荧光光谱法研究二溴羟基卟啉与蛋白质的结合作用机理

应用荧光光谱法研究了meso-四(3,5-二溴-4-羟基苯基)卟啉[T(DBHP)P]与牛血清白蛋白(BSA)之间的结合反应,基于T(DBHP)P对BSA内源荧光的猝灭机理,测定了两者之间在不同温度下的结合常数,温度为27℃时,荧光猝灭法测得反应的结合常数为K=1.30×106L.mol-1,温度为48℃时,K=6.32×105L.mol-1,结合常数随温度升高而减小,由此判定该猝灭类型为静态猝灭。根据F rster非辐射能量转移理论,确定了T(DBHP)P与BSA之间的能量转移效率E=0.91,能量给体(BSA)与受体[T(DBHP)P]之间的结合距离r=2.39 nm<7 nm,符合非辐射能量转移条件。依据热力学参数ΔG<0,ΔH<0,ΔS>0确定了T(DBHP)P与BSA之间的作用力主要是静电引力。同时,利用同步荧光光谱,考察了T(DBHP)P对BSA构象的影响,结果发现,T(DBHP)P的加入使BSA构象发生变化,BSA内部残基所处环境的疏水性降低。

二溴羟基卟啉与核酸相互作用的光谱行为研究

研究了meso-4（3，5-二溴-4-羟基苯基）卟啉（T（DBHP）P）与小牛胸腺DNA（ct DNA）相互作用的光谱行为，探讨了以T（DBHP）P作为光谱探针测定核酸的最佳条件及作用机理。在pH4．92 HAc-NaAc缓冲液中，T（DBHP）P在最大吸收波长425nm处的吸收峰强度显著下降，且下降程度与ct DNA含量呈线性关系，ct DNA含量在0．20～1．80μg·mL^-1范围内符合比尔定律，检出限为0．024μg·mL^-1。实验中发现Tween-80微乳液的加入能显著增加体系的灵敏度。同时，用摩尔比法测定了DNA与卟啉的结合数为21，并初步探讨了反应机理。

导数光度法直接测定血清中痕量锌的研究及应用

建立了一种以锌与meso-四-(3,5-二溴-4-羟基苯基)卟啉显色反应为基础的二阶导数光度法测定血清中锌的方法.在10ml溶液中,0～2μgZn^(2+)符合比耳定律.血清中共存元素不干扰锌的测定,其二阶导数光度法的检出限为1.86ng·ml^(-1),已用于血清中锌的直接测定.结果满意.

Meso-四-(3-5-二溴-4-羟基苯)卟啉分光光度法测食品中铅含量

以食品为对象,研究了铅与Meso-四-(3-5-二溴-4-羟基苯)卟啉[T(DBHP)P]的配合反应,并对于溶液pH值、加热时间、表面活性剂用量、显色剂用量等对配合物的生成及稳定性的影响进行了探究,确定反应的最佳条件。经试验,当8-羟基喹啉存在时,铅在碱性条件下可与T(DBHP)P反应生成1∶2的橙黄色化合物。该化合物在479 nm处有较强的吸收,当铅含量在0～12μg/mL时,测得的曲线呈线性关系,服从比尔定律,重复性较好。经分光光度计测出其吸光度,绘制标准工作曲线,计算出铅的含量。结果表明:本实验所采用方法简便快速、安全,对环境污染小,且灵敏度较高,选择性较好,样品不需要分离出干扰离子,只需加入掩蔽剂即可消除钙离子和铁离子的影响。将该方法用于测定食品中铅的含量,取得了较满意的效果。