外周血Th17及CD4^+CD25^+FoxP3^+调节性T细胞失衡与不明原因反复自然流产的相关性研究

目的观察不明原因反复自然流产(URSA)孕妇外周血Th17与CD4+CD25+FoxP3+调节性T细胞比例的变化,探讨Th17/T细胞比例失衡在URSA孕妇发病机制中的作用。方法选择36例URSA孕妇为实验组,健康早孕妇女40例为对照组,应用流式细胞仪检测Th17与CD4+CD25+FoxP3+T细胞的比例,应用ELISA法检测IL-6、TGFβ-和IL-17的水平。结果 URSA孕妇外周血中,CD3+CD8-IL-17+T细胞占CD3+T淋巴细胞的百分比高于对照组,P<0.05;CD4+CD25+FoxP3+T细胞占CD4+T淋巴细胞的百分比明显低于对照组,P<0.05。相关细胞因子测定结果显示,IL-6、IL-17水平在URSA孕妇血清中均明显升高,TGF-β水平在2组间比较,差异无统计学意义。结论外周血Th17与CD4+CD25+FoxP3+调节性T细胞的比例及相关细胞因子数量的异常可能下调母胎免疫耐受功能,参与URSA的发生。

复发性生殖器疱疹患者外周血IL-12与Th1/Th2细胞因子的检测

目的检测复发性生殖器疱疹(RGH)患者不同病期外周血CD4+T细胞内IL-12,IFN-,γIL-4的水平,探讨IL-12,Th1与Th2亚群在疾病中的可能作用。方法应用流式细胞仪对20例发作期、15例恢复期RGH患者和15名健康人外周血CD4+T细胞IL-12,IFN-γ和IL-4进行检测。结果发作期患者外周血IFN-γ+-CD4+T细胞百分率显著低于正常对照组(P<0.05),IL-4+-CD4+T细胞百分率明显高于正常对照组(P<0.01),Th1/Th2比值显著低于正常对照组(P<0.01),同时IL-12+-CD4+T细胞百分率显著降低(P<0.01)。恢复期患者外周血IL-12+-CD4+T细胞百分率仍显著低于正常(P<0.05)。结论RGH患者存在Th1/Th2比例失衡和IL-12水平低下,而后者可能是导致Th1/Th2比例失衡和病情反复发作的重要原因。

参芪扶正注射液对急性髓系白血病患者调节性T细胞作用的体外研究

目的研究参芪扶正注射液对完全缓解期急性髓系白血病患者调节性T细胞的影响,探讨其调节免疫功能的机制。方法免疫磁珠法分离18例急性白血病患者的CD4+CD25+T细胞,并在IL-2作用下与不同浓度参芪扶正注射液共同培养,倒置显微镜下计数细胞,AnnexinⅤ法检测其凋亡率,酶联免疫吸附法检测其分泌IL-10的水平,逆转录聚合酶链式反应法检测参芪扶正注射液对CD4+CD25+T细胞表达FOXP3的影响。结果参芪扶正注射液对急性白血病患者CD4+CD25+T细胞的生长和凋亡率无明显影响。加入参芪扶正注射液后CD4+CD25+T细胞分泌IL-10明显减少,表达FOXP3的水平亦减少,且具有剂量依赖关系。结论参芪扶正注射液能作用于化疗后完全缓解白血病患者的调节性T细胞,通过减少其分泌IL-10及表达FOXP3的水平,从而抑制调节性T细胞的功能,减弱它对机体免疫的抑制作用,增强患者的免疫功能。

HIV/AIDS患者与HBV、HCV共感染对外周血病毒载量及T淋巴细胞亚群表达影响的相关性分析

目的:分析HIV/AIDS患者与HBV、HCV共感染对外周血病毒载量及T淋巴细胞亚群表达水平影响的相关性。方法:采用流式细胞术及PCR法对115例HIV单独感染者、HIV/HBV、HIV/HCV及HIV/HBV/HCV合并感染者外周血的CD4+T细胞、CD8+T细胞表达水平、CD4+T/CD8+T细胞比值、HIV RNA、HBV DNA及HCV RNA病毒载量进行比较分析。结果:HIV与HBV、HCV共感染者的肝功能异常、肝衰竭及死亡发生率均随着CD4+T细胞表达水平下降而增加,其三组间比较差异有统计学意义(P<0.05);在HIV组、HIV/HBV组、HIV/HCV组、HIV/HBV/HCV 4组间CD4+T细胞计数与CD8+T细胞计数两组间比较差异有统计学意义(P<0.05),HIV单独感染者的CD8+T细胞数与不同类型的HIV/HBV、HIV/HCV、HIV/HBV/HCV共感染组间比较,除HIV/HBV共感染组与HIV/HCV共感染组比较差异无统计学意义(P>0.05),其余每二组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);HIV组、HIV/HBV组、HIV/HCV组、HIV/HBV/HCV共感染组的CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞与各自组的HIV RNA载量比较呈负相关系(P<0.05)。结论:HIV合并HBV、HCV感染会影响外周血T淋巴细胞表达水平及生物学功能,降低对病毒的清除作用,促进HIV-RNA复制,加速HIV/AIDS的免疫损伤,从而加速疾病进程。

杂色曲霉素对小鼠胸腺和脾脏转录因子Foxp3^+调节性T淋巴细胞的影响

目的探讨杂色曲霉素(ST)对机体免疫调节功能的影响。方法BALB/c小鼠随机分为正常对照组、溶剂对照组、ST3,30,300和3000μg·kg-1组。小鼠ip给药24h后,处死取胸腺和脾脏,采用流式细胞术测定胸腺和脾脏细胞中CD4+和CD8+T淋巴细胞及转录因子Foxp3阳性(Foxp3+)调节性T淋巴细胞的百分率,免疫组织化学法检测胸腺和脾脏组织中Foxp3+调节性T淋巴细胞数量,Western蛋白印迹法和RT-PCR分别测定胸腺和脾脏组织中Foxp3蛋白和mRNA的表达。结果溶剂对照组与正常对照组比较,小鼠胸腺和脾脏CD4+,CD8+和Foxp3+T淋巴细胞百分率均无明显差异。与溶剂对照组比较,ST3μg·kg-1组胸腺CD8+T淋巴细胞百分率降低,ST3和30μg·kg-1组脾脏CD4+和CD8+T淋巴细胞百分率明显升高,ST300和3000μg·kg-1组胸腺和脾脏CD4+和CD8+T淋巴细胞百分率无明显变化。在ST3～3000μg·kg-1内,胸腺和脾脏细胞中Foxp3+调节性T淋巴细胞百分率、胸腺和脾脏组织内Foxp3+调节性T淋巴细胞数量、Foxp3蛋白和mRNA表达均随ST浓度的增高而增加。结论ST可诱导小鼠淋巴器官内Foxp3+调节性T淋巴细胞数量增加,从而影响机体免疫耐受功能。

藏蒲公英多糖纳米乳剂对小鼠外周血T淋巴细胞亚群CD4^+、CD8^+的影响

研究藏蒲公英多糖对小鼠免疫功能的调节作用。采用流式细胞术检测健康小鼠在灌胃0.1ml质量分数0.85%生理盐水、0.1ml质量分数1%藏蒲公英多糖水溶液和0.1ml质量分数1%藏蒲公英多糖纳米乳剂情况下,外周血T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+数量的动态变化。结果发现,藏蒲公英多糖和藏蒲公英多糖纳米乳剂均能够显著提高小鼠外周血T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+水平,降低T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+比值,尤以藏蒲公英多糖纳米乳剂效果最为显著。

特发性血小板减少性紫瘢患者外周血淋巴细胞亚群和调节性T细胞的变化及临床意义

目的研究特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者外周血淋巴细胞亚群、调节性T细胞(Treg细胞)水平变化及临床意义。方法采用流式细胞仪对40例ITP患者及40例正常人外周血淋巴细胞亚群及调节性T细胞水平进行检测。结果初诊ITP组与正常对照组比较,CD3+T淋巴细胞百分比、CD4+T淋巴细胞百分比、CD4+/CD8+比值及CD16+/56+NK细胞百分比均显著降低(P<0.01),CD8+T淋巴细胞百分比略升高(P>0.05),CD19+B淋巴细胞百分比显著升高(P<0.01)。ITP患者外周血中CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞的百分比高于正常对照组(P<0.05),CD4+CD25highT细胞比例略高于对照组(P>0.05),CD4+CD25+Foxp3+T细胞占CD4+T细胞的百分比显著低于正常对照组(P<0.05)。结论 ITP患者细胞免疫功能明显异常,CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞减少可能与ITP免疫发病机制有关。淋巴细胞亚群及调节性T细胞水平检测在评价ITP疗效及判断预后方面具有一定的临床价值。

一种高效扩增人T细胞受体α链可变区基因方法的建立

目的建立一种高效扩增人T细胞受体(TCR)α链可变区(Vα)基因的方法。方法根据TCR Vα32个亚家族的基因序列特点,设计扩增Vα基因的上游内、外引物各42条,并将上游内、外引物各分为5组简并引物。在恒定区(C区)设计下游内、外引物,测序引物以及扩增Cα基因的上游引物各1条。提取细胞RNA,用PolyA介导反转录后,采用巢式PCR扩增正常人外周血单个核细胞(PBMC)中CD8 T细胞TCR Vα的32个亚家族基因,以Jurkat T淋巴瘤细胞作为对照。用T-easy载体克隆RT-PCR产物,对克隆基因进行测序分析。结果从正常人CD8 T细胞中扩增到了所有TCR Vα亚家族基因,以10个Jurkat细胞所提取的RNA作为模板即可获得成功扩增。TCR Vα同一亚家族基因的同源性均大于75%,序列差异主要在CDR3高变区。结论建立了一种高效灵敏的TCR Vα编码基因扩增方法,为抗原特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)的TCR克隆和功能研究打下了良好基础。

外周血T淋巴细胞免疫功能与医院感染的关系

目的探讨外周血T淋巴细胞免疫功能与医院感染发生之间的关系。方法采用流式细胞术对外周血T淋巴细胞进行亚群分析,采用微生物培养鉴定法对医院感染进行监测,回顾性研究了医院感染患者入院初期外周血T淋巴细胞亚群及T4/T8淋巴细胞比值的变化。结果医院感染组病例外周血成熟T淋巴细胞、T4淋巴细胞、T8淋巴细胞的百分率及T4/T8淋巴细胞比值依次为(45.99±12.99)%(、18.80±5.54)%、(19.98±10.62)%和(1.31±1.14)%,其成熟T淋巴细胞、T4淋巴细胞、T8淋巴细胞的百分含量明显低于健康对照组(P<0.01),T4/T8淋巴细胞比值无明显变化(P>0.05)。进一步分组统计显示,包括T4/T8正常亚组、T4/T8倒置亚组和T4/T8升高亚组的各医院感染组,均存在不同程度的T淋巴细胞分布异常和T4/T8比值异常。结论入院初期患者外周血T淋巴细胞免疫功能低下是发生医院感染的重要原因,该结论可为医院感染的预防提供新的思路。

ROCK对系统性红斑狼疮患者外周血T细胞黏附和迁移的调控

目的:研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血T细胞中Rho激酶(ROCK)活化情况,并探讨其对T细胞黏附和迁移的影响。方法:收集SLE患者33例,正常健康人12例和类风湿关节炎患者9例作为对照组。外周血T细胞分离采用RosettSep T细胞提取试剂盒提取,ROCK活性用磷酸化肌球蛋白磷酸酶靶亚基1(MYPT1)蛋白表达来表示,磷酸化MYPT1蛋白检测采用免疫印迹法,T细胞迁移采用Transwell小室测定。结果:新鲜分离的SLE患者外周血T细胞ROCK活性均显著高于正常对照组和类风湿关节炎组(均P<0.05)。SLE患者T细胞体外黏附和迁移能力显著高于正常对照组;ROCK特异性抑制剂Y27632显著抑制SLE患者T细胞黏附和迁移。结论:SLE患者存在T细胞ROCK活化异常;ROCK可能参与调控SLE T细胞的黏附和迁移;抑制T细胞异常的ROCK活性可能有助于SLE的治疗。

小儿急性白血病患者外周血T淋巴细胞亚群的研究

本文用单克隆抗体SACI-Ig花环法测定了小儿急性白血病及再生障碍性贫血患者外周血T淋巴细胞亚群的变化。结果显示,在急性淋巴细胞性白血病及再生障碍性贫血患儿OKT8^+细胞均明显高于正常,OKT4^+/OKT8^+比值显著降低,但在急性粒细胞性白血病患儿淋巴细胞亚群变化不明显。这提示,抑制性T细胞(OKT8^+)的增多可能与小儿急性淋巴细胞性白血病及再生障碍性贫血的发生或发展有关。

慢性乙型病毒性肝炎患者外周血T淋巴细胞CD27和CD45RA表达的研究

目的分析慢性乙型病毒性肝炎患者外周血T淋巴细胞CD27和CD45RA的表达。方法采集分离健康人和慢性乙型病毒性肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC),利用多种荧光标记抗体标记细胞表面分子,再用流式细胞仪检测CD8+T淋巴细胞表面CD27和CD45RA表达情况。结果31例慢性乙型病毒性肝炎患者CD8+CD45RA+CD27+T细胞占CD8+T细胞(29.03±13.18)%,低于28例健康对照组的(60.85±14.36)%,P<0.01。而CD8+CD45RA-CD27+T细胞占CD8+T细胞(30.31±24.11)%,显著高于健康对照组的(10.32±5.24)%,P<0.05。慢性乙型病毒性肝炎患者CD4+CD45RA+CD27+T细胞21.12±9.64%低于健康对照组的(60.89±17.93)%,P<0.01,而CD4+CD45RA-CD27+T细胞(54.28±18.75)%显著高于健康对照组的(27.16±9.24)%,P<0.01。结论健康人外周血CD8+和CD4+T淋巴细胞均以CD45RA+CD27+初始细胞表型为主,而慢性乙型病毒性肝炎患者外周血初始细胞减少,CD45RA-CD27+表型的T淋巴细胞明显增加。

急性特发性血小板减少性紫癜患儿外周血血小板抗体、调节性T淋巴细胞水平的检测及临床意义

目的检测急性特发性血小板减少性紫癜(ITP)患儿治疗前后外周血血小板相关抗体(PAIgG)、CD4+、CD25+、Foxp3+调节性T淋巴细胞(Tr细胞)的变化,探讨Tr细胞与PAIgG之间的相关性,分析Tr细胞及PAIgG在急性ITP患儿发病机制中的相互作用。方法用流式细胞仪检测外周血PAIgG和Tr细胞的数量,血细胞分析仪计数血小板(PLT)含量。结果急性ITP患儿治疗前外周血PLT数量、Tr细胞均低于健康对照组(均为P<0.05),而PAIgG含量高于健康对照组(P<0.05);随着病情痊愈或好转,血小板数量、Tr细胞含量达到正常值或接近正常值,而PAIgG含量仍然较高(均为P<0.05),PAIgG在治疗前与血小板含量呈负相关(痊愈组及好转组:r值分别为-0.81,-0.78,均为P<0.05),Tr细胞含量在治疗前与血小板含量呈正相关(r值分别为0.76、0.81,均为P<0.05),Tr细胞含量与PAIgG含量在治疗前呈负相关(r值分别为-0.64、-0.73,均为P<0.05)。结论急性ITP患儿外周血中Tr细胞数量和PAIgG含量、PLT数量均有较好的相关性,检测指标Tr细胞数量能够反映急性ITP患儿外周血中PAIgG和PLT数量的变化,Tr细胞水平的降低反映了机体的免疫功能状态降低,PAIgG及Tr细胞在急性ITP发病机制中发挥了重要作用。

E.tenella感染鸡CD_4^+、CD_8^+T细胞的动态变化研究

用免疫组化ABC法检测了柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)感染雏鸡后各免疫器官和盲肠局部的T淋巴细胞亚群CD4+淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞数的动态变化。结果表明:(1)雏鸡初次感染E.tenella后,免疫器官盲肠扁桃体、脾脏、胸腺和盲肠黏膜中的CD4+T淋巴细胞均于第2天开始增殖,第6天~8天达到峰值;二次感染后第2天有短暂的下降,第5天开始缓慢回升,第8天二次达到峰值,但第二个峰值比第一个峰值低,说明CD4+T淋巴细胞积极参与启动免疫应答和抵抗初次感染。(2)雏鸡初次感染E.tenella后,免疫器官法氏囊、盲肠扁桃体、脾脏、胸腺和盲肠黏膜中的CD8+T淋巴细胞都于第2天开始增殖,第8天达到峰值;二次感染后立即回升,第5天达到峰值,然后缓慢下降,且第二个峰值比第一个峰值高,表明CD8+T淋巴细胞是抵抗再感染的主力。

拮抗高迁移率族蛋白B1对烫伤小鼠白细胞介素-35表达及T淋巴细胞免疫功能的影响

目的观察特异性拮抗高迁移率族蛋白B1（HMGB1）对烫伤小鼠白细胞介素-35（IL-35）表达及T淋巴细胞免疫功能的影响。方法选择成年雄性BALB／e小鼠30只，按随机数字表法分为正常组、假伤组、烫伤组、Abox干预组，正常组6只，其余各组每组8只。将小鼠背部皮肤置于97℃恒温热水中6s造成约15％体表面积烫伤模型，Abox干预组小鼠烫伤后2h和12h腹腔注射HMGBl特异性拮抗剂Abo×300ug。烫伤后24h处死小鼠，取心、肝、脾、肺等组织，用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定各组织中HMGBl和IL-35含量；用实时荧光定量反转录一聚合酶链反应（qRT-PCR）分析IL-35亚基p35和EB病毒诱导基因3（EBB）的mRNA表达水平；由脾脏提取单个核细胞检测HMGBl和IL-35分泌水平，分离脾脏淋巴细胞检测效应T细胞增殖活性及IL-2、γ-干扰素（IFN-γ）、IL-4分泌水平。结果与烫伤组比较，Abox干预后，各器官HMGBl含量和脾脏单个核细胞HMGB1分泌水平显著降低[心脏（mg／g）：65．78±4．42比110．49±11．19，肝脏（mgCg）：50．90±3．72比117．77±8．10，脾脏（mg／g）：83．34±3．90比149．84±11．93，肺脏（mg／g）：125．15±8．75比236．20±17．51，脾脏单个核细胞（ug／L）：34．57±0．69比73．66±19．03]；各器官组织p35和EBl3的mRNA表达[相对定量（RQ）值]及IL-35蛋白水平均有不同程度下降[p35mRNA（r{Q值）：心脏为0．91±0．62比19．74±18．05，肝脏为0．42±0．19比14．85±8．39，脾脏为1．99±1．12比21．94±6．90，肺脏为0．50±0．21比5．15±3．46；EB13mRNA（RQ值）心脏为0．63±0．61比74．25±15．19，肝脏为0．64±0．09比56．59±19．99，脾脏为1．24±0．48比32．72±3．34，肺脏为0．30±0．06比2．41±1．43；IL-35蛋白（ug，g：心脏为142．40±19．95比241．64±12．40，肝脏为272．68±14．90比409．76±21．60。脾脏为66．94±9．60比92．28±8．82，肺脏为235．88±15．65比193．50±27．06；均P〈0．05），脾脏T淋巴细胞增殖活性增强（A值：1．26±0．26比1．03±0．05）及IL-2分泌水平也显著升高（ng／L：153．48±26．64比101．77±34．55），IFN-γ／IL-4比值显著增加（7．44±1．70比0．33±0．07），差异均有统计学意义（均P〈0．01）。结论特异性拮抗HMGB1可显著下调烧伤小鼠重要组织IL-35表达水平，有效促进脾脏T细胞增殖及Th1功能极化，从而有助于改善严重烧伤后免疫抑制状态。

CD8阳性T细胞亚群在肺癌外周血的检测及分析

目的检测肺癌患者外周血清中CD8^+T细胞亚群CD28^+及CD57^+的表达程度,探讨其临床意义。方法合肥市第二人民医院经细胞学或病理学诊断为肺癌的初次治疗患者30例,TNM分期(UICC,第7版)Ⅲ期12例,Ⅳ期18例。病理类型腺癌15例,鳞癌8例,小细胞肺癌7例。流式细胞仪分别检测肺癌患者组治疗前后及健康对照组人群的血清中CD8^+T细胞CD28^+和CD57^+的表达水平,分析该表达水平变化及与肺癌临床分期和病理学类型之间的关系。结果肺癌患者治疗前血清中CD28^+T细胞亚群比例为(12.34±3.72)%,CD57^+T细胞亚群比例为(19.53±5.26)%。而健康对照组血清中CD28^+T细胞亚群比例为(23.53±4.15)%,CD57^+T细胞亚群比例为(11.37±2.73)%,差异有统计学意义(P<0.05),该类指标与肿瘤病理类型无关,而随着不同临床分期增加,CD8^+CD57^+T细胞未见差异,而CD8^+CD28^+T细胞表达差异有统计学意义(P<0.05)。经两周期化疗后,缓解组(完全缓解+部分缓解)患者血清中CD28^+、CD57^+T细胞亚群比与健康对照组患者相比,差异无统计学意义(P>0.05),而未缓解组(稳定+进展)患者的CD28^+、CD57^+T细胞亚群比例分别为(10.62±2.74)%、(20.45±4.36)%.与健康对照组差异有统计学意义(P<0.05)。结论肺癌患者血清中CD8^+CD28^+T细胞表达较正常人群明显减低,而CD8^+CD57^+T细胞表达较正常人群明显升高,联合该两种T细胞亚群检测不仅可以了解肺癌患者免疫状况,同时可以评估肺癌患者预后,有一定临床应用价值。

新鲜和保存羊膜移植后外周血T细胞变化及免疫病理学研究

目的:对比研究新鲜羊膜和保存羊膜移植后的免疫反应,客观评价羊膜移植的免疫安全性。方法:建立BALB/c小鼠皮下埋植实验模型。按不同的埋植物分为单层新鲜羊膜组、双层新鲜羊膜组、甘油保存羊膜组、绒毛膜组(阳性对照)和单纯手术组(阴性对照);各组又随机分为5个亚组,分别对应术后1周、2周、4周、8周、12周共5个时点。大体观察小鼠的一般情况,流式细胞仪检测外周血CD3+CD25+和CD3+CD71+的表达,免疫组化法定量组织切片中CD3+、CD4+、CD8+的表达。结果:术后早期,单层新鲜羊膜组和双层新鲜羊膜组的小鼠外周血CD3+CD25+及CD3+CD71+表达,略高于甘油保存羊膜组(P<0.05),但短期内皆可自行回落。各羊膜组移植区组织CD3+、CD4+、CD8+的表达,在术后1周-12周均无显著差异(P>0.05)。各羊膜组的免疫细胞表达均以非特异性为主,显著弱于绒毛膜组(P<0.01)。结论:新鲜羊膜与保存羊膜在体内表现出几乎无差别的低免疫原性,不会引起由T细胞介导的特异性排斥反应,可视为免疫赦免组织应用。

流式细胞仪分选外周血CD3^+CD4^+T淋巴细胞方法的建立

首先用Percoll连续密度梯度离心法制备外周血单个核细胞,采用流式细胞仪分选CD3+CD4+T淋巴细胞。分选后的细胞通过细胞存活率、细胞纯度鉴定和形态观察对分选方法进行评价。结果显示,Percoll连续密度梯度离心法能很好的制备外周血单个核细胞,分选前CD3+CD4+T淋巴细胞纯度为(51.9±9.6)%,分选后CD3+CD4+T淋巴细胞纯度为(95.9±0.8)%,差异有统计学意义(P<0.01)。分选后的细胞存活率为(95.8±1.2)%,细胞的形态保持完整。

黄芪静脉应用对肺癌患者外周血单个核细胞中辅助性T细胞亚群状态的影响

目的探讨肺癌患者外周血单个核细胞(peripheral b lood mononuc lear cell,PBMC)中辅助性T细胞两个亚群(Th1/Th2)的功能状态及黄芪静脉应用对其的影响。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定了19例肺癌患者和10例健康对照者PBMC中Th1类细胞因子白细胞介素2(IL-2)和干扰素γ(IFN-γ)以及Th2类细胞因子IL-4、IL-6和IL-10的表达,并对肺癌患者与健康对照者及肺癌患者用黄芪前后上述指标进行比较。结果①19例肺癌患者IL-4、IL-6和IL-10的阳性表达例数分别为9、17和10,明显高于健康对照组,差别有统计学意义(P<0.05,P<0.01,P<0.05),IFN-γ和IL-2的阳性表达例数分别为1和2,与健康对照组比较,差别无统计学意义(P>0.05);②肺癌患者用黄芪后IL-4、IL-6和IL-10的阳性表达例数分别降至2、7和3,与用药前对比,差别有统计学意义(P<0.05),IFN-γ和IL-2的阳性表达例数升至7和11,与用药前比较,差别有统计学意义(P<0.05);③肺癌患者用黄芪后IL-2、IL-4、IL-6和IL-10的阳性表达例数与健康对照组比较,差别无统计学意义(P>0.05),IFN-γ的阳性表达例数与健康对照组比较,差别有统计学意义(P<0.05)。结论肺癌患者存在明显Th2优势应答,不利于机体抗肿瘤免疫;黄芪具有抑制肺癌患者PBMC Th2类细胞因子表达,增强Th1类细胞因子表达的作用,这可能是其抗肿瘤作用的机制之一。

自体NK、T混合淋巴细胞扩增后回输对肿瘤免疫的影响

目的:观察22例恶性肿瘤患者外周血淋巴细胞在体外经细胞因子扩增并回输前后肿瘤免疫状态的变化。方法:体外诱导扩增恶性肿瘤患者外周血淋巴细胞及单个核细胞,收获细胞后每2周回输1次,回输前用流式细胞术测定静脉血CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3-CD16-CD56+、CD3-CD16+CD56-、CD3-CD16+CD56+、CD3+CD16-CD56+、CD3+CD16+CD56-、CD3+CD16+CD56+,观察回输前后上述指标的变化。结果:回输后2周外周血CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD4+细胞与回输前相似;NK样标志细胞(CD16+/CD56+)比回输前明显增加(P<0.01);连续多次回输(2周间隔)后与上述结果相似;未见不良反应。结论:自体NK、T混合淋巴细胞(NK-Tm)扩增后回输可提高机体抗肿瘤细胞免疫功能,安全性良好。