TIP47对巨噬细胞内脂肪滴形成及甘油三酯的影响

目的探讨RNA干扰技术对巨噬细胞TIP47蛋白的抑制作用,并进一步研究其对细胞内脂肪滴形成及甘油三酯的影响。方法应用siRNA技术选择性抑制TIP47表达,Western blot分别测定TIP47和ADRP蛋白表达。油红O染色检测细胞内脂肪滴形成。结果 TIP47 siRNA选择性抑制TIP47蛋白表达,但对ADRP蛋白表达无影响,TIP47 siRNA抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的细胞内脂肪滴形成,下调甘油三酯含量。结论应用TIP47siRNA转染明确抑制TIP47蛋白表达,选择性下调TIP47抑制巨噬细胞内脂肪滴形成及降低甘油三酯含量,从而可能抑制泡沫细胞的形成,提示TIP47有可能是动脉粥样硬化相关性疾病防治的分子目标。

促酰化蛋白通过PLC信号途径调控脂滴相关蛋白TIP47的表达

目的研究在3T3-L1脂肪细胞诱导分化过程中促酰化蛋白(ASP)对脂滴相关蛋白TIP47表达的影响,及阻断细胞PLC信号途径后此影响的变化。方法(1)对诱导分化过程中的3T3-L1脂肪细胞分别给予ASP、U73122及U73122和ASP处理,并设立相应空白对照;(2)RT-PCR检测细胞中TIP47mRNA的表达,Westernblot检测细胞中TIP47蛋白的表达。结果(1)ASP对3T3-L1脂肪细胞中TIP47mRNA和蛋白表达有显著的上调作用;(2)PLC信号途径阻断剂U73122对其有显著的下调作用;(3)U73122和ASP处理后脂肪细胞中TIP47mRNA和蛋白表达水平较仅ASP处理的脂肪细胞有显著降低,而较仅U73122处理的脂肪细胞有明显增高。结论PLC信号途径参与ASP调节TIP47表达的信号转导,从分子水平深化了对ASP成脂作用的认识,为肥胖症的认识及防治开拓新的思路。

促酰化蛋白对脂肪细胞分化中脂滴相关蛋白TIP47表达的影响

研究促酰化蛋白(acylation stimulating protein,ASP)在3T3-L1脂肪细胞分化中对脂滴相关蛋白TIP47(tail-interacting protein 47 kD)表达的影响,从而探讨ASP在成脂方面的重要意义.用免疫荧光染色法观察3T3-L1前脂肪细胞中TIP47的表达定位;采用经典激素鸡尾酒法诱导分化3T3-L1前脂肪细胞,用RT-PCR和Western印迹方法检测诱导分化的3T3-L1脂肪细胞中TIP47 mRNA和蛋白表达;在分化过程中不同时点,对诱导分化中的3T3-L1脂肪细胞分别给予胰岛素和ASP处理,并设立相应空白对照,用RT-PCR和Western印迹方法检测TIP47 mRNA和蛋白表达.结果显示,3T3-L1前脂肪细胞中TIP47主要在胞浆内表达;诱导分化过程中的3T3-L1脂肪细胞TIP47 mRNA和蛋白的表达水平呈时间依赖性降低;ASP对诱导分化的3T3-L1脂肪细胞中TIP47 mRNA和蛋白表达有显著的上调作用,但随着分化至48 h,其上调作用已不明显;胰岛素仅在分化的0 d对脂肪细胞中TIP47 mRNA和蛋白表达有上调作用,之后基本无影响.结果提示,ASP促成脂作用可能与其调节脂滴相关蛋白TIP47的表达密切相关,从而为认识及防治肥胖症开拓新的思路.

尾连蛋白TIP47结构及其生物学功能研究进展

尾连蛋白TIP47,又称胎盘蛋白17(PP17)或甘露糖6磷酸结合蛋白1(M6PRBP1),是脂滴包被蛋白(PAT)家族蛋白成员之一,不仅参与脂质代谢,还与Rab9协同作用于甘露糖-6-磷酸受体(MPRs)胞浆结构域,参与MPR从核内体到反式高尔基复合体的网络运输,近年来研究表明,TIP47也参与某些疾病过程。TIP47具有双重分布特点,不仅存在于胞浆,而且结合于脂滴表面,这与细胞代谢状态和易改变的疏水结构有关。它在组织中广泛表达,本文就TIP47的结构、表达特点及功能加以综述。

PAT家族蛋白在细胞内脂滴代谢过程中的作用

哺乳动物细胞内的甘油三酯是以脂滴的形式贮存的,现在有很多证据表明,脂滴参与多种代谢过程,因而被看作胞内有功能的细胞器。脂滴含有甘油三酯构成的脂质核心,脂核表面覆盖有单层磷脂,在单层磷脂内镶嵌着在结构上具有相关性的PAT家族蛋白,包括perilipin、ADRP、TIP47和S3-12。本文就这些蛋白在甘油三酯水解和脂滴合成中的调节作用加以综述。

Leptin通过JAK-STAT3通路抑制原代大鼠脂肪细胞perilipin mRNA的表达

【目的】探讨瘦素(Leptin)影响大鼠脂肪细胞perilipin、ADRP和TIP47 mRNA表达的分子机理。【方法】以体外培养的原代大鼠脂肪细胞为研究对象,用50 ng/mL Leptin及Leptin与JAK-STAT3通路抑制剂(AG490)、MEK通路抑制剂(U0126)、PPARgamma激活剂(罗格列酮(Ros))联合处理原代大鼠脂肪细胞3 h,提取总RNA,半定量(Semi-quantitative,SQ)RT-PCR法检测PPAR gamma、perilipin、ADRP和TIP47 mRNA的表达情况。【结果】阻断JAK-STAT3通路,可以减弱50 ng/mL Leptin对原代大鼠脂肪细胞perilipin mRNA表达的抑制作用(P<0.05),但加剧了Leptin对大鼠脂肪细胞ADRP和TIP47 mRNA表达的抑制(P<0.05);阻断MEK通路可以加剧Leptin对大鼠脂肪细胞perilipin、ADRP和PPAR gamma mRNA表达的抑制作用(P<0.05)。【结论】Leptin通过JAK-STAT3通路抑制原代大鼠脂肪细胞perilipin mRNA的表达。

47kD尾连蛋白在病毒感染过程中的作用

47kD尾连蛋白(tail interacting protein of47 kD, TIP47)是PAT蛋白家族成员,主要定位于脂滴(lipid droplets, LDs)表面及细胞质中,参与脂质代谢调节及病毒复制、转运、组装、释放过程,而且人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV)、丙型肝炎病毒(hepatitis C virus, HCV)和登革病毒(dengue virus, DENV)等多种病毒感染与此过程密切相关。现就目前TIP47在HIV、HCV、DENV等多种病毒感染中所起的作用作一概述,旨在为抗病毒治疗及疫苗研制提供新的思路与途径。