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犬瘟热病毒抗原表位T’TB和犬细小病毒VP2蛋白的共表达及免疫小鼠特异性抗体的测定
被引量:
9
1
作者
王亚君
华育平
《兽类学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第2期204-209,共6页
应用PCR方法扩增犬细小病毒VP2基因,将其克隆至Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中的转移载体pFastBacHTc上,命名为pFastBacHTc-VP2,将人工合成的犬瘟热病毒抗原表位基因T’TB克隆至VP2基因的上游,命名为pFastBacHTc-T’TB-VP2。进而转化含...
应用PCR方法扩增犬细小病毒VP2基因,将其克隆至Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中的转移载体pFastBacHTc上,命名为pFastBacHTc-VP2,将人工合成的犬瘟热病毒抗原表位基因T’TB克隆至VP2基因的上游,命名为pFastBacHTc-T’TB-VP2。进而转化含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac中,获得携带犬瘟热病毒T’TB细胞表位和犬细小病毒VP2基因的重组转染质粒Bacmid-BacHT-T’TB-VP2,将其转染昆虫细胞Sf-9后获得融合重组T’TB-VP2蛋白,大小约为70ku。经Westernblot分析,结果显示:表达的蛋白具有良好的免疫原性。表达的重组蛋白在无佐剂参与的情况下,按确定的免疫程序免疫6~8周龄的BALB/c小鼠,检测小鼠的体液免疫学指标。结果表明:表达蛋白能诱导小鼠产生抗CDV和CPV的特异性中和抗体。本实验为重组犬瘟热与犬细小病毒新型亚单位疫苗的研制奠定了重要的物质基础。
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关键词
犬瘟热病毒
t
’
tb
抗原表位
犬细小病毒VP2基因
杆状病毒表达系统
表达
抗体检测
下载PDF
职称材料
重组犬瘟热病毒抗原表位T'TB和犬细小病毒vp2基因的真核表达
被引量:
1
2
作者
王亚君
华育平
高光慧
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第5期349-353,358,共6页
将人工合成的犬瘟热病毒抗原表位T'TB基因克隆至Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中的转移载体pFastBacHTc上,命名为pFastBacHTc-T'TB。应用PCR方法扩增犬细小病毒vp2基因,将其克隆至pMD18-T载体,测序后将vp2基因插入T'TB基因下...
将人工合成的犬瘟热病毒抗原表位T'TB基因克隆至Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中的转移载体pFastBacHTc上,命名为pFastBacHTc-T'TB。应用PCR方法扩增犬细小病毒vp2基因,将其克隆至pMD18-T载体,测序后将vp2基因插入T'TB基因下游,命名为pFastBacHTc-T'TB-VP2,进而转化含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac中,获得携带犬瘟热病毒T'TB细胞表位和犬细小病毒vp2基因的重组转染质粒Bacmid-BacHT-T'TB-VP2,转染昆虫细胞Sf-9后获得融合重组T'TB-VP2蛋白,大小约为70ku。经Westernblot分析,表达的蛋白可与犬细小病毒阳性血清反应,具有良好的免疫原性。
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关键词
犬瘟热病毒
犬细小病毒
犬瘟热病毒
t
^I
tb
抗原表位
VP2基因
杆状病毒表达系统
表达
下载PDF
职称材料
犬瘟热病毒N蛋白的B细胞抗原表位预测
被引量:
4
3
作者
张海雷
白换力
+5 位作者
薛慧亮
李志萍
苏红艳
唐志文
靳朝
夏志平
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第1期10-16,共7页
将1段犬瘟热病毒N蛋白氨基酸序列(GenBank编号为:AEV77096.1)与GenBank登录的其他氨基酸序列进行比对,分析其同源性;通过DNAStar生物信息学分析软件中的Protean模块及The PredictProteinserver在线蛋白分析工具预测犬瘟热病毒N蛋...
将1段犬瘟热病毒N蛋白氨基酸序列(GenBank编号为:AEV77096.1)与GenBank登录的其他氨基酸序列进行比对,分析其同源性;通过DNAStar生物信息学分析软件中的Protean模块及The PredictProteinserver在线蛋白分析工具预测犬瘟热病毒N蛋白的理化性质、二级结构、亲水性、表面可及性、柔韧性、抗原指数、跨膜螺旋、蛋白相互作用位点、蛋白功能位点等特性,并预测其B细胞优势抗原表位。结果显示,犬瘟热病毒N蛋白具有规则的二级结构、亲水性、柔韧性片段多,多处于表面可及性大,抗原指数高,蛋白质相互作用位点区域。潜在的B细胞优势抗原表位为12~18、61~66、243~246、410~415、421~429、434~447、452~456、480~487氨基酸序列。结果表明,本试验预测了犬瘟热病毒N蛋白的B细胞优势抗原表位,为进一步设计犬瘟热病毒的诊断抗原多肽、免疫用抗原多肽和研发血清学检测试剂盒奠定了理论基础。
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关键词
犬瘟热病毒
生物信息学
B细胞抗原表位
原文传递
题名
犬瘟热病毒抗原表位T’TB和犬细小病毒VP2蛋白的共表达及免疫小鼠特异性抗体的测定
被引量:
9
1
作者
王亚君
华育平
机构
东北林业大学野生动物资源学院
出处
《兽类学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第2期204-209,共6页
基金
黑龙江省青年专项基金资助项目(2007Q0256-00)
国家林业局科技课题(野生动物主要疫病检测方法和诊断平台的建立)资助项目
文摘
应用PCR方法扩增犬细小病毒VP2基因,将其克隆至Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中的转移载体pFastBacHTc上,命名为pFastBacHTc-VP2,将人工合成的犬瘟热病毒抗原表位基因T’TB克隆至VP2基因的上游,命名为pFastBacHTc-T’TB-VP2。进而转化含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac中,获得携带犬瘟热病毒T’TB细胞表位和犬细小病毒VP2基因的重组转染质粒Bacmid-BacHT-T’TB-VP2,将其转染昆虫细胞Sf-9后获得融合重组T’TB-VP2蛋白,大小约为70ku。经Westernblot分析,结果显示:表达的蛋白具有良好的免疫原性。表达的重组蛋白在无佐剂参与的情况下,按确定的免疫程序免疫6~8周龄的BALB/c小鼠,检测小鼠的体液免疫学指标。结果表明:表达蛋白能诱导小鼠产生抗CDV和CPV的特异性中和抗体。本实验为重组犬瘟热与犬细小病毒新型亚单位疫苗的研制奠定了重要的物质基础。
关键词
犬瘟热病毒
t
’
tb
抗原表位
犬细小病毒VP2基因
杆状病毒表达系统
表达
抗体检测
Keywords
An
t
ibody de
t
ec
t
ion
Baculo
virus
expression sys
t
em
Expression
Parvo
virus
virus
t' tb antigen epitope of canine distemper virus
VP2 gene of
canine
分类号
Q959.9 [生物学—动物学]
下载PDF
职称材料
题名
重组犬瘟热病毒抗原表位T'TB和犬细小病毒vp2基因的真核表达
被引量:
1
2
作者
王亚君
华育平
高光慧
机构
东北林业大学野生动物学院
黑龙江省哈尔滨市道里区动物检疫站
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第5期349-353,358,共6页
基金
黑龙江省青年专项基金(2007Q0256-00)
国家林业局科技课题资助项目
文摘
将人工合成的犬瘟热病毒抗原表位T'TB基因克隆至Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中的转移载体pFastBacHTc上,命名为pFastBacHTc-T'TB。应用PCR方法扩增犬细小病毒vp2基因,将其克隆至pMD18-T载体,测序后将vp2基因插入T'TB基因下游,命名为pFastBacHTc-T'TB-VP2,进而转化含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac中,获得携带犬瘟热病毒T'TB细胞表位和犬细小病毒vp2基因的重组转染质粒Bacmid-BacHT-T'TB-VP2,转染昆虫细胞Sf-9后获得融合重组T'TB-VP2蛋白,大小约为70ku。经Westernblot分析,表达的蛋白可与犬细小病毒阳性血清反应,具有良好的免疫原性。
关键词
犬瘟热病毒
犬细小病毒
犬瘟热病毒
t
^I
tb
抗原表位
VP2基因
杆状病毒表达系统
表达
Keywords
canine
distemper
virus
canine
parvo
virus
virus
t
^I
tb
antigen
epitope
vp2 gene
baculo
virus
expression sys
t
em
expression
分类号
S852.655 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
犬瘟热病毒N蛋白的B细胞抗原表位预测
被引量:
4
3
作者
张海雷
白换力
薛慧亮
李志萍
苏红艳
唐志文
靳朝
夏志平
机构
吉林大学动物医学学院
军事医学科学院军事兽医研究所
出处
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第1期10-16,共7页
基金
国家"十二五"重大专项(2011ZXJ09201-031)
文摘
将1段犬瘟热病毒N蛋白氨基酸序列(GenBank编号为:AEV77096.1)与GenBank登录的其他氨基酸序列进行比对,分析其同源性;通过DNAStar生物信息学分析软件中的Protean模块及The PredictProteinserver在线蛋白分析工具预测犬瘟热病毒N蛋白的理化性质、二级结构、亲水性、表面可及性、柔韧性、抗原指数、跨膜螺旋、蛋白相互作用位点、蛋白功能位点等特性,并预测其B细胞优势抗原表位。结果显示,犬瘟热病毒N蛋白具有规则的二级结构、亲水性、柔韧性片段多,多处于表面可及性大,抗原指数高,蛋白质相互作用位点区域。潜在的B细胞优势抗原表位为12~18、61~66、243~246、410~415、421~429、434~447、452~456、480~487氨基酸序列。结果表明,本试验预测了犬瘟热病毒N蛋白的B细胞优势抗原表位,为进一步设计犬瘟热病毒的诊断抗原多肽、免疫用抗原多肽和研发血清学检测试剂盒奠定了理论基础。
关键词
犬瘟热病毒
生物信息学
B细胞抗原表位
Keywords
canine
distemper
virus
bioinforma
t
ics
B-cell
antigen
ic
epitope
s
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
犬瘟热病毒抗原表位T’TB和犬细小病毒VP2蛋白的共表达及免疫小鼠特异性抗体的测定
王亚君
华育平
《兽类学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
9
下载PDF
职称材料
2
重组犬瘟热病毒抗原表位T'TB和犬细小病毒vp2基因的真核表达
王亚君
华育平
高光慧
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
1
下载PDF
职称材料
3
犬瘟热病毒N蛋白的B细胞抗原表位预测
张海雷
白换力
薛慧亮
李志萍
苏红艳
唐志文
靳朝
夏志平
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
4
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