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毛白杨TIR-NBS-LRR基因转化烟草的研究 被引量:10
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作者 李海霞 张志毅 +3 位作者 张谦 安新民 李琰 刘婷婷 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期73-78,共6页
该文采用农杆菌介导法将从毛白杨中克隆得到的TIR-NBS-LRR抗病基因(PtDRG01)导入烟草中,经抗生素筛选和PCR分子检测,获得了一批阳性转化植株。进而对这些阳性转化植株进行烟草花叶病毒接种实验,从表型观察结果发现,在接种病毒1周和6周后... 该文采用农杆菌介导法将从毛白杨中克隆得到的TIR-NBS-LRR抗病基因(PtDRG01)导入烟草中,经抗生素筛选和PCR分子检测,获得了一批阳性转化植株。进而对这些阳性转化植株进行烟草花叶病毒接种实验,从表型观察结果发现,在接种病毒1周和6周后,转基因烟草株系TG-11的发病程度明显低于非转基因烟草。荧光定量分析结果显示,转基因烟草株系TG-11叶片中的烟草花叶病毒(TMV)数量显著低于非转基因植株,且该转基因株系中的PtDRG01基因转录水平显著高于非转基因植株。这些结果表明,毛白杨PtDRG01基因具有明显的抗病功能,其高效表达能够显著提高烟草的抗TMV能力。该文通过对烟草的遗传转化与病毒接种实验,鉴定了PtDRG01基因的功能,可为其他TIR-NBS-LRR基因的功能鉴定提供参考。 展开更多
关键词 毛白杨 tir-nbs-lrr基因 转基因烟草 烟草花叶病毒 抗病性
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中间锦鸡儿CiDR1的克隆及干旱胁迫下的表达分析 被引量:2
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作者 武苾菲 李万峰 +3 位作者 徐海燕 张立峰 齐力旺 韩素英 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2017年第2期238-244,共7页
[目的]研究并了解中间锦鸡儿CiDR1基因功能及其对干旱胁迫的响应,为抗性育种提供候选基因。[方法]通过RACE技术从中间锦鸡儿中克隆CiDR1基因的c DNA全长,利用生物信息学分析软件对其基因结构及功能进行分析和预测。再通过qRT-PCR技术对... [目的]研究并了解中间锦鸡儿CiDR1基因功能及其对干旱胁迫的响应,为抗性育种提供候选基因。[方法]通过RACE技术从中间锦鸡儿中克隆CiDR1基因的c DNA全长,利用生物信息学分析软件对其基因结构及功能进行分析和预测。再通过qRT-PCR技术对干旱胁迫后的幼苗中的CiDR1表达模式进行研究。[结果]从中间锦鸡儿中克隆到CiDR1基因的c DNA全长共计4 297 bp,Gen Bank登录号为KP277100。生物信息学分析表明,预测的CiDR1蛋白序列中含有1 243个氨基酸残基,具有抗病基因特征结构域TIR、NB-ARC、LRR等,其等电点为6.35,不稳定指数为42.91,不具备信号肽,为非分泌蛋白,定位于细胞质中。定量PCR检测发现,CiDR1基因在幼年期的茎中表达量较低,在成年期的叶片中表达量较高;在干旱胁迫处理后的幼苗中,CiDR1表达水平有明显下降,表明该基因的表达受干旱抑制,可能与中间锦鸡儿适应干旱相关。[结论]中间锦鸡儿在干旱胁迫后其根、茎和叶中CiDR1的表达均明显下降,表明CiDR1的表达受干旱抑制,可能与中间锦鸡儿适应干旱相关,进一步研究发现CiDR1在根、茎、叶中的表达水平可能受发育阶段调控。 展开更多
关键词 中间锦鸡儿 CI DR1 tir-nbs-lrr 干旱
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Recognition of a salivary effector by the TNL protein RCSP promotes effector-triggered immunity and systemic resistance in Nicotiana benthamiana
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作者 Weiwei Rao Tingting Ma +6 位作者 Jiayuan Cao Yajun Zhang Sisi Chen Shu Lin Xiaoxiao Liu Guangcun He Li Wan 《Journal of Integrative Plant Biology》 2025年第1期150-168,共19页
Insects secret chemosensory proteins(CSPs)into plant cells as potential effector proteins during feeding.The molecular mechanisms underlying how CSPs activate plant immunity remain largely unknown.We show that CSPs fr... Insects secret chemosensory proteins(CSPs)into plant cells as potential effector proteins during feeding.The molecular mechanisms underlying how CSPs activate plant immunity remain largely unknown.We show that CSPs from six distinct insect orders induce dwarfism when overexpressed in Nicotiana benthamiana.Agrobacterium-mediated transient expression of Nilaparvata lugens CSP11(NlCSP11)triggered cell death and plant dwarfism,both of which were dependent on ENHANCED DISEASE SUSCEPTIBILITY 1(EDS1),N requirement gene1(NRG1)and SENESCENCE-ASSOCIATED GENE 101(SAG101),indicating the activation of effector-triggered immunity(ETI)in N.benthamiana.Overexpression of NlCSP11 led to stronger systemic resistance against Pseudomonas syringae DC3000 lacking effector HopQ1-1 and tobacco mosaic virus,and induced higher accumulation of salicylic acid(SA)in uninfiltrated leaves compared to another effector XopQ that is recognized by a Tollinterleukin-1 receptor(TIR)domain nucleotidebinding leucine-rich repeat receptor(TNL)called ROQ1 in N.benthamiana.Consistently,NlCSP11-induced dwarfism and systemic resistance,but not cell death,were abolished in N.benthamiana transgenic line expressing the SA-degrading enzyme Nah G.Through large-scale virus-induced gene silencing screening,we identified a TNL protein that mediates the recognition of CSPs(RCSP),including aphid effector MP10 that triggers resistance against aphids in N.benthamiana.Coimmunoprecipitation,bimolecular fluorescence complementation and Alpha Fold2 prediction unveiled an interaction between NlCSP11 and RCSP.Interestingly,RCSP does not contain the conserved catalytic glutamic acid in the TIR domain,which is required for TNL function.Our findings point to enhanced ETI and systemic resistance by a TNL protein via hyperactivation of the SA pathway.Moreover,RCSP is the first TNL identified to recognize an insect effector. 展开更多
关键词 chemosensory protein effector effector-triggered immunity salicylic acid tir-nbs-lrr
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