益气活血通络汤与低分子肝素抗凝对大鼠骨折愈合、血液流变学及TGF-β1表达的影响

目的探究益气活血通络汤与低分子肝素抗凝对大鼠骨折愈合、血液流变学及转化生长因子(TGF)-β1表达的影响。方法选取50只SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常(A)组、模型(B)组、益气活血通络汤(C)组、低分子肝素(D)组、益气活血通络汤联合低分子肝素(E)组,每组10只,对B、C、D、E组采用骨钳截断加克氏针髓内固定法建立胫骨骨折模型,A组不建立该模型,建模成功后,C组4 g/kg益气活血通络汤灌胃,D组500 U/kg低分子肝素灌胃,E组给予益气活血通络汤联合低分子肝素治疗,A组、B组同期灌胃同体积生理盐水,X线摄片检测骨折愈合程度,苏木素-伊红(HE)染色法检测骨组织病理形态,全自动血流变仪检测血液流变学相关指标,免疫组化法检测骨组织中TGF-β1蛋白表达。结果与A组相比,B组骨折线清晰,且没有形成明显骨痂;与B组相比,C、D、E组骨愈合速度明显加快,C、D组骨折线仍可见但折断端边缘趋于模糊,且形成明显骨痂,而E组骨折基本消失,髓腔再通,外骨痂减少,可见大部分骨痂长入骨折线,已有骨外膜形成并可见骨连接形成;A组骨组织形态完整,骨小梁生长旺盛,排列规则有序,且无坏死区域;B组骨组织形态紊乱,出现部分坏死区域,并可见少量纤维组织;C、D组骨痂组织中可见大量肉芽组织、纤维组织长入,成软骨细胞增生活跃,并有网状交织的骨小梁;E组骨组织形态已趋于完整,排列有序且部分已被正常组织替代,骨小梁排列相对规则,可见部分成熟板状骨形成;与A组比较,B、C、D、E组软骨比例、胫骨组织TGF-β1蛋白表达显著降低,纤维性骨痂比例、全血低切黏度、中切黏度、高切黏度及血浆黏度显著升高(P<0.05);与B组比较,C、D、E组软骨比例、胫骨组织TGF-β1蛋白表达显著升高,纤维性骨痂比例、全血低切黏度、中切黏度、高切黏度及血浆黏度显著降低(P<0.05);与C、D组相比,E组上述指标变化显著(P<0.05),而各组骨性骨痂相比无明显差异(P>0.05)。结论益气活血通络汤联合低分子肝素抗凝具有显著疗效,其可显著促进骨折愈合,改善血液流变学,并促进TGF-β1表达。

骨髓纤维化患者TGF-β_1及其Ⅰ、Ⅱ型受体测定的临床意义

目的 研究转化生长因子 β1(TGF β1)及其Ⅰ、Ⅱ型受体 (TGFR1及TGFR2 )在骨髓纤维化发生、发展中的作用 ,并观察其在骨髓纤维化预后方面的意义。方法 用SABC免疫组织化学方法观察TGF β1及TGFR1、TGFR2在 2 3例骨髓纤维化患者骨髓组织的表达情况 ,并应用ELISA法测定骨髓纤维化患者血清中的TGF β1水平。结果 原发性和继发性骨髓纤维化患者骨髓组织TGF β1及TGFR1的表达水平均明显高于对照组 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 ) ,而TGFR2的表达水平与对照组比较差异无显著性 (P >0 .0 5 )。骨髓纤维化患者血清TGF β1水平明显高于对照组 ,差异非常显著 (P <0 .0 1) ,继发性骨髓纤维化患者升高更明显 ,骨髓纤维化临床缓解后血清TGF β1水平下降至接近正常。结论 TGF β1及其Ⅰ、Ⅱ型受体参与骨髓纤维化的发生 ,骨髓纤维化患者TGF β1、TGFR1的检测有助于判断其预后。

TGF-β1、Smad2、CyclinD1与恶性肿瘤关系的研究进展

转化生长因子β1（TGF -β1）是具有负调控生长功能的细胞因子之一，它可使许多细胞生长发生停滞，其主要方式是通过阻止 G1期细胞进入 S 期。TGF -β1的生长抑制作用是通过其信号转导通路完成的，TGF -β1首先与其对应的受体结合形成复合物，该复合物对下游的Smad2蛋白进行活化，并使 Smad2与 Smad4结合，形成转录复合物后进入细胞核，并参与核酸转录因子及靶基因启动子结合调节靶基因的转录，以发挥生长抑制效应［1］。随着 Smad 蛋白家族的发现，TGF -β1信号通路的研究也取得了极大进展，即发现某些恶性肿瘤的发生与 TGF -βRⅡ表达异常有关，同时又存在 Smad 蛋白异常，Smad2属于受体激活的 Smad 蛋白家族成员，Smad2基因在多种肿瘤中发生突变，是一种可能的肿瘤抑制基因。细胞周期素 D1（CyclinD1）为细胞周期调控基因，属于癌基因，Cy-clinD1的过度表达可引起细胞增殖失控，现在许多肿瘤中均已发现有该基因扩增现象。本文就 TGF -β1、Smad2、CyclinD1与恶性肿瘤关系的研究进展做一综述。

扶正活血不同组方对肝纤维化大鼠TGFβ1和TIMP-1表达的影响

目的观察扶正活血不同组方对肝纤维化大鼠肝血清及肝组织中血清转化生长因子β1(TGFβ1)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)表达水平的影响,探讨其抗肝纤维化的作用机理及疗效差异。方法将90只SD大鼠随机分为六组,采用CCl4加橄榄油造模,治疗组分为扶正活血1号方、2号方、3号方,并设阳性药物组、模型组和正常对照组,通过对各组动物灌服不同药物及生理盐水,分别检测大鼠血清和肝组织中TGFβ1、TIMP-1的表达水平。结果扶正活血不同组方对大鼠肝组织与血清中TGFβ1和TIMP-1表达水平明显低于模型组(P<0.05或P<0.01)和阳性对照组(P<0.05或P<0.01),而1号方和2号方的改善作用较3号方明显。结论扶正活血不同组方均能有效抑制TGFβ1、TIMP-1的表达,从而减少或降低肝纤维化的发生。

螺内酯对实验大鼠肝组织TGFβ1、PDGF-BB及α-SMA表达的影响

目的 探讨螺内酯预防肝纤维化的作用机制。方法 SD大鼠 90只 ,随机分为 3组。正常对照组 (8只 ) :正常饮食 ,皮下注射花生油 ;模型组 (42只 ) :复合因素制成肝纤维化模型 ;螺内酯预防组 (40只 ) :造模方法同模型组 ,螺内酯 10 0mg·kg- 1·d- 1灌胃。分别于第 2周、4周、6周、8周末随机处死 8只大鼠 ,取肝组织用免疫组化法检测各组肝组织内转化生长因子 β1(TGFβ1)、血小板衍生生长因子 (PDGF BB)及α 平滑肌动蛋白 (α SMA)含量。结果 螺内酯预防组TGFβ1、PDGF BB及α SMA在肝组织中的表达均较模型组明显减少 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。 结论 螺内酯可通过降低TGFβ1、PDGF

TGF-β1受体1和2在TGF-β1调节细胞增殖中的作用

转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)是一种多功能细胞因子,在细胞增殖、分化、伤口愈合和肿瘤生成转移等过程中均发挥重要调控作用。TGF-β1对细胞增殖的调节可因细胞类型、刺激剂量不同而不同,但其差异调节的机制还不清楚。现普遍认为,TGF-β1在TGFBR2/TGFBR1二聚体参与下通过经典的Smad信号通路抑制增殖,而通过非Smad信号通路促进细胞周期,但是机体是如何调控这种不同增殖调节作用转化的还不明确。TGFBR1和TGFBR2在细胞中的分布和比例变化可能是TGF-β1差异性调控细胞增殖作用的一个重要机制。

肝硬化患者外周血中TGFβ_1和ET-1的表达

目的 研究肝硬化患者外周血中转化生长因子 β1 (TGFβ1 )及血浆内皮素 - 1(ET- 1)的表达 ,并探讨其与肝脏贮备功能和食管静脉曲张的关系。方法 采用标准生物学方法即 TGFβ1 对水貂肺上皮细胞生长抑制的方法及放免法分别检测 72例肝硬化患者及 2 4例正常人血清 TGFβ1 及血浆 ET- 1水平。结果 肝硬化组血清TGFβ1 (11.77± 1.32 ng/ m l)及血浆 ET- 1(78.37± 17.5 4pg/ ml)水平明显高于正常对照组 (P<0 .0 5 ) ;ET- 1水平与肝功能及食道静脉曲张程度相关分析显示 ET- 1水平越高则肝脏贮备功能越差 (r=0 .94) ,食道静脉曲张程度越重 (r=0 .87) ;TGFβ1 含量与肝脏贮备功能及食道静脉曲张程度无关 (r=0 .11及 0 .0 3)。结论 TGFβ1 和 ET- 1可能是参与肝硬化病理生理过程的重要神经肽。ET- 1可作为反映肝硬化程度、判断预后的参考指标。

miR-101-3p靶向TGFβR1/Smad抑制视网膜母细胞瘤细胞侵袭和迁移

目的探索miR-101-3p对视网膜母细胞瘤细胞侵袭和迁移的影响及作用机制。方法RT-PCR检测miR-101-3p及转化生长因子β受体1(transforming growth factor beta receptor 1,TGFβR1)表达水平;生物信息学预测miR-101-3p与TGFβR1的靶向关系并通过荧光素酶报告实验进行验证。将Y79细胞分为Control组、miR-101-3p mimic组(转染miR-101-3p mimic)、pcDNA-TGFβR1组(转染pc-TGFβR1)及miR-101-3p mimic+pc-TGFβR1组(共转染miR-101-3p mimic和pc-TGFβR1),MTT检测细胞增殖速率,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell实验检测细胞侵袭,划痕实验检测细胞迁移,Western blot检测TGFβR1、Ki67、Bcl-2、Bax、cleaved Caspase-9、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2、MMP-9、血管内皮生长因子、p-Smad2及p-Smad3的表达水平。结果在视网膜母细胞瘤组织中,miR-101-3p的表达为0.35±0.05,明显低于正常视网膜组织(P<0.01);视网膜母细胞瘤细胞株Y79中miR-101-3p的表达为0.24±0.04,明显低于视网膜上皮细胞株ARPE-19(P<0.01);与Control组相比,miR-101-3p mimic组miR-101-3p mRNA水平显著升高、TGFβR1 mRNA水平显著降低(均为P<0.01);miR-101-3p与TGFβR1之间存在连续结合片段。与Control组相比,miR-101-3p mimic组TGFβR1的表达水平显著降低,增殖速率及细胞中Ki67表达均显著降低,细胞凋亡率显著增加,Bax及cleaved Caspase-9表达显著升高、Bcl-2表达显著降低,侵袭细胞数目和划痕闭合率显著降低,MMP-2、MMP-9、血管内皮生长因子、TGFβR1、p-Smad2和p-Smad3的表达水平显著降低(均为P<0.01)。结论miR-101-3p通过靶向下调TGFβR1抑制视网膜母细胞瘤细胞的侵袭和迁移。

固本通络汤对DM大鼠早期肾损害及TGFβ-1表达影响的实验研究

本研究运用固本通络汤观察其对糖尿病（DM）大鼠早期肾损害及TGF-β1表达的影响,获得较好的疗效,现报道如下。

转化生长因子-β1／TGFβ激活激酶信号表达变化在心房颤动心肌纤维化中的作用

目的探讨心房颤动的发生过程中是否存在心房肌的纤维化，以及TGF-β1／TAK1信号系统在心房颤动心肌纤维化中的作用。方法20只新西兰大白兔随机分成两组：假手术组（GroupS）和快速起搏组（GroupP）。给予兔左心房心外膜电起搏，以900次／min高频起搏，建立房颤模型。起搏前后及房颤后记录心电图。取兔心房组织，观察细胞结构变化（HE染色），比较左房重量指数及胶原蛋白的表达水平（Masson染色），免疫组化、Westen—blot检测TGF-61、TAK1蛋白表达水平，PCR检测TGF-β1mRNA、TAKImRNA的表达水平。结果①起搏兔的左房重量、左房重量指数明显高于GroupS。Masson染色显示起搏兔的左心房心肌间质胶原显著增多。②起搏组的TGF—β1、TAK1的表达明显高于GroupS。③在起搏组中，代表心肌纤维化的心肌间质胶原及LAWI与TGF-β1、TAK1的表达密切相关（P〈0．05），其中与TGF—β1呈正相关（R2=0．72，P〈0．05），与TAKI亦呈正相关（R^2=0．762，P〈0．05）。结论心房颤动在发生早期即存在心房组织的纤维化。快速起搏诱导的心房颤动早期，TGF-β1／TAK1通路信号mRNA及蛋白表达水平明显升高，TGF-β1／TAK1通路信号可能是心房纤维化信号途径之一，可能成为房颤治疗的新靶点。

miR-25通过TGF-β1途径降低缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡

目的 探讨miR-25在缺氧/复氧诱导H9C2心肌细胞凋亡过程中的作用及机制。方法 H9C2细胞培养24 h后进行慢病毒感染,空白对照(control)组未进行转染;阴性对照(Lv-control)组转染Lv-control-miRNA模拟物(mimic);Lv-anti-control组转染Lv-control-miRNA-抑制剂(inhibitor);Lv-miR-25组转染Lv-miR-25 mimic;Lv-anti-miR-25组转染Lv-miR-25 inhibitor。按照脂质体转染试剂Lipofectamine2000试剂盒说明,Contol-shRNA组转染control-shRNA;HMGB1-shRNA组转染HMGB1-shRNA,经培养后筛出稳定细胞系。选取高表达miR-25 H9C2心肌细胞,Lv-miR-25组转染Lv-miR-25 mimic, Lv-miR-25+SB431542组转染Lv-miR-25 mimic后加入TGF-β1/Smads抑制剂SB431542共培养。稳定转染后给予缺氧/复养处理。Western印迹检测高迁移率族蛋白(HMG)B1、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Cleaved caspase)-3、转化生长因子(TGF)-β1、Smad3、磷酸化(p)-Samd3、细胞外信号调节激酶(ERK)1/2、p-ERK1/2蛋白表达。流式细胞术检测细胞凋亡。结果 Lv-miR-25组HMGB1、Cleaved caspase-3蛋白表达水平显著低于control组、Lv-control组、Lv-anti-control组、Lv-anti-miR-25组(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平显著高于control组、Lv-control组、Lv-anti-control组、Lv-anti-miR-25组(P<0.05)。与Contol-shRNA组比较,HMGB1-shRNA组HMGB1、TGF-β1、p-Samd3、Cleaved caspase-3蛋白表达水平显著下降(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平显著上升(P<0.05)。与Lv-miR-25组比较,Lv-miR-25+SB431542组Cleaved caspase-3蛋白表达水平显著增加(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平及细胞凋亡率显著下降(P<0.05)。结论 miR-25抑制缺氧/复氧诱导的H9C2细胞凋亡,其作用机制通过靶向调控HMGB1,降低TGF-β1导致的心肌凋亡。

活性维生素D3对糖尿病肾病大鼠血脂代谢、肾脏形态、TGF-β1蛋白及mRNA表达的影响

目的探讨活性维生素D3对糖尿病肾病(DN)大鼠血脂代谢、肾脏形态及转化生长因子(TGF)-β1 mRNA水平的影响。方法将实验大鼠平均分为正常对照(NC)组、DN组和活性维生素D3(VDR)组,分别比较3组大鼠的体重、肾指数、血糖、血脂指标和肾功能指标;用苏木素-伊红(HE)染色对肾组织形态进行观察比较;用Western印迹和免疫荧光聚合酶链反应(PCR)检测各组TGF-β1蛋白和mRNA的表达。结果和NC组相比,DN组体重明显减轻,血糖和肾指数明显升高(P<0.05);治疗后VDR组和DN组相比,体重明显回升,且血糖和肾指数均显著降低(P<0.05)。与NC组血脂指标比较,DN组总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平均明显升高,高密度脂蛋白胆因醇(HDL-C)水平显著降低,且DN组尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、肌酐清除率(CCr)和24 h尿蛋白指标均明显升高(P<0.05);治疗后VDR组血脂指标和肾功能指标均明显改善(P<0.05)。DN组肾组织中TGF-β1蛋白和mRNA表达均显著高于NC组(P<0.05);与DN组相比,VDR组肾组织中TGF-β1蛋白和mRNA表达均明显降低(P<0.05)。结论活性维生素D3可改善DN大鼠血脂代谢和肾组织形态,对肾组织中TGF-β1 mRNA的表达进行抑制,从而发挥对DN肾组织的保护作用。

老年病毒性心肌炎患者外周血NLRP3-ASC-Caspase-1-IL-18/IL-1β-TGF-β信号通路的变化及意义

目的探究老年病毒性心肌炎患者外周血核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白(NLRP)3-凋亡相关斑点样蛋白(ASC)-半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-1-白细胞介素(IL)-18/IL-1β-转化生长因子(TGF)-β信号通路的变化及意义。方法选择140例老年病毒性心肌炎患者,根据病程分为急性期和恢复期,另选择同期50例健康体检者,均采用聚合酶链反应检测外周单个核细胞(PBMCs)中NLRP3炎性小体、ACS、Caspase-1 mRNA水平,Western印迹检测上述三者蛋白表达水平,采用酶联免疫吸附试验检测外周血IL-18、IL-1β和TGF-β水平,分析检测结果。结果140例患者检出病毒140株,其中RNA病毒86株,DNA病毒54株,主要病毒为柯萨奇病毒B、柯萨奇病毒A和疱疹病毒1型;病毒性心肌炎急性期患者NLRP3、ACS、Caspase-1 mRNA及其蛋白表达水平和血清IL-18、IL-1β、TGF-β水平均显著高于恢复期和对照组(P<0.05),恢复期和对照组各指标比较差异无统计学意义(P>0.05);病毒性心肌炎急性期患者NLRP3 mRNA及其蛋白表达与ACS、Caspase-1 mRNA表达和ACS、Caspase-1蛋白表达及血清IL-18、IL-1β、TGF-β水平均呈正相关(P<0.05)。结论老年病毒性心肌炎急性期患者NLRP3-ASC-Caspase-1-IL-18/IL-1β-TGF-β信号通路被激活,参与病理过程,可为疾病诊疗提供指导。

负载TGF-β_1微球的壳聚糖-丝素支架复合骨髓间充质干细胞修复兔关节软骨缺损的实验研究

目的研制负载转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)壳聚糖微球的壳聚糖-丝素支架复合骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)体外构建组织工程软骨,观察将其移植修复兔膝关节软骨缺损的效果。方法通过密度梯度离心法及贴壁培养法分离纯化MSCs,以抗兔CD14、CD44等单抗采用流式细胞仪进行MSCs表面抗原鉴定,获得纯化的MSCs。采用乳化交联法获得包裹TGF-β1壳聚糖缓释微球,并将该微球负载在冷冻干燥获得的壳聚糖-丝素支架上。将培养的MSCs种植到支架上,体外构建组织工程软骨,移植到兔关节软骨缺损处。移植空白支架的为实验对照组,移植体外构建的组织工程软骨为实验组。主要观察指标,流式检测的MSCs细胞表面标记情况,微球的形态,支架与细胞共培养后电镜下情况,支架移植后的兔关节修复情况及组织学检查。结果流式检测MSCs第4代及第9代细胞的CD14及CD44表面抗原的表达情况发现两代MSCs CD14表达基本呈阴性,CD44表达呈阳性,符合间充质干细胞的特性。扫描电镜观察所制备的微球基本呈球形,表面光滑,直径约为1μm,大小较均一,分散度好。细胞在壳聚糖-丝素三维支架上生长状态良好,电镜观察,可见支架孔隙内有细胞黏附生长。移植治疗后发现实验组修复明显好于对照组,实验组术后3个月实验组已经有较硬的类软骨组织填充修复,切片显示有软骨细胞规则排列,甲苯胺蓝染色为阳性,而对照组仅为纤维组织修复,切片显示为纤维组织或纤维软骨组织修复,软骨细胞排列紊乱,甲苯胺蓝染色阴性或弱阳性。结论负载TGF-β1壳聚糖微球的壳聚糖-丝素支架复合骨髓间充质干细胞体外复合培养后移植治疗修复兔膝关节软骨缺损,具有较好的疗效。

TGF-β_1对人腹膜间皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂-1的影响

【目的】观察TGF β1对人腹膜间皮细胞 (HPMCs)纤溶酶原激活物抑制剂 1(PAI 1)的mRNA和蛋白表达影响并就可能的机制进行探讨。【方法】取健康成年人大网膜进行原代培养 ,用 5ng/mlTGF β1刺激第三代培养细胞 ,采用免疫组织化学染色、Westernblot、ELISA以及RT PCR等方法 ,分别观察PAI 1的mRNA和蛋白表达 ,纤维连接蛋白 (FN)和Ⅰ型胶原 (COLⅠ )的mRNA和蛋白表达 ,细胞内磷酸化Smad2 / 3(p Smad2 / 3)的蛋白表达。【结果】刺激组PAI 1的mRNA和蛋白表达与对照组相比均显著增加 ,其中 2 4h为高峰 ,4 8h、72h依次递减 ;刺激组FN和COLⅠ的mRNA和蛋白表达与对照组比均呈时间依从性显著增加 ;对照组细胞内几乎不表达p Smad2 / 3,阳性细胞率 3% ,在刺激后 15min蛋白表达即开始增加 ,阳性细胞率2 9 % ,1h增加最明显 ,阳性细胞率达 84 % ,2h明显回落 ,此时阳性细胞率为 37%。【结论】TGF β1在致腹膜纤维化过程中诱导了HPMCs内PAI 1的转录与蛋白表达 ,这可能与TGF β1激活了HPMCs内Smad信号通路有关。

微创针刀联合rHuEPO注射治疗痛风性关节炎的临床疗效及对TGF-1、NLRP3水平的影响

目的研究微创针刀联合重组人促红细胞生成素(rHuEPO)注射治疗痛风性关节炎的临床疗效及对转化生长因子(TGF)-1、核苷酸结合寡聚化结构域样受体(NLRP)3水平的影响。方法90例痛风性关节炎患者依据随机数字表法分为观察组和对照组,每组45例,对照组采用微创针刀治疗,观察组在对照组基础上注射rHuEPO。比较两组治疗后的疗效,疼痛、贫血、膝关节功能恢复情况,NLRP3、TGF-1水平的变化,并统计分析不良反应发生情况。结果治疗后观察组总有效率(95.56%)显著高于对照组(82.22%),差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后滑膜厚度、关节积液深度均显著降低,红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)水平均显著增加,且观察组治疗后各指标水平显著优于对照组(P<0.05)。治疗后Lysholm评分显著增加,VAS显著下降,且观察组各评分显著优于对照组(P<0.05)。治疗后关节滑膜液TGF-1、NLRP3水平显著降低,且观察组各水平显著低于对照组(P<0.05)。结论微创针刀联合rHuEPO治疗痛风性关节炎疗效显著,可有效下调关节滑膜液NLRP3、TGF-1水平,降低疼痛反应,改善贫血症状,从而改善关节功能和提高临床疗效。

COX-2、bFGF及TGFβ1在慢性粒细胞白血病中的表达及其意义

目的:检测不同分期慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)患者血清环氧合酶-2(serum cyclooxygenase-2,COX-2)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)及转化生长因子(transforming growth factorβ1,TGFβ1)的变化,并探讨其在CML的诊治及预后判定中的临床意义。方法:以在安康市中心医院就诊的50例初诊患者(其中慢性期30例,加速期10例,急变期10例)为研究对象,以该院体检中心健康体检者40例为正常对照,采用ELISA方法检测血清COX-2、b FGF及TGFβ1水平,并对CML患者进行治疗前、后两个不同阶段的动态检测。结果:初诊时,CML组患者的血清COX-2及b FGF含量显著升高,而TGFβ1含量明显减低(P<0.001)。CML组加速期和急变期患者血清b FGF及COX-2水平较慢性期患者均明显增高,而TGFβ1水平均显著减低,差异有统计学意义。完全缓解(complete response,CR)时,血清b FGF及COX-2含量明显下降,而TGFβ1含量基本恢复到正常水平,与正常对照组相比较,差异无统计学意义(P>0.05);未达到缓解时,血清b FGF、COX-2及TGFβ1水平与CR组比较差异显著(均为P<0.001)。CML初诊患者治疗前血清b FGF、VEGF水平与TGFβ1呈负相关(分别为r=-0.330,P=0.020;r=-0.632,P<0.001)。结论 :CML患者初诊时COX-2及b FGF高表达,TGFβ1低表达,经过甲磺酸伊马替尼治疗后,达到CR时,血清这些因子水平基本恢复正常,提示C ML的发生、发展与这些因子密切相关。因此,动态监测CML患者血清COX-2、b FGF及TGFβ1水平,可作为CML病情评估的重要参考指标。

5-氟尿嘧啶抑制TGF-β1诱导人肝内胆管上皮细胞间质化

目的探讨5-氟尿嘧啶对TGF-β1诱导人肝内胆管上皮细胞间质化的抑制作用,并探讨其作用机制。方法原代培养人肝内胆管上皮细胞,角蛋白19荧光染色鉴定;细胞分为:对照(normal)组,TGF-β1(TGF-β1)组,5-氟尿嘧啶(TGF-β1+5-FU)组;免疫荧光染色观察CK-19、E-cadherin、vimentin和α-SMA标记蛋白;Western blot检测细胞标记蛋白及TGF-β1表达量;Real-time PCR检测细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原及TGF-β1 mRNA含量。结果原代培养的人肝内胆管上皮细胞呈多边形或者锥形,CK-19荧光染色为胞质着色;TGF-β1诱导72 h后,胆管上皮出现间质化表现,与正常组比较,vimentin、α-SMA和TGF-β1表达明显增强(P<0.05),CK-19和E-cadherin表达显著减弱(P<0.05),Ⅰ、Ⅲ型胶原及TGF-β1 mRNA含量显著升高(P<0.05);5-FU抑制胆管上皮间质化,与TGF-β1组比较,CK-19和E-cadherin表达增强(P<0.05),vimentin、α-SMA和TGF-β1表达明显减弱(P<0.05),TGF-β1 mRNA和Ⅲ型胶原mRNA含量明显降低(P<0.05)。结论 5-FU通过下调TGF-β1的表达抑制胆管上皮细胞间质化。

当归补血汤有效组分及其配伍对肝星状细胞TGF-β1/Smad信号通路的调控作用

目的观察当归补血汤有效组分及其配伍对大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)-T6转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)/Smad信号通路的调控作用.方法当归的有效成分阿魏酸、黄芪的有效成分黄芪甲苷单独应用及联合处理HSC-T6细胞24 h,收集细胞,Western blot检测HSC-T6细胞Ⅲ型胶原蛋白、Smad4和Smad7蛋白表达,实时定量PCR检测HSC-T6细胞Smad3和Ⅱ型TGF-β1受体mRNA表达.结果阿魏酸显著抑制HSC-T6细胞中Ⅲ型胶原蛋白和Smad4蛋白表达(均P<0.05),抑制Smad3和Ⅱ型TGF-β1受体mRNA表达(均P<0.05),对Smad7蛋白表达无显著性影响(P>0.05),黄芪甲苷对这些指标均无显著性影响(均P>0.05).与阿魏酸单独处理组比较,联合处理的作用效果无显著性提高(均P>0.05).结论当归补血汤的有效组分阿魏酸通过TGF-β1/Smad信号通路抑制了肝星状细胞Ⅲ型胶原蛋白表达.

糖皮质激素对重症肌无力患者血清IL-18、TGFβ-1水平的干预作用

目的探讨糖皮质激素(GC)对重症肌无力(MG)患者血清外周血白介素18(IL-18)和转化生长因子β-1(TGFβ-1)水平的干预作用。方法随机选取在我院治疗的52例重症肌无力患者为干预组,按照年龄和性别匹配60例健康对照组,采用ELISA检测干预组的患者糖皮质激素治疗前,治疗后血清IL-18,TGFβ-1水平以及健康对照组的血清IL-18,TGFβ-1水平,采用临床绝对和相对记分法判定临床疗效。结果干预组患者的血清IL-18,TGFβ-1水平与对照组差异显著(P<0.05);治疗后干预组血清IL-18水平明显下降(P<0.05),TGFβ-1水平明显升高(P<0.05)。结论糖皮质激素可以抑制IL-18,并且提高血清TGFβ-1水平进一步有效调节重症肌无力患者的细胞免疫功能。