为检测鸡抗病毒相关基因在病毒感染过程中的动态变化规律,研究建立了鸡IFN-a、IFN-β、TLR-3和TLR-7的实时荧光定量RT-PCR的检测方法。根据GenBank提供的鸡IFN-α、IFN-β、FLR-3和TLR-7参考序列设计了相应的特异引物,用常规RT-PCR方法...为检测鸡抗病毒相关基因在病毒感染过程中的动态变化规律,研究建立了鸡IFN-a、IFN-β、TLR-3和TLR-7的实时荧光定量RT-PCR的检测方法。根据GenBank提供的鸡IFN-α、IFN-β、FLR-3和TLR-7参考序列设计了相应的特异引物,用常规RT-PCR方法从鸡脾脏总RNA中扩增得到鸡相应基因。将其cDNA分别克隆到pMD19-T载体中进行测序鉴定,采用SYBR Green I染料法,建立标准曲线并分析其溶解曲线。结果表明,这4种基因的检测灵敏度可高达46 copies/μL,且具有良好的特异性和重复性。此检测方法的建立为动态定量检测及研究鸡IFN-α、IFN-β、TLR-3和TLR-7基因的表达变化提供了有效的手段。展开更多
Toll样受体(Toll Like Receptor,TLR)作为模式识别受体,对机体的免疫防御和稳态维持至关重要。为了保证TLR通路介导的免疫反应适时适度地进行,机体存在对TLR通路的精细的正负调控机制。磷脂酰肌醇-3-激酶(Phosphatidylinositol 3-Kinase...Toll样受体(Toll Like Receptor,TLR)作为模式识别受体,对机体的免疫防御和稳态维持至关重要。为了保证TLR通路介导的免疫反应适时适度地进行,机体存在对TLR通路的精细的正负调控机制。磷脂酰肌醇-3-激酶(Phosphatidylinositol 3-Kinase,PI3K)-蛋白激酶B(Akt)信号通路在细胞的增殖、分化、迁移和代谢等众多生理过程中都发挥重要调控作用,也参与了TLR通路的负调控。TLR通路和PI3K-Akt通路之间存在复杂的交互调控,但细节部分一直未被充分阐明。本文对这一领域的相关文献进行综述,以期增进对TLR通路调控机制的理解。展开更多
文摘为检测鸡抗病毒相关基因在病毒感染过程中的动态变化规律,研究建立了鸡IFN-a、IFN-β、TLR-3和TLR-7的实时荧光定量RT-PCR的检测方法。根据GenBank提供的鸡IFN-α、IFN-β、FLR-3和TLR-7参考序列设计了相应的特异引物,用常规RT-PCR方法从鸡脾脏总RNA中扩增得到鸡相应基因。将其cDNA分别克隆到pMD19-T载体中进行测序鉴定,采用SYBR Green I染料法,建立标准曲线并分析其溶解曲线。结果表明,这4种基因的检测灵敏度可高达46 copies/μL,且具有良好的特异性和重复性。此检测方法的建立为动态定量检测及研究鸡IFN-α、IFN-β、TLR-3和TLR-7基因的表达变化提供了有效的手段。
文摘Toll样受体(Toll Like Receptor,TLR)作为模式识别受体,对机体的免疫防御和稳态维持至关重要。为了保证TLR通路介导的免疫反应适时适度地进行,机体存在对TLR通路的精细的正负调控机制。磷脂酰肌醇-3-激酶(Phosphatidylinositol 3-Kinase,PI3K)-蛋白激酶B(Akt)信号通路在细胞的增殖、分化、迁移和代谢等众多生理过程中都发挥重要调控作用,也参与了TLR通路的负调控。TLR通路和PI3K-Akt通路之间存在复杂的交互调控,但细节部分一直未被充分阐明。本文对这一领域的相关文献进行综述,以期增进对TLR通路调控机制的理解。