的直接接触,与转染后T细胞表面表达TGF-β有关。

慢性非细菌性前列腺炎CD_4^+T淋巴细胞及IL-6的表达及意义

目的检测慢性非细菌性前列腺炎(chronic abacterial prostatitis,CAP)大鼠前列腺组织中CD4+T淋巴细胞及白介素-6(IL-6)的表达,探讨CAP的免疫学发病机制。方法将24只老龄SD大鼠随机分为正常对照组和CAP模型组,每组12只。观察大鼠前列腺组织的病理形态学变化;免疫组化法检测CD4+T淋巴细胞及IL-6在各组大鼠前列腺组织中的表达。结果CAP模型组大鼠前列腺的病理形态学改变基本符合CAP的特点。CAP模型组CD4及IL-6的表达显著高于正常对照组(P<0.01)。结论CD4+T淋巴细胞介导的自身免疫反应可能是CAP发病的重要机制。

重组FoxP3腺相关病毒转染小鼠CD4^+CD25^-T细胞的实验研究

目的:研究FoxP3(ForkheadBoxP3)基因在小鼠T细胞的表达情况,以及重组FoxP3腺相关病毒(adenoassociatedvirus,AAV)对小鼠CD4+CD25-T细胞功能的影响。方法:采用实时定量PCR检测CD4+CD25+T细胞和CD4+CD25-T细胞FoxP3mRNA表达情况,利用基因重组技术构建FoxP3腺相关病毒载体,体外转染CD4+CD25-T细胞,通过细胞增殖试验观察转染CD4+CD25-T细胞功能变化。结果:CD4+CD25+T细胞较CD4+CD25-T相比高水平表达FoxP3基因mRNA,重组FoxP3腺相关病毒转染后的CD4+CD25-T细胞对CD3单抗的刺激呈低反应性,并且能抑制新鲜分离CD4+CD25-T细胞的增殖。结论:FoxP3基因转染的CD4+CD25-T细胞在体外具有抑制T细胞活化增殖的功能。

雷公藤多苷对类风湿关节炎患者滤泡辅助性T细胞及IL-21的影响

目的探讨雷公藤多苷对类风湿关节炎患者滤泡辅助性T细胞（TfH）及其细胞因子白细胞介素21（IL-21）水平的影响。方法将2015年1～8月河北省沧州中西医结合医院诊治的90例类风湿关节炎患者根据随机数字表法分为观察组和对照组，各45例。观察组采用口服雷公藤多苷20mg，每日3次，双氯芬酸钠肠溶片50mg，每日3次，甲氨蝶呤10mg，每周1次；对照组给予双氯芬酸钠肠溶片50mg，每日3次，甲氨蝶呤10mg，每周1次，疗程均为12周。观察两组患者的治疗效果及TfH细胞、IL-21蛋白的变化。结果治疗后，观察组的总有效率高于对照组[93．3％（42／45）比71．O％（32／45）]，差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗后，观察组生活质量评分高于对照组[（71±13）分比（65±13）分]，差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗后，观察组压痛关节数、肿痛关节数、白细胞、血小板及红细胞沉降率、总体类风湿关节炎患者病情评价评分均低于对照组[（4．8±1．1）个比（9．3±1．7）个，（3．0±0．8）个比（6．9±1．1）个，（6．4±1．2）×109／L比（8．5±1．0）×109／L，（280±66）×109／L比（313±68）×109／L，（40±11）mm／1h比（57±11）mm／1h，（2．7±0．6）分比（3．9±0．9）分]，差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。治疗后，观察组Tfh细胞及IL-21水平低于对照组[（10±3）％比（20±6）％，（335±78）ng/L比（414±99）ng／g]，差异有统计学意义（P〈0．01）。经Pearson相关性分析，Tm细胞及IL-21水平与DAS28评分呈正相关（r=0．712，0．709，P〈0．05）。结论雷公藤多苷对类风湿关节炎治疗效果好，并能够显著改善TfH细胞及其细胞因子IL-21水平。

肝脏CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞在小鼠急、慢性肝损伤中的表达差异及意义

目的探究肝内CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(regulatory T cell,Tregs)在急、慢性肝损伤中的表达差异及意义。方法使用四氯化碳(carbon tetrachloride,CCL4)一次或多次给予C57BL/6J小鼠腹腔注射,分别制备急性(24 h)和慢性肝损伤(6周)模型,对照组小鼠腹腔注射等体积0.9%氯化钠注射液。病理切片Masson染色观察不同模型小鼠肝内病理变化情况,运用流式细胞分析法和免疫荧光检测小鼠肝内Tregs的表达。Real-time PCR检测小鼠肝内Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、白细胞介素-1β(interloukin-1β,IL-1β)、IL-6、IL-10、转化生长因子-β(transforming growth factor,TGF-β)的表达。结果 Masson染色显示急性肝损伤小鼠的肝细胞大片坏死伴出血,慢性肝损伤小鼠肝脏假小叶形成,同时Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原表达增加。流式细胞分析显示Tregs在急性和慢性组小鼠肝脏表达都有升高,但在慢性组升高的幅度比急性组大(P<0.01),与免疫荧光结果一致。肝内抑制性细胞因子IL-10、TGF-β在慢性肝损伤组升高显著(P<0.05),而促炎因子IL-1β、IL-6在急性肝损伤组升高显著(P<0.01)。结论肝内Tregs在急、慢性肝损伤中表达不同。在急性肝损伤中,尤其是急性肝损伤恢复期,Tregs部分增加,抑制炎性反应扩散,促进机体恢复;在慢性肝损伤中,Tregs表达显著增加,形成免疫耐受,抑制免疫清除,肝纤维化形成。

HIV-1感染者CD4^+CD127^-T细胞减少与PD-1高表达相关

目的通过检测HIV-1感染者CD4+CD127^-T细胞上PD-1、HLA-DR和CD38的表达水平,探究HIV-1感染者CD4+CD127^-T细胞的免疫状态。方法募集慢性HIV-1感染者70例,根据CD4^+T细胞计数绝对值,将慢性HIV-1感染者分为高CD4+计数组(CD4^+T细胞≥500 cells/μl)、中CD4+计数组(350 cells/μl≤CD4^+T细胞<500 cells/μl)和低CD4+计数组(CD4^+T细胞<350 cells/μl);同时设立健康对照组12例。利用流式细胞术检测HIV-1感染者和健康对照者外周血中CD4+CD127^-T细胞PD-1、CD38和HLA-DR的表达情况,并分析不同指标表达的相关性。结果在HIV-1慢性感染期间,外周血CD4+CD127^-T细胞百分比与CD4计数绝对值负相关(P<0.05);CD4+计数<350 cells/μl的HIV-1感染者CD4+CD127^-T细胞上HLA-DR与CD38表达水平显著升高,并且与CD4计数存在负相关关系(P<0.05)。HIV-1感染者PBMCs中CD4+CD127^-T细胞上高表达PD-1,并且PD-1与CD4计数存在负相关关系,与HLA-DR的表达存在正相关关系。结论在慢性HIV-1感染过程中,CD4^+T细胞数量的减少可能与CD4+CD127^-T细胞PD-1的表达相关。

一种高效扩增人T细胞受体α链可变区基因方法的建立

目的建立一种高效扩增人T细胞受体(TCR)α链可变区(Vα)基因的方法。方法根据TCR Vα32个亚家族的基因序列特点,设计扩增Vα基因的上游内、外引物各42条,并将上游内、外引物各分为5组简并引物。在恒定区(C区)设计下游内、外引物,测序引物以及扩增Cα基因的上游引物各1条。提取细胞RNA,用PolyA介导反转录后,采用巢式PCR扩增正常人外周血单个核细胞(PBMC)中CD8 T细胞TCR Vα的32个亚家族基因,以Jurkat T淋巴瘤细胞作为对照。用T-easy载体克隆RT-PCR产物,对克隆基因进行测序分析。结果从正常人CD8 T细胞中扩增到了所有TCR Vα亚家族基因,以10个Jurkat细胞所提取的RNA作为模板即可获得成功扩增。TCR Vα同一亚家族基因的同源性均大于75%,序列差异主要在CDR3高变区。结论建立了一种高效灵敏的TCR Vα编码基因扩增方法,为抗原特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)的TCR克隆和功能研究打下了良好基础。

胶原诱导性关节炎小鼠CD4^+ T细胞亚群表达酪氨酸羟化酶的作用

目的:本研究应用胶原诱导性关节炎(CIA)的动物模型,通过研究CD4+T细胞亚群表达酪氨酸羟化酶(TH)的变化与作用,探讨CD4+T细胞亚群来源的儿茶酚胺与CIA的炎症反应之间的关系。方法:雄性DBA/1小鼠36只随机分为对照组、35天模型组和55天模型组(n=12)。用II型胶原(CII)乳剂免疫DBA/1小鼠诱导CIA,在初次免疫后第35天和55天进行关节临床评分并检测血清中抗CII IgG抗体水平的变化。用Western blot法检测肠系膜淋巴结中Th1、Th17、Th2和Treg细胞的特异性转录因子及其细胞因子以及TH表达的变化。用流式细胞术检测肠系膜淋巴结中表达TH的CD4+T细胞亚群数目的变化。结果:CIA小鼠在发病早期(初次免疫后第35天)和发病晚期(初次免疫后第55天)临床评分和血清中抗CII IgG抗体水平显著升高。CIA小鼠肠系膜淋巴结中Th1和Th17细胞的特异性转录因子和细胞因子表达增加而Th2和Treg细胞的细胞因子表达减少。CIA小鼠肠系膜淋巴结中TH的表达增加,且CD4+T细胞中TH+的细胞数目增多,这主要是来自CD4+T细胞亚群中Th1和Th17细胞的作用。结论:CIA小鼠肠系膜淋巴结中存在CD4+T细胞亚群来源的儿茶酚胺的增加,可能在CIA的发展过程中具有一定的抗炎作用。

外源性LTB4对CIA小鼠Treg/Th17脾细胞分化的作用

目的探讨外源性白三烯B4(LTB4)对胶原诱导型关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)小鼠脾细胞调节性T细胞(Treg)和Th17细胞分化的调节,进一步阐明LTB4在类风湿关节炎(RA)发病中的作用机制。方法建立CIA小鼠模型,取造模d28的脾细胞,体外实验分析外源性LTB4对Treg和Th17细胞分化的影响。应用流式细胞术检测CD4+CD25+Foxp3+细胞的数量,荧光定量PCR技术检测调控Treg和Th17细胞分化的特异性转录因子Foxp3和RORγt的mRNA的表达,酶联免疫吸附(ELISA)方法检测培养细胞上清IL-17的含量。结果成功建立CIA小鼠模型;造模d28分离小鼠脾细胞,体外培养加入鸡Ⅱ型胶原(CⅡ)共同孵育,随着LTB4浓度增加(0.01、0.1、1μmol·L-1),CD4+CD25+Foxp3+细胞数量相应减少,Foxp3 mRNA的表达相应降低;相反,IL-17的含量相应增加,RORγt mRNA的表达相应升高。结论LTB4抑制CIA模型脾细胞Treg细胞的分化,促进Th17细胞的分化,提示LTB4在CIA发病过程中具有一定的促炎活性。

呼吸道变应性炎症相关Th细胞因子的研究进展

呼吸道变应性炎症是呼吸系统疾病常见病理学改变,发生机制复杂,多种细胞因子参与其调控,T淋巴细胞相关因子一直是研究的焦点。本文综述了以干扰素-γ(IFN-γ)、白介素(IL-12)、白介素-2(IL-2)为代表的Th1细胞,白介素-4(IL-4)、白介素-5(IL-5)、白介素-9(IL-9)、白介素-13(IL-13)为代表的Th2细胞,以及白介素(IL-17)为代表的Th17细胞与呼吸道变应性炎症的关系,希望有助于进一步寻找研究呼吸道炎症发病机制的切入点,探索新的治疗靶区,为呼吸道变应性炎症防治提供更广阔的思路和前景。

辅助性T细胞9相关细胞因子在类风湿性关节炎患者血清中的表达

目的探讨辅助性T细胞(Th)9相关细胞因子在类风湿性关节炎(RA)中表达的改变及可能机制。方法采集15例健康人(健康对照组)和15例RA患者外周血,以酶联免疫吸附法测定血清白细胞介素(IL)-9、IL-4、转化生长因子-β(TGF-β)和干扰素-γ(IFN-γ)水平,分析这些因子在Th9分化中的作用。结果 RA患者血清IL-9水平与健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);RA患者血清TGF-β水平较健康对照组显著减低,差异有统计学意义(P<0.01);RA患者血清IL-4水平较健康对照组有所降低,但差异无统计学意义(P>0.05);IFN-γ水平在5例RA患者外周血中可以检出,其余低于可检出浓度,健康对照组均低于可检出浓度。结论 RA患者外周血Th9细胞的促分化因子降低,抑分化因子升高,导致Th9细胞缺乏分化的微环境,由此推测循环血Th9细胞不参与RA的发病环节。

人骨髓间充质干细胞对再生障碍性贫血患者T细胞活化的影响

目的探讨人骨髓间充质千细胞在体外对再生障碍性贫血患者T细胞活化的影响。方法从人骨髓分离培养间充质干细胞，用尼龙棉柱分离T淋巴细胞，分别以不同数量间充质干细胞加入到植物血凝素刺激的再生障碍性贫血患者T淋巴细胞活化体系中，通过流式细胞仪获取数据，计算CD3^＋CD25^＋和CD3^＋CD38^＋T细胞的表达率。结果当间充质干细胞为1×10^4／孔时，与单独培养的再生障碍性贫血患者T淋巴细胞（对照组）相比，间充质干细胞对再生障碍性贫血患者T淋巴细胞CD25及CD38的表达呈明显抑制作用，差异有统计学意义（P〈0．01）。当间充质干细胞为1×10^3／孔时，与对照组相比无统计学意义。结论间充质干细胞在体外抑制再生障碍性贫血患者T细胞的活化，且这种抑制作用具有数量依赖性。

结核分枝杆菌纯蛋白衍生物(PPD)对CD4^+ CD154^+ T细胞的影响

目的通过研究结核分枝杆菌纯蛋白衍生物(PPD)对CD4+ CD154+ T细胞亚群的影响,探讨结核分枝杆菌分泌蛋白的致病性。方法 PPD或/和BCG刺激PBMCs后,用流式细胞术检测活动性肺结核的CD4+ CD154+ T细胞和CD4+IFN-γ+T细胞的比例变化。结果①PPD刺激显著下调CD4+ CD154+ T细胞比例,能够抑制BCG刺激产生的CD4+ CD154+ T细胞的增殖;②PPD刺激CD4+ IFN-γ+ T细胞的效果显著低于BCG。结论 PPD内存在能显著抑制机体保护性免疫的分泌蛋白,可能是结核杆菌进入人体后抑制机体免疫力的重要因素之一。

抗IL-2受体γ链抗体抑制T细胞表达survivin的研究

目的 探讨体外封闭IL-27链抑制T细胞表达survivin的机制。方法 分离Balb／C、C57BL／6小鼠脾细胞进行双向混合淋巴细胞培养（MLR）及conA刺激试验。通过免疫细胞化学染色方法检测survivin表达及其规律。不同天数内加入抗γ公共链抗体，流式细胞术检测细胞凋亡（PEcy5-CD3，FTTE—Annexin-V）、细胞周期（PI）及CD25、survivin表达。结果 同种抗原及ConA刺激后脾细胞可检测到survivin、CD25表达。活化淋巴细胞表达survivin，加抗γ公共链抗体后，不能检测到survivin的表达，而CD3^＋ Annexin-V^＋细胞数增加，M期细胞数下降，凋亡细胞（前G1期）增加；但在MLR后第1～2天，抗γ公共链抗体加入并不能使凋亡细胞增加。结论 抗IL-2γ链抗体可诱导活化的T细胞凋亡，间接抑制活化的T细胞的survivin表达。

全反式维甲酸对川崎病患儿外周血Th17/Treg细胞平衡的影响研究

目的探讨全反式维甲酸(ATRA)对川崎病患儿外周血Th17/Treg细胞平衡的影响。方法研究纳入10名川崎病患儿为病例组,选择10名健康儿童作为对照组,采取外周静脉血后,无菌分离、制备外周血单个核细胞(PBMC),给予不同浓度ATRA诱导培养PBMC72h后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液的细胞因子IL-10、IL-17A、TGF-β以及IL-6水平,实时PCR检测RORγt mRNA和FOXP3 mRNA表达水平,流式细胞术检测Th17/Treg占外周CD4+T细胞百分比。结果未加ATRA作用下,病例组Th17细胞比例,转录因子RORγt的mRNA表达水平以及相关细胞因子IL-10、IL-17A均高于对照组(P均<0.01),而Treg细胞比例,FOXP3mRNA表达水平以及相关细胞因子TGF-β、IL-6低于对照组(P均<0.01)。给予不同浓度ATRA作用后,病例组以及对照组Th17比例、IL-10、IL-17A、RORγt的mRNA均有所下降,而Treg细胞比例、FOXP3mRNA表达水平、TGF-β、IL-6均有所上升(P均<0.01)。结论 ATRA在体外可促进川崎病患儿外周血Treg分化,同时抑制Th17分化,改变川崎病患儿外周血Th17/Treg失衡状态,该研究为阐明川崎病的免疫学发病机制及探索新疗法提供实验依据以及思路。