非重症及重症脓毒症患者外周血单核细胞炎性因子分泌及Toll样受体4表达的研究

目的 观察革兰阴性菌感染的非重症及重症脓毒症患者内毒素（LPS）刺激后外周血单核细胞炎性因子分泌及TLR4的表达.方法 以我院ICU革兰阴性菌感染所致脓毒症52例患者为研究对象,28例非重症脓毒症患者,24例重症脓毒症患者,选取30例健康对照者.所有人均晨起空腹采血,分离外周血单核细胞,将细胞加入1 μg/mL细菌LPS培养24 h后流式细胞仪检测单核细胞表面TLR4的表达,同时应用放射免疫法测定外周血单核细胞培养液中TNF-α、IL-10的浓度.结果 ①重症脓毒症患者单核细胞培养上清液中TNF-α的浓度低于非重症脓毒症患者及健康对照组（P〈0.05）,但IL-10浓度高于其他两组（P〈0.05）,IL-10/TNF-α比值明显高于非重症脓毒症患者及健康对照组（P〈0.01）.②三组患者外周血单核细胞LPS刺激后,细胞表面TLR4表达差异无统计学意义（P〉0.05）.结论 重症脓毒症患者外周血单核细胞体外给予LPS刺激后,促炎因子表达较非重症脓毒症组下降,且伴有抗炎因子表达的上调,IL-10/TNF-α比值明显升高,显示重症脓毒症患者存在更加严重的免疫抑制现象,但这种现象不能单纯用细胞膜表面TLR4的表达解释,其可能存在更复杂的机制.

人肝癌组织TLR2和TLR4蛋白表达与基因突变相关性分析

目的:探讨肝癌组织中TLR2和TLR4蛋白表达与p53、PIK3CA和β-catenin基因突变的相关性。方法:用组织微阵列及免疫组织化学法检测中国医科大学附属盛京医院2008-03-30-2010-09-30手术切除60例肝癌组织标本及7例正常肝组织中TLR2和TLR4蛋白表达情况,并结合临床病理参数进行分析;通过DNA测序分析肝癌组织中p53、PIK3CA和β-catenin基因突变率,统计学分析TLR2和TLR4蛋白表达与3种基因突变的相关性,以及对肝癌预后的影响。结果:肝癌组织中TLR2蛋白高表达35例(58.3%),低表达25例(41.7%);TLR4蛋白高表达31例(51.7%),低表达29例(48.3%),与正常肝组织(1/7)比较,TLR2(P<0.001)和TLR4(P=0.002)蛋白在肝癌组织中的表达均升高,差异有统计学意义。肝癌组织中,TLR2表达与肝癌分化程度(r=0.657)和TNM分期(r=0.509)相关,TLR4表达与肝癌分化程度(r=0.657)和TNM分期(r=0.682)亦相关,P值均<0.001。肝癌组织中存在p53、PIK3CA和β-catenin基因突变,突变率分别为26.7%(16/60)、18.3%(11/60)和25.0%(15/60);统计学分析发现,TLR2和TLR4蛋白在肝癌组织中的表达与3种基因突变明显相关。Kaplan-Meier生存分析显示,TLR2和TLR4蛋白表达与术后无复发生存时间明显相关,Log-Rank检验,P值分别为0.029和0.020。多因素Cox比例风险模型分析显示,TLR2蛋白表达与预后明显相关,P=0.019。结论:肝癌组织中TLR2和TLR4蛋白表达可作为判断肝癌预后的指标;TLR2和TLR4蛋白表达与p53、PIK3CA和β-catenin基因突变相关,在肝癌微环境中某些致癌因子可能通过TLRs引起相关基因突变而致癌。