TCF21在肺腺癌中的表达及其对肿瘤血管生成的影响

目的探讨核转录因子21(TCF21)在肺腺癌组织中的表达及其对肺腺癌血管生成的影响。方法收集济南市第八人民医院配对新鲜肺腺癌组织标本20例,采用蛋白质免疫印迹(Western blot)方法检测TCF21在肺腺癌组织和癌旁组织中的表达。选用人肺腺癌细胞系A549,通过慢病毒感染肺腺癌细胞,构建TCF21过表达稳转细胞株,利用Western blot技术检测对照组、空载组和过表达组缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子A(VEGFA)蛋白表达量,并通过体外血管形成实验观察TCF21对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)成管能力的影响。结果TCF21在新鲜肺腺癌组织中的表达低于对应的癌旁组织(P<0.05)。肺腺癌A549细胞系过表达TCF21后,与对照组MOCK组、对照组Vector组相比,HIF-1α、VEGF蛋白表达显著降低,成管实验显示HUVEC的管长度和节点明显减少。结论TCF21在肺腺癌组织中低表达,具有抑制肺腺癌血管生成能力,为临床抗肿瘤治疗提供新的潜在靶点。

抑癌基因TCF21对肺癌细胞A549增殖、凋亡和迁移的影响

背景与目的转录因子21(transcription factor 21,TCF21)是新近发现的抑癌基因,其在多种肿瘤中具有抑癌功能,本研究旨在探讨TCF21基因对人肺癌A549细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法利用慢病毒转染技术在肺癌A549细胞中高表达TCF21基因,以荧光定量PCR、Western blot分析目的基因的表达,并采用Transwell、MTT法、流式细胞术检测TCF21高表达对A549迁移、增殖、凋亡的影响。结果成功在肺癌细胞株A549中高表达TCF21,且高表达TCF21后A549的细胞生长和迁移能力受抑制、凋亡率增高。结论抑癌基因TCF21可抑制A549细胞的增殖和迁移、诱导凋亡。

抑癌基因TCF21启动子甲基化在肾癌诊断及预后中的意义

目的探讨TCF21启动子甲基化在肾癌诊断与预后中的意义。方法使用焦磷酸测序仪对样本的TCF21基因启动子甲基化水平进行定量检测,并进行统计学分析。结果肾癌组织及尿液中TCF21基因甲基化水平明显升高(P=0.000,P=0.0 0 0)。肾癌组织T C F 2 1基因甲基化水平与年龄(P=0.003)、吸烟史(P=0.018)、Fuhrman分级(P=0.046)及临床分期(P=0.048)有关,TCF21甲基化水平与年龄(r=0.403、P=0.002)、吸烟史(r=0.321、P=0.017)和Fuhrman分级(r=0271、P=0.045)呈正相关。肾癌尿液中TCF21甲基化水平与肿瘤大小(P=0.000)、Fuhrman分级(P=0.013)及临床分期(P=0.020)有关,TCF21甲基化水平与肿瘤大小(r=0.662、P=0.000)、Fuhrman分级(r=0.662、P=0.010)和临床分期(r=0.662、P=0.017)呈正相关。TCF21高甲基化组(>35.42%)与TCF21低甲基化组(≤35.42%)患者术后生存率和总生存率差异有统计学意义(P=0.000,P=0.000)。肾癌组织中TCF21甲基化水平诊断肾癌的ROC曲线下面积高于尿液样本,差异具有统计学意义(P=0.004)。结论 TCF21与肾细胞癌的发生、发展及预后有关。联合检测肾细胞癌组织标本和尿液标本可作为诊断肾癌及判断预后等生物学行为的重要指标。

肾癌中TCF21与KISS-1的表达及调控关系

目的:探讨TCF21与KISS-1在肾癌组织中的表达和相关性以及二者之间的调控关系。方法:实时PCR检测原发未转移肾癌和原发伴转移肾癌组织中TCF21和KISS-1的表达。应用RNA干扰技术沉默Caki-1细胞中TCF21的表达,Western blot检测TCF21和KISS-1蛋白的表达。结果:与原发未转移肾癌相比,原发伴转移肾癌组织中TCF21和KISS-1的表达均显著下调,二者呈显著正相关;转染后TCF21和KISS-1蛋白的表达均显著下调。结论:TCF21和KISS-1与肾癌的侵袭转移相关,TCF21在肾癌细胞中能够正性调节KISS-1的表达。

STAT3信号通路抑制剂AG490协同TCF21促进卵巢癌细胞凋亡的实验研究

目的:探讨信号转导与转录因子3(STAT3)信号通路抑制剂AG490对过表达转录因子21(TCF21)的卵巢癌细胞凋亡的影响。方法:卵巢癌细胞ES-2转染TCF21过表达载体,Western blot检测转染后细胞中TCF21表达情况。ES-2细胞分为对照组(未转染且正常培养)、过表达组(转染TCF21过表达载体)、抑制剂组(未转染的细胞经过STAT3信号通路抑制剂处理)、联合组(STAT3信号通路抑制剂处理过表达TCF21的细胞)。噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)、剪切后的Caspase-3(Cleaved Caspase-3)蛋白表达。结果:转染TCF21过表达载体的ES-2细胞中TCF21表达水平升高明显高于对照组(P<0.05)。过表达组和抑制剂组细胞增殖率和p-STAT3/STAT3水平明显低于对照组且明显高于联合组(P<0.05)。过表达组和抑制剂组细胞凋亡率和Cleaved Caspase-3水平明显高于对照组且明显低于联合组(P<0.05)。结论:STAT3信号通路抑制剂能够协同TCF21促进卵巢癌细胞凋亡并抑制卵巢癌细胞增殖。

TCF21基因与肿瘤关系的研究进展

转录因子21(TCF21)是近年日受关注的新的抑癌基因,位于人染色体6q23-24区,对细胞的生长与分化具有重要意义。TCF21能调控下游基因的表达,与多种恶性肿瘤的发生和进展密切相关。本文将对TCF21基因与肿瘤关系的研究进展作一综述。

TCF21基因对人肺癌A549细胞裸鼠成瘤的影响

目的:通过观察转录因子21(TCF21)基因对人肺癌A549细胞裸鼠成瘤的影响,探讨TCF21在非小细胞肺癌(NSCLC)发生、发展中的作用。方法:利用慢病毒感染在人肺癌A549细胞中过表达TCF21,并进行Western blotting验证。实验组、阴性对照组以及空白组细胞接种于BALB/c裸鼠左侧腋窝皮下,观察裸鼠成瘤情况,并绘制生长曲线。计算体积抑瘤率。结果:TCF21成功过表达,实验组较阴性对照组及空白组瘤体生长速度慢,肿瘤终体积分别为(620.08±263.07)vs.(1 406.77±351.14)vs.(620.08±263.07)mm3(P<0.05)。结论:TCF21基因过表达能有效抑制NSCLC裸鼠成瘤和移植瘤生长,表明TCF21在NSCLC发生、发展中起到重要作用,并有可能成为NSCLC靶向治疗的潜在新靶点。

TCF21基因对肺腺癌A549细胞DDP化疗及放疗敏感性的影响

目的为探讨转录因子21(TCF21)基因对人肺癌A549细胞放化疗敏感性的影响。方法利用慢病毒转染技术在肺癌A549细胞中高表达TCF21基因,以荧光定量PCR、Western blot分析目的基因的表达,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测高表达TCF21肺腺癌A549细胞对顺铂(DDP)化疗敏感性的影响,平板克隆实验检测高表达TCF21肺腺癌A549细胞对放疗敏感性的影响。结果在72h时,随着DDP浓度的增高(0、0.625、1.250、2.500、5.000、10.000mg/L),各组细胞的抑制率相应增高,高表达组各个药物浓度时的抑制率明显高于空载体组与未转染组(P<0.05),而后两者之间无明显差异;过表达TCF21组随着药物浓度及时间及的增加,高表达组抑制率相应增高(P<0.05);接受X照射后,未转染组、未转染+放疗组、空载体组、空载体+放疗组、高表达组及高表达+放疗组克隆形成率分别为:95.17%±2.85%、88.20%±2.03%、93.80%±4.17%、85.60%±2.42%、71.67%±3.21%、56.00%±2.65%。结论 TCF21基因高表达能显著增强肺癌A549细胞对放疗及DDP化疗敏感性。

TCF21、Bax在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的探讨抑癌基因TCF21及凋亡相关基因Bax在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及临床意义。方法收集广西宾阳县人民医院2013～2015年胸外科切除的NSCLC标本共44例（含癌及癌旁）。采用免疫组织化学方法（ABC法）检测TCF21、Bax在肺癌组织及正常组织中的表达,分析NSCLC组织中TCF21、Bax的表达及与临床病理特征的关系。结果在肺癌组织及癌旁组织中,TCF21的阳性率为34.09%vs.56.81%,差异有统计学意义（P〈0.05）,Bax的阳性率分别为50.00%vs.44.10%,差异无统计学意义（P〉0.05）;在癌组织中,随着肿瘤分化程度的降低（高、中、低）,TCF21与Bax的阳性表达率依次降低（53.33%vs.28.57%vs.12.50%,P〈0.05）、（80.00%vs.38.10%vs.25.00%,P〈0.05）。TCF21、Bax在有淋巴结转移和无淋巴结转移的阳性率为21.21%vs.72.73%（P〉0.05）、36.36%vs.90.91%（P〈0.05）,无淋巴结转移的癌组织中TCF21、Bax阳性率较高。TCF21、Bax在TNM分期I＋II期和III期阳性率为44.12%vs.00.00%（P〈0.05）、29.41%vs.40.00%（P〉0.05）。结论 TCF21在癌组织中表达下调与Bax呈正相关,与肿瘤的分化程度、淋巴结转移以及TNM分期有关,可能提示肿瘤恶性程度及预后。

肺腺癌组织中TCF21、VEGF表达与微血管密度及预后的相关性分析

目的探讨肺腺癌中肿瘤转移相关基因转录因子21(transcription factor 21,TCF21)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达与微血管密度(microvessel density,MVD)及预后的相关性。方法采用免疫组化SP法检测肺腺癌及癌旁正常组织中TCF21、VEGF的表达及MVD值,结合临床病理特征进行相关性分析。结果TCF21、VEGF在肺腺癌组织中的阳性率分别为45.1%(41/91)和60.4%(55/91);TCF21、VEGF表达及MVD值与肺腺癌分化程度、TNM分期及淋巴结转移有相关性(P<0.05)。肺腺癌中TCF21阳性组MVD值低于阴性组(P<0.05);肺腺癌中VEGF阳性组中MVD值高于阴性组(P<0.05);肺腺癌组织中TCF21与VEGF表达呈负相关(r=-0.668,P<0.05),与MVD值呈负相关(r=-0.542,P<0.05);VEGF表达与MVD值呈正相关(r=0.468,P<0.05)。生存分析显示,TCF21阳性肺腺癌患者的生存期明显高于阴性患者;肺腺癌中VEGF阳性+MVD高表达组患者生存期明显低于阴性组。结论TCF21可能在肺腺癌的血管生成中发挥重要作用,为肺腺癌的治疗提供新的预测指标和靶点;TCF21、VEGF、CD34均与患者预后有相关性,联合检测可作为肺腺癌恶性程度的评判指标。

非小细胞肺癌组织中TCF21的表达及意义

目的：检测非小细胞肺癌（NSCLC）中抑癌基因TCF21蛋白的表达情况，探讨其与NSCLC各种临床病理特征间的关系。方法非选择性入组肺癌患者206例（观察组），其中鳞癌86例、腺癌及腺鳞癌99例、其它非小细胞肺癌21例；非肺癌组60例（对照组）；通过免疫组化（SP法）检测各种组织TCF21表达情况，分析其与患者各项临床指标及预后的关系。结果在观察组中TCF21阳性率明显低于对照组（P〈0.05）。TCF21的低表达、与肿瘤的临床分期、分化程度、淋巴结转移及5年生存率密切相关（P〈0.05）。结论 TCF21基因在NSCLC的发生、发展中起到重要作用，它的功能缺失可能是肺癌发生发展的主要机制之一；TCF21基因的表达情况可以作为NSCLC肿瘤转移和预后的指标。

TCF21基因对鸡前脂肪细胞增殖的影响

实验旨在研究TCF21基因在鸡前脂肪细胞增殖过程中的功能。以鸡永生化前脂肪细胞系(ICP1)和体外分离培养的鸡原代前脂肪细胞为实验材料,首先利用qRT-PCR实验方法分析TCF21在ICP1细胞和鸡原代前脂肪细胞增殖过程中的表达规律,其次利用CCK-8比色法研究过表达和干扰TCF21基因对鸡前脂肪细胞增殖过程中细胞数的影响,最后利用qRT-PCR实验方法分析细胞增殖过程中标志基因PCNA、cyclinD1和Ki67的表达情况。结果表明:TCF21基因在ICP1细胞和体外分离培养的鸡原代前脂肪细胞的增殖过程中均呈下降趋势;过表达TCF21基因抑制鸡前脂肪细胞的增殖,且细胞增殖标志基因PCNA、cyclinD1和Ki67的mRNA表达水平下调;干扰TCF21基因对鸡前脂肪细胞增殖无明显影响。综上所述,TCF21可能对鸡前脂肪细胞的增殖有一定的抑制作用。

TCF21在肿瘤中的研究进展

TCF21又名POD-1,是编码转录因子21的基因,属于碱性螺旋-环-螺旋（b HLH）家族。人类的TCF21基因全长6 417 bp,位于6号染色体区域6q23q24。它在肺、肾脏、肠、心脏间质细胞[1]和肾小球上皮细胞的间叶细胞中表达[2]。TCF21对细胞生长和分化有重要作用。

KAI1、TCF21及PTEN与非小细胞肺癌淋巴结微转移关系的研究

目的研究KAI1、TCF21及PTEN与非小细胞肺癌淋巴结微转移的关系。方法回顾性分析本院2005年1月至2010年12月诊治的pN0期非小细胞癌(NSCLC)患者,按5年生存期分为复发组[pN0(+)组]、稳定组[pN0(-)组]。应用CK20mRNA、MUC1mRNA,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测pN0期复发组NSCLC淋巴结微转移情况,应用免疫组化法检测KAI1,TCF21及PTEN在淋巴结中表达情况,并分析其与淋巴结微转移之间关系。结果 56例pN0期NSCLC患者,其中复发组淋巴结微转移患者22例(39.29%),稳定组非淋巴结微转移患者34例(60.71%),且淋巴结微转移患者上述因子KAI1、TCF21及PTEN水平明显低于非淋巴结微转移患者(P <0.05)。结论在NSCLC患者中,KAI1、TCF21及PTEN的表达水平与淋巴结微转移有关,其表达情况可以作为非小细胞肺癌转移及预后的指标。

下调miR-374a通过靶向TCF21抑制宫颈癌细胞SiHa增殖、迁移、侵袭的分子机制

目的:阐明下调miR-374a靶向转录因子21(TCF21)调控宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭的分子机制。方法:采用Realtime PCR法检测微小RNA(miR)-374a在正常宫颈上皮细胞和宫颈癌细胞中的表达变化。在宫颈癌细胞Si Ha中转染miR-374a inhibitor,MTT检测细胞增殖,Transwell小室检测细胞侵袭以及迁移能力变化,Western blot检测细胞中基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达变化。在线靶基因预测软件预测miR-374a的靶基因可能为TCF21,荧光素酶报告系统鉴定靶向关系。在宫颈癌细胞Si Ha中共转染miR-374a inhibitor和TCF21 siRNA,检测细胞增殖、侵袭、迁移变化。结果:miR-374a在正常宫颈上皮细胞中的表达水平明显低于宫颈癌细胞。转染miR-374a inhibitor后的宫颈癌细胞Si Ha增殖、迁移和侵袭能力下降,细胞中MMP-2和MMP-9蛋白表达减少。miR-374a靶向负调控TCF21表达。TCF21 siRNA逆转miR-374a inhibitor对宫颈癌细胞Si Ha增殖、侵袭和迁移的抑制作用。结论:下调miR-374a通过靶向TCF21抑制宫颈癌细胞Si Ha增殖、迁移、侵袭。

TCF21与Caspase-3在非小细胞肺癌组织中的表达及意义

目的探讨TCF21与Caspase-3在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及意义。方法收集广西宾阳县人民医院2013-01-2015-01外科手术切除的NSCLC标本共44例（含癌及癌旁组织）。采用实时荧光定量PCR（RT-PCR）技术检测TCF21与Caspase-3在肺癌组织及正常组织中的表达,分析NSCLC组织中TCF21与Caspase-3的表达及与临床分期的关系。结果 TCF21和Caspase-3在NSCLC组织中表达明显低于癌旁正常肺组织[（0.36±0.70）vs（1.00±0.00）、（0.62±0.56）vs（1.00±0.00）,P〈0.01],且二者在肺癌TNMⅢ期中的表达较Ⅰ＋Ⅱ期的表达量明显降低[（0.05±0.06）vs（0.48±0.79）、（0.17±0.20）vs（0.78±0.56）,P〈0.01]。TCF21和Caspase-3在NSCLC组织中的表达呈正相关。结论 TCF21和Caspase-3低表达可能促进了肿瘤的恶性增殖及转移,联合检测TCF21和Caspase-3对判断NSCLC恶性程度、转移潜能及预后有重要的临床意义。

抑癌基因TCF21重组腺病毒载体的构建及鉴定

目的：利用大肠杆菌BJ5183细菌内同源重组法构建重组腺病毒pAd-TCF21载体。方法设计TCF21cDNA 扩增引物，从真核表达载体pCMV-SPORT6.1-TCF21中扩增TCF21的DNA序列，与腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV进行连接，构成穿梭质粒pAdTrack-TCF21；然后再用经PmeI酶线性化的pAdTrack-TCF21转化含pAdeasy-1的超感受态AdBJ5183，采用细菌内同源重组法构建腺病毒质粒pAd-TCF21；筛选同源重组质粒阳性克隆，提取pAd-TCF21质粒经PacI酶切鉴定和PCR鉴定。结果线性化的pAdTrack-TCF21转化含pAdeasy-1的超感受态AdBJ5183，12~20h后获得了40%阳性重组质粒克隆，经酶切获得＞23kb的大片段和3.0 kb的特征性片段，PCR反应扩增出了540bp的片段，证明重组腺病毒质粒中已成功插入目的基因TCF21。结论细菌内同源重组法成功构建了含TCF21基因的重组腺病毒质粒，为下一步腺病毒介导的TCF21转染A549细胞的研究打下基础。

小分子干扰RNA沉默人结直肠癌HT-29细胞TCF21基因对Kiss-1基因表达的影响

目的 观察小于扰RNA（siRNA）沉默结直肠癌HT-29细胞TCF21基因对Kiss-1基因表达的影响,以及细胞增殖、侵袭及迁移能力等生物学行为的变化.方法 利用脂质体lipofectamineTM 2000将siRNA稳定转染结直肠癌HT-29细胞,实验分为干扰组、阴性对照组、空白对照组；应用实时定量逆转录聚合酶链反应（RT-qPCR）与Western blot技术检测TCF21与Kiss-1基因mRNA与蛋白的表达水平,分别采用细胞计数试剂盒（CCK-8）法和Transwell小室法检测干扰前后细胞增殖、侵袭与迁移能力的变化.结果 siRNA干扰后成功沉默了HT-29细胞TCF21基因的表达,Kiss-1基因mRNA的表达量为0.58 ±0.02,较对照组的1.00±0.00明显降低（P＜0.05）,蛋白表达量为0.3491±0.0009,与对照组比较（0.8485 ±0.0016）亦出现明显下降（P＜0.05）,同时细胞增殖、侵袭及迁移能力均明显增强（P＜0.01）.结论 沉默TCF21基因的表达可以下调结直肠癌细胞Kiss-1基因的表达水平,并导致相应生物学行为的变化,因此TC F21基因可能是Kiss-1基因的上游调控因子.

非小细胞肺癌TCF21基因表达及其启动子区甲基化的研究

目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）中TCF21基因mRNA和蛋白的表达水平及其启动子区甲基化状态的意义。方法运用RT—PCR、蛋白印迹法（Western—blot）和焦磷酸测序（Pyrosequencing）技术检测97例非小细胞肺癌组织和21例支气管扩张或肺大疱等手术切除的良性肺组织中TCF21基因mRNA、蛋白表达及启动子区甲基化状态。结果97例NSCLC癌组织和21例良性肺组织中分别检测出TCF21基网mRNA阳性表达23例（23．71％）和14例（66．67％）；NSCLC癌组织中TCF21蛋白平均表达量灰度值为0．49±1．78，良性肺组织中其平均表达量灰度值为1．48±1．58；NSCLC癌组织和良性肺组织叶1TCF21摹因启动子区均有不同程度的甲基化，且癌组织和良性肺组织中各个位点甲基化频率均有统计学意义，在NSCLC癌组织中第1、5位点平均甲基化频率较高为49．04％和51．37％。结论TCF21基因mRNA及蛋白表达在NSCLC痈组织和良性肺组织中均有统计学意义，TCF21基因启动子区平均甲基化频率明屁高于良性肺组织细胞。

转录因子21与胰腺星状细胞活化及上皮间质转化的相关性研究

观察Tcf21与HPSCs细胞活化及上皮间质转化的相关性。方法 采用TGF-β1诱导HPSCs细胞活化,通过Real-time PCR、Western blot实验检测Tcf21、细胞活化相关标志物(α-SMA)、上皮细胞相关标志物(E-cadherin)、间质细胞相关标志物(N-cadherin)的表达变化。结果 WB、qRT-PCR实验结果均表明随着TGF-β1剂量升高,α-SMA、N-cadherin的表达水平显著升高,Tcf21、E-cadherin的表达水平则显著降低。结论 TGF-β1在一定剂量范围内促进HPSCs细胞活化及上皮间质转化过程,同时抑制Tcf21的表达水平。