CD68、TGF-β2及VEGF在良性前列腺增生中的水平变化及临床应用价值

目的分析巨噬细胞标志物(CD68)、转化生长因子标志物(TGF-β2)及血管内皮生长因子(VEGF)在良性前列腺增生中的水平变化及临床应用价值。方法选取2020年1月至2022年12月于重庆市永川区中医院进行治疗的良性前列腺增生患者207例(观察组)为研究对象,选取同期进行中老年男性健康体检者150名为对照组。对比两组血清CD68、TGF-β2、VEGF水平;对比观察组不同疾病程度BPH患者的CD68、TGF-β2、VEGF水平;采用Kappa一致性检验评估血清CD68、TGF-β2、VEGF单独以及联合诊断BPH与病理活检结果的一致性;绘制ROC曲线,分析血清CD68、TGF-β2、VEGF单独及联合诊断BPH的价值。结果对照组血清CD68、TGF-β2、VEGE水平均低于观察组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组血清CD68、TGF-β2、VEGE水平:Ⅲ度>Ⅱ度>Ⅰ度,差异有统计学意义(P<0.05);血清CD68、TGF-β2、VEGF单独以及联合诊断BPH与病理活检结果的一致性Kappa值分别为0.536、0.617、0.631、0.878;血清CD68、TGF-β2、VEGF三者联合诊断BPH的AUC为0.812,高于三指标单独检测(P<0.05)。结论可通过检测血清CD68、TGF-β2、VEGF水平变化,了解BPH的发展情况,三指标有利于临床对患者进行早期诊断以及预后评估。

β2肾上腺素受体通过TGF-β1/Smad3信号通路调控创面愈合中的纤维增生

目的探讨β2肾上腺素受体(β2 adrenergic receptor,ADRB2)在创面愈合过程中对纤维增生的调控机制。方法将12只小鼠背部皮肤随机注射非特异性敲减ADRB2基因的腺相关病毒(AAV-ADRB2组,n=6)和对照病毒(AAV-NC组,n=6)21 d后,在背部建立全层皮肤缺损创面愈合模型。记录术后第1、3、5、7天创面愈合率;采用H-E染色、Masson染色和免疫组化染色观察创面组织结构、纤维化程度及α-平滑肌肌动蛋白表达;定量PCR检测ADRB2、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)mRNA水平;Western印迹法检测胶原纤维1A1、胶原纤维3A1、TGF-β1、Smad3蛋白表达水平。结果术后第5、7天,AAV-ADRB2组创面愈合率显著下降(P<0.05),伴随表皮增厚、炎症细胞增多、纤维细胞减少、胶原沉积降低;α-SMA水平显著下降(P<0.05);COL1A1/COL3A1比例减少(P<0.05);ADRB2 mRNA水平显著降低(P<0.01),MMP-1和MMP-8 mRNA水平升高(P<0.01);TGF-β1/Smad3蛋白水平显著下降(P<0.05)。结论ADRB2敲减通过抑制TGF-β1/Smad3信号通路,减少创面纤维化反应和结缔组织含量,提高MMP mRNA水平,降低Ⅰ型/Ⅲ型胶原比例。

形觉剥夺性近视豚鼠巩膜形态及TGF-β_2表达的变化

目的:观察形觉剥夺性近视豚鼠巩膜组织学改变和TGF-β2在巩膜中的表达。方法:用头套形觉剥夺右眼的方法诱导近视动物模型,实验前后检测豚鼠双眼屈光状态及眼轴长度。HE染色观察后极部巩膜形态学改变,免疫组织化学法对TGF-β2在巩膜内的表达进行定性及半定量测定。结果:实验组巩膜变薄、胶原纤维排列紊乱,粗细不均,纤维间隙变大,纤维走向不一,板层结构不清;巩膜TGF-β2表达明显下调。结论:形觉剥夺性近视眼的巩膜产生一系列的退行性改变,TGF-β2是形觉剥夺性近视形成的重要因素之一。

TGF-β_2反义寡核苷酸抑制抗青光眼术后滤过泡瘢痕的实验研究

目的观察TGF-β2反义寡核苷酸对青光眼滤过术后结膜囊成纤维细胞的转化、增生的影响。方法制备兔青光眼滤过手术模型。右眼结膜下注射TGF-β2反义寡核苷酸(A组);左眼分别注射TGF-β2错义寡核苷酸(B组)、PBS(C组),于造模后第4、7、14、28 d取术区结膜囊标本进行免疫组织化学染色和电镜观察。结果A组眼压术后第14 d和第21 d比B组(P<0.01)和C组(P<0.05)显著降低;滤泡平均生存时间A组(17.2 d)较B组(14.5 d)、C组(13.5 d)明显延长(P<0.05);A组α-SMA和PCNA阳性成纤维细胞数明显少于B、C组;成纤维细胞的超微结构A组和B、C组比较无明显区别。结论TGF-β2反义寡核苷酸可降低兔青光眼滤过术后眼压,延长滤泡生存时间,抑制兔青光眼滤过术后结膜囊成纤维细胞的转化、增生。

TGF-β_2反义寡核苷酸抑制抗青光眼术后滤过泡瘢痕的实验研究(英文)

目的:观察TGF-β2反义寡核苷酸对青光眼滤过术后结膜囊成纤维细胞的转化、增生的影响。方法:制备兔青光眼滤过手术模型。右眼结膜下注射TGF-β2反义寡核苷酸(A组);左眼分别注射TGF-β2错义寡核苷酸(B组)、PBS(C组),于造模后4,7,14,28d取术区结膜囊标本进行免疫组织化学染色和电镜观察。结果:A组眼压术后14d和21d比B组(P<0.01)和C组P<0.05)显著降低;滤泡平均生存时间A组(17.2d)较B组(14.5d)、C组(13.5d)明显延长(P<0.05);A组α-SMA和PCNA阳性成纤维细胞数明显少于B、C组;成纤维细胞的超微结构A组和B、C组比较无明显区别。结论:TGF-β2反义寡核苷酸可降低兔青光眼滤过术后眼压,延长滤泡生存时间,抑制兔青光眼滤过术后结膜囊成纤维细胞的转化、增生。

TGF-β2通过基质金属蛋白酶通路影响胶质瘤干细胞的侵袭能力

目的:研究TGF-β2对胶质瘤干细胞侵袭能力的影响及其可能机制。方法:收集2016年4月至2017年4月中国医科大学附属第一医院神经外科手术切除的8例人多形性成胶质细胞瘤组织标本,通过胰蛋白酶消化法进行胶质瘤细胞原代培养,部分胶质瘤细胞加入含有EGF、bFGF、B27的DEME/F12培养基中进行无血清培养获得悬浮生长的肿瘤细胞球,免疫荧光染色及分化实验验证肿瘤球是否为胶质瘤干细胞。ELISA方法检测胶质瘤干细胞分泌TGF-β2的水平,转染TGF-β2 siRNA后应用Transwell方法检测TGF-β2对胶质瘤侵袭能力影响,Western blotting检测TGF-β2对胶质瘤干细胞中基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)表达影响。结果:通过免疫荧光染色及分化实验证明原代培养的悬浮生长肿瘤细胞球为胶质瘤干细胞,肿瘤细胞球表达CD133,在含血清培养基中可以分化为神经元和胶质细胞。胶质瘤干细胞比原代培养的胶质瘤TGF-β2分泌水平明显升高[(74.13±3.63)vs(46.13±2.61)pg/ml,P<0.05]。沉默TGF-β2可以降低胶质瘤干细胞侵袭细胞数[(105.71±8.69)vs(63.67±5.93)个,P<0.05],并抑制MMP-2和MMP-9表达(均P<0.05)。结论:TGF-β2通过MMP-2和MMP-9通路增强胶质瘤干细胞的侵袭能力。

TGF-β_2局部应用对大鼠角膜碱烧伤后CD44和E-selectin表达的影响

目的研究TGFβ2局部应用对大鼠角膜碱烧伤后CD44和Eselectin的mRNA合成的影响,探求其对角膜碱烧伤的治疗作用。方法制备Wistar大鼠角膜碱烧伤模型,一组给予TGFβ2(浓度为1mg·L-1)局部滴眼,每日3次,一组未给予TGFβ2治疗。于角膜碱烧伤后3d和2周应用RTPCR方法检测TGFβ2治疗组与未治疗组角膜CD44和Eselectin的mRNA合成情况。结果角膜碱烧伤3d时CD44mRNA表达无显著变化,碱烧伤2周时CD44表达量增加,同正常对照组相比差异显著(P<0.01)。TGFβ2治疗组3d和2周时CD44的mRNA合成同未治疗组相比均有增加,2组差异显著。角膜碱烧伤3d时EselectinmRNA的表达量低于正常对照组,碱烧伤2周时Eselectin表达量高于正常对照组,有显著差异(P<0.01)。TGFβ2治疗组3d和2周时Eselectin的mRNA合成同未治疗组相比均有增加,3d时增加明显,差异极显著。结论TGFβ2能促进急性期和营养紊乱期CD44和EselectinmRNA的合成,减轻碱烧伤后的炎症反应。TGFβ2能够通过影响角膜局部粘附分子的合成和表达来减轻病理损伤,促进创伤愈合。

替莫唑胺通过TGF-β2影响胶质瘤干细胞的侵袭性研究

目的探讨替莫唑胺能否抑制胶质瘤干细胞(GSCs)和分化的胶质瘤细胞株的侵袭,并降低免疫抑制作用和对转化生长因子-β2(TGF-β2)表达的影响。方法首先从原代培养胶质瘤干细胞(PCGCs),然后,我们通过免疫组化,细胞侵袭实验来研究替莫唑胺对侵袭力的影响,实时逆转录酶-聚合酶链反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)等方法来证明TGF-β2的表达影响。结果 TMZ能够抑制胶质瘤干细胞和原代培养胶质瘤干细胞的侵袭力。此外,TMZ在mRNA和蛋白水平下调TGF-β2的表达。结论替莫唑胺能够通过影响TGF-β2的表达来抑制胶质瘤干细胞(GSCs)和分化的胶质瘤细胞株的侵袭,并降低他们的免疫抑制作用,替莫唑胺可作为胶质瘤治疗的免疫调节剂。

大段同种异体骨移植复合BMP_2和TGF-β_2对兔桡骨中段骨缺损愈合的影响

[目的]探讨外源性TGF-β2和BMP2复合同种异体骨对骨缺损愈合的作用。[方法]用兔桡骨骨缺损模型,在骨缺损局部单独或联合应用TGF-β2和BMP2与同种异体骨复合,A组:同种异体骨与BMP2复合;B组(对照组):自体骨;C组:同种异体骨与TGF-β2复合;D组:同种异体骨与TGF-β2、BMP2复合;通过不同时间X线片、生物力学、骨密度和骨痂钙含量的检测对骨缺损愈合情况进行评估。[结果]B组的骨痂钙含量、骨缺损愈合情况和愈合后的力学强度明显优于A、C、D组(P<0.01),D组优于A、C组(P<0.05),C组优于A组(P<0.01)。[结论]TGF-β2和BMP2在骨缺损愈合过程中均发挥了重要的作用。在兔骨缺损周围局部应用外源性TGF-β2和BMP2与同种异体骨复合,可明显促进骨缺损愈合,使骨痂量增加,增强骨折愈合后的力学强度。并且在骨折愈合时间上接近自体骨移植骨折愈合的时间,从而在临床上缩短了需要大段植骨患者治疗时间,减轻了患者痛苦。单用TGF-β2的作用强于BMP2。它们联合应用时,这种作用进一步增强,在促进骨缺损愈合方面具有协同作用。同时也为异体骨复合何种因子及因子的剂量提供可靠的参考指标。

TGF-β2和geneX对BrdU标记骨髓间充质干细胞增殖与成骨分化的作用

目的研究TGF-β2和gene X对Brd U标记的骨髓间充质干细胞增殖与成骨分化作用的影响.方法采用全骨髓贴壁培养法分离骨髓间充质干细胞,传代并鉴定,设实验组和空白对照组,实验组分4组:A组:Brd U标记后的BMSCs组;B组:Brd U标记后的BMSCs+TGF-β2组;C组:Brd U标记后的BMSCs+gene X组;D组:Brd U标记后的BMSCs+gene X+TGF-β2组.空白对照组为Brd U标记后的单纯BMSCs加入基础培养基避光培养.诱导培养后观察骨髓间充质干细胞生长形态、检测生长动力学(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)、碱性磷酸酶(ALP)和钙定量、进行细胞Von-Kossa法染色,观察成骨分化作用.结果 (1)4组BMSCs吸光度值(OD)分析比较显示:细胞组间差异有统计学意义(P<0.05);(2)各组BMSCs成骨诱导后碱性磷酸酶(ALP)和钙定量检测结果显示:细胞组间差异有统计学意义(P<0.05);(3)进行细胞Von-Kossa法染色,D组可见大量钙结节;C组可见较多钙结节;B组可见部分钙结节;A组可见少量钙结节;空白对照组未见钙结节.结论 (1)TGF-β2可促进骨髓间充质干细胞的增殖和诱导其向成骨细胞分化;(2)gene X可促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,且在细胞因子TGF-β2联合作用下成骨分化作用更明显.

硬皮病皮损中TGF-β1和β2的表达

目的 : 探讨TGF β1和 β2在硬皮病 (SD)发病中的作用。方法 : 采用免疫组化SP法检测 17例SD皮损中TGF β1、β2的原位表达情况 ,并以 10例正常皮肤组织作对照。 结果 : SD组TGF β1和TGF β2表达阳性率相同 ;SD组TGF β1、β2表达阳性率和表达程度均明显高于对照组 (P <0 .0 1) ;TGF β2在SD组中的表达程度和过度表达率明显高于TGF β1(P <0 .0 5 )。结论 : SD皮损内的表皮细胞和真皮内的成纤维细胞可合成并分泌较多的TGF β1、β2 。

牦牛TGF-β2基因片段的克隆测序及系统进化分析

克隆测序了牦牛的TGF-β2基因,并进行了Blastn比较分析。结果表明,牦牛TGF-β2基因片段长为559bp,与普通牛、人、黑猩猩、小鼠的相应片段的同源性分别达98%、95%、94%、93%。在5′端调控区域没有类似TATA盒元件,推测TGF-β2基因在脾脏、肾脏组织细胞中表达量不是很高。由于TGF-β对细胞的生长、分化和免疫功能都有重要的调节作用,牦牛TGF-β2基因研究对高原畜牧业发展提供了科学资料。

输卵管积水对着床窗期子宫内膜人白血病抑制因子(LIF)和转化生长因子(TGF-β_2)表达的影响

目的:探讨输卵管积水对人子宫内膜着床窗期的影响。方法:用免疫组化法检测输卵管积水组(A组)、输卵管阻塞无积水组(B组)和正常组(C组)着床窗期子宫内膜人白血病抑制因子(LIF)和转化生长因子(TGF)-β2的表达。结果:LIF和TGF-β2在3组着床窗期子宫内膜都有表达,A组的LIF和TGF-β2表达均明显低于B组和C组组(P<0.05)。结论:输卵管积水妇女着床窗期子宫内膜LIF和TGF-β2的低表达可能是输卵管积水妇女胚胎种植失败的原因之一。

抗TGF-β2抗体对滤过泡瘢痕成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响

目的观察抗转化生长因子-β2(TGF-β2)抗体对体外培养的滤过泡成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响。方法利用手术修复人眼小梁切除术后失败滤过泡修复时切除下来的瘢痕组织进行组织块培养,获得成纤维细胞(FB)。将0、0.01、0.1、1μg/mL抗TGF-β2抗体作用于FB24h以及0.14μg/mL(半数抑制率质量浓度,IC50)抗体作用0、24、48、72h,通过生物化学显色法、RT-PCR法检测抗TGF-β2抗体对成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达量。结果在FB中加入0、0.01、0.1、1μg/mL抗TGF-β2抗体作用24h及IC50质量浓度处理0、24、48、72h,结果显示随着抗TGF-β2抗体质量浓度增加及作用时间延长,Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达依次减少,羟脯氨酸(HPr)及胶原含量逐渐降低(P<0.05)。结论抗TGF-β2抗体能减少Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达及合成。

紫外辐射诱导人晶状体上皮细胞凋亡机制中TGF-β2/Smad-4细胞信号传导通路的作用

目的了解转化生长因子β2(TGF-β2)/Smad-4细胞信号传导通路是否参与B波段紫外线(UVB)辐射诱导人晶状体上皮细胞系(HLECs)的凋亡过程,探讨HLEC紫外线损伤的可能保护机制。方法HLECs预先在含0.01μg/ml AF-302-NA的培养基中孵育24h,行480mW/cm2的UVB照射。采用流式细胞仪(FCM)和TUNEL方法检测细胞凋亡,采用RT-PCR检测TGF-β受体(TβRs)和bax mRNA表达水平的变化,免疫荧光染色方法进行Smad-4蛋白定位。结果UVB照射组HLECs凋亡比例明显高于对照组;TβRs和凋亡促进子bax的mRNA表达水平增高,UVB照射后Smad-4表达量明显升高,并从HLECs细胞胞浆转移到细胞核内;AF-302-NA可以抑制UVB引起的Smad-4由细胞浆向细胞核的转移,部分抑制UVB照射引起的TβRs和bax mRNA表达量的增高,并可降低HLECs的凋亡比例。结论在UVB诱导HLECs凋亡机制中,凋亡信号通过TGF-β2/Smad-4信号传导通路传递,阻断TGF-β2/Smad-4信号传导通路可以在一定程度上抑制UVB照射所引起的HLECs凋亡。

杂色曲霉素对小鼠小脑Purkinje细胞TNF-α和TGF-β_2 mRNA表达的影响

本研究观察了杂色曲霉素(sterigmatocystin,ST)对小鼠Purkinje细胞TNF-α和TGF-β2 mRNA表达的影响。给予BALB/c小鼠一次灌胃ST(3000μg/kg),分别于灌胃后0.5、1、2、4、8和16h处死动物,用原位杂交方法观察了Purkinje细胞TNF-α和TGF-β2 mRNA的表达。TNF-α和TGF-β2mRNA在对照组和处理组各时间点的Purkinje细胞均有阳性表达。但各处理组与对照组比较,TNF-α和TGF-β2 mRNA表达显著增加(P<0.01)。上述结果说明单次ST灌胃后TNF-α和TGF-β2 mRNA在Purkinje细胞表达明显增加,TNF-α和TGF-β2在ST对脑组织的损伤过程中起着重要的作用。

鸡TGF-β2基因启动子区多态性分析

为了研究鸡TGF-β2基因启动子区的SNP及其对启动子功能元件的影响,采用PCR-SSCP方法对16个鸡种的TGF-β2启动子区的554~824 bp（即3号染色体的19 433 476~19 433 746 bp）进行基因分型,经测序,共检测到3个有效的SNPs位点,分别是679位点的C/G,699位点的G/A,774位点的T/C。其中大骨鸡和太湖鸡在3个位点均检测到SNP存在,AA鸡在3个位点都没有发现SNPs。分别利用生物信息学软件JASPAR和Meth Primer预测TGF-β2基因启动子区转录因子结合位点和Cp G岛,发现SNP位点可改变转录因子结合位点且位于Cp G岛上,表明TGF-β2启动子区SNPs可能通过不同方式影响基因表达调控。

TGF-β_2反义寡核苷酸对兔角膜基质创伤修复的影响(英文)

目的:探讨TGF-β2反义寡核苷酸对兔角膜基质成纤维细胞转化、增殖的作用,揭示其对角膜创伤修复的影响。方法:新西兰大白兔28只,双眼均制备角膜基质创伤模型,右眼为实验组,用浸有TGF-β2反义寡核苷酸的8-0薇乔缝线缝合角膜创口;左眼为对照组,用普通8-0薇乔缝线缝合角膜创口,分别于4,7,14,21d处死动物,取角膜后行免疫组化(α-SMA和PCNA)染色和电镜观察。结果:术后各时间段均发现,实验组α-SMA和PCNA阳性的成纤维细胞数明显少于对照组,但成纤维细胞的超微结构实验组和对照组比较无明显区别。结论:TGF-β2反义寡核苷酸可抑制兔角膜基质成纤维细胞转化、增殖,为调控角膜基质伤口修复提供了一个新的途径。

大鼠角膜碱、酸、热烧伤后房水中TGF-β_2的变化研究

目的:通过检测角膜烧伤后前房水中TGF-β2含量的变化,探讨在眼部内环境下TGF-β2与角膜烧伤之间的关系,为角膜烧伤治疗提供依据。方法:制备Wistar大鼠角膜碱、酸、热中度烧伤动物模型,分别于伤后4,8h;1,3,5,7,14,28,49d处死。采集房水:用20g/LBSA包被的毛细管于角膜缘处刺入角膜,吸取房水至20g/LBSA包被的离心管中,-70℃保存。标准品和样品进行酸激活处理。使用ELISA方法检测角膜烧伤后前房水中TGF-β2的水平。结果:大鼠角膜碱烧伤后4hTGF-β2的水平呈现一过性升高,然后下降,3d时TGF-β2含量再次升高,7d时达高峰,持续至7wk时降至正常。大鼠角膜酸烧伤后4hTGF-β2的水平呈现一过性升高,然后下降,低于正常对照组,两者差异显著。7d时房水中TGF-β2升至正常,然后一直保持低平状态。49d时我们检测房水中TGF-β2水平仍低于正常。大鼠角膜热烧伤后4hTGF-β2的水平呈现一过性升高,1d时降至最低,3d时开始增长,直到7d时我们检测仍高于正常,然后缓慢下降。结论:角膜烧伤后前房水中TGF-β2的含量发生变化,致伤原因不同,其变化方式不同。角膜碱烧伤和热烧伤后于7d时出现TGF-β2高峰,说明此时角膜处于免疫功能抑制状态,这对于维持角膜前房的免疫赦免状态非常重要,证明此时机体发挥了自我保护功能,避免产生过度的病理反应。角膜酸烧伤后TGF-β2水平始终低平,其原因尚有待于进一步研究。

转化生长因子β_2(TGF-β_2)在老年性白内障与正常晶状体上皮细胞中mRNA表达的差异

目的研究老年性白内障晶状体上皮细胞中转化生长因子β2(TGF-β2)的表达变化情况。方法应用逆转录聚合酶链反应(semi-quantitaive reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)方法,检测TGF-β2在老年性白内障晶状体上皮细胞中mRNA的表达水平。结果老年性白内障晶状体上皮细胞中TGF-β2mRNA的表达水平高于对照组,差异有显著性。结论 TGF-β2的高表达提示其可能参与了老年性白内障晶状体上皮细胞的凋亡,在老年性白内障的发生、发展过程中起着重要的作用。