拉考沙胺联合奥卡西平治疗局灶性癫痫的疗效及对脑电图频段功率、血清TLR-4、NF-κB水平影响

目的探讨拉考沙胺联合奥卡西平治疗局灶性癫痫的疗效及对患者脑电图频段功率、血清Toll样受体-4(TLR-4)、核转录因子-κB(NF-κB)水平影响。方法选取2022年1月至2023年2月本院收治的局灶性癫痫患者102例,根据随机数字表法分为基线组和试验组,每组51例。基线组采用奥卡西平治疗,试验组采用拉考沙胺联合奥卡西平治疗。两组均治疗6个月后评估疗效。比较两组患者治疗前、治疗6个月癫痫发作频率、脑电图频段功率,检测血清TLR-4、NF-κB水平。分析两组患者治疗6个月TLR-4、NF-κB水平与疗效的关系。统计两组患者治疗期间不良反应发生率。结果试验组治疗总有效率高于基线组(P<0.05)。治疗6个月,两组患者癫痫发作频率降低,且试验组低于基线组(P<0.05);两组α、β频段功率升高,δ、θ频段功率降低,且试验组变化幅度大于基线组(P<0.05)。治疗6个月,试验组、基线组TLR-4(r=-0.820、-0.666,P均<0.001)、NF-κB(r=-0.744、-0.643,P均<0.001)水平与疗效均呈负相关。治疗期间试验组不良反应发生率与基线组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论拉考沙胺联合奥卡西平治疗局灶性癫痫疗效显著,可有效改善患者脑电图频段功率,减少发作频率,且安全性有保障。

有氧运动对CAP大鼠前列腺组织miR-155表达、TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的探讨有氧运动对慢性非细菌性前列腺炎(CAP)大鼠前列腺组织miR-155表达、Toll样受体(TLR)4/核转录因子(NF)-κB信号通路的影响。方法雄性健康SD大鼠随机分为正常对照组(正常组)、CAP模型对照组(模型组)、游泳运动观察组(运动组),每组10只,注射消痔灵进行大鼠造模,模型形成期7 d,后运动组进行50 min/(次·d)的游泳运动,每周运动6 d,持续28 d,正常组和模型组不进行任何运动,自由活动取食;末次运动结束后2 h处死大鼠,采用ELISA检测前列腺组织白细胞介素(IL)-8、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α表达,Western印迹检测TLR4、NF-κB P65蛋白相对表达,实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-PCR)检测miR-155表达,观察各组前列腺组织病理学改变。结果28 d游泳运动结束后,与正常组比较,模型组和运动组前列腺组织内IL-8、IL-6、TNF-α、TLR4、NF-κB P65和miR-155表达均显著升高(P<0.05);与模型组比较,运动组上述各项观察指标均显著降低(P<0.05);相关分析显示,TLR4、NF-κB P65与IL-8、IL-6、TNF-α表达呈正相关,miR-155与TLR4、NF-κB P65、IL-8、IL-6、TNF-α表达呈正相关(均P<0.01);病理观察显示,正常组前列腺组织学观察未见异常改变,模型组前列腺组织内可见腺体上皮细胞及纤维组织明显增生,间质中淋巴细胞等慢性炎症细胞浸润;与模型组比较,运动组前列腺腺体上皮细胞轻度增生,间质轻度纤维化,慢性炎症细胞浸润现象明显好转。结论有氧运动能够对CAP大鼠炎症起到缓解作用,其作用机制可能与miR-155调控TLR4/NF-κB信号通路有关。

室旁核TLR4阻断改善2型糖尿病大鼠糖代谢及机制

目的 聚焦于下丘脑室旁核(PVN)区域,研究中枢Toll样受体(TLR)4阻断对2型糖尿病(T2DM)大鼠糖代谢的影响及探讨相应影响机制。方法 将SD大鼠随机分为:正常对照(NC+PVN vehicle)组、正常干预(NC+PVN TAK-242)组、糖尿病(DM+PVN vehicle)组、糖尿病干预(DM+PVN TAK-242)组。高糖高脂联合小剂量链脲佐菌素(STZ)方法建立T2DM大鼠模型,皮下植入室旁核微型渗透泵(28 d,输注速率0.11 L/h)给予TAK-242(一种TLR4特异性抑制剂)和人工脑脊液;各组大鼠监测体重、空腹血糖(FBG)、葡萄糖耐量试验(GTT)、胰岛素耐量试验(ITT)和丙酮酸耐量试验(PTT)评估体内糖代谢情况;肾交感神经放电检测交感神经活性;Western印迹检测还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶(NOX)4、Cu-Zn超氧化物歧化酶(SOD)、NF-κB通路激活标志物(TH)、谷氨酸脱羧酶(GAD)67蛋白表达;二氢乙淀(DHE)检测PVN中活性氧簇(ROS)水平;免疫荧光检测PVN中TLR4、TH阳性神经元表达数量;免疫组化检测PVN中神经元激活标志物(c-FOS)、NF-κB通路激活标志物(p-IKKβ)阳性神经元表达数量。结果 与正常组相比,T2DM组大鼠体重显著降低,FBG显著升高,体内存在胰岛素抵抗和糖异生紊乱,肾交感神经放电显著增加,PVN内TLR4、TH、ROS、c-FOS、p-IKKβ阳性神经元表达数量显著增多,PVN内NOX4、TH蛋白表达显著升高,Cu-Zn SOD、GAD67蛋白表达显著降低(P<0.05)。经TAK-242治疗的T2DM大鼠体重下降速度显著降低,FBG不断升高趋势被控制,体内胰岛素抵抗和糖异生紊乱显著改善,肾交感神经放电显著降低,PVN内TLR4、TH、ROS、c-FOS、p-IKKβ阳性神经元表达数量显著减少,PVN内NOX4、TH蛋白表达降低,Cu-Zn SOD、GAD67蛋白表达升高(P<0.05)。结论 PVN慢性输注TAK-242可有效阻断下丘脑PVN TLR4的表达,改善PVN内氧化应激和神经元凋亡,改善PVN内兴奋性神经递质和抑制性神经递质失平衡,进而降低交感神经活性,改善T2DM大鼠体内糖代谢。

丹参有效成份配伍对ApoE^(-/-)小鼠心脏的保护作用及TLR4/NF-κB通路的影响

目的研究丹参4种主要的水溶性成分丹参素(DSS)、丹酚酸(Sal)-A、Sal-B和原儿茶醛(PAL)的有效配伍组合(SABP)对ApoE基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠心脏的保护作用及其机制。方法6周龄雄性的ApoE^(-/-)小鼠被随机分为:模型(Model)组、SABP组、阳性药瑞舒伐他汀(RC)组。雄性的C57BL/6J小鼠作为正常对照(Control)组。所有的小鼠正常饮食。RC组每天腹腔注射0.4 mg/kg的RC,SABP组每天腹腔注射丹参4种水溶性成分的有效组合(DSS:5 mg/kg,Sal-A:0.233 mg/kg,Sal-B:10.000 mg/kg,PAL:17.000 mg/kg)。Control组和Model组每天腹腔注射等剂量的生理盐水。8 w后,通过全自动生化分析仪检测血清脂类水平,苏木素-伊红(HE)染色观察心脏的形态学变化。免疫组化和Western印迹检测心脏组织中Toll样受体(TLR)4、转化生长因子β激活激酶(TAK)1、核转录因子(NF)-κB、白细胞介素(IL)-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α蛋白表达的变化。结果SABP可以有效地降低血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,改善心脏损伤,减少心脏中TLR4、TAK1、IL-6和TNF-α蛋白表达,抑制NF-κB的磷酸化。结论SABP对ApoE^(-/-)小鼠心脏具有保护作用,其机制可能与TLR4/NF-κB信号通路有关。

补肾健脾开心散通过TLR4/NF-κB通路改善AD大鼠炎症的机制

目的观察补肾健脾开心散对阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆能力及脑皮质区Toll样受体(TLR)4/核转录因子(NF)-κB通路相关炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β表达的影响,探讨其作用机制。方法60只SD大鼠随机分为空白(Ctrl)组、模型(AD)组、补肾(BS)组(3.6 g/kg补肾方)、健脾(JP)组(4.05 g/kg健脾方)、开心(KX)组(2.34 g/kg开心方)、补肾健脾开心(BSJPKX)组(9.99 g/kg补肾健脾开心散),每组10只。采用D-半乳糖(D-gal)注射制备AD大鼠模型,BS组、JP组、KX组、BSJPKX组分别以相应药物灌胃,Ctrl组、AD组给予等量生理盐水,1次/d。给药4 w后,Morris水迷宫实验检测学习记忆能力,分别用免疫组化法、实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测脑皮质组织TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-1β表达。结果与Ctrl组比较,AD组空间学习记忆能力明显下降(P<0.05,P<0.01),TLR4/NF-κB通路被激活,IL-1β、TNF-α表达显著增高(P<0.05,P<0.01);经补肾健脾开心散治疗后,与AD组比较,BSJPKX组空间学习记忆能力显著改善(P<0.05,P<0.01),TLR4/NF-κB通路被抑制,IL-1β、TNF-α表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论补肾健脾开心散可以保护AD大鼠神经元,其作用机制可能与调控TLR4/NF-κB信号通路减轻神经炎症有关。

TLR4在急性肝衰竭模型大鼠中的动态变化及意义

目的探讨TLR4在D-Gal/LPS诱导的大鼠急性肝衰竭中的表达变化及其作用。方法65只SD雄性大鼠随机分为正常对照组(n=5)、D-Gal/LPS模型组(n=25)、PDTC干预组(n=25),于不同时间点检测肝功能,免疫组化观察肝组织TLR4的表达,TUNEL法观察肝脏细胞凋亡。结果模型组大鼠4h开始ALT、AST明显升高,8h达峰值,4-24h ALT、AST明显高于正常对照组(P<0.05)。模型组各时间点TLR4表达明显高于正常对照组(P<0.05)。模型组凋亡的肝脏细胞数随时间的延长逐渐增多,均高于正常对照组(P<0.05)。PDTC干预后ALT、AST水平,TLR4的表达及凋亡的肝脏细胞数低于模型组(P<0.05)。结论急性肝衰竭模型鼠TLR4表达增强,PDTC干预可下调其表达,提示TLR4在急性肝衰竭的发生发展中可能具有一定作用。

四神丸对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎大鼠血清TGFβ1、IL-6及结肠组织TLR-4 mRNA表达的影响

目的:观察四神丸对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎大鼠中血清转化生长因子β1(TGFβ1)、白介素6(IL-6)及结肠组织中Toll样受体4(TLR-4)mRNA含量的变化,探讨四神丸对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎的作用机制。方法:采用番泻叶灌胃+氢化可的松注射液腹腔注射+2、4、6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇法灌肠建立脾肾阳虚型溃疡性结肠炎大鼠模型。将60只wistar大鼠随机分为空白组、模型组、四神丸组及柳氮磺嘧啶(SASP)组,经药物干预后分别采用酶联免疫法检测各组大鼠血清中的TGFβ1、IL-6含量及半定量反转录-聚合酶链反应检测各组大鼠结肠组织中的TLR-4 mRNA含量。结果:与空白组比较,模型组大鼠中TGFβ1含量降低(P<0.05),IL-6含量升高(P<0.05);与模型组比较,各治疗组大鼠中TGFβ1含量升高(P<0.05),IL-6含量降低(P<0.05)。与空白组比较,模型组大鼠结肠组织TLR-4 mRNA表达显著增强(P<0.05);各治疗组TLR-4 mRNA表达减弱(P<0.05)。结论:四神丸能够通过下调IL-6和升高TGFβ1的表达,降低结肠组织中TLR-4 mRNA的含量,抑制炎症反应,调节肠上皮免疫系统,恢复肠粘膜微环境的免疫稳态,达到治疗UC的目的。

牛蒡根水提取物对高血压患者血清致伤血管内皮细胞TLR4、NF-κB表达的影响

目的探究牛蒡根水提取物对高血压患者血清致伤血管内皮细胞Toll样受体-核转录因子(TLR-NF-κB)信号转导通路的影响。方法选取2014年12月至2016年1月于桂林医学院附属医院诊治的高血压病患者40例纳入高血压组,选择健康体检者40例纳入对照组。分别采用两组研究对象的血清干预人脐静脉内皮细胞(HUVEC-C)24 h,应用不同浓度的牛蒡根水提取物干预高血压患者血清诱导的HUVEC-C TLR4表达(24 h)及核转录因子(NF-κB)活化(2 h)。将细胞连续培养24 h后将细胞蛋白提取,并用免疫印迹(Western blot)技术检测细胞内TLR4蛋白及NF-κB抑制因子I-κBα蛋白的表达。结果 1高血压组细胞提取蛋白中的TLR-4水平为(0.670 1±0.091 18),明显高于对照组(0.224±0.030 97),I-κBα水平为(0.291 5±0.054 92),明显低于对照组的(0.543 7±0.089 97),差异均有统计学意义(P<0.05);2牛蒡根水提取物干预低剂量组、中剂量组及高剂量组细胞蛋白中的TLR-4表达水平分别为(0.270 9±0.061 39)、(0.455 1±0.035 12)、(0.428 7±0.045 89),均低于高血压组的(0.670 1±0.091 18),同时高于对照组的(0.224±0.030 97);I-κBα表达水平为(0.4795±0.057 43)、(0.360 85±0.060 85)、(0.310 00±0.049 10),高于高血压组的(0.291 5±0.054 92),同时低于对照组的(0.543 7±0.089 97),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论经TLR-NF-κB信号途径介导的免疫紊乱和炎症反应可能是高血压病血管内皮损伤的机制之一,牛蒡根水提取物可通过抑制细胞TLR-4、NF-κB的表达,从而抑制炎症因子的表达来达到保护血管内皮细胞的作用。

小胶质细胞(MG)TLR-4介导T细胞获得性免疫炎症反应的机制

目的探讨以小胶质细胞(microglia,MG)为中心Toll样受体-4(toll like receptor-4,TLR-4)介导的T细胞获得性免疫炎症损伤机制在早产儿脑白质损伤中的作用。方法分别分离纯化C3H/HeJ(tlr4基因缺失)小鼠和C57B/L(野生型)小鼠脾脏CD4+T细胞和大脑MG细胞并制作交互共培养模型。各组分别加以细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)为刺激因素,流式细胞术和细胞化学染色观察MG变化,检测CD4+T细胞增殖变化和ELISA方法检测其分泌功能;通过上调(LPS刺激)或下调TLR-4(tlr4基因缺失)表达对MG活化和共同免疫刺激因子MCHⅡ的影响及对CD4+T细胞增殖分化及Th1/Th2极化方向的影响,阐明TLR-4在T细胞获得性免疫中的关键作用。结果显微镜下观察,LPS刺激后tlr4基因缺失小鼠MG细胞胞体较小,突起细长,仍处于静息状态;相反,野生型组LPS刺激后出现较明显的细胞体积变大、胞体变大显圆满,突起增加呈分支状。LPS活化的MG其TLR-4和MCHⅡ蛋白表达显著上调与tlr4基因缺失小鼠比较有显著性差异(P<0.01)。此外,LPS刺激活化的CD4+T淋巴细胞增殖明显,且伴有Th1型细胞因子显著升高和Th2型细胞因子的显著下降,与tlr4基因缺失小鼠比较均有显著性差异(P<0.01)。TLR-4表达与CD4+T细胞Th1细胞因子浓度间具有显著相关性(P<0.01)。结论 TLR-4介导MG活化在固有免疫和获得性免疫中发挥桥梁作用,并由此提出由Th1/Th2偏移向TLR4-Th1偏移的新的早产儿脑白质损伤模式。

远志皂苷通过TLR4/NF-κB信号通路对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的机制

目的探讨远志皂苷(Ten)对高糖诱导的人肾小管上皮HK-2细胞损伤的影响及其对Toll样受体(TLR)4/核转录因子(NF)-κB信号通路的调控机制。方法高糖诱导HK-2细胞糖尿病肾病模型,不同浓度Ten处理HK-2细胞,噻唑蓝(MTT)法筛选Ten适宜浓度;实验分为NG组、HG组、HG+Ten组、HG+Ten+pcDNA组、HG+Ten+TLR4组;流式细胞术检测凋亡率;试剂盒检测丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)水平与超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;Western印迹检测TLR4、p-p65、p65、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达量。结果MTT检测结果显示,选用Ten 150μmol/L进行后续实验;与NG组比较,HG组凋亡率、TLR4、Bax、TLR4、p-p65蛋白、MDA、ROS水平明显升高,Bcl-2蛋白水平、SOD、GSH-Px活性明显降低(P<0.05);与HG组比较,HG+Ten组凋亡率、Bax、TLR4、p-p65蛋白、MDA、ROS水平明显降低,Bcl-2蛋白水平、SOD、GSH-Px活性明显升高(P<0.05);与HG+Ten+pcDNA组比较,HG+Ten+TLR4组凋亡率、TLR4、Bax蛋白、MDA、ROS水平明显升高,Bcl-2蛋白水平、SOD、GSH-Px活性明显降低(P<0.05)。结论Ten可通过抑制TLR4/NF-κB信号通路激活而减轻高糖诱导的HK-2细胞损伤。

氧化低密度脂蛋白对巨噬细胞Toll样受体-4的表达效应

目的研究低密度脂蛋白(LDL)氧化对人单核细胞源巨噬细胞Toll样受体-4(TLR-4)表达的影响及其机制。方法用RPM I 1640培养基体外培养人THP-1单核细胞系,加入佛波醇肉豆蔻酸乙酸酯(PMA)培养48 h使其分化为巨噬细胞,加入氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)或LDL,用免疫细胞化学、蛋白质免疫印迹和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,观察脂蛋白氧化前、后对巨噬细胞表达TLR-4蛋白及TLR-4 mRNA的影响。结果Ox-LDL可提高TLR-4蛋白及TLR-4 mRNA的表达(P<0.01);而LDL对TLR-4蛋白及其mRNA的表达无影响(P<0.05)。结论LDL的氧化可能促进THP-1源巨噬细胞TLR-4转录水平的上调,导致蛋白质的合成增加;Ox-LDL可能是动脉粥样硬化中炎症的始发原因之一。

黄连解毒汤含药血清对Toll样受体34、型及其下游信号转导通路的影响

目的:研究黄连解毒汤含药血清对细菌脂多糖和双链RNA病毒核酸类似物聚肌胞刺激的小鼠巨噬细胞株RAW264.7 Toll样受体(TLR)及其下游主要信号转导通路的影响。方法:用脂多糖、聚肌胞分别刺激RAW264.7细胞,同时给予黄连解毒汤含药血清进行干预,24 h后,取细胞培养上清液,ELISA法测定炎症因子TNF-α和IFN-β的含量,荧光定量PCR方法测定TLR3、TLR4和下游信号转导通路髓样分化因子88(MyD88),肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF-6),TOLL样受体相关分子(TRAM)和TOLL样受体相关的干扰素活化子(TRIF)mRNA的表达,Western blotting法分析TLR3、TLR4蛋白的表达,同时用细胞免疫荧光法分析MyD88,TRAF-6蛋白表达的强弱,在mRNA水平和蛋白水平探讨黄连解毒汤对Toll样受体的作用机理。结果:黄连解毒汤含药血清显著降低LPS诱导的TLR4、MyD88、TRAF-6、TRAM和TRlF的高表达(与单纯LPS刺激组比较,P<0.05或P<0.01);Poly(I:C)刺激后,黄连解毒汤含药血清仅对TRAM利TRIF的表达有明显的降低作用(P<0.01)。结论:黄连解毒汤能阻断TLR4高表达,阻断TLR4胞内信号转导的MyD88依赖和非依赖两条途径(以阻断非依赖途径为主),抑制相关基因表达产物TNF-α、IFN-β过度分泌,具有TLR4拮抗剂样作用。黄连解毒汤也可直接作用于接头蛋白TRAM和TRIF,影响TLR3信号转录的MyD88非依赖性途径,抑制IFN-β的过度分泌。

肿瘤坏死周子-β1对脓毒症大鼠Toll样受体R4及核周子-κB表达的影响

目的动态观察TGF-β1对脓毒症大鼠外周血单核细胞Toll样受体（Toll-likereceptor）TLR4、TNF-α及肝脏NF-κB表达的影响。方法120只SD大鼠接受盲肠结扎穿孔法（CLP）建立脓毒症模型，并随机均分为10组：脓毒症模型2h、6h、12h、24h、和48h组（造模后0．5h尾静脉注射生理盐水1m1），TGF-β1干预2h、6h、12h、24h、和48h组[造模后0．5h尾静脉注射TGF-β120ng／（ml·250g）]。另12只SD大鼠用作对照组。于各时间点分别处死大鼠，利用流式细胞术检测外周血单核细胞表面TLR4表达变化，酶联免疫吸附分析法（ELISA）检测外周血TNF-α、肝脏NF-κB浓度。结果CLP术后6～12hTLR4在外周血单核细胞表达明显减少，12h最低；肝脏组织中NF-κB的浓度从术后6h起即显著高于对照组，24h时达到最高并维持到48h后。TGF-β1干预组单核细胞TLR4表达显著低于脓毒症模型组，伴随肝脏表达NF-κB减少，但外周血TNF-α浓度明显升高。结论在脓毒症，TGF-β1能下调单核细胞TLR4及肝脏NF-κB的表达，但TNF-α的生成增加。TGF-β1在脓毒症炎症反应过程中发挥复杂作用，可能并非通过TLR4来影响炎症因子的生成。

基于脂多糖-Toll样受体4信号通路抗内毒素血症机制研究进展

Toll样受体4(TLR4)是TLR家族中极为重要的成员,同时被认为是脂多糖(LPS)受体的编码基因,是识别LPS的主要受体,LPS诱导TLR4信号通路在内毒素血症中起着至关重要的作用。LPS诱导TLR4激活后,激活丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路和转录核因子κB(NF-κB)释放大量炎症因子,继而触发炎症级联反应。本文从LPS-TLR4信号通路调控的上游靶蛋白、LPS诱导的TLR4信号转导、LPS-TLR4信号通路调控的下游靶蛋白等3个方面,就基于LPS-TLR4信号通路治疗内毒素血症机制研究进行综述。

肺炎支原体感染对BALB/c小鼠TLR4/NF-κB信号通路表达的影响

目的探讨肺炎支原体(MP)感染对BALB/c小鼠TLR4/NF-κB信号通路表达的影响。方法BALB/c小鼠80只,随机分成肺炎支原体感染组和对照组,每组40只,分别于接种后3d、7d、14d、21d,,用ELISA试剂盒检测肺泡灌流液(BALF)IL-4和IL-6含量;HE染色观察肺脏病理组织学变化;用Western blot实验检测肺组织TLR4、Myd88与NF-κB表达变化。结果肺泡灌流液中IL-4和IL-6含量于感染后7 d时达到高峰,而后呈下降趋势;感染MP 3d后,BALB/c小鼠肺组织即出现间质性炎症改变,7d时炎症最明显,14d时炎症逐渐减轻;感染MP后,BALB/c小鼠肺组织TLR4、Myd88与NF-κB表达水平显著升高。结论肺炎支原体感染激活TLR4/NF-κB信号通路。

脂必泰对非酒精性脂肪肝病大鼠肝组织ERK和TLR4表达的影响

目的:观察脂必泰对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝组织ERK和TLR4表达的调控作用。方法:采用10%果糖和高脂饲料诱导非酒精性脂肪性肝病大鼠模型,将模型大鼠随机分为模型对照组、脂必泰100 mg/kg、200 mg/kg组、二甲双胍200 mg/kg组、水飞蓟宾100 mg/kg组,另设正常对照组。连续给药9周后,观察各组大鼠空腹血糖(FBG)、餐后2小时血糖(2hBG)及血清胰岛素(Fins)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,并计算肝脏指数和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);以RT-PCR和Western blot法检测肝组织Toll样受体4(TLR4)、P-ERK1/2 mRNA及蛋白的表达。结果:与空白对照组比较,模型组2hBG、Fins、HOMA-IR、ALT、AST、TG、CHOL、HDL-C、LDL-C含量、肝脏指数及病理评分均明显升高,HDL-C含量明显降低,TLR4、P-ERK1/2 mRNA和蛋白表达水平明显上调。与模型对照组比较,脂必泰100、200 mg/kg组2hBG、Fins、HOMA-IR、ALT、AST、TG、CHOL、LDL-C含量及肝脏指数、组织病理评分均明显降低,HDL-C含量和AST/ALT比值明显升高,TLR4、P-ERK1/2 mRNA和蛋白表达水平明显下调。结论:脂必泰可通过下调TLR4、P-ERK1/2基因和蛋白的表达,影响MAPK-ERK-TLRs通路而抑制炎症信号通路的转导,阻止炎症的发生、发展,改善血脂,同时拮抗胰岛素抵抗,改善肝脏空泡变性,减轻肝脏炎症反应而起到保护肝脏的作用。

辽东楤木叶总皂苷对荷结肠癌细胞裸鼠移植瘤TLR-4/NF-κB信号通路及炎性因子的影响

目的:观察辽东楤木叶总皂苷(ETS)对荷瘤裸鼠人结肠癌HT-29移植瘤Toll样受体-4/核转录因子-κB(TLR-4/NF-κB)信号通路及血清中炎性因子的影响,从而探讨其抑瘤机制。方法:将人结肠癌HT-29细胞株接种于50只裸鼠的右腋部皮下,建立人结肠癌异位皮下移植瘤的动物模型。将接种后的裸鼠随机分为5组,每组10只,即模型组,ETS低、中、高剂量组(37. 5,75,150 mg·kg-1),5-氟尿嘧啶组(20 mg·kg-1)。分组后2 d进行给药,5-氟尿嘧啶组腹腔注射给药,隔日1次; ETS低、中、高组给药;模型组给灌胃等体积的生理盐水;连续给药8周。眼眶取血,酶联免疫吸附法(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1(IL-1);实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肿瘤组织中TLR-4,NF-κB mRNA表达水平;光学显微镜和透射电子显微镜下观察ETS对荷瘤裸鼠人结肠癌HT-29移植瘤形态学方面的影响。结果:病理组织学和超微病理学实验显示各给药组肿瘤组织均有不同程度的损伤,与模型组比较,ETS低、中、高剂量组及5-氟脲嘧啶组对荷瘤裸鼠人结肠癌移植瘤均有不同程度的抑制作用(P <0. 05,P <0. 01),4组抑瘤率分别是20. 14%,32. 43%,59. 56%,63. 58%;与模型组比较,ETS各剂量组TLR-4,NF-κB mRNA及TNF-α,IL-1水平表达明显降低(P <0. 05)。结论:ETS可有效抑制结肠癌肿瘤的生长,其机制可能与调控TLR-4/NF-κB信号通路,减少炎性因子表达有关。

生脉散对DCM大鼠的干预作用及对TLR-4/NF-κB炎症信号通路的影响

目的：研究生脉散对扩张型心肌病（dilated cardiomyopathy，DCM）大鼠的干预作用，探讨生脉散对Toll样受体4（Tolllikereceptor-4，TLR-4）／核转录因子-κB（nuclear factor kappaB，NF-κB）信号通路及炎症因子的影响。方法：用腹腔注射阿霉素法建立DCM大鼠模型，将大鼠随机分为空白组、阿霉素组、生脉散组、培哚普利组，分别采用生脉散和培哚普利对DCM大鼠进行干预。治疗后对大鼠行心脏超声检查；用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清B型钠尿肽（BNP），肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及白细胞介素一6（IL-6）水平；用实时荧光定量PCR法（Real-timePCR）法检测心肌组织TLR-4，NF-κBmRNA表达水平；用蛋白质印迹法（Westernblot）检测心肌组织TLR-4，NF-κB蛋白表达水平；取大鼠左室心肌组织用苏木素一伊红（HE）染色和透射电子显微镜的方法观察大鼠心肌组织形态。结果：与空白组比较，阿霉素组左室舒张末期内径（LVIDd），左室收缩末期内径（LVIDs）增大（P〈0．01），左心室射血分数（LVEF），短轴缩短率（FS）下降（P〈0．01）；血清BNP，TNF-α，IL-6水平升高（P〈0．01）；心肌组织TLR-4，NF-KBmRNA及蛋白表达水平升高（P〈0．01）；心肌组织病理损伤增加。与阿霉素组比较，生脉散组LVIDs，LVIDd减小（P〈0．01），LVEF，FS增加（P〈0．01）；血清BNP，TNF-α，IL-6水平下降（P〈0．01）；心肌组织TLR-4，NF-KBmRNA及蛋白表达水平下降（P〈0．01），心肌组织病理损伤有所改善。结论：生脉散可有效改善DCM大鼠心功能，抑制心肌损害。生脉散治疗DCM大鼠的作用机制，可能与调节TLR-4和NF-κBmRNA及蛋白水平从而抑制TLR-4／NF-KB信号通路下游炎症因子有关。

固本防哮饮对小鼠哮喘缓解期TLR4及TLR7的调节作用

目的:观察固本防哮饮对哮喘缓解期小鼠模型Toll-样受体(TLR) 4,TLR7,核转录因子-κB p65(NF-κB p65),NF-κB抑制蛋白α(IκBα)的调节作用,探讨固本防哮饮治疗哮喘缓解期的机制。方法:呼吸道合胞病毒(RSV)联合鸡卵蛋白(OVA)对3周龄BALB/c小鼠制备哮喘缓解期模型,将60只小鼠分为空白组、模型组、地塞米松组(0. 001 g·kg^(-1))以及固本防哮饮低、中、高剂量(6. 5,13,26 g·kg^(-1))组,分别进行干预,共给药28 d,每天1次。给药结束后处死小鼠,苏木素-伊红(HE)染色观察哮喘小鼠肺组织病理形态学变化,并对肺部炎症情况进行评分;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠肺组织TLR4,TLR7,IκBα及肺组织细胞核内NF-κB p65蛋白表达水平;免疫荧光共聚焦观察NF-κB p65在细胞核表达情况。结果:与空白组比较,模型组小鼠肺组织有明显炎症细胞浸润及支气管狭窄(P <0. 01),同时小鼠肺组织细胞核内NF-κB p65分布显著增多(P <0. 01),表达明显增高(P <0. 05),TLR4,TLR7,IκBα蛋白表达明显降低(P <0. 05);与模型组比较,固本防哮饮各剂量组能显著缓解小鼠肺组织炎症浸润(P <0. 01),降低肺组织核蛋白NF-κB p65的表达(P <0. 01),核蛋白NF-κB p65入核情况减轻(P <0. 01),同时显著增加TLR4,TLR7,IκBα蛋白的表达(P <0. 01)。结论:固本防哮饮能够缓解气道炎症,并且可能是通过调节TLR4,TLR7,NF-κB p65,IκBα实现其治疗作用。

镜下清理富血小板血浆治疗轻中度膝骨关节炎

[目的]探究关节镜下清理术联合富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)治疗轻中度膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)的疗效及可能机制。[方法]2021年1月—2022年4月收治的轻中度KOA患者110例,抽签法随机将其分为两组,每组55例。联合组接受关节镜下清理术联合PRP治疗,清理组仅关节镜下清理术治疗。比较两组围手术期、随访及辅助检查结果。[结果]两组手术时间、切口总长度、术中失血量、下地行走时间、切口愈合等级及住院时间的差异均无统计学意义(P>0.05)。术后7 d联合组肿胀VAS评分[(4.0±1.1)vs(4.5±1.0),P<0.05]显著低于清理组。随访12个月以上,联合组完全负重活动时间显著早于清理组[(45.2±6.2)d vs(50.1±7.2)d,P<0.05]。随时间推移,两组VAS、WOMAC和Lysholm膝关节评分均显著改善(P<0.05)。术后12个月联合组的VAS[(1.3±0.4)vs(2.1±0.6),P<0.05]、WOMAC[(25.0±5.2)vs(31.5±5.0),P<0.05]、Lysholm评分[(90.5±8.0)vs(85.3±8.1),P<0.05]均显著优于清理组。辅助检查方面,与治疗前相比,治疗后1个月两组患者血清TLR-4、MMP-9、SDF-1水平均显著下降(P<0.05);治疗后1个月,联合组的血清TLR-4[(7.0±2.0)ng/ml vs(8.4±2.2)ng/ml,P<0.05]、MMP-9[(26.0±7.0)pg/ml vs(30.1±7.3)pg/ml,P<0.05]和SDF-1[(453.4±47.2)μg/L vs(495.8±52.2)μg/L,P<0.05]显著优于清理组。[结论]关节镜下清理联合PRP治疗可减轻中度KOA患者疼痛,改善其膝关节功能,其机理可能与降低血液TLR-4、MMP-9、SDF-1水平有关。