固本通络汤对DM大鼠早期肾损害及TGFβ-1表达影响的实验研究

本研究运用固本通络汤观察其对糖尿病（DM）大鼠早期肾损害及TGF-β1表达的影响,获得较好的疗效,现报道如下。

糖皮质激素对重症肌无力患者血清IL-18、TGFβ-1水平的干预作用

目的探讨糖皮质激素(GC)对重症肌无力(MG)患者血清外周血白介素18(IL-18)和转化生长因子β-1(TGFβ-1)水平的干预作用。方法随机选取在我院治疗的52例重症肌无力患者为干预组,按照年龄和性别匹配60例健康对照组,采用ELISA检测干预组的患者糖皮质激素治疗前,治疗后血清IL-18,TGFβ-1水平以及健康对照组的血清IL-18,TGFβ-1水平,采用临床绝对和相对记分法判定临床疗效。结果干预组患者的血清IL-18,TGFβ-1水平与对照组差异显著(P<0.05);治疗后干预组血清IL-18水平明显下降(P<0.05),TGFβ-1水平明显升高(P<0.05)。结论糖皮质激素可以抑制IL-18,并且提高血清TGFβ-1水平进一步有效调节重症肌无力患者的细胞免疫功能。

重症肌无力患者IL-18、TGFβ-1的表达

目的探讨白细胞介素18(interleukin-18,IL-18)、转化生长因子β-1(transforming growth factorβ-1,TGFβ-1)在重症肌无力发病机制中的作用。方法采用基因芯片技术对30例重症肌无力患者和30名正常人外周血单个核细胞TGFβ-1、IL-18mRNA表达水平进行分析,采用酶联免疫吸附试验的方法检测血清IL-18、TGFβ-1水平,对重症肌无力患者病情按临床绝对评分法进行评分,并比较其临床意义。结果 MG患者外周血清IL-18、TGFβ-1水平显著高于正常组水平(t=6.18,P<0.01),MG患者基因芯片检测IL-18Ratio值为2.026,TGFβ-1Ratio值为2.34,结果具有一致性,Ⅱ型、Ⅲ型MG患者IL-18水平高于Ⅰ型患者,与患者临床绝对评分呈正相关(r=0.827,P<0.05)。结论 IL-18、TGFβ-1均参与重症肌无力发病机制,IL-18血清水平可能与重症肌无力病情轻重程度相关。

芪蚣抗纤方(QF)拆方中软坚散结药对免疫损伤性肝纤维化大鼠TGFβ-1定性定量表达的影响

目的:观察芪蚣抗纤方(QF)拆方中软坚散结药(蜈蚣、山慈姑)对免疫损伤性肝纤维化大鼠TGFβ-1定性定量表达的影响。方法:猪血清攻击法诱导免疫损伤性肝纤维化大鼠模型,随机分为模型组、软坚散结药大剂量干预组、软坚散结药小剂量干预组,另设正常对照组,整个实验过程共8周。免疫组化法检测肝组织TGF-β1相关表达;酶标仪ABC-ELISA法测血清TGF-β1含量。结果:免疫组化显示:正常组大鼠肝脏仅TGFβ1微弱表达,模型组较正常组TGFβ1阳性信号明显增强(P<0.01),软坚散结药干预后大鼠肝脏TGFβ1表达比模型组明显下调,(小剂量P<0.01,大剂量P<0.05),大、小剂量组与模型组相比有差异。血清TGF-β1含量:与模型组相比,软坚散结药大、小剂量干预后动物血清中的TGFβl显著降低(P<0.01)。结论:芪蚣抗纤方(QF)中软坚散结药大、小剂量对免疫损伤性大鼠肝纤维化形成和逆转均有影响,对促肝纤维化细胞因子TGFβ-1均有很好调节作用,对临床上应用软坚散结药治疗肝纤维化有一定的指导意义。

糖皮质激素对重症肌无力患者IL-18和TGFβ-1水平的影响

目的探讨糖皮质激素对重症肌无力患者IL-18和TGFβ-1水平的影响。方法 2010年3月-2013年3月期间,我院诊治的40例重症肌无力患者作为观察组,选取同期40例健康体检者作为对照组,通过双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA法),检测糖皮质激素治疗前后重症肌无力患者血清IL-18和TGFβ-1水平,并与健康体检者结果相比较。结果治疗前,与对照组相比,观察组IL-18明显较高,TGFβ-1水平明显较低,(P<0.05);与治疗前相比,重症肌无力患者治疗后IL-18明显降低,TGFβ-1水平明显升高,(P<0.05)。结论糖皮质激素通过抑制IL-18水平,提高TGFβ-1水平,改善重症肌无力患者的细胞免疫功能。

降浊汤对慢性肾小球肾炎患者血TGFβ-1、CRP的影响

目的:探讨降浊汤对慢性肾炎脾肾气虚兼湿热证患者的临床疗效及血中TGF-β1、CRP影响。方法:选择60例脾肾气虚兼湿热证慢性肾小球肾炎患者,随机分为治疗组和对照组,每组30例。两组均给予西医常规治疗,治疗组加用“降浊汤”,对照组加用“肾炎康复片合雷公藤多苷片”,比较两组临床疗效及对血TGF-β1、CRP的影响。结果:治疗组疗效明显优于对照组(P<0.05),治疗后两组24小时尿蛋白定量、血脂、TGF-β1、CRP改善明显,优于对照组(P<0.05)。结论:降浊汤可有效改善慢性肾炎患者的临床症状、降低血脂与尿蛋白,可能通过降低血TGFβ-1、CRP水平来调节患者免疫紊乱状态、抑制炎症反应,达到延缓慢性肾脏病进展的目的。

食用白酒对实验性肝纤维化TGF-β_1的影响

目的:观察实验性大鼠肝纤维化转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达,探讨食用白酒(贵州茅台酒)对肝纤维化的影响。方法:雄性Wistar大鼠79只随机分为:正常对照组(n=9)、茅台酒四氯化碳组(n=12)、乙醇四氯化碳组(n=13)、茅台酒组(n=14)、乙醇组(n=16)、四氯化碳造模组(n=15)。实验第4周和第8周末分批处死动物40、37只,取血和肝脏,分别行血清肝功能、肝纤维化血清学指标检测、HE染色评估肝纤维化程度、免疫组化法检测肝组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)水平。结果:乙醇四氯化碳组和茅台酒四氯化碳组间层粘连蛋白(LN)差异有统计学意义(P<0.05)。在第8周末,茅台酒四氯化碳组的Ⅲ型前胶原(PCⅢ)与四氯化碳造模组差异有统计学意义(P<0.05)。对血清LN、PCⅢ、肝脏TGF-β1表达的影响,茅台酒组和乙醇组相比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:茅台酒没有显著增加TGF-β1的表达,对肝纤维化的发展有一定的抑制作用,同乙醇相比,茅台酒可以延缓四氯化碳造成的纤维化损伤。

TGFβ-1和HGF在小鼠皮肤损伤修复过程中的表达及与损伤时间的关系

用免疫组织化学染色法和RT—PCR法，检测小鼠皮肤切创组织中不同时间的转换增殖因子β-1和肝细胞增殖因子基因表达的变化，并探讨这些因子作为推断损伤时间依据的可能性。

糖尿病肾病TGF-β_1,Ⅳ型胶原水平变化的临床意义及辛伐他汀的治疗作用

目的 :探讨血清转化生长因子 β1 (TGF β1 ) ,Ⅳ型胶原水平变化在糖尿病肾病患者中的临床意义及其在辛伐他汀治疗后的变化 .方法 :糖尿病患者 80例根据尿白蛋白排泄率(UAER)分为糖尿病无肾病组 (A组 ) 36例和糖尿病肾病组 (B组 ) 4 4例 .B组接受辛伐他汀治疗 .分别采取所有患者于辛伐他汀治疗前和治疗后 6 ,1 2和 2 4wk的静脉血和 2 4h尿 .用ELISA法测定不同时期、用辛伐他汀治疗后糖尿病肾病患者血清TGF β1 ,Ⅳ型胶原水平 ,以黄柳酸比浊法测定 2 4h尿中总蛋白含量 .4 0例健康者作为对照组 .结果 :糖尿病患者血中TGF β1 ,Ⅳ型胶原水平较对照组明显升高 (A组均为P <0 .0 5 ,B组均为P <0 .0 1 ) ,B组较A组患者血中TGF β1 ,Ⅳ型胶原水平明显升高 (均为P <0 .0 5 ) .用辛伐他汀治疗后尿中蛋白含量减少 ,血中TGF β1 ,Ⅳ型胶原水平逐渐降低 .结论 :TGF β1 和IV型胶原可能在糖尿病肾病的发病过程中起重要作用 .辛伐他汀治疗糖尿病肾病的机制可能是通过抑制TGF β1

AntagomiR-103协同阿霉素对TGF-β1诱导的HepG2细胞转化及生长的影响

目的:探讨antagomiR-103协同阿霉素(ADM)对TGF-β1诱导肝癌细胞(HepG2)发生上皮-间质细胞转化(EMT)及HepG2细胞存活率的影响。方法:HepG2细胞体外培养,设为control组、TGF-β1组、TGF-β1+ADM组、TGF-β1+microRNA inhibitor N.C组、TGF-β1+ADM+microRNA inhibitor N.C组、TGF-β1+antagomiR-103组、TGF-β1+ADM+antagomiR-103组及使用western-blot检测EMT标志蛋白N-Cadherin、E-Cadherin、vimentin的表达水平;设control组、TGF-β1组、antagomiR-103组、TGF-β1+antagomiR-103组,用不同浓度的ADM作用于各组细胞24 h,使用MTT法检测细胞存活率,并计算IC50。结果:与control组相比,antagomiR-103+ADM组E-Cadherin表达上调,N-Cadherin、Vimentin表达下调;细胞存活率随ADM浓度的增高而逐渐降低;在ADM浓度相同的条件下,不同药物预处理组之间进行比较,当ADM浓度为25 mg/L时,antagomiR-103+ADM组的细胞存活率明显低于其他组。结论:antagomiR-103联合ADM可抑制TGF-β1诱导发生EMT的HepG2细胞存活。

肝硬化患者外周血中TGFβ_1和ET-1的表达

目的 研究肝硬化患者外周血中转化生长因子 β1 (TGFβ1 )及血浆内皮素 - 1(ET- 1)的表达 ,并探讨其与肝脏贮备功能和食管静脉曲张的关系。方法 采用标准生物学方法即 TGFβ1 对水貂肺上皮细胞生长抑制的方法及放免法分别检测 72例肝硬化患者及 2 4例正常人血清 TGFβ1 及血浆 ET- 1水平。结果 肝硬化组血清TGFβ1 (11.77± 1.32 ng/ m l)及血浆 ET- 1(78.37± 17.5 4pg/ ml)水平明显高于正常对照组 (P<0 .0 5 ) ;ET- 1水平与肝功能及食道静脉曲张程度相关分析显示 ET- 1水平越高则肝脏贮备功能越差 (r=0 .94) ,食道静脉曲张程度越重 (r=0 .87) ;TGFβ1 含量与肝脏贮备功能及食道静脉曲张程度无关 (r=0 .11及 0 .0 3)。结论 TGFβ1 和 ET- 1可能是参与肝硬化病理生理过程的重要神经肽。ET- 1可作为反映肝硬化程度、判断预后的参考指标。

新发病重症肌无力患者外周血IL-18、TGFβ-1水平与糖皮质激素疗效的研究

目的探讨糖皮质激素(GC)对新发病重症肌无力(MG)患者外周血白介素18(IL-18)、转化生长因子β-1(TGFβ-1)水平及临床疗效的影响。方法采用ELISA法检测26例新发病重症肌无力患者GC治疗前、治疗2月后和30名健康对照组血清IL-18、TGFβ-1水平,肌无力严重程度和临床疗效判定采用临床绝对和相对记分法。结果 MG患者外周血清IL-18、TGFβ-1水平均高于健康对照组(P<0.05);GC治疗2月后MG患者IL-18水平显著下降(t=8.92,P<0.01),TGFβ-1水平升高(t=-6.66,P<0.05);GC治疗前后预后差的全身型MG患者IL-18水平始终高于预后好的眼肌型MG患者(P<0.05),MG患者IL-18、TGFβ-1变化值与临床相对评分无明显相关性(r=0.301、r=-0.386,P>0.05)。结论 GC可通过抑制IL-18、提高TGFβ-1血清分泌水平而有效调节MG患者细胞免疫功能。

通络保肾复方对LPS刺激的肾小球系膜细胞增殖及其TGF-β_1表达的影响

目的:探讨通络保肾复方对肾小球系膜细胞(GMCs)增殖及肾小球系膜细胞转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法:将5%含药血清培养基加入体外培养的肾小球系膜细胞,分别于脂多糖(LPS)刺激肾小球系膜细胞12h、24h、48h、60h后,MTT方法检测各组肾小球系膜细胞的增殖情况,以及Western-blot方法检测LPS刺激48 h时肾小球系膜细胞TGF-β1的表达。结果:LPS刺激12h后肾小球系膜细胞开始增殖,48h达到高峰,60h后开始下降。通络保肾复方能够抑制肾小球系膜细胞的增殖,其中以通络保肾复方大剂量组和中剂量组效果显著,与LPS组比较差异显著(P<0.05)。同时通络保肾复方可以抑制48 h时由LPS刺激导致的肾小球系膜细胞TGF-β1的表达。结论:本研究结果提示,通络保肾复方可以抑制LPS诱导的肾小球系膜细胞的增殖及肾小球系膜细胞TGF-β1的表达,抑制细胞外基质的异常积聚和沉积,从而延缓肾小球硬化的进程。

TGF-β_1对INF-γ诱导肺鳞癌细胞β_2-M表达的影响

目的 探讨TGF β1 对肺鳞癌细胞MHCⅠ类抗原表达的影响。方法 以原代培养的人肺鳞癌细胞为对象 ,采用免疫荧光法 ,通过流式细胞仪分别检测加入rhINF γ及rhTGF β1 +rhINF γ肺鳞癌细胞 β2 M的表达状况。结果 rhINF γ能显著诱导肺鳞癌细胞 β2 M的表达 (P <0 0 1) ,但这种诱导作用在各组癌细胞中均能被rhTGF β1 显著抑制 (P <0 0 1) ,且与其分化程度无关。结论 TGF β1 对INF γ诱导人肺鳞癌细胞MHCⅠ类抗原表达有明显抑制作用。

GW501516通过TGFβ-Smad3信号途径促进人脐静脉内皮细胞PAI-1的表达

为探讨过氧化物酶体增殖物激活型受体δ(peroxisome proliferator-activated receptor-δ,PPARδ)激动剂GW501516对人脐静脉内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)表达的影响及机制,采用siRNA、TGFβ-Smad3信号通路阻滞剂等处理细胞,经实时定量PCR、Western blot方法分别检测细胞中PAI-1及磷酸化Smad3蛋白的表达.结果显示,与对照组比较,GW501516可诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中PAI-1表达,且此效应呈浓度和时间依赖性(P<0.05);siRNA沉默PPARδ的表达后,可阻抑GW501516对HUVEC细胞PAI-1表达的促进作用;TGFβ-Smad3信号通路抑制剂SB-431542与SIS3均可降低HUVEC细胞pSmad3蛋白的表达,而细胞PAI-1表达也随之降低.结果提示,GW501516可促进HUVEC细胞PAI-1的表达,其机制可能与TGFβ-Smad3信号通路有关.

乳腺癌组织中TGFβ_1、VEGF、c-erbB-2的表达及其与浸润转移的关系

目的 探讨转化生长因子 β1、血管内皮生长因子及c -erbB -2在乳腺癌组织中的表达及其与浸润转移的关系。方法 采用免疫组化EnVisionTM二步法检测 6 5例乳腺癌组织中TGFβ1、VEGF、c -erbB -2的表达情况。结果 TGFβ1、VEGF、c -erbB -2的表达均与乳腺癌淋巴结转移密切相关 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,TGFβ1表达还与癌浸润相关 (P <0 .0 1) ;VEGF表达与TGFβ1、c -erbB -2表达呈显著正相关 (P均 <0 .0 1)。结论 TGFβ1、VEGF和c -erbB -2的过度表达预示着乳腺癌具有较强的转移能力 ;3种蛋白的过度表达可能在乳腺癌的浸润转移过程中起协同作用。

妊娠期高血压疾病与转化生长因子TGFβ1-509C/T基因多态性关系的探讨

目的探讨妊娠期高血压疾病(以下简称妊高征)与转化生长因子TGFβ1-509C/T基因多态性的关系。方法运用多聚酶链反应技术检测32例妊高征患者,68例正常妊娠妇女转化生长因子TGFβ1-509C/T基因多态性。结果妊高征患者TGFβ1-509C/T基因CC、CT、TT基因型频率及C、T等位基因频率分别为6.25%、43.75%、50.00%,对照组CC、CT、TT基因型频率及C、T等位基因频率分别为14.71%、45.59%、39.7%,两组基因型及等位基因频率比较差异无统计学意义。结论从目前检测例数来讲,TGFβ1-509C/T基因多态性与妊娠高血压综合征的发病无关。

软肝冲剂对CCl_4肝纤维化大鼠TGFβ_1mRNA表达的影响

目的 :研究软肝冲剂对CCl4肝纤维化大鼠转化生长因子 β1(TGFβ1)mRNA表达的影响 ,从分子水平探讨软肝冲剂促进肝细胞再生、阻止肝纤维化、肝硬化形成的作用机制。方法 :采用Northern blot方法检测CCl4肝纤维化大鼠TGFβ1mRNA表达。结果 :Northern blot杂交显示 ,实验第 45、90天 ,模型组、中药各组和西药秋水仙碱组大鼠肝脏TGFβ1mRNA表达均较正常组增强 (P <0 0 1)。但中药各组和西药秋水仙碱组TGFβ1mRNA表达水平均低于模型组(P <0 0 1)。其中中药高剂量组TGFβ1mRNA表达水平均低于中药低剂量组和西药秋水仙碱组 (P <0 0 1)。结论 :软肝冲剂能调节CCl4肝纤维化大鼠TGFβ1mRNA表达 ,促进肝细胞再生 ,抑制肝纤维化、肝硬化的形成。

缬沙坦下调糖尿病大鼠肾皮质葡萄糖转运蛋白1和TGFβ_1 mRNA的表达

观察血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂缬沙坦对实验性糖尿病大鼠肾脏皮质葡萄糖转运蛋白 1(GLUT1 )和转化生长因子 β1 (TGFβ1 )mRNA表达的影响 ,以探讨其保护肾功能的机理。用链尿佐菌素腹腔注射法复制糖尿病大鼠模型 ,动物随机分为糖尿病组、缬沙坦治疗组及对照组 ;分别于实验第 4、6周末测定大鼠平均动脉压、血糖、血肌酐、尿肌酐、肾重 体重、尿白蛋白排泄率及平均肾小球面积和平均肾小球体积。用逆转录 PCR(RT PCR)法对肾皮质GLUT1及TGFβ1 mRNA表达进行半定量分析。在第 4周及第 6周末 ,各组大鼠平均动脉压无差异 ,治疗组肌酐清除率、肾重 体重、尿白蛋白排泄率及肾小球平均面积和平均体积均显著低于同时期的糖尿病组。糖尿病组GLUT1 及TGFβ1mRNA表达较正常组显著增高 ,治疗组二者表达均有所下降。缬沙坦能够下调糖尿病大鼠肾皮质GLUT1 及TGFβ1mRNA表达 ,具有保护肾脏的作用。

鸡冠花黄酮类对成骨细胞增殖和TGFβ_1的作用

目的 探讨鸡冠花黄酮类化合物对体外培养大鼠颅骨成骨细胞增殖、分化和转化生长因子 - β(TGFβ1)表达的影响作用 ,为临床骨质疏松症的预防和治疗提供参考。方法 提取新生大鼠颅骨成骨细胞制作体外培养模型 ,然后用噻唑盐 (MTT)法测定鸡冠花黄酮类化合物对体外培养成骨细胞的增殖作用 ,氨基安替吡啉测酚法测成骨细胞内碱性磷酸酶 (ALP)活性 ,SP免疫组化法研究鸡冠花黄酮类化合物对成骨细胞TGFβ1表达的影响。结果 鸡冠花黄酮类化合物可以促进体外培养大鼠成骨细胞的增殖 ,并显著性促进成骨细胞分化。对第 3代成骨细胞TGFβ1表达进行图像分析 ,培养 3d ,鸡冠花黄酮类化合物剂量在 0 5以上组TGFβ1表达阳性 ,培养 5d ,所有实验TGFβ1均表达阳性促使成骨细跑合成TGFβ1的免疫组化阳性表达。结论 鸡冠花黄酮类化合物可以提高成骨细胞的增殖和分化 ,并有促进分泌TGFβ1的功能 ,对于预防骨质疏松症的发生有重要的参考价值。