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缺血性疾病患者血清lncRNA PVT1和FOXM1表达水平及联合心脏磁共振延迟强化成像与预后的关系
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作者 尹晓翔 赵森 +2 位作者 郭颖 刘梦雯 庄琰 《中国CT和MRI杂志》 2024年第3期73-75,共3页
目的 探讨缺血性疾病患者血清长链非编码RNA浆细胞瘤转化迁移基因1(lncRNA PVT1)和叉头框转录因子M1(FOX M1)表达水平及联合心脏钆对比剂延迟增强磁共振成像(LGE-MRI)与预后的关系。方法 选取2021年2月-2022年2月我院收治的缺血性心脏... 目的 探讨缺血性疾病患者血清长链非编码RNA浆细胞瘤转化迁移基因1(lncRNA PVT1)和叉头框转录因子M1(FOX M1)表达水平及联合心脏钆对比剂延迟增强磁共振成像(LGE-MRI)与预后的关系。方法 选取2021年2月-2022年2月我院收治的缺血性心脏病患者118例即为研究组,随访一年根据随访过程中是否发生主要心脏不良事件(MACE),分为MACE组32例,无MACE组86例。同期选择在我院体检健康的志愿者118例为对照组。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测血清lncRNA PVT1的相对表达量。采用酶联免疫吸附试验(E LISA)检测FOXM1水平。受试者工作特征(ROC)曲线分析LGE-MRI、血清lncRNA PVT1和FOXM1对缺血性心脏病患者预后发生MACE的预测价值。结果 研究组患者DBP、SBP、TG、TC、 LDL-C、GLU水平与对照组相比显著升高,HDL-C水平显著降低(P<0.05)。与对照组相比,研究组的血清中lncRNA PVT1和FOXM1水平显著升高(P<0.05)。与无MACE组相比,MACE组患者DBP、SBP、TC、LDL-C水平显著升高, HDL-C水平显著降低(P<0.05)。与无MACE组相比,MACE组患者血清中lncRNA PVT1和FOXM1水平显著升高(P<0.05)。MACE组的LGE-MRI阳性数量显著高于无MACE组(P<0.)05。与LGE-MRI、血清lncRNA PVT1和FOXM1单独预测相比,三者联合预测MACE发生的AUC更高(Z=7.221,P<0.001;Z=7.737,P<0.001;Z=7.091,P<0.001)。结论 缺血性心脏病预后发生MACE的患者血清lncRNA PVT1和FOXM1水平呈高表达,二者联合LGE-MRI对MACE的发生有一定的预测价值。 展开更多
关键词 长链非编码rna浆细胞瘤转化迁移基因1 叉头框转录因子m1 心脏钆对比剂延迟增强磁共振成像 预后 缺血性疾病
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低氧通过HIF-1α介导Hepcidin mRNA的去甲基化修饰促进高原红细胞增多症的分子机制研究
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作者 白洁 黄河 +2 位作者 张莲 浩光东 万玛草 《河北医学》 CAS 2024年第8期1250-1255,共6页
目的:探讨HIF-1α和Hepcidin在高原红细胞增多症致病机制中的作用。方法:招募和测定高原红细胞增多症(HAE组)和同一高海拔地区健康个体(HH组),以及出生于同一高海拔地区并在超过2年的时间段居住于低海拔地区的健康个体(LH组)外周血血红... 目的:探讨HIF-1α和Hepcidin在高原红细胞增多症致病机制中的作用。方法:招募和测定高原红细胞增多症(HAE组)和同一高海拔地区健康个体(HH组),以及出生于同一高海拔地区并在超过2年的时间段居住于低海拔地区的健康个体(LH组)外周血血红蛋白浓度[Hb]、血红蛋白质量(Hbmass)、血容量和外周血O_(2)饱和度(SpO_(2))。ELISA法测定上述个体外周血清HIF-1α和Hepcidin的水平。体外低氧诱导HepG2细胞,实验分组为Control组和Hypoxia组,测定细胞中HIF-1α和Hepcidin mRNA和蛋白质表达水平。m6A含量分析、RNA免疫共沉淀法(RIP)、双荧光素酶报告基因分析法,mRNA稳定性分析法深入探讨HIF-1α对Hepcidin mRNA的m6A去甲基化修饰的分子机制。结果:与LH组相比,HH组[Hb]、Hbmass水平和血容量升高,SpO_(2)降低;与HH组相比,HAE组[Hb]、Hbmass水平和血容量升高,SpO_(2)降低(P<0.05)。与Control组相比,Hypoxia组HIF-1αmRNA和蛋白质相对表达水平升高,Hepcidin mRNA和蛋白质相对表达水平降低(P<0.05)。与Control组相比,Hypoxia组HepG2细胞的m6A(%)水平降低(P<0.05)。mRNA稳定性分析HepG2细胞中Hepcidin mRNA水平,与Control组相比,Hypoxia组Hepcidin mRNA相对表达水平降低(P<0.05)。双荧光素酶报告基因分析结果显示,与共转染了Hepcidin 3'-UTR和shRNA NT组的HepG2细胞相比,共转染了Hepcidin 3'-UTR和HIF-1αshRNA组的HepG2细胞相对荧光素酶活性升高(P<0.05)。RIP结果显示,与IgG组相比,FTO Ab组Hepcidin 3'-UTR富集水平升高(P<0.05)。结论:低氧上调HIF-1α介导Hepcidin mRNA的去甲基化修饰参与高原红细胞增多症疾病进展。 展开更多
关键词 高原红细胞增多症 缺氧诱导因子-1Α 铁调素 m6A rna去甲基化修饰
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METTL3介导的PDK1 mRNA m^(6)A修饰通过Akt/mTOR信号通路促进肺上皮细胞增殖
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作者 靳艾 李梦宇 孙青竹 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期934-946,共13页
腺苷N6-位点甲基化(m^(6)A)在细胞增殖过程中发挥重要作用。RNA甲基转移酶3(METTL3)作为催化m^(6)A关键酶,其介导m^(6)A修饰在肺上皮细胞增殖中的作用机制尚不明确。本研究旨在探讨METTL3介导m^(6)A修饰调控肺上皮细胞增殖的效应及机制... 腺苷N6-位点甲基化(m^(6)A)在细胞增殖过程中发挥重要作用。RNA甲基转移酶3(METTL3)作为催化m^(6)A关键酶,其介导m^(6)A修饰在肺上皮细胞增殖中的作用机制尚不明确。本研究旨在探讨METTL3介导m^(6)A修饰调控肺上皮细胞增殖的效应及机制。结果显示,在肺上皮细胞中敲低METTL 3显著抑制细胞生长,而过表达METTL3则促进了细胞增殖(P<0.05)。进一步的蛋白质免疫印迹结果显示,细胞生长和增殖的关键蛋白质PCNA在METTL 3敲降的肺上皮细胞中蛋白质水平的表达显著下调,并且Akt以及mTOR的磷酸化水平显著降低(P<0.05)。细胞免疫荧光结果发现,METTL 3敲降的肺上皮细胞中m^(6)A修饰水平显著降低(P<0.05)。实时荧光定量PCR及蛋白质免疫印迹结果表明,Akt-mTOR信号通路上游调控分子PDK1的mRNA和蛋白质表达水平在METTL 3敲降的肺上皮细胞中显著下降(P<0.05)。机制上,m^(6)A-IP-qPCR和RIP-qPCR结果进一步表明,METTL3催化PDK 1 mRNA的3′UTR区域m^(6)A修饰,进而被YTH N6-甲基腺苷RNA结合蛋白1(YTHDF1)识别,增强其mRNA的稳定性。总之,本研究揭示了METTL3通过增强PDK1 m^(6)A修饰,进而激活Akt-mTOR信号通路,促进细胞增殖。本研究为METTL3在上皮细胞增殖中的新角色提供了证据,同时为治疗肺上皮细胞损伤修复提供了新的治疗靶点。 展开更多
关键词 甲基转移酶3 rna m^(6)A修饰 细胞增殖 肺上皮细胞 磷酸肌醇依赖性蛋白激酶-1
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MMP-9,2,7及其抑制剂TIMP-1,2,3在卵巢肿瘤组织中的表达及临床意义 被引量:10
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作者 胡晓霞 李力 +4 位作者 黎丹戎 张玮 陈心秋 张洁清 唐步坚 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第10期1194-1198,共5页
背景与目的:基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)通过降解细胞外基质在肿瘤的侵袭与转移中起着重要作用,MMPs活性又受到其抑制剂(tissueinhibitorofmatrixmetalloproteinase,TIMPs)的调节。本研究通过检测MMP-9、MMP-2、MMP-... 背景与目的:基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)通过降解细胞外基质在肿瘤的侵袭与转移中起着重要作用,MMPs活性又受到其抑制剂(tissueinhibitorofmatrixmetalloproteinase,TIMPs)的调节。本研究通过检测MMP-9、MMP-2、MMP-7及TIMP-1、TIMP-2、TIMP-3mRNA在卵巢肿瘤组织中的表达,探讨其与卵巢癌临床病理特征和预后的关系。方法:应用RT-PCR方法检测48例卵巢癌、21例良性肿瘤及22例正常卵巢组织中MMP-9、MMP-2、MMP-7及TIMP-1、TIMP-2、TIMP-3mRNA的表达。结果:MMP-9阳性率和MMP-9、MMP-2半定量值在卵巢癌组织中明显高于正常卵巢组织(P<0.05)。TIMP-2、MMP-7、TIMP-3在卵巢恶性及良性肿瘤组织中的阳性率及半定量值明显高于正常卵巢组织。MMP-9/TIMP-1在卵巢癌组织中的比值(0.91±0.67)明显高于正常卵巢组织(0.15±0.34)。MMP-9表达水平与卵巢癌的手术病理分期及预后有关,在Ⅲ~Ⅳ期患者中的表达(1.13±0.66)显著高于Ⅰ~Ⅱ期患者(0.60±0.54)(P<0.05);MMP-9其阳性患者平均生存时间为(43.00±17.12)个月,累积生存率为47.37%,明显低于MMP-9阴性者(100%)。结论:MMP-9、MMP-2、MMP-7、TIMP-2、TIMP-3基因在卵巢恶性肿瘤组织中的表达增加。 展开更多
关键词 mmP-9 卵巢癌 表达水平 mmP-7 timp-2 timp-1 timp-3 rna 抑制剂 高表达
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香连片对小鼠溃疡性结肠炎癌变过程中DKK-1mRNA、β-catenin和PCNA蛋白表达的影响及意义 被引量:2
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作者 李素云 吴琳群 +2 位作者 宋花玲 蔡西晨 王园 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1276-1278,共3页
目的通过观察香连片对DKK-1 m RNA、β-catenin和PCNA蛋白表达的影响,初步明确香连片预防小鼠溃疡性结肠炎癌变的作用机制。方法 48只BALB/C小鼠随机分为空白组、模型组、香连片用药组和柳氮磺胺嘧啶组,采用DMH/DSS复合法诱导小鼠溃疡... 目的通过观察香连片对DKK-1 m RNA、β-catenin和PCNA蛋白表达的影响,初步明确香连片预防小鼠溃疡性结肠炎癌变的作用机制。方法 48只BALB/C小鼠随机分为空白组、模型组、香连片用药组和柳氮磺胺嘧啶组,采用DMH/DSS复合法诱导小鼠溃疡性结肠炎癌变模型,造模时间为18周,用药时间为11周。Real-time PCR检测DKK-1基因的表达,SABC免疫组织化学法检测β-catenin和PCNA蛋白的表达。结果 Real-time PCR检测结果表明香连片可以上调DKK-1 m RNA的表达,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05);免疫组织化学结果表明香连片可以下调β-catenin和PCNA蛋白的表达,与模型组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论香连片预防小鼠溃疡性结肠炎癌变的作用机制与上调DKK-1的表达,阻抑Wnt/β-catenin信号通路有一定的关系。 展开更多
关键词 香连片 溃疡性结肠炎 癌变 DKK-1 mrna Β-CATENIN PCNA
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近海沉积物DlPCBs对斑马鱼胚胎EROD和cyp1a mRNA的影响 被引量:1
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作者 聂芳红 蔡吉榛 +7 位作者 王小宁 林红英 Ravi Gooneratne Anthony Hay 马驿 巨向红 郑锦庆 陈进军 《生态毒理学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期364-368,共5页
为探究湛江近海域海洋沉积物中类二噁英多氯联苯(dioxin-like polychlorinated biphenyls,Dl PCBs)的生物学毒性效应,选取湛江近海域2个地点(近工业区TS和近生活区JSW)采集沉积物样品,制备近海域沉积物Dl PCBs提取物,将斑马鱼胚胎... 为探究湛江近海域海洋沉积物中类二噁英多氯联苯(dioxin-like polychlorinated biphenyls,Dl PCBs)的生物学毒性效应,选取湛江近海域2个地点(近工业区TS和近生活区JSW)采集沉积物样品,制备近海域沉积物Dl PCBs提取物,将斑马鱼胚胎暴露于不同浓度的Dl PCBs提取物,测定斑马鱼胚胎7-乙氧基异吩恶唑脱乙基酶(ethoxyresorufin-O-deethylase,EROD)活性和cyp1a m RNA相对表达量。结果发现,JSW采样点Dl PCBs提取物染毒组EROD酶活性变化与TS采样点Dl PCBs提取物一致,在各染毒浓度下,斑马鱼仔鱼EROD酶活性为对照组的1.1~1.8倍。TS和JSW采样点不同浓度Dl PCBs提取物暴露斑马鱼胚胎96 h后,使斑马鱼仔鱼cyp1a m RNA相对表达量是对照组的3.36~19.45倍。说明一定浓度的近海沉积物Dl PCBs能诱导斑马鱼仔鱼EROD酶活性和cyp1a m RNA表达量升高,且呈现浓度-效应关系。 展开更多
关键词 类二噁英多氯联苯 斑马鱼胚胎 EROD酶 cyp1a m rna 近海沉积物
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微小RNA在叉头转录因子M_1激活非小细胞肺癌上皮向间质转化中的作用 被引量:2
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作者 吴艳 邹黎菲 +1 位作者 惠复新 汪家坤 《中国临床医学》 2016年第6期739-743,共5页
目的:探讨微小RNA(microRNA)在叉头转录因子M_1(Fox M_1)激活非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞上皮向间质转化(epithelial-mesenehymal transition,EMT)中的作用。方法:将Fox M_1过表达质粒,Fox M_1-shRNA,miR-539、... 目的:探讨微小RNA(microRNA)在叉头转录因子M_1(Fox M_1)激活非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞上皮向间质转化(epithelial-mesenehymal transition,EMT)中的作用。方法:将Fox M_1过表达质粒,Fox M_1-shRNA,miR-539、miR-485-5p模拟物及其抑制物转染至人NSCLC细胞株中,应用Western印迹和real-time PCR检测细胞株中Fox M_1蛋白和mRNA及miR-539、miR-485-5p的表达。同时应用CCK-8和细胞迁移实验观察Fox M_1、miR-539和miR-485-5p对NSCLC细胞的增殖和侵袭功能的影响。应用荧光素酶报告基因实验检测miR-539和miR-485-5p与EMT调控蛋白ZEB_1和Snail_1的关系。结果:Fox M_1过表达下调NSCLC细胞中miR-539、miR-485-5p,转染Fox M_1-shRNA后NSCLC细胞中miR-539、miR-485-5p升高。MiR-539和miR-485-5p抑制Fox M_1对NSCLC细胞增殖和侵袭的促进作用。NSCLC细胞中miR-539对EMT调控蛋白ZEB_1,miR-485-5p对EMT调控蛋白Snail_1的表达有抑制作用。结论:miR-539和miR-485-5p能抑制NSCLC细胞中Fox M_1-EMT通路,从而影响NSCLC细胞的增殖和侵袭,抑制NSCLC的远处转移。 展开更多
关键词 叉头转录因子m1 上皮向间质转化 非小细胞肺癌 微小rna
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复合平肥茶对单纯性肥胖大鼠脂肪组织UCP-1 mRNA和下丘脑POMC mRNA的影响 被引量:1
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作者 刘志君 何军锋 +2 位作者 刘霞 胡岳山 屈娅婷 《中医药导报》 2017年第7期35-38,共4页
目的:观察复合平肥茶对单纯性肥胖大鼠(DIO)体质量、血脂、血糖、白色脂肪组织解偶连蛋白1(UCP-1)和下丘脑阿片促黑色素原(POMC)的影响。方法:50只SD雄性大鼠随机分为低脂组(10只)和高脂组(40只),分别以低脂饲料及高脂饲料喂养,高脂组... 目的:观察复合平肥茶对单纯性肥胖大鼠(DIO)体质量、血脂、血糖、白色脂肪组织解偶连蛋白1(UCP-1)和下丘脑阿片促黑色素原(POMC)的影响。方法:50只SD雄性大鼠随机分为低脂组(10只)和高脂组(40只),分别以低脂饲料及高脂饲料喂养,高脂组大鼠造模成功后,随机分为模型组、奥利司他组、复合平肥茶组,每组10只。低脂组和模型组予以蒸馏水灌胃,奥利司他组和复合平肥茶组分别予以奥利司他和复合平肥茶灌胃。治疗结束后,分别检测体质量、血脂、血糖、白色脂肪组织UCP-1 m RANA表达水平和下丘脑POMC mRNA表达水平。结果:复合平肥茶组和奥利司他组体质量增长明显低于模型组(P<0.05),甘油三酯(TG)、血总胆固醇(TC)、血低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL),空腹血糖(FPG)均明显低于模型组(P<0.05);复合平肥茶和奥利司他组脂肪组织UCP-1 mRNA和下丘脑POMC mRNA较模型组均明显升高(P<0.05)。奥利司他组大鼠皮毛发黄,精神萎靡,活动度减少,且大便溏稀不成形,而复合平肥茶大鼠皮毛有光泽,精神可,活动灵敏,大便正常。结论:复合平肥茶可以抑制大鼠体质量的增长,增加UCP-1 mRNA和POMC mRNA表达促使白色脂肪棕色化,保护糖脂代谢平衡。 展开更多
关键词 复合平肥茶 脂肪 UCP-1 m rna POmC m rna 大鼠
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抗端粒酶M1RNA核酶真核表达载体构建及肝癌细胞转染的研究
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作者 姜英俊 程广 +2 位作者 孔心涓 王培戈 李建国 《齐鲁医学杂志》 2006年第1期1-3,共3页
目的构建抗人端粒酶RNA(hTR)的M1RNA核酶的真核表达载体,并筛选稳定转染核酶的肝癌细胞株。方法设计并应用PCR技术合成hTR模板的M1RNA核酶,应用pEGFPC1载体构建M1RNA核酶的真核表达质粒,应用脂质体LipofectAMINEAM2000转染肝癌细胞系Hep... 目的构建抗人端粒酶RNA(hTR)的M1RNA核酶的真核表达载体,并筛选稳定转染核酶的肝癌细胞株。方法设计并应用PCR技术合成hTR模板的M1RNA核酶,应用pEGFPC1载体构建M1RNA核酶的真核表达质粒,应用脂质体LipofectAMINEAM2000转染肝癌细胞系HepG2,应用G418筛选稳定表达核酶的细胞株。结果测序证实hTR的M1RNA核酶基因被正确克隆入真核表达载体pEGFPC1,应用脂质体成功转染肝癌细胞系HepG2。结论成功构建了hTR的M1RNA核酶,并筛选出了稳定表达核酶的肝癌细胞株。 展开更多
关键词 m1rna核酶 端粒 末端转移酶 肝癌细胞 转染
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小干扰RNA沉默HIF-1α对缺氧状态下脉络膜黑色素瘤细胞中MMP-2表达的影响 被引量:1
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作者 苑伏香 张霆 +4 位作者 周占宇 王良雨 赵娟 王爽 卢发艳 《国际眼科杂志》 CAS 2015年第7期1139-1142,共4页
目的:以小干扰RNA沉默人眼脉络膜黑色素瘤细胞中的低氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)基因,在缺氧状态下观察其对人眼脉络膜黑色素瘤(human uveal melanoma cell,OCM-1)细胞中基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase... 目的:以小干扰RNA沉默人眼脉络膜黑色素瘤细胞中的低氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)基因,在缺氧状态下观察其对人眼脉络膜黑色素瘤(human uveal melanoma cell,OCM-1)细胞中基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)基因表达的影响。方法:将脉络膜黑色素瘤细胞分为正常组与缺氧组,其中将缺氧组再分成单纯缺氧组、干扰组、脂质体对照组、阳性对照组和阴性对照组;对正常组细胞用含有浓度为10%的胎牛血清和1%的双抗(青-链霉素混合液)的DMEM高糖培养基进行培养。在缺氧组人眼OCM-1细胞的培养瓶中加入100μmol/L CoC l2以构建肿瘤细胞内部的缺氧微环境。干扰组转染HIF-1αsiRNA,阴性对照组转染无义siRNA,阳性对照组转染β-actin siRNA,脂质体对照组转染空脂质体。RT-PCR检测细胞中HIF-1α和MMP-2 mRNA的表达,行Western-blot检测HIF-1α和MMP-2蛋白的表达。结果:与正常组相比,单纯缺氧组HIF-1α蛋白的表达增高(P<0.05),而其mRNA表达量无明显变化(P>0.05);MMP-2 mRNA及蛋白的表达升高(P<0.05)。缺氧培养的各组之间相比,阳性对照组β-actin mRNA表达下降(P<0.05),证实转染成功;干扰组HIF-1αmRNA和MMP-2mRNA和蛋白表达均下降(P<0.05),阴性对照组、脂质体对照组各检测因素均无明显差别(P>0.05)。结论:缺氧条件下可以提高人眼脉络膜黑色素瘤细胞中HIF-1α蛋白的表达,而且HIF-1α蛋白的表达水平可以影响MMP-2的转录与翻译,从而可能进一步影响人眼脉络膜瘤细胞的外周浸润和远处转移能力。 展开更多
关键词 脉络膜黑色素瘤 缺氧 HIF-1Α mmP-2 小干扰rna
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miR-370-3p和FOXM1 mRNA对人成骨肉瘤细胞增殖、迁移、侵袭的影响观察及其靶向关系验证 被引量:2
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作者 王晓欣 刘红艳 朱兴 《山东医药》 CAS 2022年第18期36-40,共5页
目的观察骨肉瘤组织中miR-370-3p、FOXM1 mRNA的表达,观察miR-370-3p和FOXM1 mRNA对人成骨肉瘤细胞系MG63增殖、迁移及侵袭的影响,并验证其靶向关系机制。方法①观察骨肉瘤及癌旁组织miR-370-3p及及其下游靶基因叉头框蛋白M1(FOXM1)mRN... 目的观察骨肉瘤组织中miR-370-3p、FOXM1 mRNA的表达,观察miR-370-3p和FOXM1 mRNA对人成骨肉瘤细胞系MG63增殖、迁移及侵袭的影响,并验证其靶向关系机制。方法①观察骨肉瘤及癌旁组织miR-370-3p及及其下游靶基因叉头框蛋白M1(FOXM1)mRNA表达:37例骨肉瘤患者,均行肿瘤切除术,术中保存骨肉瘤及癌旁组织,采用实时定量PCR法检测骨肉瘤及癌旁组织miR-370-3p、FOXM1 mRNA,分析骨肉瘤组织FOXM1 mRNA表达与miR-370-3p表达的相关性。采用Kaplan-Meier曲线、Log-Rank检验分析miR-370-3p表达与骨肉瘤患者临床病理参数及预后关系。②观察miR-370-3p过表达及FOXM1抑制表达的人成骨肉瘤细胞系MG63增殖、迁移及侵袭的影响:取MG63细胞分为1~4组,分别转染miR-370-3p mimic(促进miR-370-3p表达)、mimic NC(空载体质粒)、空白对照组及FOXM1 siRNA干扰质粒(FOXM1基因敲除质粒)。分别于转染0、24、48、72、96 h采用CCK-8法观察各组细胞增殖情况,采用划痕实验观察各组细胞迁移情况,采用Transwell小室观察各组细胞侵袭能力。③预测MG63细miR-370-3p与FOXM1靶向关系构建pmirGLO-FOXM1-野生型/突变型质粒,将MG63细胞分为A、B、C、D组,分别用1μL pmirGLO-FOXM1-WT+200 nmol miR-370-3p mimic、1μL pmirGLO-FOXM1-WT+mimic NC、1μL pmirGLO-FOXM1-MUT+200 nmol miR-370-3p mimic、1μL pmirGLO-FOXM1-MUT+200 nmol mimic NC转染。转染24 h时采用双荧光素酶报告检测系统观察各组细胞荧光活性。结果①与癌旁组织比较,骨肉瘤组织miR-370-3p相对表达量低、FOXM1 mRNA相对表达量高(t=4.66,3.41;P均<0.05)。随miR-370-3p表达量升高,骨肉瘤组织FOXM1 mRNA表达量呈下降趋势(R2=0.6481,P=0.1284)。miR-370-3p表达与骨肉瘤患者临床分期、远端转移情况有关(χ2=4.430、6.027;P均<0.05)。miR-370-3p低表达的骨肉瘤患者预后比miR-370-3p高表达患者差(P<0.05)。②2、3组相比,转染48、72、96 h时1、4组细胞OD450值均降低(P均<0.05)。与2、3组相比,转染24 h时1、4组划痕愈合率低、穿膜细胞数少(P均<0.05)。③与B组比较,A组细胞荧光活性降低(P<0.05);与D组比较,C组细胞中荧光活性变化不明显(P>0.05)。结论骨肉瘤组织中miR-370-3p表达降低、FOXM1 mRNA表达升高。促进miR-370-3p表达及FOXM1抑制表达的MG63细胞增殖、侵袭及迁移能力均降低。骨肉瘤细胞中miR-370-3p可能通过靶向调控FOXM1表达来抑制MG63的增殖、迁移及侵袭。 展开更多
关键词 微小rna 微小rna-370-3p 叉头框蛋白m1 骨肉瘤 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭
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Insulin-like growth factor 2 mRNA-binding protein 1 promotes cell proliferation via activation of AKT and is directly targeted by microRNA-494 in pancreatic cancer 被引量:8
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作者 Bai-Shun Wan Ming Cheng Ling Zhang 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2019年第40期6063-6076,共14页
BACKGROUND Studies have shown that insulin-like growth factor 2 mRNA-binding protein 1(IGF2BP1)plays critical roles in the genesis and development of human cancers.AIM To investigate the clinical significance and role... BACKGROUND Studies have shown that insulin-like growth factor 2 mRNA-binding protein 1(IGF2BP1)plays critical roles in the genesis and development of human cancers.AIM To investigate the clinical significance and role of IGF2BP1 in pancreatic cancer.METHODS Expression levels of IGF2BP1 and microRNA-494(miR-494)were mined based on Gene Expression Omnibus datasets and validated in both clinical samples and cell lines by quantitative real-time polymerase chain reaction and Western blot.The relationship between IGF2BP1 expression and clinicopathological factors of pancreatic cancer patients was analyzed.The effect and mechanism of IGF2BP1 on pancreatic cancer cell proliferation were investigated in vitro and in vivo.Analyses were performed to explore underlying mechanisms of IGF2BP1 upregulation in pancreatic cancer and assays were carried out to verify the posttranscriptional regulation of IGF2BP1 by miR-494.RESULTS We found that IGF2BP1 was upregulated and associated with a poor prognosis in pancreatic cancer patients.We showed that downregulation of IGF2BP1 inhibited pancreatic cancer cell growth in vitro and in vivo via the AKT signaling pathway.Mechanistically,we showed that the frequent upregulation of IGF2BP1 was attributed to the downregulation of miR-494 expression in pancreatic cancer.Furthermore,we discovered that reexpression of miR-494 could partially abrogate the oncogenic role of IGF2BP1.CONCLUSION Our results revealed that upregulated IGF2BP1 promotes the proliferation of pancreatic cancer cells via the AKT signaling pathway and confirmed that the activation of IGF2BP1 is partly due to the silencing of miR-494. 展开更多
关键词 PANCREATIC cancer INSULIN-LIKE growth factor 2 mrna-binding protein 1 Proliferation microrna-494
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敲低金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)抑制TGF-β1诱导的MRC-5人胚肺成纤维细胞增殖和胶原蛋白合成 被引量:6
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作者 李家树 史家欣 +2 位作者 胡蓉 赵新成 梁程程 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期25-30,共6页
目的探讨敲低金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的MRC-5人胚肺成纤维细胞生长的影响。方法将MRC-5细胞分为空白组、 TGF-β1组、转染阴性对照小干涉RNA的TGF-β1组和转染TIMP-1小干涉RNA(siTIMP-1)的TGF-β... 目的探讨敲低金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的MRC-5人胚肺成纤维细胞生长的影响。方法将MRC-5细胞分为空白组、 TGF-β1组、转染阴性对照小干涉RNA的TGF-β1组和转染TIMP-1小干涉RNA(siTIMP-1)的TGF-β1组。噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期分布, ELISA检测上清液肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量, Western blot法检测TIMP-1、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、 1型胶原蛋白(Col1)和β联蛋白(β-catenin)的蛋白水平。结果转染siTIMP-1组的MRC-5细胞TIMP-1蛋白水平明显降低。与空白组相比, TGF-β1组细胞活力明显升高、 G0/G1期细胞百分比明显降低、 S期和G2/M期细胞百分比明显升高, TNF-α含量明显升高,α-SMA、 Col1和β-catenin的蛋白水平均明显升高。与TGF-β1组相比,敲低TIMP-1水平后,细胞活力明显降低、 G0/G1期细胞百分比明显升高、 S期和G2/M期细胞百分比明显降低, TNF-α含量明显降低,α-SMA、 Col1和β-catenin蛋白表达均明显降低。转染阴性对照小干涉RNA的细胞与TGF-β1组各项指标均无明显差异。结论敲低TIMP-1水平可抑制MRC-5细胞增殖活性、减少胶原蛋白合成及TNF-α释放,可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。 展开更多
关键词 金属蛋白酶组织抑制物1(timp-1) β联蛋白(β-catenin) 细胞周期 小干涉rna 肿瘤坏死因子α(TNF-α)
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白细胞介素-1β对原代培养Leydig细胞白细胞介素-αmRNA基因表达的诱导作用 被引量:1
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作者 王德利 童钟杭 吕志良 《科技通报》 1994年第5期326-330,共5页
最近发现睾丸中存在IL-I样物质,但其来源不明,作者用改良的Klinefelter方法分离纯种大鼠睾丸Leydig细胞,培养于含有人重组IL-1β的牛血清的DEME/F12培养基中,根据Chomczyns-ki及Sa... 最近发现睾丸中存在IL-I样物质,但其来源不明,作者用改良的Klinefelter方法分离纯种大鼠睾丸Leydig细胞,培养于含有人重组IL-1β的牛血清的DEME/F12培养基中,根据Chomczyns-ki及Sacdchi方法,抽提全部细胞的RNA,最后用Northern印迹分析发现IL-β导致Leydig细胞中IL-1αmRNA表达增加,且呈剂量依赖性,脂多糖亦刺激IL-1αmRNA的表达,但佛波脂无此作用.结果表明Leydig细胞为IL-I的主要来源,它具有自分泌和旁分泌效应. 展开更多
关键词 白细胞介素1 LEYDIG细胞 IL-Iαm 基因表达 rna
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METTL1介导的m7G RNA甲基化在肿瘤发生发展中的调控作用
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作者 张佳谊 武霄勇 +3 位作者 祝嘉 闫学敏 文锦旭 王跃欣 《中国医药导刊》 2023年第4期389-393,共5页
RNA甲基化在许多基本的生物学过程中起着关键作用,包括基因表达的调控、信使RNA的稳定性和稳态。m7G甲基化通过修饰各种RNA分子,包括信使RNA(mRNA)、核糖体RNA(rRNA)、microRNA和转运RNA(tRNA)等,参与生理和病理功能。m7G是发生在tRNA... RNA甲基化在许多基本的生物学过程中起着关键作用,包括基因表达的调控、信使RNA的稳定性和稳态。m7G甲基化通过修饰各种RNA分子,包括信使RNA(mRNA)、核糖体RNA(rRNA)、microRNA和转运RNA(tRNA)等,参与生理和病理功能。m7G是发生在tRNA可变环中最普遍的修饰之一,由人类METTL1-WDR4复合物调控。m7G修饰调控mRNA的转录、microRNA的生物合成、生物学功能、tRNA的稳定性、18SrRNA的加工和成熟。作为m7G的甲基转移酶,METTL1在各种肿瘤中发挥着重要作用,包括影响甲基化水平、肿瘤相关基因稳定性、癌细胞信号通路等多种调节机制。因此,阐明METTL1在肿瘤发生发展过程中的机理,对肿瘤的诊疗具有重要意义。本研究综述了METTL1介导的m7G RNA甲基化在急性髓细胞白血病(AML)、肝内胆管癌(ICC)、肝细胞癌(HCC)、结肠癌(CC)、肺癌、鼻咽癌、膀胱癌等各种肿瘤发生发展过程中调控作用的研究进展,探讨了METTL1与RNA稳定性的关系以及对多种肿瘤的调节机制,认为METTL1可能成为新的诊断标志物和治疗靶点。 展开更多
关键词 mETTL1 m7G rna甲基化 肿瘤 调控作用
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血清Tim-3 mRNA、MCP-1、IL-22、sCD30对慢性心力衰竭并发肺部感染患者的诊断价值 被引量:7
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作者 王春玲 孙增晋 +3 位作者 王俊茹 毕瑞云 刘玲 尹金淑 《岭南心血管病杂志》 2020年第5期574-579,共6页
目的探讨血清人T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(T cell immunoglobulin mucin molecule 3,Tim-3)mRNA、人单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、白细胞介素-22(interleukin-22,IL-22)、人可溶性CD30(soluble CD3... 目的探讨血清人T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(T cell immunoglobulin mucin molecule 3,Tim-3)mRNA、人单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、白细胞介素-22(interleukin-22,IL-22)、人可溶性CD30(soluble CD30,sCD30)对慢性心力衰竭并发肺部感染患者的诊断价值。方法选取2016年10月到2019年1月北京市社会福利医院收治的老年慢性心力衰竭患者144例作为研究对象,依据是否发生肺部感染将患者分为对照组72例和肺部感染组72例,另选72名健康体检者为健康组。抽血检测3组人群血清中Tim-3mRNA、MCP-1、IL-22、sCD30浓度并进行比较。结果肺部感染组患者血清Tim-3 mRNA、MCP-1、IL-22、sCD30浓度高于对照组,对照组高于健康组,差异有统计学意义(P<0.05)。慢性心力衰竭并发肺部感染患者血清MCP-1、IL-22、sCD30、Tim-3 mRNA之间互为正相关,并且随着肺感染程度分级和纽约心脏协会心功能分级的升高而升高,不同分级间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。Tim-3 mRNA、MCP-1、IL-22、sCD30诊断肺部感染的受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)的曲线下面积(area under curve,AUC)均接近于0.9,说明诊断准确性较高。结论Tim-3mRNA、MCP-1、IL-22、sCD30可能是慢性心力衰竭患者是否肺部感染的诊断标志物,监测其浓度变化对患者病情评估具有重要临床意义。 展开更多
关键词 心力衰竭 肺部感染 T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3mrna 人单核细胞趋化蛋白-1 白细胞介素-22 可溶性CD30
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IGF_(2)BP_(1)调控lncRNA NEAT1在类风湿关节炎中的作用
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作者 肖剑伟 蔡旭 +3 位作者 黄新民 洪易炜 颜真波 陈新鹏 《临床与病理杂志》 CAS 2024年第3期354-362,共9页
目的:类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种常见的全身性自身免疫疾病,可能导致关节变形和功能障碍。本研究旨在探索胰岛素样生长因子-2 mRNA结合蛋白1(insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 1,IGF_(2)BP_(1))在R... 目的:类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种常见的全身性自身免疫疾病,可能导致关节变形和功能障碍。本研究旨在探索胰岛素样生长因子-2 mRNA结合蛋白1(insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 1,IGF_(2)BP_(1))在RA中的表达水平,以及其对长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)核丰富转录本1(nuclear paraspeckle assembly transcript 1,NEAT1)稳定性的影响和在RA发病机制中的作用。方法:通过GEO(Gene Expression Omnibus)数据库获取RA数据集,并将其分为正常对照组和RA组,使用R软件分析获取N^(6)-甲基腺苷(N^(6)-methyladenosine,m^(6)A)相关的甲基化酶的表达量并进行差异分析。分析差异表达的m^(6)A甲基化酶与lncRNA NEAT1的相关性。通过在线网站ENCORI预测与lncRNA NEAT1结合的蛋白质,并与lncRNA NEAT1表达相关的m^(6)A甲基化酶取交集,从而获取关键基因。通过RNA蛋白质相互作用分析实验(RNA pull-down)验证在RA滑膜细胞中NEAT1与关键基因结合的情况。通过蛋白质印迹法验证关键基因在正常滑膜细胞和RA滑膜细胞中的表达水平。在RA滑膜细胞中转染关键基因的小干扰RNA,通过real-time RT-PCR检测NEAT1在滑膜细胞中的表达水平。结果:差异分析结果显示:与正常对照组相比,共有8个m^(6)A甲基化基因在RA组中存在差异表达,其中IGF_(2)BP_(1)、甲基转移酶样蛋白14(methyltransferase 14,N^(6)-adenosine-methyltransferase subunit,MEEEL14)与lncRNA NEAT1存在相关性;ENCORI预测结果显示:共有23个蛋白质能够与lncRNA NEAT1结合,与NEAT1共表达m^(6)A甲基化酶取交集,获得NEAT1相关m^(6)A甲基化蛋白IGF_(2)BP_(1)。蛋白质印迹法显示:与正常对照组相比,RA组中IGF_(2)BP_(1)蛋白在RA滑膜细胞中表达升高(P<0.05);RNA pull-down结果显示IGF_(2)BP_(1)蛋白与NEAT1结合;real-time RT-PCR的结果表明:敲减IGF_(2)BP_(1)可显著降低NEAT1 mRNA表达水平(P<0.01)。结论:IGF_(2)BP_(1)可能通过稳定lncRNA NEAT1表达参与RA发病,调控IGF_(2)BP_(1)水平可能是一种新的治疗RA的方法。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 N6-甲基腺苷甲基化 长链非编码rna核丰富转录本1 胰岛素样生长因子-2 mrna结合蛋白1 生物信息学
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补肾活血方对多囊卵巢综合征伴不孕症患者卵巢颗粒细胞IGF-1R m RNA的影响 被引量:3
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作者 王江鱼 祁志勇 祁康康 《中国初级卫生保健》 2016年第7期38-39,42,共3页
目的探讨补肾活血方对多囊卵巢综合征伴不孕症患者卵巢颗粒细胞IGF-1R m RNA的影响。方法选取2010年3月—2014年3月静宁县人民医院诊治多囊卵巢综合征伴不孕症患者70例,随机分为观察组和对照组,每组各35例。对照组患者给予常规促排卵治... 目的探讨补肾活血方对多囊卵巢综合征伴不孕症患者卵巢颗粒细胞IGF-1R m RNA的影响。方法选取2010年3月—2014年3月静宁县人民医院诊治多囊卵巢综合征伴不孕症患者70例,随机分为观察组和对照组,每组各35例。对照组患者给予常规促排卵治疗,观察组患者在对照组治疗的基础上给予补肾活血方治疗,疗程为6个月经周期。观察并记录两组患者在相应方法干预后血清雌二醇(E2)、睾酮(T)、黄体生成素/卵泡雌激素(LH/FSH)和中医症候积分的变化情况;测定取卵日卵巢颗粒细胞IGF-1R m RNA的表达情况。结果治疗前,两组患者的上述观察指标相比,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组患者的E2升高,T、LH/FSH和中医症候积分下降,其中观察组患者的改善程度优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者卵巢颗粒细胞IGF-1R m RNA的表达显著高于对照组,差异有统计学意义(t=3.938,P=0.000)。结论对多囊卵巢综合征伴不孕症患者给予补肾活血方治疗,可以提高IGF-1R m RNA的表达水平,促进卵泡发育,调节机体的黄体功能,提高治疗效果,值得临床推广。 展开更多
关键词 补肾活血方 多囊卵巢综合征 卵巢颗粒细胞 IGF-1R m rna
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Mitigating Root Knot Nematode Propagation on Transgenic Tobacco via <i>in Planta</i>Hairpin RNA Expression of <i>Meloidogyne incognita</i>—Specific PolA1 Sequence
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作者 Peter Nkachukwu Chukwurah Samuel Aduse Poku +3 位作者 Akira Yokoyama Ai Takeda Masahiro Shishido Ikuo Nakamura 《American Journal of Plant Sciences》 2019年第5期866-884,共19页
Root knot nematodes are top priority nematode pests that significantly constrain agricultural productivity globally especially in developing countries. However, expressing double stranded RNA (dsRNA) of essential nema... Root knot nematodes are top priority nematode pests that significantly constrain agricultural productivity globally especially in developing countries. However, expressing double stranded RNA (dsRNA) of essential nematode genes in susceptible plants is known to confer protection against these pests via RNA silencing. This molecular-based strategy is called host induced gene silencing (HIGS) and the selection of appropriate target nematode gene is critical to its success. In this study, therefore, we focused on root knot nematode PolA1, an essential single copy nuclear gene encoding the largest subunit of RNA polymerase I enzyme and evaluated its effectiveness as a target in conferring nematode resistance on Agrobacterium-mediated transformed tobacco plants. Transgenic tobacco expressing Meloidogyne incognita-specific (MiS) dsRNA of PolA1 gene showed significant reduction in nematode fecundity and multiplication compared to wild type plants in both T0 and T1 generations. T0 plants showed varying degrees of agronomic vigorover WT plants possibly due to varying levels of processed siRNA. However, production of MiS siRNAs in the transgenic plants coupled with significant reduction of PolA1 transcript expression in nematodes feeding on roots of transgenic plants provided evidence of HIGS. Taken together, our results show that PolA1 is a potentially effective target for HIGS-mediated reduction of root knot nematode damage on transgenic tobacco. Given the homology of our target sequence among Meloidogyne species, this protection could be broad range against other root knot nematodes aside M. incognita. 展开更多
关键词 m. incognita NEmATODE Resistance N. tabacum rna Silencing PolA1 Gene
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构建M1型巨噬细胞相关lncRNA签名预测肿瘤免疫微环境
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作者 吴琦 刘一鸣 +1 位作者 胡青松 吴慧慧 《中国科学技术大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期26-37,66,共13页
长链非编码RNA(lncRNA)被认为是肿瘤微环境和肿瘤免疫微环境中至关重要的分子。巨噬细胞作为免疫系统的重要成员,与M1型巨噬细胞功能相关的lncRNA依然需要进一步的探讨。本文基于肿瘤微环境中M1型巨噬细胞浸润程度高和低的队列样本的转... 长链非编码RNA(lncRNA)被认为是肿瘤微环境和肿瘤免疫微环境中至关重要的分子。巨噬细胞作为免疫系统的重要成员,与M1型巨噬细胞功能相关的lncRNA依然需要进一步的探讨。本文基于肿瘤微环境中M1型巨噬细胞浸润程度高和低的队列样本的转录组差异构建了lncRNA签名。该lncRNA签名包含7个lncRNA∶LINC01494,ZDHHC20-IT1,LINC01450,LINC00871,EVX1-AS,KIF25-AS和AADACL2-AS1。这些lncRNA均在M1巨噬细胞缺乏型病人样本中高表达,表明它们在抑制巨噬细胞浸润和极化为M1亚型过程中的潜在作用,进而导致免疫排斥型的肿瘤微环境,而这已被证明与不良预后密切相关。该lncRNA签名不仅预测了不理想的临床预后,也与抗原处理和递呈障碍所导致的免疫抑制性环境相关。此外,我们也评估了该lncRNA签名在免疫检查点抑制疗法中的预测价值,这进一步丰富和增强了lncRNA在预测免疫治疗响应情况的价值。 展开更多
关键词 结肠癌 m1型巨噬细胞 长非编码rna 肿瘤免疫微环境 免疫检查点治疗
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