TAP26磷酸化对SP-C基因表达调控影响的研究

目的:探讨TTF-1相关蛋白26(TAP26)磷酸化位点对SP-C基因表达调控的影响。方法:采用定点诱变PCR技术产生TAP26的4个磷酸化位点突变体TAP26(S48→A48)、TAP26(S66→A66)、TAP26(T167S168→V167A168)、TAP26(T219→V219);通过体外细胞共转染后荧光素酶报告基因活性值检测技术研究野生型TAP26及其4个突变体质粒对SP-C基因启动子表达活性的影响。结果:荧光素酶报告基因活性值检测结果显示,分别与共转染野生型TAP26和其它3个突变体质粒相比较,共转染TAP26(S66→A66)突变体质粒的荧光素酶活性值最低,经统计分析差异均有统计学意义(P<0.05,n=9)。结论:TAP26磷酸化对促进SP-C基因表达具有非常重要的作用,TAP-26的S66位点则是与TTF-1相互作用从而共同调控SP-C基因表达的一个关键PKC磷酸化位点。

TTF-1相关蛋白26磷酸化位点突变体的构建

目的制备TTF-1相关蛋白26（TAP26）的3个磷酸化位点（S48，S66和T219）的突变体（TAP26（S48→A48）、TAP26（S66→A66）和TAP26（T219→V219））。方法采用定点诱变PCR技术，分别突变掉TAP26的3个磷酸化位点（S48，S66和T219），并获得TAP26的3个相应突变体。结果DNA序列分析结果显示TAP26的3个突变体序列正确。结论通过定点诱变PCR技术，成功构建了TAP26的3个突变体。

甲状腺转录因子-1及相关蛋白26对SP-B基因表达的调控作用

甲状腺转录因子-1(thyroidtranscriptionfactor-1,TTF-1)是调节SP-B基因表达的关键因子。最近研究发现了一种新的蛋白即TTF-1相关蛋白(TAP26),它不仅能与SP-B基因启动子近侧序列相互作用,而且还能与TTF-1形成蛋白复合物,促进SP-B基因的表达。采用染色质免疫沉淀分析证实TAP26是肺细胞中SP-B启动子转录复合物的一个组成部分,为SP-B基因表达的调控提供分子机制。