梅毒血清固定患者中NOD样受体蛋白3和Toll样受体4表达与Th1/Th2相关细胞因子的相关性研究

目的探究梅毒血清固定患者中NOD样受体蛋白3(NLRP3)、Toll样受体4(TLR4)表达与辅助性T细胞1/辅助性T细胞2(Th1/Th2)相关细胞因子的相关性。方法选取2021年2月至2022年4月川北医学院附属三台医院收治的197例梅毒患者作为研究对象。将进行驱梅治疗后血清转阴者纳入转阴组(n=88),未进行驱梅治疗者纳入梅毒组(n=45),接受驱梅治疗后血清固定者纳入固定组(n=64)。另选取同期进行体检的健康人作为对照组(n=53)。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测外周血单个核细胞(PBMCs)中NLRP3、TLR4 mRNA相对表达水平;采用酶联免疫吸附试验法检测Th1/Th2相关细胞因子的表达水平;采用Pearson法分析TLR4、NLRP3 mRNA与Th1/Th2相关细胞因子的相关性。结果各组PBMCs中TLR4、NLRP3 mRNA表达水平比较,梅毒组>转阴组>对照组>固定组,差异具有统计学意义(P<0.05);各组白介素(IL)-2、γ干扰素(IFN-γ)水平比较,对照组>转阴组>梅毒组>固定组,差异具有统计学意义(P<0.05);各组IL-1β、IL-4、IL-10及IL-18水平比较,对照组<转阴组<梅毒组<固定组,差异具有统计学意义(P<0.05);梅毒血清固定患者TLR4、NLRP3 mRNA表达与IFN-γ、IL-2呈正相关,与IL-1β、IL-4、IL-10、IL-18呈负相关(P<0.05)。结论梅毒血清固定患者NLRP3、TLR4 mRNA表达水平显著降低,且与Th1/Th2相关细胞因子密切相关。

5周递增负荷运动训练过程中T-helper1和T-helper2相关细胞因子基因表达的变化

目的:从辅助性T淋巴细胞(T-helper)细胞因子mRNA表达的角度探讨递增负荷运动下机体免疫机能变化的规律。方法:采用实时定量PCR检测技术,对进行5周递增负荷训练的健康男性受试者外周血单个核细胞的T-helper特征性细胞因子mRNA进行动态观察。结果:5周递增负荷运动训练过程中,训练组实验期间IL-2mRNA变化不明显,训练2、3和4周后IL-4mRNA明显升高,训练3周、4周、5周后IFN-γmRNA、IFN-γmRNA/IL-4mRNA、PFRmRNA明显高于实验前,训练5周后受试者最大摄氧量和PWC170明显提高。对照组IL-2mRNA、IL-4mRNA、IFN-γmRNA、PFRmRNA、有氧运动能力5周实验前后均无显著性差异。结论:5周递增负荷运动训练使T-helper1/T-helper2细胞因子基因表达上调,机体免疫平衡协调能力提高。

外周血Th1/Th2细胞因子与急性缺血性脑卒中患者脑功能损伤和认知功能障碍的关系

目的探讨外周血辅助性T细胞(Th)1/Th2细胞因子与急性缺血性脑卒中(AIS)患者脑功能损伤和卒中后认知功能障碍(PSCI)的关系。方法选取AIS患者125例(AIS组)和同时段65例健康人(对照组),AIS患者根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分分为轻度脑功能损伤组(33例)、中度脑功能损伤组(74例)和重度脑功能损伤组(18例),根据6个月后是否发生PSCI分为PSCI组(52例)和非PSCI组(73例)。采用流式细胞术检测外周血Th1、Th2比例,酶联免疫吸附法检测血清干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-4。通过Spearman相关性分析AIS患者外周血Th1/Th2细胞因子与NIHSS评分的相关性,单因素和多因素Logistic回归分析AIS患者PSCI的影响因素。结果AIS组外周血Th1、IFN-γ、Th1/Th2水平高于对照组,外周血Th2、IL-4水平低于对照组(P均<0.05)。轻度脑功能损伤组、中度脑功能损伤组、重度脑功能损伤组外周血Th1、IFN-γ、Th1/Th2依次升高,外周血Th2、IL-4水平依次降低(P均<0.05)。AIS患者外周血Th1、IFN-γ、Th1/Th2与NIHSS评分呈正相关,Th2、IL-4与NIHSS评分呈负相关(P均<0.05)。PSCI组年龄大于非PSCI组,NIHSS评分和Th1、IFN-γ、Th1/Th2高于非PSCI组,Th2、IL-4水平低于非PSCI组(P均<0.05)。NIHSS评分增加、Th1升高、IFN-γ升高、Th1/Th2升高为AIS患者PSCI的独立危险因素,Th2升高、IL-4升高为独立保护因素(P均<0.05)。结论外周血Th1/Th2细胞因子与AIS患者脑功能损伤加重和PSCI发生密切相关。

基于Th1/Th2表达探究特异性免疫对哮喘小鼠肺泡灌洗液炎性反应的影响

目的 基于Th1/Th2表达探究特异性免疫对哮喘小鼠肺泡灌洗液炎性反应的影响。方法 选择40只小鼠分为对照组、模型组、SIT组及地塞米松组,每组10只。除了对照组外均建立哮喘小鼠模型,激发阶段后SIT组注射1 mg的OVA,地塞米松组灌胃0.075 mg/mL溶液,其余大鼠注射等体积的PBS溶液。采用肺功能仪检测气道反应;经瑞氏-吉姆萨染色观察肺泡灌洗液(BALF)炎性细胞;酶联免疫吸附法(ELISA)检测BALF中细胞因子IL-13、IL-4、IL-5及INF-γ;HE染色观察肺组织形态;PAS染色观察肺气道上皮杯状细胞活性;流式细胞术检测肺组织中Th1及Th2占比。结果 特异性免疫可显著降低模型小鼠气道高反应性、减少BALF内炎性细胞活性,并可通过升高Th1降低Th2而抑制哮喘发生发展。结论 特异性免疫可缓解哮喘小鼠气道高反应性,抑制炎性反应,并通过改善气道上皮杯状细胞增生而缓解通气,可能与调节Th1/Th2表达相关。

基于Notch信号通路探讨芪蛭皱肺颗粒对慢性阻塞性肺疾病大鼠Th1/Th2免疫平衡的调节机制

目的探讨果蝇双翅边缘缺刻同源基因(Notch)信号通路在慢性阻塞性肺疾病(COPD)辅助性T细胞1(Helper T cells 1,Th1)和辅助性T细胞2(Helper T cells 2,Th2)失衡中的作用及芪蛭皱肺颗粒的干预机制。方法70只Wistar大鼠随机挑选10只作为空白对照组,其余大鼠均采用香烟烟雾(CS)联合气管滴注脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)法建立COPD模型,空白对照组及造模组各随机挑选3只大鼠验证造模是否成功。造模结束进行灌胃给药干预,造模组大鼠随机分为模型对照组、阳性对照组(67.5μg·kg^(-1))及芪蛭皱肺颗粒高中低剂量组(3.24、1.62、0.81 g·kg^(-1)),分别给予生理盐水、醋酸地塞米松混悬液、芪蛭皱肺高、中、低剂量混悬液进行灌胃干预,空白对照组同模型对照组,灌胃等体积生理盐水。经28天造模及28天治疗后,采用动物肺功能测试系统检测吸气峰流速(Peak Inspiratory Flow,PIF)和呼气峰流速(Peak Expiratory Flow,PEF),处死大鼠提取肺脏、脾脏、血清及支气管肺泡灌洗液(BALF),苏木素-伊红(HE)染色评价肺组织病理变化,酶联免疫吸附实验法(ELISA)测定血清及BALF中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,流式细胞仪检测脾脏Th1/Th2细胞水平,免疫组织化学法(Immunohistochemistry,IHC)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肺组织Notch1、Hes家族发状分裂相关增强子1(Hes1)、Hey家族发状分裂相关增强子1(Hey1)蛋白水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR,RT-PCR)检测肺组织Notch1、Hes1、Hey1基因表达水平。结果与空白对照组比较,模型对照组大鼠肺功能显著降低(P<0.05),肺组织出现炎性细胞浸润、支气管结构破坏等病变,血清及BALF中TNF-α含量显著升高(P<0.05),脾Th1细胞百分比显著降低(P<0.05),Th2细胞百分比显著升高(P<0.05),肺组织Notch1、Hes1、Hey1蛋白及mRNA表达显著升高(P<0.05),差异均具有统计学意义;与模型对照组比较,各给药组大鼠肺功能显著升高(P<0.05),肺组织病理损伤均有所减轻,血清及BALF中TNF-α含量显著降低(P<0.05),脾Th1细胞百分比显著升高(P<0.05),Th2细胞百分比显著降低(P<0.05),肺组织Notch1、Hes1、Hey1蛋白及mRNA表达显著降低(P<0.05),差异均具有统计学意义。结论芪蛭皱肺颗粒通过抑制Notch信号通路调节Th1/Th2平衡,从而改善COPD大鼠肺功能及病理损伤,影响其免疫功能。

特异性免疫治疗通过改善Th1/Th2免疫失衡减轻哮喘小鼠肺部炎症

目的:探讨特异性免疫治疗(SIT)对哮喘小鼠肺部炎症反应的影响及其机制。方法:小鼠按照随机数字表法分为对照组、模型组、SIT组及地塞米松组。模型组、SIT组及地塞米松组均建立哮喘小鼠模型,建模激发阶段后SIT组注射1 mg的卵白蛋白(OVA),地塞米松组灌胃0.075 mg/mL地塞米松溶液,其余小鼠注射等体积的PBS溶液,后进入雾化阶段。采用肺功能仪检测气道反应;瑞氏-吉姆萨染色观察肺泡灌洗液(BALF)中的炎症细胞;ELISA检测BALF中细胞因子IL-13、IL-4、IL-5及干扰素-γ(IFNγ);H-E染色观察肺组织病理形态;过碘酸雪夫(PAS)染色观察肺气道上皮杯状细胞;流式细胞术检测肺组织中IFNγ及IL-4占比。结果:在6.25、12.50、25.00μg/kg及50.00μg/kg的乙酰胆碱作用下,模型组小鼠气道反应高于对照组,SIT组及地塞米松组的气道反应均低于模型组,但SIT组及地塞米松组间差异无统计学意义。与对照组相比,模型组小鼠BALF中细胞总数、中性粒细胞(%)、嗜酸性粒细胞(%)、IL-4、IL-5、IL-13、气道上皮杯状细胞、辅助型T细胞2(Th2)均升高,IFNγ降低;与模型组相比,SIT组BALF中细胞总数、中性粒细胞(%)、嗜酸性粒细胞(%)、IL-4、IL-5、IL-13、气道上皮杯状细胞降低,IFNγ升高,SIT组与地塞米松组间差异无统计学意义。对照组小鼠肺泡及气道结构规整,气道壁较薄,管腔无狭窄;模型组小鼠肺组织结构破坏显著,气道壁较厚,肺泡结构破坏显著,炎症浸润明显且血管周围存在水肿。SIT组及地塞米松组小鼠肺组织炎症浸润改善,血管水肿程度降低,管腔狭窄缓解。结论:SIT可缓解哮喘小鼠气道高反应性,抑制BALF中炎症细胞及炎症因子活性,通过抑制气道上皮杯状细胞增生而改善通气,其机制与改善肺组织中辅助型T细胞1/辅助型T细胞2免疫失衡相关。

辅助性T细胞1/辅助性T细胞2标志性细胞因子与晚期肺腺癌化疗近远期疗效的关联性分析

目的分析辅助性T细胞(TH)1/TH2标志性细胞因子与晚期肺腺癌化疗近远期疗效的关联性。方法选取2021年1月至2023年12月江苏省徐州市中医院收治的82例晚期肺腺癌患者为研究对象,均给予培美曲塞+顺铂或卡铂治疗,21 d为1个周期,连续治疗3个周期。比较不同近期临床疗效者化疗前及化疗3个周期后血清γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-10变化及不良反应发生情况,并记录化疗后2年生存与死亡者化疗3个周期后血清IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10差异。结果82例晚期肺腺癌患者均完成3个周期的化疗,其中完全缓解(CR)1例,部分缓解(PR)34例,疾病稳定(SD)28例,疾病进展(PD)19例,晚期肺腺癌患者化疗3个周期后血清IFN-γ、IL-2均高于本组化疗前,血清IL-4、IL-10均低于本组化疗前,差异有统计学意义(P<0.05);CR+PR患者化疗后血清IFN-γ、IL-2高于SD+PD者,差异有统计学意义(P<0.05),血清IL-4、IL-10低于SD+PD者,差异有统计学意义(P<0.05)。CR+PR患者与SD+PD患者的化疗期间不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。42例获得随访终点的晚期肺腺癌患者中死亡8例(19.05%),生存34例(80.95%),化疗后2年死亡者化疗3个周期血清IFN-γ、IL-2低于生存者,差异有统计学意义(P<0.05),血清IL-4、IL-10高于生存者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论TH1/TH2平衡不仅与晚期肺腺癌患者化疗近期疗效有关,也与患者远期预后生存情况有关。

AECOPD患者中医证型分布与血清Th1/Th2、肺功能及CAT评分的关系

目的:探究慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者中医证型分布与血清辅助性T细胞1/辅助性T细胞2(Th1/Th2)、肺功能及慢性阻塞性肺病评估测试(CAT)评分的关系。方法:将2021年3月~2023年3月期间本院收治的114例AECOPD患者纳入研究。依据临床症状对参试患者进行中医辨证,收集不同辨证分型患者临床资料进行回顾性分析。比较不同辨证分型患者的血清Th1/Th2、肺功能及CAT评分。结果:AECOPD患者临床主要有5种证型分布,分别为痰浊壅肺证18例(15.79%)、痰热郁肺证22例(19.30%)、痰蒙神窍证20例(17.54%)、肺肾气虚证26例(22.81%)、阳虚水泛证28例(24.56%);五组中医证型患者血清Th1/Th2比较,痰浊壅肺组>痰热郁肺组>痰蒙神窍组>肺肾气虚组>阳虚水泛组(P<0.05);五组中医证型患者CAT评分比较,痰浊壅肺组<痰热郁肺组<痰蒙神窍组<肺肾气虚组<阳虚水泛组(P<0.05);五组中医证型患者肺功能指标FEV1、FEV1%、FEV1/FVC比较,痰浊壅肺组>痰热郁肺组>痰蒙神窍组>肺肾气虚组>阳虚水泛组(P<0.05)。结论:随着AECOPD患者病情逐渐发展,症状表现也由肺脾气虚向肺脾肾气虚进展,肺功能及免疫功能相应下降。

结直肠癌患者血清总蛋白、白蛋白、血红蛋白与Th1/Th2免疫平衡及调节性T细胞、辅助性T细胞17相关性分析

目的探究结直肠癌患者血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、血红蛋白(Hb)与其辅助性T细胞(Th)1/Th2免疫平衡及Treg、Th17相关性。方法使用主观全面评定量表中营养状态评分对2018年12月至2021年10月河北北方学院附属第一医院收治的结直肠癌患者500例进行营养评估,根据患者营养评估结果随机抽取其中营养状态优者162例,营养状态良者161例,营养状态差者177例。使用简单随机抽样法,选取营养状态优组(40例)、轻中度营养不良组(40例)、重度营养不良组(40例)。观察不同组别患者营养指标,Th1/Th2、Treg/Th17免疫平衡相关指标并进行相关性分析。结果营养状态优组TP、ALB、Hb、白细胞介素(IL)-2、γ-干扰素、肿瘤坏死因子-α、Th1细胞表达、Th1/Th2显著高于轻中度营养不良组及重度营养不良组(P<0.05),轻中度营养不良组显著高于重度营养不良组(P<0.05);营养状态优组运铁蛋白(TF)、IL-6、IL-10、IL-5、Th2细胞表达低于轻中度营养不良组及重度营养不良组(P<0.05),轻中度营养不良组显著低于重度营养不良组(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,TP与患者IL-2、TNF-α水平及Th1细胞表达、Th1/Th2呈正相关(r=0.500、0.471、0.413、0.332,P<0.05),与IL-6、IL-10、IL-5水平及Th2、Treg、Th17细胞表达呈负相关(r=-0.443、-0.442、-0.396、-0.213、-0.422、-0.419,P<0.05);ALB与患者IL-2、IFN-γ、TNF-α水平及Th1细胞表达、Th1/Th2呈正相关(r=0.493、0.338、0.393、0.336、0.321,P<0.05),与IL-6、IL-10、IL-5水平及Th2、Treg、Th17细胞表达呈负相关(r=-0.360、-0.313、-0.269、-0.231、-0.369、-0.306,P<0.05);TF与患者IL-6、IL-10、IL-5水平及TH2、Treg、Th17细胞表达呈正相关(r=0.577、0.490、0.345、0.394、0.507、0.490,P<0.05),与IL-2、IFN-γ、TNF-α水平及Th1细胞表达、Th1/Th2呈负相关(r=-0.665、-0.401、-0.590、-0.540、-0.432,P<0.05);Hb与患者IL-2、TNF-α水平及Th1细胞表达呈正相关(r=0.280、0.392、0.194,P<0.05),与IL-6、IL-10、IL-5水平及Th2、Treg、Th17细胞表达呈负相关(r=-0.284、-0.188、-0.308、-0.210、-0.266、-0.327,P<0.05)。结论结直肠癌患者营养学指标与其Th1/Th2免疫平衡及Treg、Th17相关性具有相关性,随着结直肠癌患者营养学指标变化会引起其Th1/Th2免疫平衡及Treg、Th17表达水平改变,营养状态较差患者Th1/Th2免疫平衡向Th2漂移,Treg、Th17升高,抗肿瘤免疫能力减弱。

D-松醇调节Notch1/Hes1信号通路对银屑病皮损大鼠Th1/Th2平衡的影响

目的:探索D-松醇对银屑病皮损大鼠Th1/Th2平衡影响的机制研究。方法:构建咪喹莫特(IMQ)大鼠模型,随机分为对照组、IMQ组、D-松醇低剂量组、D-松醇中剂量组、D-松醇高剂量组和阳性对照组,每组10只。造模成功后大鼠给与D-松醇低、中、高剂量组(50mg/kg、100mg/kg、150mg/kg)和阳性对照组(1mg/kg,甲氨蝶呤)灌胃治疗,对照组和IMQ组给予相同剂量的生理盐水,每天一次,连续7d。在给药第8天对各组大鼠银屑病皮损症状和指数(MPASI)评价;HE染色观察银屑病皮损病理变化;ELISA检测血清中干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-4(IL-4)、白介素-10(IL-10)水平;以流式细胞术检测辅助性T细胞1(Th1)/辅助性T细胞2(Th2)比值;Western blot检测T盒子转录因子(T-bet)、GATA结合蛋白3(GATA-3)、缺刻基因1(Notch1)、发状分裂相关增强子1(Hes1)蛋白表达。结果:与对照组比较,IMQ组大鼠皮肤出现银屑病样病变如红斑、过度角质化、炎性细胞浸润等,IFN-γ、TNF-α、Th1细胞、T-bet、Notch1、Hes1水平显著升高(P<0.05),IL-4、IL-10、Th2细胞、GATA-3水平显著降低,Th1/Th2细胞比例失衡(P<0.05);经D-松醇治疗后,大鼠银屑病样病变减轻或消失,皮损指数下降,IFN-γ、TNF-α、Th1细胞、T-bet、Notch1、Hes1水平下降(P<0.05),IL-4、IL-10、Th2细胞、GATA-3水平升高,Th1/Th2比例有所恢复(P<0.05)。结论:D-松醇可能通过抑制Notch1/Hes1信号通路调节Th1/Th2平衡,降低炎性因子产生,减轻IMQ大鼠银屑病皮损。

尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒基因型分布及Th1/Th2亚群失衡与复发的关系

目的探讨感染不同基因型人乳头瘤病毒(HPV)及T淋巴细胞亚群状态与尖锐湿疣(CA)复发的关系。方法选取2019年1月至2020年12月新疆维吾尔自治区人民医院诊治的142例CA患者作为研究对象(CA组),采集疣体组织及外周血,根据是否复发分为CA复发组与CA非复发组。另选取同期20例健康人作为对照组,采集外周血。采用聚合酶链反应-反向杂交法检测疣体组织中HPV型别;采用流式细胞术检测外周血中T淋巴细胞亚群;采用流式微球分析法检测细胞因子的表达。结果CA组检出HPV感染亚型主要为HPV 11(47.18%)、HPV 6(38.73%)及HPV 16(19.01%),CA复发率为76.76%;CA患者CD4^(+)/CD8^(+)比值显著低于对照组(P<0.05),CA复发组Treg比率显著低于CA非复发组(P<0.05);CA复发组辅助性T(Th)1型细胞因子白介素-2(IL-2)及γ干扰素(IFN-γ)均显著低于CA非复发组(P<0.05),而Th2型细胞因子白介素-4(IL-4)及白介素-10(IL-10)均显著高于CA非复发组(P<0.05)。结论新疆地区CA患者HPV感染型别以HPV 11、6、16为主,同时均出现了T淋巴细胞亚群的紊乱及Th1/Th2细胞亚群的失衡,这种变化可能与CA发病期的免疫应答及CA复发期的免疫耐受存在关联。

Th1/Th2、Th17/Treg细胞因子与小儿支原体肺炎肺通气功能关系

目的:探讨小儿支原体肺炎(MP)患儿辅助性T细胞(Th)1/Th2、Th17/调节性T细胞(Treg)细胞因子与肺通气功能的关系。方法:选取2019年1月~2021年6月医院收治的150例MP患儿,测定MP患儿Th1/Th2细胞因子及肺通气功能,分析之间关系。结果:血清INF-γ、INF-γ/IL-4、IL-10与MP患儿肺通气功能呈正相关(r>0,P<0.05),血清IL-4、IL-17、IL-17/IL-10与其呈负相关(r<0,P<0.05)。结论:MP患儿血清Th1/Th2、Th17/Treg细胞因子水平与肺通气功能有关。

阻断CXCR2对宫内绒毛膜羊膜炎大鼠胎盘组织NLRP3信号转导及Th1/Th2平衡的影响

目的 探讨阻断CXC受体2(CXCR2)对宫内绒毛膜羊膜炎(CA)大鼠胎盘组织含NLR家族Pyrin域蛋白3(NLRP3)信号转导及辅助性T细胞1/辅助性T细胞2(Th1/Th2)平衡的作用。方法 48只SD孕鼠按随机数字表法分为4组,即对照组、SB225002组、LPS组、LPS+SB225002组,每组12只,按分组通过羊膜腔注射脂多糖(LPS)构建宫内绒毛膜羊膜炎模型,并给予CXCR2拮抗剂SB225002处理;妊娠第20天剖腹取胎,HE染色对胎盘组织进行病理形态学检查,免疫荧光染色检测胎盘组织NLRP3表达,实时荧光定量PCR反应和Western blot法测定胎盘组织内NLRP3、ASC及Caspase-1的mRNA相对表达量和蛋白相对表达量,ELISA法检测血清中细胞因子IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-5及IL-10的含量,流式细胞术测定外周血单个核细胞内Th1、Th2细胞比例变化。结果 与对照组比较,经LPS诱导后孕鼠胎盘组织结构受损,炎症细胞浸润明显,血窦面积显著增加(P<0.05),NLRP3阳性表达率显著升高(P<0.05),NLRP3、ASC及Caspase-1的mRNA相对表达量和蛋白相对表达量均显著上调(P<0.05),血清内IL-2、IFN-γ水平显著升高而IL-4、IL-5、IL-10水平显著降低(P<0.05),Th1细胞比例和Th1/Th2比值均显著升高,Th2细胞比例显著降低(P<0.05);与LPS组比较,经LPS诱导并给予CXCR2拮抗剂SB225002处理的孕鼠,其胎盘组织内炎症细胞浸润减轻,血窦面积显著减小(P<0.05),NLRP3阳性表达率显著降低(P<0.05),NLRP3、ASC及Caspase-1的mRNA相对表达量和蛋白相对表达量均显著下调(P<0.05),血清内IL-2、IFN-γ水平显著降低,IL-4、IL-5、IL-10水平则显著升高(P<0.05),同时,Th1细胞比例和Th1/Th2比值均显著降低,而Th2细胞比例显著升高(P<0.05)。结论 阻断CXCR2对孕鼠宫内绒毛膜羊膜炎病理过程有改善作用,并有望成为早产感控的治疗靶点。

反复呼吸道感染患儿血清维生素A水平变化及其对Th1/Th2平衡的影响

目的分析反复呼吸道感染(RRTI)患儿血清维生素A水平变化及其对辅助性T细胞1/辅助性T细胞2(Th1/Th2)平衡的影响。方法回顾性选取2017年9月至2019年6月期间在徐州市儿童医院接受治疗的108例RRTI患儿作为研究对象(RRTI组),另选取同期于本院进行体检的健康儿童100例作为健康对照组,采用高效液相色谱法测定两组血清维生素A(>0.3mg/L划分为正常组,≤0.3mg/L划分为不足组)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素6(IL-6)、γ-干扰素(IFN-γ)及Th1/Th2细胞亚群比值;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析维生素A、Th1/Th2对RRTI患儿治疗后无效的预测价值。结果RRTI组血清维生素A水平低于健康对照组,差异有统计学意义(t=12.841,P<0.05);维生素A不足组Th1、Th1/Th2及IFN-γ水平均低于正常组(t值分别为13.653、30.010、53.329,P<0.05),Th2、IL-4及IL-6水平均高于正常组(t值分别为10.406、22.100、35.180,P<0.05);治疗无效组患儿血清维生素A水平和Th1/Th2均低于有效组,差异有统计学意义(t值分别为12.183、18.277,P<0.05);ROC曲线分析结果显示维生素A联合Th1/Th2预测RRTI患儿治疗后无效的曲线下面积为0.965,高于维生素A、Th1/Th2单独预测的0.722、0.862(Z=3.402,P<0.05)。结论RRTI患儿血清维生素A低于正常水平;与维生素A正常患儿相比,维生素A不足患儿的Th1/Th2、IFN-γ水平均较低,IL-4、IL-6水平较高;维生素A和Th1/Th2联合预测RRTI患儿疗效具有一定的价值。

NOD1mRNA调节Th1/Th2和Treg/Th17细胞因子在肺结核中的免疫机制及预后价值研究

目的 探究肺结核(tuberculosis,TB)患者核苷酸结合寡聚化结构域1(nucleotide binding oligomerization domain1,NOD1)表达水平与辅助性T细胞1(Th1)/辅助性T细胞2(Th2),辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)平衡的相关性,分析NOD1 mRNA是否通过调节Th1/Th2,Treg/Th17的平衡参与肺结核细胞免疫进展过程。方法 运用病例对照研究,收集2021年6月~2022年7月昌吉市人民医院结核病门诊收治的肺结核患者50例作为肺结核组,同期健康体检者50例作为对照组。所有病例均标准抗结核治疗6个月,利用实时荧光定量聚合酶链式反应(q PCR)法检测患者抗结核治疗前后外周血单个核细胞NOD1基因的表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清Th1/Th2和Th17/Treg的细胞因子γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)和白细胞介素-17(IL-17)的表达水平。将抗结核治疗前后NOD1与细胞因子IFN-γ,IL-4,IL-10和IL-17的动态变化进行相关性比较。运用多因素COX回归分析影响肺结核患者短期预后的危险因素。结果 与对照组比较,肺结核组NOD1(10.87±5.29 vs 0.95±0.44),IL-4(17.23±4.77pg/ml vs 10.44±0.59pg/ml)和IL-10(29.17±2.07pg/ml vs24.17±2.88pg/ml)表达水平均升高,差异具有统计学意义(t=44.86,-9.97,-9.89,均P<0.05);肺结核组IFN-γ(3.91±0.52pg/ml)和IL-17[28.93(27.57~31.03)pg/ml]表达水平均低于对照组[5.40±0.36pg/ml,33.35(29.77~35.10)pg/ml],差异有统计学意义(t=16.58,Z=-5.79,均P<0.05)。与治疗前相比,治疗3个月NOD1,IL-4,IL-10和6个月的表达水平显著下降,差异具有统计学意义(t=-17.03,2.46,5.51,-26.51,9.47,10.13,均P<0.05);与治疗前相比,IFN-γ和IL-17治疗3个月和6个月表达水平显著升高,差异有统计学意义(t=-5.28,-3.41,-13.81,-4.34,均P<0.05);所有病例接受抗结核治疗后效果良好,治疗6个月后与健康对照组比较,差异均无统计学意义(t=-1.01~1.73,均P>0.05)。Pearson相关性分析表明,NOD1水平与IFN-γ,IL-10水平呈正相关(r=0.514,0.421,P<0.05),与IL-4水平呈负相关(r=-0.363,P<0.05),与IL-17水平无明显相关性(r=0.125,P>0.05)。多因素COX回归分析结果显示,NOD1m RNA的表达≥10.87(OR=-0.923,P=0.040)和IFN-γ≥3.90(OR=0.820,P=0.038)的高表达是影响肺结核患者短期预后的危险因素。结论 NOD1的表达水平与Th1/Th2,Treg/Th17的平衡具有相关性,随着患者治疗的好转,NOD1的表达是降低的,并且可能通过调节Th1/Th2,Treg/Th17的平衡参与肺结核患者细胞免疫进展过程,但具体的变化机制还需要进一步研究。NOD1m RNA和IFN-γ的高表达,二者共同影响肺结核患者的短期预后。有望成为评估肺结核患者短期预后的危险因素。

基于NLRP3及Th1、Th2平衡探讨针灸辅助治疗慢性阻塞性肺疾病的临床价值

目的:研究基于NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)及辅助性T细胞1(Th1)、辅助性T细胞2(Th2)平衡探讨针灸辅助治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)的临床价值。方法:选取2020年1月—2022年9月贵州医科大学附属医院收治的251例COPD患者,通过病历号数表抽签法将其随机分为对照组(n=125)、研究组(n=126)。对照组参照《慢性阻塞性肺疾病诊治指南(2013年修订版)》采取对症治疗;研究组在对照组基础上给予针灸治疗。观察两组治疗前后血液及痰液中NLRP3 mRNA表达水平、白细胞介素1-β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)、Th1[γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]细胞因子水平、Th2[白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-5(IL-5)]细胞因子水平、肺功能、生活质量及治疗期间安全性、随访3个月后再入院率。结果:治疗前,两组痰液及血清NLRP3 mRNA、IL-1、IL-18、IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-5水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组痰液及血清NLRP3 mRNA、IL-1、IL-18、IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-5水平均低于治疗前,且研究组NLRP3 mRNA、IL-1、IL-18、IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-5水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEV_(1))、FEV_(1)占预计值百分比(FEV_(1)%pred)、FEV_(1)/FVC%水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组FVC、FEV_(1)、FEV_(1)%pred、FEV_(1)/FVC%均高于治疗前,且研究组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组慢阻肺评估测试问卷(CAT)评分、改良英国医学研究委员会呼吸困难量表(mMRC)评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组CAT评分、MRC评分低于治疗前,且研究组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗期间并未出现疼痛、包块、局部血肿及感染等不良反应。研究组3个月再入院率为1.59%,低于对照组的10.40%,差异有统计学意义(χ^(2)=8.673,P=0.003)。结论:针灸可改善COPD患者肺功能,调节NLRP3及Th1、Th2细胞因子水平,改善生活质量及呼吸程度,降低再入院风险,安全性高。

外周血miR-29b、miR-139水平与Th1/Th2的相关性及对银屑病的诊断价值

目的探讨外周血微小RNA(miR)-29b、miR-139水平与外周血辅助性T淋巴细胞(Th)1/Th2的相关性及对银屑病的诊断价值。方法选取2020年4月至2021年4月在该院入院治疗的89例银屑病患者为银屑病组,根据银屑病疾病分期将患者分为活动期37例和静止期52例,根据皮损严重程度分为轻度组24例、中度组36例和重度组29例。另选取同期来该院进行体检的体检健康者60例作为对照组。采用实时荧光定量PCR检测外周血miR-29b、miR-139及T细胞转录因子(T-bet)、GATA结合蛋白3(GATA3)水平;流式细胞仪检测外周血Th1、Th2细胞比例;酶联免疫吸附试验检测血清Th1、Th2相关细胞因子水平;Pearson相关分析银屑病患者外周血miR-29b、miR-139水平与Th1/Th2、T-bet、GATA3的相关性;受试者工作特征(ROC)曲线分析外周血miR-139、miR-29b水平对重度银屑病的诊断价值。结果银屑病组miR-139、T-bet、IL-2、IFN-γ水平、Th1细胞比例、Th1/Th2均高于对照组(P<0.05),miR-29b、GATA3、IL-4、IL-10水平、Th2细胞比例均低于对照组(P<0.05);活动期患者miR-139、T-bet、IL-2、IFN-γ水平、Th1细胞比例、Th1/Th2高于静止期患者(P<0.05),miR-29b、GATA3、IL-4、IL-10水平、Th2细胞比例低于静止期患者(P<0.05);Th1细胞比例、Th1/Th2、miR-139、T-bet、IL-2、IFN-γ水平随着皮损严重程度增加呈升高趋势,Th2细胞比例、miR-29b、GATA3、IL-4、IL-10水平随着皮损严重程度增加呈降低趋势(P<0.05);银屑病患者外周血miR-139水平与Th1/Th2、T-bet呈正相关,与GATA3呈负相关(P<0.05);miR-29b水平与Th1/Th2、T-bet呈负相关,与GATA3呈正相关(P<0.05)。miR-139、miR-29b联合诊断重度银屑病的曲线下面积为0.917,灵敏度为93.10%,特异度为81.64%,二者联合诊断效能优于miR-139、miR-29b单独诊断(Z=2.882、1.993,P=0.004、0.043)。结论银屑病患者外周血miR-139水平升高,miR-29b水平降低,与Th1/Th2、Th1/Th2相关细胞水平及转录因子具有一定的相关性,二者联合对银屑病的诊断具有较高效能。

妊娠糖尿病患者血清中FPR2的表达情况与Th1/Th2细胞平衡的相关性研究

目的探讨妊娠糖尿病(GDM)患者血清中甲酰肽受体2(FPR2)的表达情况与辅助性T细胞1(Th1)/辅助性T细胞2(Th2)平衡的相关性。方法采用回顾性研究,将2020年1月至2022年1月于北京市顺义区妇幼保健院进行产检并住院分娩的52例GDM孕妇设为研究组,并选择同期在北京市顺义区妇幼保健院产检和分娩的健康孕妇60名作为对照组。采用实时荧光定量PCR检测两组孕妇血清中FPR2的相对表达水平;采用流式细胞术检测两组孕妇血清中Th1/Th2细胞比例;采用酶联免疫吸附试验检测两组孕妇血清中干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-10水平;采用Pearson法分析GDM患者血清中FPR2的表达水平与Th1/Th2细胞比例之间的相关性。结果研究组患者血清中FPR2、Th1表达水平分别为1.59±0.41、(9.59±2.56)%,均明显高于对照组[0.97±0.25、(8.61±2.02)%],Th2表达水平为(2.06±0.51)%,明显低于对照组[(3.28±0.88)%],且Th1/Th2细胞比例为5.11±1.02,高于对照组(3.20±0.79),差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组患者血清中IFN-γ、IL-2水平分别为(27.96±5.21)、(16.69±4.02)pg/mL,均明显高于对照组[(20.19±4.59)、(14.12±3.86)pg/mL],而IL-4、IL-10水平分别为(11.46±2.36)、(31.52±6.24)pg/mL,均明显低于对照组[(13.09±3.01)、(38.81±7.16)pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson法分析结果显示,GDM患者血清中FPR2的表达与Th1/Th2细胞比例之间呈正相关(r=0.373,P<0.05)。结论GDM患者血清中FPR2高表达、Th1/Th2细胞比例升高,两者呈正相关,FPR2可能通过调节Th1/Th2细胞比例影响GDM的发生。

升降散对脓毒症小鼠 Th1／Th2和 Th17／Treg失衡的干预

目的：观察中药升降散对脓毒症小鼠CD4＋T辅助细胞Th1／Th2和Th17／Treg失衡的干预作用。方法80只小鼠随机分为对照组、假手术组、脓毒症组和升降散组，脓毒症造模后比较升降散干预前后不同时间段各组小鼠Th1、Th2、Th17和Treg细胞占辅助T细胞比例及Th1／Th2、Th17／Treg比值的变化。结果①Th1细胞比例：脓毒症组24 h内持续上升，升降散组24 h内逐渐下降，12 h和24 h脓毒症组均高于对照组、假手术组和升降散组（ P＜0．05或＜0．01）。Th2细胞比例各时间段在各组之间差异均无统计学意义（ P＞0．05）。 Th17细胞比例：升降散组24 h内呈逐渐升高趋势；6 h脓毒症组显著高于对照组、假手术组和升降散组（P＜0．01），12 h和24 h脓毒症组均高于对照组和假手术组（P＜0．05或＜0．01），12 h和24 h升降散组显著高于对照组和假手术组（ P＜0．01）。 Treg细胞比例：脓毒症组、升降散组24 h内呈逐渐升高趋势；各时间段假手术组、脓毒症组和升降散组均高于对照组（P＜0．05或＜0．01），24 h脓毒症组高于假手术组和升降散组（P＜0．05或＜0．01）。②Th1／Th2比值：各时间段脓毒症组均高于对照组（P＜0．05或＜0．01），升降散组与对照组比较差异无统计学意义（P＞0．05），24 h脓毒症组高于假手术组和升降散组（P＜0．05）；Th17／Treg比值：各时间段脓毒症组均高于对照组和假手术组（P＜0．05或＜0．01），6 h脓毒症组显著高于升降散组（P＜0．01），12 h和24 h升降散组显著高于假手术组和对照组（P＜0．01）。结论升降散具有调节脓毒症小鼠CD4＋T辅助细胞Th1／Th2和Th17／Treg失衡的作用。

升降散对脓毒症患者Th1/Th2失衡及相关调节因子的干预

目的研究中药升降散对脓毒症患者血清Th1/Th2失衡及相关调节因子T-bet、GATA-3的干预作用。方法将55例脓毒症患者随机分为常规组(27例)和升降散组(28例),另将健康志愿者9例设为对照组。常规组患者给予西医常规治疗,升降散组患者在西医常规治疗的基础上加用升降散100 m L,每日2次口服或鼻饲,对照组患者予口服安慰剂;3组的疗程均为3 d。比较治疗前后3组患者中医证候评分、白细胞计数(WBC)、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、血清Th1/Th2及其相关转录因子T-bet、GATA-3的水平。结果常规组与升降散组比较,治疗后中医证候评分、WBC、Th1/Th2和T-bet的差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),2组患者治疗后CRP、PCT和GATA3的差异无统计学意义(P>0.05);2组与对照组比较,除GATA3外,其他各项指标差异均有统计学意义(P<0.01)。结论升降散可以改善脓毒症患者中医临床征候和炎症反应指标,对血清Th1/Th2失衡及其相关调节因子T-bet、GATA-3的水平具有干预作用。