TBX2基因在头颈鳞癌中甲基化相关的预后分析

目的探究TBX2基因与头颈鳞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)的关系,分析甲基化预后的价值。方法综合利用UCSC Xena数据库、基因表达综合(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库、人类蛋白质图谱(Human Protein Atlas,HPA)数据库、UALCAN数据库挖掘TBX2基因的表达、DNA甲基化和临床相关性,利用基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)法富集TBX2在HNSCC中所参与的信号通路。结果TBX2基因在HNSCC中高表达,TBX2基因高、低表达组HNSCC患者的总生存率(overall survival,OS)无明显差异,但HNSCC中TBX2基因的表达与临床分级分期有关。TBX2基因某些cg位点的低甲基化水平与较差的OS和无进展生存期(progression free survival,PFS)密切相关。GSEA结果显示,TBX2基因主要参与钙信号通路、黏着斑、蛋白酶体等多条通路。结论TBX2基因可作为HNSCC特异性诊断和预后的生物标志物。

TBX2在局部宫颈鳞癌患者中的表达与新辅助化疗疗效的相关性研究

目的探讨NACT疗效的影响因素。方法回顾性收集46例术前行NACT治疗的子宫颈鳞状细胞癌患者临床资料,采用免疫组化法检测患者癌组织TBX2表达水平,分析其与NACT疗效的关系。结果46例患者中,NACT有效的25例患者中,TBX2高表达9例,低表达16例;NACT无效的21例患者中,TBX2高表达17例,低表达4例。两组比较有统计学意义(χ^(2)=9.39,P=0.002)。结论TBX2的表达水平是影响NACT有效性的因素。

Tbx1基因功能下调影响斑马鱼Tbx20和Tbx2表达

目的采用吗啡啉修饰反义寡核苷酸显微注射方法下调斑马鱼Tbx1基因表达,研究斑马鱼Tbx1基因功能下调对其他两个T盒基因Tbx20和Tbx2表达的影响。方法采用吗啡啉修饰的反义寡核苷酸显微注射方法抑制斑马鱼Tbx1基因表达,分别将2.5、5、8、10 ng吗啡啉反义寡核苷酸在斑马鱼0-4细胞期注入胚胎,并构建Tbx20,骨形成蛋白2b(Bmp2b)和Tbx2反义RNA探针,进行整体原位杂交,观察Tbx1基因下调对Tbx20、Bmp2b及Tbx2表达的影响。结果Tbx1吗啡啉寡核苷酸显微注射组胚胎表现出鳃弓、耳囊、心血管系统和胸腺的发育异常。Tbx1基因下调导致Tbx20的表达出现改变,Tbx20在心脏的表达与对照组相比明显下调,神经元的表达范围明显缩小;Tbx1基因功能下调会导致Bmp2b在心脏和咽囊的表达减低,Bmp2b在后部咽囊的表达较前部咽囊减低得更为明显;Tbx1基因功能下调胚胎,Tbx2在鳃弓的表达模式发生改变,48 hpf,Tbx2在鳃弓的表达出现从后向前逐渐减低,鳃弓的表达范围较对照组明显缩小。结论Tbx1在发育过程中,会对其他T盒基因,如Tbx20和Tbx2具有激活或抑制的调控作用。Tbx1对Tbx20的作用可能是通过影响Bmp2b的途径,继发地影响Tbx20的表达。Tbx1基因功能下调,会改变Tbx2在鳃弓的表达模式。

TBX2在葡萄膜黑色素瘤的预后和机制探索

目的:探究T盒转录因子2(T-box transcription factor 2,TBX2)在葡萄膜黑色素瘤(uveal melanoma,UVM)中的表达水平、生存预后、免疫浸润相关性。方法:首先通过TIMER2.0数据库分析正常组织和肿瘤组织中TBX2表达和临床特征,从UCSC Xena数据库下载泛癌的生存数据,使用Cox比例风险模型和Kaplan-Meier曲线分析评估TBX2对预后的预测价值。然后使用cBioPortal数据库分析人源TBX2突变前后生存改变,通过BloodSpot和TIMER2.0数据库探究TBX2与癌症免疫浸润之间的相关性。癌症单细胞状态图谱和基因集变异分析(gene set variation analysis,GSVA)探究其表达与分子机制的相关性。结果:15种肿瘤类型的TBX2 mRNA表达水平显著改变,TBX2是肾上腺皮质癌(adrenocortical carcinoma,ACC)、肾乳头状细胞癌(kidney renal papillary cell carcinoma,KIRP)、UVM典型的生存预后标志物。其突变与生存状态无明显相关性,在UVM中T淋巴细胞浸润水平提高导致不良预后风险升高。此外,在UVM中TBX2通路富集至ATP结合盒(ATP-binding cassee transporter,ABC)转运蛋白、DNA修复和损伤。结论:TBX2在UVM的生存和免疫浸润中起着关键作用,将来可能作为一种UVM预后及免疫治疗效果的预测因子。

子宫内膜样腺癌中TBX2、PAX9的表达及其相关性

目的探讨TBX2、PAX9在正常子宫内膜、子宫内膜增殖症和子宫内膜样腺癌(endometrioid adenocarcinoma,EA)组织中的表达及临床病理学意义。方法采用组织芯片技术和免疫组化检测30例正常子宫内膜组织、30例单纯性增生内膜、30例复杂伴不典型性增生内膜、82例EA组织中TBX2、PAX9蛋白的表达。结果 TBX2蛋白在子宫内膜样腺癌中的阳性表达率明显高于正常子宫内膜和子宫内膜增殖症(P均<0.01),TBX2过表达与组织学分级、临床分期、浸润程度均有相关性(P<0.01,P<0.05,P<0.01),与淋巴结转移无相关性(P>0.05);PAX9蛋白在子宫内膜样腺癌中的阳性表达率明显高于正常子宫内膜、子宫内膜单纯性增生(P均<0.01),而和复杂伴不典型性增生之间没有统计学意义(P>0.05),在复杂伴不典型增生中表达明显高于正常子宫内膜和单纯性增生内膜(P均<0.01),PAX9阳性表达与组织学分级、临床分期、浸润程度均有相关性(P<0.01,P<0.01,P<0.05),但与淋巴结转移无相关性(P>0.05)。TBX2与PAX9蛋白呈正相关(rs=0.427,P<0.01)。结论 TBX2和PAX9均在子宫内膜样腺癌中发生、发展中发挥重要作用,联合检测其表达可为子宫内膜样腺癌的早期诊断、预后判断提供有价值的指标。

TBX2及p53在甲状腺癌组织中的表达及意义

目的探讨甲状腺癌组织中TBX2及p53表达的临床意义。方法应用免疫组织化学技术,检测正常甲状腺及甲状腺癌组织中TBX2及p53表达。结果 TBX2及p53在甲状腺癌组织中的阳性表达明显高于其在正常甲状腺组织中的阳性表达(P<0.05);TBX2及p53在甲状腺癌组织中的阳性表达强度与甲状腺癌的组织学分型及分化程度有关(P<0.05)。结论 TBX2及p53在甲状腺癌的发生、发展中起着重要的作用,检测甲状腺癌中TBX2及p53表达可为临床甲状腺癌的诊断、治疗方案的选择及预后评估提供参考指标,同时也为甲状腺癌的治疗提供新靶点。

乳腺浸润性导管癌中TBX2和MDM2的表达及临床意义

目的探讨TBX2和MDM2蛋白在乳腺浸润性导管癌组织中的表达及临床意义。方法应用免疫组化SP法检测TBX2、MDM2蛋白在90例乳腺浸润性导管癌和30例正常乳腺组织中表达。结果 90例乳腺癌浸润性导管癌中TBX2和MDM2蛋白的阳性率分别为75.6%和81.1%,明显高于正常乳腺组织中的阳性率16.7%、23.3%,差异均有统计学意义(P<0.01)。TBX2过表达与病理分级、临床分期、腋窝淋巴结转移密切相关(P均<0.05),与患者年龄、肿瘤大小无关(P>0.05)。MDM2过表达与病理分级、腋窝淋巴结转移密切相关(P均<0.05),与患者年龄、肿瘤大小、临床分期无关(P>0.05)。TBX2和MDM2蛋白在乳腺癌表达呈正相关(rs=0.240,P<0.05)。结论 TBX2、MDM2蛋白在乳腺癌组织中的异常表达,可能在乳腺癌的发生、发展过程中起重要作用,联合检测两者可为监测乳腺癌的预后及治疗提供理论依据。

Wnt/β-catenin信号通路可能调节胰腺癌细胞TBX2基因表达

目的探讨Wnt/β-catenin信号途径是否参与胰腺癌细胞中TBX2基因的表达调节。方法运用免疫细胞化学SP法,检测胰腺癌细胞株SW1990中是否有Tbx2和β-catenin蛋白表达;以不同浓度的糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)的特异性抑制剂氯化锂作用于SW1990,应用RT-PCR检测TBX2基因及Wnt/β-catenin信号通路的已知靶基因c-myc的mRNA表达变化;Western印迹法检测β-catenin、Tbx2蛋白的表达变化。结果在SW1990细胞中有Tbx2和β-catenin蛋白表达;氯化锂作用于SW1990细胞后,TBX2、c-myc、β-catenin表达水平均升高(P<0.05);Tbx2蛋白随着β-catenin表达水平的升高而升高(r=0.583,P<0.05)。结论Wnt/β-catenin信号通路可能参与了胰腺癌细胞中TBX2基因表达的调节。

TBX2基因3'非翻译区位点rs59382073与汉族人群散发型先天性心脏病的易感性密切相关

目的分析TBX2基因3＇UTR变异位点与汉族人群散发型先天性心脏病（CHD）的遗传易感性是否关联,初步探讨其可能的发病机制。方法纳入2010年8月至2012年4月山东济南军区总医院心血管病研究所诊断的非综合征型汉族CHD为CHD组,以同期医院和社区体检的健康儿童为对照组。选择CHD组和对照组各24例行TBX2 3＇UTR测序。根据测序结果在CHD组和对照组分别行SNa Pshot基因分型和关联分析;通过细胞转染及荧光素酶检测对阳性位点进行功能分析。结果 CHD组纳入768例,年龄（6.1±4.8）岁,男383例（49.9%）;对照组纳入660例,年龄（6.5±3.2）岁,男354例（53.6%）。124例CHD和24例对照行TBX2基因3＇UTR区测序发现3个已知的SNPs位点：rs59382073、rs1058004和rs729782,未检出新发SNPs位点。2样本采集中期CHD和对照组各288例样本的关联分析显示,rs59382073的基因型在CHD组和对照组的分布差异有统计学意义（P=0.012）;余2个SNPs在两组间差异无统计学意义（P〉0.5）,后续样本未行该2个SNPs检测。3全样本关联分析显示,TBX2 3＇UTR rs59382073位点与散发型CHD的患病风险密切相关,GT/TT基因型较GG基因型可导致CHD的患病风险增加2.13倍（OR=2.13,95%CI：1.51~2.99,P=1.44×10-5）;进一步分层分析显示,与GG基因型相比,GT/TT基因型增加2.75倍圆椎动脉干畸形（OR=2.75,95%CI：1.57~4.81,P=3.99×10-4）、3.18倍法洛四联症（OR=3.18,95%CI：1.53~6.61,P=1.90×10-3）和1.70倍室间隔缺损（OR=1.70,95%CI：1.17~2.46,P=5.14×10-3）的患病风险。4细胞水平的功能研究提示,与G等位基因相比,转染T等位基因可分别导致HEK293 T及H9C2细胞的荧光素酶活性下降29.2%和33.6%。结论 TBX2 3＇UTR rs59382073位点可显著增加汉族人群散发型CHD的患病风险;其不同等位基因的荧光素酶表达水平存在差异,为潜在的功能位点。

TBX2和PAX9在膀胱尿路上皮癌中高表达

目的研究TBX2和PAX9在膀胱尿路上皮癌中的表达及临床意义。方法收集武汉大学人民医院病理科2006-2009年有完整临床和病理资料的膀胱尿路上皮癌存档蜡块50例和5例癌旁组织,采用免疫组织化学S-P法检测50例膀胱尿路上皮癌和5例癌旁组织中TBX2和PAX9的表达水平;采用HPIAS-1000高清晰度彩色病理图文报告管理系统,对TBX2和PAX9的表达进行定量分析,并用SPSS13.0软件对各组免疫组织化学反应阳性颗粒的平均光密度、阳性面积率做单因素方差分析和SNK(q)检验。结果 TBX2和PAX9在膀胱尿路上皮癌中均高表达,与癌旁组织相比,差异有显著性;经Spearman等级相关分析显示,TBX2和PAX9表达呈正相关。结论 TBX2和PAX9对膀胱尿路上皮癌诊断提供参考价值。

TBX2和PAX9在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义探讨

目的探讨TBX2和PAX9在甲状腺乳头状癌中的表达及临床病理学意义。方法取得60例甲状腺乳头状癌组织及20例癌旁正常甲状腺组织标本,用免疫组化法检测TBX2和PAX9的蛋白表达情况,用RT-PCR法检测TBX2 mRNA和PAX9 mRNA的相对表达量,并分析两者与患者临床病理因素之间的关系。结果免疫组化和RT-PCR结果均显示TBX2和PAX9在甲状腺乳头状癌组织中的表达明显高于正常甲状腺组织,差异有统计学意义(P<0.01);TBX2和PAX9的表达与分化程度、病理分期(pTMN)及淋巴转移密切相关(P<0.05);并且甲状腺乳头状癌组织中TBX2蛋白与PAX9蛋白的表达呈正相关(r=0.471,P<0.01)。结论 TBX2和PAX9参与了人类甲状腺乳头状癌的发生、发展,表达水平随着甲状腺乳头状癌组织恶性程度的增高而增高,可作为衡量食管鳞状细胞癌恶性程度的肿瘤分子标志物。

TBX2和MDM2在子宫内膜样腺癌中的表达及相关性

目的探究T-box转录因子TBX2与鼠双微体基因MDM2在正常增生期内膜、各型增生内膜和子宫内膜样腺癌中的表达及相关性。方法组织芯片技术结合免疫组化SP法检测92例子宫内膜样腺癌、30例复杂伴不典型性增生内膜、30例单纯性增生内膜及30例正常增生期内膜中TBX2与MDM2蛋白表达。结果 TBX2阳性表达率在子宫内膜样腺癌(76.1%,70/92)中显著高于正常增生期内膜及单纯性增生内膜(30.0%,9/30;36.7%,11/30),亦显著高于复杂伴不典型增生内膜(43.3%,13/30),差异均具有统计学意义(P<0.01),TBX2表达过高与病理学分级、肌层浸润及临床分期均有关(P<0.01,P<0.01,P<0.05),与淋巴结转移不具相关性(P>0.05);MDM2蛋白在子宫内膜样腺癌及复杂伴不典型增生中阳性率分别为81.5%(75/92)和43.3%(13/30),显著高于正常子宫内膜及单纯性增生内膜(10.0%,3/30;20.0%,6/30),差异均有统计学意义(P<0.01),MDM2阳性表达与病理学分级、肌层浸润无关,与临床分期及淋巴结转移也不具相关性(P均>0.05)。TBX2与MDM2蛋白表达呈正向相关(rs=0.346,P<0.01)。结论 TBX2和MDM2蛋白在子宫内膜样腺癌中异常高表达,并在其发生及恶化进展中扮演一定角色,为子宫内膜样腺癌的靶点探寻及预后评判提供了新的方向。

TBX2在甲状腺癌组织中的表达及其临床意义

目的:检测TBX2在甲状腺癌组织中的表达,探讨其临床意义。方法:应用RT-PCR方法检测TBX2在9例正常甲状腺、13例甲状腺腺瘤及67例甲状腺癌组织(其中甲状腺乳头状癌28例,甲状腺滤泡癌23例,甲状腺髓样癌14例,甲状腺未分化癌2例)中的表达。结果:TBX2mRNA在甲状腺癌组织中的阳性表达(阳性表达56例,占83.6%)明显高于其在正常甲状腺(阳性表达3例,占33.3%)及甲状腺腺瘤组织(阳性表达6例,占46.2%)中的阳性表达(P<0.05),差异有显著性;TBX2mRNA在甲状腺乳头状癌、甲状腺滤泡癌及甲状腺髓样癌(甲状腺未分化癌例数太少,无统计学意义)组织中的阳性表达强度(相对系数)分别为1.776±0.382、2.627±0.532、2.937±0.481;P<0.05,差异具有显著性。TBX2mRNA在甲状腺癌组织中的阳性表达强度与甲状腺癌组织的分化程度及组织学分型有关。结论:TBX2可能是甲状腺癌发生、发展的促进因子,并有可能成为甲状腺癌临床诊断及预后评估的又一重要参考指标。

The role of Tbx2 in pancreatic cancers and its regulation by Wnt/β-catenin signaling

Objective: To investigate the expression of Tbx2 protein in pancreatic cancer tissues and its molecular regulation mechanism by Wnt/β-catenin signaling. Methods: 49 pancreatic cancer and 13 non-cancer tissue specimens were obtained and examined the expression of Tbx2, and the correlation between the expression of Tbx2 and clinicopathological parameters was analyzed. The immunohistochemistry, immunocytochemistry, RT-PCR and Western blot assay methods were used to detect the changes of expression levels of β-catenin and Tbx2. Results: Tbx2 was amplified in 34 of 49 pancreatic cancers, and in 13 non-cancer tissues, only one sample amplified. The further study demonstrated that Tbx2 had a significant positive correlation with tumor differentiation degree and clinical stage, but it did not relate to the sex, age and the disease region. Inhibi-tion of β-catenin degradation through the treatment of pancreatic cancer cells SW1990 with different concentrations of lithium chloride indicated that accumulation of β-catenin was sufficient to induce TBX2 expression. Conclusion: TBX2 gene plays an important role in the occurrence and development of pancreatic cancer and the accumulation of β-catenin contributes to the expression of TBX2. The Wnt/β-catenin signaling pathway participates the regulation of TBX2 in pancreatic cancer cells.

恶性外周神经鞘膜瘤中TBX2基因突变及相关蛋白表达的临床意义

目的:检测恶性外周神经鞘膜瘤基因组异常并探讨TBX2、CHK2和p53在恶性外周神经鞘膜瘤中的表达及其临床意义。方法:收集天津医科大学肿瘤医院骨与软组织肿瘤科1991年1月至2011年12月手术切除并经病理证实的恶性外周神经鞘膜瘤组织标本63例。从中选取新鲜且DNA质量合格的肿瘤样本12例,采用第二代测序(next-generation sequencing,NGS)方法,检测人恶性外周神经鞘膜瘤组织样本基因组异常情况。应用免疫组织化学方法检测63例恶性外周神经鞘膜瘤组织样本中TBX2、CHK2和p53的表达情况。结果:12例恶性外周神经鞘膜瘤组织样本中,有1例TBX2基因突变。63例恶性外周神经鞘膜瘤组织样本中,TBX2、CHK2和p53的高表达率分别为60.3%(38/63)、47.6%(30/63)及30.2%(19/63)。TBX2的高表达与AJCC分期、复发和转移有显著相关性(P<0.05);TBX2的表达与CHK2的表达呈正相关(r=0.254,P=0.045),CHK2的表达与p53的表达呈正相关(r=0.343,P=0.006)。高表达TBX2、CHK2和p53的无病生存时间及总生存时间均显著低于低表达组(P<0.05),且TBX2、CHK2和p53均为恶性外周神经鞘膜瘤的独立预后因素。结论:TBX2及其相关蛋白的表达可能在恶性外周神经鞘膜瘤发生发展过程中起重要作用,检测其表达有望为MPNST预后提供理论依据。

转录抑制基因TBX2在甲状腺癌中的表达及其临床病理意义

目的检测甲状腺癌组织中TBX2的表达,探讨其表达的临床意义。方法应用免疫组织化学技术,检测正常甲状腺、甲状腺腺瘤及甲状腺癌组织中TBX2的表达。结果 TBX2在甲状腺癌组织中的阳性表达明显高于其在正常甲状腺及甲状腺腺瘤组织中的阳性表达(P<0.05);TBX2在甲状腺癌组织中的阳性表达强度与甲状腺癌的组织学分型及分化程度有关(P<0.05)。结论 TBX2在甲状腺癌的发生、发展中起重要作用,检测甲状腺癌中TBX2的表达,可为临床甲状腺癌的诊断、治疗方案的选择及预后评估提供参考指标,同时也为甲状腺癌的治疗提供新靶点。

Tbx2基因在胚胎组织器官发育中的作用研究进展

T-box基因家族属于发育调控相关转录因子基因家族,在脊椎和非脊椎动物胚胎发育过程中发挥重要作用。转录抑制因子Tbx2是T-box基因家族重要成员之一,其编码产物作为转录抑制因子可调控胚胎发育。目前多项研究表明,Tbx2参与了胚胎心脏、四肢、骨骼、胰腺、乳腺及黑色素细胞等的发育,Tbx2基因突变或缺失会导致心脏、四肢、骨骼、乳腺、胰腺、黑色素细胞等发育异常。

TBX2亚家族基因在非小细胞肺癌中的表达及其与预后的关系

目的分析TBX2亚家族基因在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与预后的关系,对机制进行初步探讨。方法应用生物信息学平台、免疫组织化学染色分析TBX2亚家族基因在NSCLC中的表达及其与预后的关系,分析TBX2亚家族基因间的共表达情况;采用MethHC数据库分析TBX2低表达情况与其基因启动子区域甲基化的关系。结果TBX2亚家族基因在NSCLC组织中的表达水平低于正常肺组织(P<0.05),并与患者的总生存率具有相关性(P<0.05)。MethHC分析显示,TBX2亚家族基因在NSCLC中的基因启动子区域的甲基化程度明显高于正常肺组织(P<0.05)。结论TBX2亚家族基因可能成为NSCLC的新型检测标志物,其低表达是NSCLC预后不良的因素,其低表达现象可能与NSCLC患者启动子区域的甲基化程度增高相关。

复合荧光RT-PCR技术检测TBX2和p53在甲状腺癌表达及临床诊断意义

目的探讨TBX2、p53在正常甲状腺组织、甲状腺癌组织中的表达及临床诊断意义。方法采用复合荧光RT-PCR技术检测45例甲状腺癌组织和10例正常甲状腺组织中TBX2、p53基因mRNA的表达。结果不同病理学类型甲状腺癌TBX2基因mRNA表达峰高与β-actin基因mRNA表达峰高之比在(1.283 2±0.354 5)^(2.37±0.488 9),较正常甲状腺明显高(P<0.01);不同分化程度甲状腺癌TBX2基因、β-actin基因mRNA表达平均峰高比值较正常甲状腺明显高(P<0.01)。不同病理学类型甲状腺癌p53基因mRNA表达峰高与β-actin基因mRNA表达峰高之比在(1.196 4±0.326 7)^(2.838 6±0.467 9),较正常甲状腺明显高(P<0.01);不同分化程度甲状腺癌p53基因、β-actin基因mRNA表达平均峰高比值较正常甲状腺明显高(P<0.01)。结论联合检测TBX2和基因mRNA表达可为甲状腺癌的早期诊断、预后判断提供有价值的指标。

cFLIP、TBX2在颅内外鳞癌中的表达及意义

目的探讨颅内外鳞癌中cFLIP及TBX2的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测了57例颅内外鳞癌、38例癌旁不典型增生及30例正常组织中cFLIP、TBX2蛋白表达情况。结果颅内外鳞癌组织中cFLIP及TBX2的阳性表达率明显高于不典型组织及正常组织。cFLIP及TBX2的表达水平与患者性别、部位之间的差异无统计学意义(P>0.05),而肿瘤TNM分期及淋巴结转移的差异有统计学意义(P<0.05)。结论 cFLIPL及TBX2在颅内外鳞癌中的表达水平较高,两者可能在鳞癌发生、发展中发挥重要作用。