期刊文献+
共找到85篇文章
< 1 2 5 >
每页显示 20 50 100
Cloning and Bioinformatics Analysis of TLR4 Gene from Wuzhishan Pig in Hainan
1
作者 Yan ZHANG Lili HUANG +2 位作者 Hailong LIU Zhemin LIN Shuyi TAN 《Agricultural Biotechnology》 CAS 2019年第5期55-59,共5页
In order to obtain the TLR 4 gene sequence of Hainan Wuzhishan pig and analyze its molecular structure characteristics,its genomic sequence was cloned and sequenced by PCR and subjected to related bioinformatics analy... In order to obtain the TLR 4 gene sequence of Hainan Wuzhishan pig and analyze its molecular structure characteristics,its genomic sequence was cloned and sequenced by PCR and subjected to related bioinformatics analysis with the genomic sequence of the TLR 4 gene of pig in GenBank as a reference sequence.The full-length DNA sequence of Wuzhishan pig TLR 4 gene was 10 435 bp in length,of which CDS was 2 526 bp in length and encoded 841 amino acids.Compared with the common pig TLR 4 gene sequence published by GenBank,there were 38 mutations,of which two mutations were in the CDS region.The results of homology analysis showed that the amino acid sequence of the TLR 4 gene of Wuzhishan pig shared 99.9%,80.7%,79.9%,74.8%,74.7%,73.1%,73.0%,72.7%,62.5% and 43.4% homology with those of common pig,cattle,sheep,dog,horse,macaque,human,chimpanzee,mouse and chicken,respectively.The protein encoded by the TLR 4 of Wuzhishan pig belonged to secreted protein and transmembrane protein.It was hydrophilic,and had 8 glycosylation modification sites,17 serines (ser),7 threonines (Thr) and 8 tyrosine (TYR) phosphorylation sites.The amino acid phylogenetic tree analysis showed that the TLR 4 genes of different species are highly conserved during evolution.This result lays a foundation for further study of the function of TLR 4 gene. 展开更多
关键词 Wuzhishan PIG TLR 4 gene CLONE BIOINFORMATICS analysis
下载PDF
血清TLR4和PTEN与特发性膜性肾病患者临床病理特征及预后的相关性
2
作者 钟娇影 刘慧 +3 位作者 陈秀娟 苏宝印 朱昭明 刘杰 《分子诊断与治疗杂志》 2024年第2期295-299,共5页
目的 探究血清Toll样受体4(TLR4)、第10号染色体缺失性磷酸酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)与特发性膜性肾病(IMN)患者临床病理特征及预后的相关性。方法 选取2019年1月至2022年1月在河北以岭医院就诊治疗的IMN患者224例为IMN组,同时根据... 目的 探究血清Toll样受体4(TLR4)、第10号染色体缺失性磷酸酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)与特发性膜性肾病(IMN)患者临床病理特征及预后的相关性。方法 选取2019年1月至2022年1月在河北以岭医院就诊治疗的IMN患者224例为IMN组,同时根据其预后结果将其分为预后良好组174例、预后不良组50例;另选取同期在本院体检健康者100名作为对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测研究对象血清TLR4、PTEN水平;采用pearson分析IMN患者血清TLR4水平和PTEN水平相关性;多因素Logistic回归分析IMN患者预后不良的影响因素;受试者工作特征曲线(ROC)分析血清TLR4和PTEN在评估IMN患者预后中的价值。结果 IMN组血清TLR4、PTEN水平较对照组均显著升高,差异有统计学意义(t=12.918,13.249,P<0.05);预后不良组血清TLR4、PTEN水平较预后良好组均显著升高,差异有统计学意义(t=11.608,12.965,P<0.05);IMN患者血清TLR4与PTEN水平呈正相关;TLR4、PTEN、IgG、合并高血压均为IMN患者预后不良的独立危险因素(P<0.05);血清TLR4、PTEN水平预测IMN患者预后是否不良的曲线下面积(AUC)分别为0.878、0.868,两者联合预测的AUC为0.941,高于两者单独预测(z=1.874、2.065,P<0.05),且特异度为0.89,灵敏度为0.88。结论 血清TLR4、PTEN水平与IMN患者分期,肾小球硬化,二者对IMN预后具有一定的预测价值。 展开更多
关键词 TOLL样受体4 第10号染色体缺失性磷酸酶和张力蛋白同源物基因 特发性膜性肾病
下载PDF
哮喘儿童TLR4基因多态性与其外周血炎症因子及肺功能水平的相关性研究
3
作者 王字卉 李权伦 散琴 《中国妇幼健康研究》 2023年第12期63-69,共7页
目的分析TLR4基因多态性与儿童哮喘患者外周血炎症因子及肺功能水平的相关性。方法选择2019年4月至2022年10月湖北省十堰市妇幼保健院收治的172例急性发作期哮喘患儿为实验组,并根据发病严重程度分为轻度、中度、重度和危重级,另选取同... 目的分析TLR4基因多态性与儿童哮喘患者外周血炎症因子及肺功能水平的相关性。方法选择2019年4月至2022年10月湖北省十堰市妇幼保健院收治的172例急性发作期哮喘患儿为实验组,并根据发病严重程度分为轻度、中度、重度和危重级,另选取同期于本院健康体检的136例儿童作为对照组,测定各组受试者肺功能指标一秒率(FEV_(1)/FVC)和呼出气一氧化氮(FeNO),采集外周静脉血,检测白细胞介素-4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)、嗜酸性粒细胞百分率(Eos)、免疫球蛋白E(IgE)等,应用聚合酶链式反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RELP)技术检测TLR4基因Asp299Gly(A/G)和Thr399Ile(C/T)位点单核苷酸多态性,分析其与儿童哮喘的相关性。结果实验组外周血中IL-4、Eos、IgE及FeNO的水平高于对照组,而IFN-γ及FEV_(1)/FVC(%)水平低于对照组,差异均有统计学意义(t值介于8.90~29.04之间,P<0.05);两组Asp299Gly的基因型和等位基因分布相比差异不具有统计学意义(P>0.05);实验组Thr399Ile单核苷酸多态性位点TT基因型分布频率高于对照组,T等位基因分布频率高于对照组,差异有统计学意义(χ^(2)值分别为10.19、11.50,P<0.05);携带Thr399Ile TT基因型哮喘患儿的IL-4和FeNO水平高于CC和CT基因型,IFN-γ的水平低于CC和CT基因型(F值分别为44.95、24.29、8.51,P<0.05);秩和检验显示携带Thr399Ile单核苷酸多态性位点基因型与哮喘发病程度不相关(P>0.05);二元Logistic回归分析结果显示TT基因型人群是CC型人群患病风险的2.353倍(P<0.05)。结论TLR4基因Thr399Ile位点多态性与儿童哮喘的发生具有相关性,影响哮喘患儿IL-4、IFN-γ、FeNO的表达水平,但与患儿的肺功能水平和发病的严重程度无关。 展开更多
关键词 儿童哮喘 TOLL样受体4 基因多态性 肺功能 白细胞介素-4、γ干扰素
下载PDF
破血化瘀、填精补髓方对脑出血模型小鼠脑组织TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路的影响
4
作者 乔颖 袁月 +2 位作者 徐三鹏 宋双 李萍 《中医药学报》 CAS 2023年第11期36-42,共7页
目的:探讨破血化瘀、填精补髓方治疗脑出血的相关作用机制。方法:野生型小鼠和Nrf2基因敲除小鼠各90只,采用小鼠尾动脉取血向脑内灌注的方法建立脑出血小鼠模型,造模成功后120只小鼠随机分为野生型模型组、野生型方剂组、Nrf2基因敲除... 目的:探讨破血化瘀、填精补髓方治疗脑出血的相关作用机制。方法:野生型小鼠和Nrf2基因敲除小鼠各90只,采用小鼠尾动脉取血向脑内灌注的方法建立脑出血小鼠模型,造模成功后120只小鼠随机分为野生型模型组、野生型方剂组、Nrf2基因敲除模型组、Nrf2基因敲除方剂组,每组30只。另分别取30只野生型小鼠和Nrf2基因敲除小鼠脑内只插入微量注射针数分钟不注血作为野生型假手术组和Nrf2基因敲除假手术组。造模后对野生型方剂组及Nrf2基因敲除方剂组给予破血化瘀、填精补髓方10.41 g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,模型组及假手术组给予等量生理盐水。给药1 d、3 d后检测小鼠的行为学变化及脑含水量变化,3 d后HE染色观察脑组织病理形态学改变,用Western Blot以及免疫组化检测脑组织TLR4、NF-κB、NLRP3蛋白水平。结果:与野生型假手术组相比,野生型模型组小鼠的神经功能评分、脑含水量、HE染色病理细胞数、免疫组化阳性细胞数以及TLR4、NF-κB、NLRP3的蛋白表达水平均升高(P<0.05,P<0.01)。与野生型模型组比较,野生型方剂组小鼠上述各指标均明显改善(P<0.05)。相对于野生型模型组小鼠,Nrf2基因敲除型模型组小鼠上述各指标均有明显改善(P<0.05)。结论:破血化瘀、填精补髓方可以通过抑制TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路抑制氧化反应及炎症反应,从而抑制脑出血后的神经细胞功能损伤,减少继发性脑损伤。 展开更多
关键词 脑出血 破血化瘀、填精补髓方 基因敲除 tlr4/NF-κB/NLRP3信号通路
下载PDF
益肾通癃汤通过上调miR-145-5p抑制TLR4/p38 MAPK/NF-κB信号通路抗前列腺癌作用机制研究
5
作者 涂雅玲 刘德果 +2 位作者 羊羡 李博 陈其华 《Digital Chinese Medicine》 CSCD 2023年第1期86-96,共11页
目的探讨益肾通癃汤(YSTLD)通过上调miR-145-5p抑制TLR4/p38 MAPK/NF-κB信号通路抗前列腺癌的作用机制。方法借助miRNA芯片技术检测YSTLD处理前列腺癌PC-3细胞后的miRNA表达谱的变化,筛选miRNA芯片结果中差异显著的miRNA,并通过实时荧... 目的探讨益肾通癃汤(YSTLD)通过上调miR-145-5p抑制TLR4/p38 MAPK/NF-κB信号通路抗前列腺癌的作用机制。方法借助miRNA芯片技术检测YSTLD处理前列腺癌PC-3细胞后的miRNA表达谱的变化,筛选miRNA芯片结果中差异显著的miRNA,并通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)进行验证。慢病毒转染miR-145-5p入前列腺癌PC-3细胞,CCK8法及划痕实验检测miR-145-5p对前列腺癌PC-3细胞增殖与迁移作用;qRT-PCR法及Wstern blot法检测miR-145-5p对TLR4/p38 MAPK/NF-κB信号通路及凋亡相关基因caspase3、TNF-α、Bax、Bcl-2表达的影响;qRT-PCR及Wstern blot法检测YSTLD含药血清对miR-145-5p、TLR4/p38 MAPK/NF-κB信号通路及凋亡相关基因caspase3、TNF-α、Bax、Bcl-2表达的影响。结果miRNA基因芯片检测发现YSTLD处理前列腺癌PC-3细胞后存在35种miRNA表达水平与对照组存在显著差异,其中以miR-145-5p差异最为显著,同时qRT-PCR验证发现YSTLD处理的PC-3细胞中的miR-145-5p水平显著高于DMSO对照组(P<0.05)。慢病毒转染miR-145-5p入前列腺癌PC-3细胞后,发现miR-145-5p能抑制前列腺癌PC-3细胞的增殖与迁移。过表达miR-145-5p可上调前列腺癌PC-3细胞caspase3、TNF-α及Bax mRNA表达水平,下调p38 MAPK、p65 NF-κB及Bcl-2的mRNA表达水平(P<0.05),同时上调前列腺癌PC-3细胞caspase3蛋白表达水平,下调TLR4、p38 MAPK、p65 NF-κB的蛋白表达水平(P<0.05);YSTLD含药血清在干预前列腺癌PC-3细胞后,可上调前列腺癌PC-3细胞caspase3、TNF-α及Bax mRNA表达水平,下调p38 MAPK、p65 NF-κB、Bcl-2、TRAF1的mRNA表达水平(P<0.05),同时上调前列腺癌PC-3细胞caspase3蛋白表达水平,下调TLR4、p38 MARK、p65 NF-κB、TRAF1的蛋白表达水平(P<0.05)。结论YSTLD可通过上调miR-145-5p的表达水平,抑制TLR4/p38 MAPK/NF-κB信号通路促进前列腺癌PC-3细胞凋亡,这可能是YSTLD抗前列腺癌的重要机制。 展开更多
关键词 前列腺癌 益肾通癃汤 基因芯片技术 miR-145-5p tlr4/p38 MAPK/NF-κB信号通路
下载PDF
牛TLR4基因的遗传多态性与乳房炎的关联分析 被引量:36
6
作者 王兴平 许尚忠 +3 位作者 马腾壑 高雪 任红艳 陈金宝 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期120-124,共5页
TLR4通过识别病原体而激活免疫细胞,在先天免疫和适应性免疫防御中起着重要作用。以中国荷斯坦奶牛、三河牛和中国西门塔尔牛共397头为研究对象,利用创造酶切位点PCR法扩增243 bp的目的片段,通过限制性内切酶HinfⅠ酶切来检测TLR4第3外... TLR4通过识别病原体而激活免疫细胞,在先天免疫和适应性免疫防御中起着重要作用。以中国荷斯坦奶牛、三河牛和中国西门塔尔牛共397头为研究对象,利用创造酶切位点PCR法扩增243 bp的目的片段,通过限制性内切酶HinfⅠ酶切来检测TLR4第3外显子的多态性,结果发现扩增产物的27 bp处C到T的突变使得多态位点产生,编码的氨基酸由苏氨酸变为异亮氨酸。A、B 2个等位基因在3个群体中均有分布,A等位基因占优势(大于78%),经χ2适合性检验,三河牛在该位点未达到Hardy-Weinberg平衡状态(P<0.05)。运用SAS 8.2软件采用最小二乘法拟合线性模型,将该基因座不同基因型与奶牛乳房炎进行了关联分析,结果表明:AA基因型为乳房炎抗性基因型(P<0.05),A等位基因为乳房炎抗性的有利基因。 展开更多
关键词 tlr4基因 CRS-PCR PCR-RFLP 乳房炎 体细胞数 体细胞评分
下载PDF
LPS诱导条件下猪小肠上皮细胞TLR4及其信号通路基因表达变化分析 被引量:16
7
作者 孙丽 夏日炜 +4 位作者 殷学梅 喻礼怀 朱国强 吴圣龙 包文斌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1095-1101,共7页
本试验通过0.1和1μg·mL-1浓度的LPS诱导处理猪小肠上皮细胞(IPEC-J2),分别在2、4、6h时利用实时荧光定量PCR方法检测TLR4及其信号通路相关基因(CD14、MyD88、TNF-α、IL-1β和IFN-α)mRNA水平相对表达量,初步探讨猪小肠上皮细胞... 本试验通过0.1和1μg·mL-1浓度的LPS诱导处理猪小肠上皮细胞(IPEC-J2),分别在2、4、6h时利用实时荧光定量PCR方法检测TLR4及其信号通路相关基因(CD14、MyD88、TNF-α、IL-1β和IFN-α)mRNA水平相对表达量,初步探讨猪小肠上皮细胞受到产肠毒素大肠杆菌侵扰发生炎症反应的相关分子反应机理。结果发现,两种浓度的LPS均使得所检测的TLR4及其信号通路相关基因表达量上调,诱导后4~6h的表达量急速上升,且高浓度的LPS诱导处理后各基因表达量上调倍数明显高于低浓度LPS诱导时各基因表达量上调倍数,高浓度的LPS对机体肠道的刺激引起了更为强烈的免疫反应,使正常机体更快地产生炎症反应。由此推测,大肠杆菌侵染猪肠道后将释放LPS,TLR4作为LPS的受体,受LPS诱导其表达量上调,进而引起TLR4信号途径的信号传递,传递过程中由于MyD88的依赖机制,MyD88表达量上调相对稳定,再经过级联免疫放大效应,大量的促炎细胞因子释放,导致炎症及腹泻水肿病的产生。 展开更多
关键词 tlr4基因 信号通路 细胞因子
下载PDF
低氧胁迫对瘤背石磺Toll样受体4、血细胞和免疫酶活性的影响
8
作者 肖海明 土志涵 +4 位作者 饶榕城 陈锡林 钱畅 张小明 沈和定 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期37-49,共13页
为探究瘤背石磺面临低氧环境时固有免疫的应激机制,实验以RACE法对瘤背石磺TLR4基因进行全长克隆,并进行生物信息学分析,测定了低氧胁迫下瘤背石磺TLR4基因的表达变化,以及分析了血细胞活力和溶菌酶(LSZ)活性、肝脏中超氧化物歧化酶(SOD... 为探究瘤背石磺面临低氧环境时固有免疫的应激机制,实验以RACE法对瘤背石磺TLR4基因进行全长克隆,并进行生物信息学分析,测定了低氧胁迫下瘤背石磺TLR4基因的表达变化,以及分析了血细胞活力和溶菌酶(LSZ)活性、肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)和碱性磷酸酶(ALP)活性。结果显示,瘤背石磺TLR4基因cDNA全长共3605 bp,包括编码956 aa氨基酸的2817 bp开放阅读框。系统进化树表明,瘤背石磺TLR4基因与光滑双脐螺TLR4基因的进化地位较为接近。qRT-PCR结果显示,TLR4基因在瘤背石磺7个组织中均有表达,其中表达量最高的是肝脏。低氧胁迫下,各组织中TLR4基因的表达量皆显著上升,其中神经节在4 h时率先达到峰值。此外,血细胞活力、LSZ活性、ALP活性都是呈先下降后上升的趋势,而SOD活性呈先上升再下降再上升的趋势,波动幅度最为明显。研究结果初步说明了TLR4的生理功能,为探究潮间带生物免疫系统的低氧应激机制提供理论参考。 展开更多
关键词 瘤背石磺 tlr4 基因克隆 低氧胁迫 固有免疫
下载PDF
猪TLR4基因在F18大肠杆菌抗性型和敏感型资源群体间的差异表达分析 被引量:7
9
作者 包文斌 潘章源 +6 位作者 朱璟 叶兰 杜子栋 蔡家嘉 黄小国 朱国强 吴圣龙 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期278-283,共6页
本研究旨在检测TLR4基因mRNA在猪各个组织的分布以及在F18大肠杆菌抗性型和敏感型群体间差异表达水平,为探讨该基因在免疫识别和F18大肠杆菌抗性中发挥的作用提供理论依据。本试验运用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR技术进行定量测定。首... 本研究旨在检测TLR4基因mRNA在猪各个组织的分布以及在F18大肠杆菌抗性型和敏感型群体间差异表达水平,为探讨该基因在免疫识别和F18大肠杆菌抗性中发挥的作用提供理论依据。本试验运用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR技术进行定量测定。首先,各取8头35日龄F18大肠杆菌抗性型和敏感型苏太仔猪组织样,包括心脏、肝脏、脾脏等11个组织,提取总RNA,以GAPDH基因为内参基因,进行实时荧光定量PCR。对TLR4基因mR-NA进行均一化处理,利用荧光阈值(Ct值)计算TLR4基因mRNA在各个组织以及F18大肠杆菌抗性型和敏感型群体间表达量。结果显示,TLR4 mRNA在猪各种组织中广泛表达,在肺、淋巴结、肾脏和脾脏等免疫器官中表达量较高,F18大肠杆菌敏感型的TLR4基因表达量普遍高于抗性型个体的表达量,在各个组织中(除胃外)TLR4表达量差异倍数从1.083到2.980不等;在肺、淋巴结、肾脏和胸腺组织中,F18大肠杆菌敏感型的TLR4基因表达量显著高于抗性型个体的表达量(P<0.05)。本研究结果表明,TLR4基因通过天然免疫识别机制对猪F18大肠杆菌病等革兰氏阴性疾病有一定的影响,TLR4基因表达量的下调与F18大肠杆菌的抗性具有一定程度的关系。 展开更多
关键词 tlr4基因 F18大肠杆菌 REAL-TIME PCR 表达谱
下载PDF
猪TLR4基因外显子1新等位基因的分离及遗传变异分析 被引量:7
10
作者 潘章源 叶兰 +5 位作者 朱璟 杜子栋 黄小国 朱国强 包文斌 吴圣龙 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期163-167,共5页
文章采用PCR-SSCP方法对亚洲野猪、3个引进的商业化品种和10个中国地方猪品种共893个个体TLR4基因外显子1的遗传变异进行了检测,旨在系统分析国内外猪种TLR4基因的多态性,为探讨该基因在免疫和防御系统中发挥的作用提供依据。结果,在猪T... 文章采用PCR-SSCP方法对亚洲野猪、3个引进的商业化品种和10个中国地方猪品种共893个个体TLR4基因外显子1的遗传变异进行了检测,旨在系统分析国内外猪种TLR4基因的多态性,为探讨该基因在免疫和防御系统中发挥的作用提供依据。结果,在猪TLR4基因外显子1中分离到新的等位基因,共检测到3个等位基因,6种基因型。其中杜洛克检测到AA、BB、CC、AB、AC、BC基因型,有杜洛克血统的苏太猪中检测到BB、CC、BC基因型,长白猪、约克夏中检测到CC、BC基因型,野猪及所有10个中国地方猪品种TLR4基因外显子1高度保守,只检测到CC基因型,中国地方猪品种和引进品种TLR4基因外显子1多态性存在极显著的差异。3种基因型中CC型与GenBank中的序列一致,BB和AA基因型分别存在G93C同义突变位点和G194A无义突变位点,这2个变异位点与抗逆性和一般抗病力的关系值得进一步深入研究。 展开更多
关键词 tlr4基因 多态性 野猪 地方猪种 引进猪种
下载PDF
奶牛TLR4基因的多态性与乳房炎的相关性研究(英文) 被引量:5
11
作者 王兴平 许尚忠 +2 位作者 高雪 任红艳 陈金宝 《Journal of Genetics and Genomics》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第5期406-412,共7页
TLR4通过识别病原体而激活免疫细胞,在先天免疫和适应性免疫防御中起着重要作用。以中国荷斯坦奶牛、三河牛和中国西门塔尔牛为研究对象,以TLR4为乳房炎抗性的候选基因,分别扩增316bp和382bp2个片段,分别采用SSCP和RFLP-AluⅠ方法来检测... TLR4通过识别病原体而激活免疫细胞,在先天免疫和适应性免疫防御中起着重要作用。以中国荷斯坦奶牛、三河牛和中国西门塔尔牛为研究对象,以TLR4为乳房炎抗性的候选基因,分别扩增316bp和382bp2个片段,分别采用SSCP和RFLP-AluⅠ方法来检测TLR4基因的多态性。结合测序发现:在intron1的第4,525bp处的A→G的突变,和exon3的第1,397bp处的T→C突变,使得产生多态。2个位点的A、B等位基因在3个群体中都有分布,且处于中度多态。χ2适合性检验表明,3个群体在这2个位点的突变达到Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05)。运用SAS8.0软件采用最小二乘法拟合线性模型,将基因座不同基因型与奶牛乳房炎进行了关联分析,结果表明:T4CRBR1的AA基因型为乳房炎抗性基因型(P<0.05),A等位基因为乳房炎抗性的有利基因,T4CRBR2的各基因型个体间的体细胞评分差异不显著(P>0.05)。 展开更多
关键词 tlr4基因 SSCP RFLP 乳房炎 体细胞数 体细胞评分
下载PDF
鸡TLR4基因表达水平与沙门氏菌感染关系的研究 被引量:10
12
作者 李鹏 夏平安 +1 位作者 宋咏梅 赵桂苹 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第5期72-74,共3页
为了研究鸡TLR4(toll like receptor 4)基因表达在调控鸡沙门氏菌感染中的作用,80只3日龄SPF鸡按随机分为2组,处理组经口注射鸡白痢沙门氏菌悬液108CFU/mL 0.50 mL,对照组注射同剂量生理盐水。每个处理组分别在感染后1、3、7和14 d随机... 为了研究鸡TLR4(toll like receptor 4)基因表达在调控鸡沙门氏菌感染中的作用,80只3日龄SPF鸡按随机分为2组,处理组经口注射鸡白痢沙门氏菌悬液108CFU/mL 0.50 mL,对照组注射同剂量生理盐水。每个处理组分别在感染后1、3、7和14 d随机取8只鸡处死,迅速取脾脏样品用于RNA提取。采用SYBR GreenⅠ染料实时荧光定量PCR(QPCR),比较处理组和对照组TLR4基因mRNA相对表达量的变化。结果显示,在4个时间点,与对照组相比,处理组TLR4基因高表达,差异显著(P<0.05);尤其在感染后3和7 d,差异达到极显著水平(P<0.01)。结果表明,鸡沙门氏菌感染后,TLR4基因mRNA表达上调,TLR4基因在沙门氏菌感染中发挥重要作用。 展开更多
关键词 tlr4基因 沙门氏菌 荧光定量PCR
下载PDF
猪TLR4基因可变剪接体的鉴定 被引量:6
13
作者 杨秀芹 翟春媛 +1 位作者 李海涛 刘娣 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1051-1056,共6页
为合理、有效地利用民猪资源进行抗病育种,本研究利用重叠延伸RT-PCR结合巢式PCR法扩增民猪TLR4基因,寻找可变剪接体;利用竞争性RT-PCR方法研究各可变剪接体的组织表达情况。获得了猪TLR4基因3个可变剪接体(其中2个是未见报道的),并且... 为合理、有效地利用民猪资源进行抗病育种,本研究利用重叠延伸RT-PCR结合巢式PCR法扩增民猪TLR4基因,寻找可变剪接体;利用竞争性RT-PCR方法研究各可变剪接体的组织表达情况。获得了猪TLR4基因3个可变剪接体(其中2个是未见报道的),并且鉴定出一类特殊的剪接模式——外显子内部的部分片段被单独剪除,该类型在动物中尚属首次发现;组织表达分析表明3个可变剪接体普遍表达。TLR4基因存在着复杂的剪接机制,也暗示着其功能的复杂性。 展开更多
关键词 民猪 tlr4基因 可变剪接 组织表达
下载PDF
TLR4基因外显子ⅢBbv12 I酶切位点多态性与奶牛乳房炎的相关分析 被引量:7
14
作者 刘文娇 孙少华 李雪梅 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2008年第2期114-118,共5页
采用PCR-RFLP技术,对奶牛TLR4基因外显子Ⅲ321bp的部分序列进行多态性分析,结果发现扩增产物C到T突变处存在限制性内切酶Bbv12 I酶切位点,并且导致编码氨基酸由苏氨酸变为异亮氨酸。C、T等位基因在牛群中均有分布并且属于中度多态,C等... 采用PCR-RFLP技术,对奶牛TLR4基因外显子Ⅲ321bp的部分序列进行多态性分析,结果发现扩增产物C到T突变处存在限制性内切酶Bbv12 I酶切位点,并且导致编码氨基酸由苏氨酸变为异亮氨酸。C、T等位基因在牛群中均有分布并且属于中度多态,C等位基因占优势。利用最小二乘拟合线性模型将基因型效应与奶牛乳房炎易感性进行关联分析,结果表明不同基因型奶牛的体细胞评分(SCS)表现出CC基因型>CT基因型>TT基因型的趋势,但运用SAS 9.0软件统计不同基因型对体细胞评分的最小二乘均值没有显著性差异(P>0.05)。 展开更多
关键词 tlr4基因 PCR-RFLP 体细胞评分 乳房炎
下载PDF
小鼠TLR4基因的克隆和序列分析 被引量:4
15
作者 眭建 张雅琴 +5 位作者 王锁英 林小涛 王晓莺 吴燕 徐道银 许化溪 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2007年第3期197-200,共4页
目的:克隆小鼠TLR4基因的全长编码区cDNA并进行序列分析。方法:利用RT-PCR方法,从Balb/c小鼠脾组织细胞mRNA中扩增TLR4基因全长cDNA,并将其连接到pcDNA3.1(+)载体上,进行测序和核酸分析。结果:扩增得到的小鼠TLR4基因cDNA全长2 508 bp,... 目的:克隆小鼠TLR4基因的全长编码区cDNA并进行序列分析。方法:利用RT-PCR方法,从Balb/c小鼠脾组织细胞mRNA中扩增TLR4基因全长cDNA,并将其连接到pcDNA3.1(+)载体上,进行测序和核酸分析。结果:扩增得到的小鼠TLR4基因cDNA全长2 508 bp,编码536个氨基酸,Blast结果分析表明,该cDNA与基因库中发表的序列(NM021297)具有100%的同源性。结论:获得小鼠TLR4基因的克隆,为进一步研究转基因免疫干预奠定了基础。 展开更多
关键词 tlr4 基因克隆 RT-PCR
下载PDF
pri-miR-21重组腺病毒载体构建及其对TLR4基因调控的研究 被引量:8
16
作者 赵婧 徐广贤 +4 位作者 贾伟 董辉 张一琳 赵志军 魏军 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期153-155,159,共4页
目的:构建能高效表达成熟miR-21小分子的腺病毒载体,探讨其对TLR4基因的靶向调控关系。方法:以正常小鼠基因组DNA为模板,PCR扩增pri-miR-21基因,克隆至穿梭载体pAdTrack-CMV中经PCR、酶切及基因测序分析正确无误后,与pAdEasy-1腺病毒骨... 目的:构建能高效表达成熟miR-21小分子的腺病毒载体,探讨其对TLR4基因的靶向调控关系。方法:以正常小鼠基因组DNA为模板,PCR扩增pri-miR-21基因,克隆至穿梭载体pAdTrack-CMV中经PCR、酶切及基因测序分析正确无误后,与pAdEasy-1腺病毒骨架质粒进行同源重组,并利用293A细胞,包装成pri-miR-21重组腺病毒感染HeLa细胞,通过Western blot检测TLR4的蛋白表达水平,验证miR-21与TLR4靶向调控的关系。结果:经PCR、酶切、测序及GFP表达证实,成功构建携带pri-miR-21基因的重组腺病毒载体并制备出高滴度重组病毒。Western blot证实,miR-21可抑制TLR4蛋白的表达。结论:所制备的小鼠pri-miR-21重组腺病毒,可以高效表达成熟miR-21小分子,能够抑制靶基因TLR4的表达。 展开更多
关键词 pri-miR-21 重组腺病毒载体 tlr4基因 靶向调控
下载PDF
安徽地方猪TLR4基因第3外显子的SNP分析 被引量:2
17
作者 丁月云 朱卫华 +4 位作者 薛玮纬 孟云 黄龙 张晓东 殷宗俊 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1767-1774,共8页
本试验采用PCR-SSCP方法对皖南黑猪、圩猪、安庆六白猪、霍寿黑猪及长白猪5个群体共354个样本TLR4基因外显子3部分片段的遗传变异进行了检测,旨在系统分析安徽地方品种猪TLR4基因的多态性,为探讨该基因在免疫和防御系统中发挥的作用提... 本试验采用PCR-SSCP方法对皖南黑猪、圩猪、安庆六白猪、霍寿黑猪及长白猪5个群体共354个样本TLR4基因外显子3部分片段的遗传变异进行了检测,旨在系统分析安徽地方品种猪TLR4基因的多态性,为探讨该基因在免疫和防御系统中发挥的作用提供依据。结果检测到2个突变:G417A、C1027A,其中,G417A为非错义突变,仅在皖南黑猪、圩猪和安庆六白猪群体中检测到,且只检测到GG、GA两种基因型,在该3群体均为低度多态,且均处于哈迪-温伯格平衡状态(P>0.05);C1027A为错义突变,且引起了编码氨基酸性质的改变,在皖南黑猪、圩猪、安庆六白猪、霍寿黑猪及长白猪群体中均检测到CC、CA、AA 3种基因型,在该5群体均为中度多态,且均处于哈迪-温伯格平衡状态(P>0.05);χ2独立性检验结果表明,G417A、C1027A各基因型的分布在皖南黑猪、圩猪、安庆六白猪、霍寿黑猪及长白猪5个中外猪种间存在极显著差异(P<0.01)。结果提示,安徽地方猪TLR4基因外显子3区序列相对保守、多态含量较低,群体遗传变异程度较小;C1027A位点多态性在猪种间分布的差异是否与品种抗病性有关,值得进一步研究。 展开更多
关键词 安徽地方猪 tlr4基因 单核苷酸多态性 群体遗传学分析
下载PDF
TLR4基因多态性SNP896A>G、SNP1196C>T与冠心病的相关性研究 被引量:7
18
作者 王珺楠 刘斌 宋春莉 《中国实用医药》 2009年第11期5-6,共2页
目的探讨吉林地区汉族人群TLR4基因多态性与与冠心病的关系。方法运用单核苷酸多态性分析技术在328例无亲缘关系的吉林地区汉族人群(正常对照人群172例,冠心病156例)中检测TLR4基因3号外显子的SNP896A>G、SNP1196C>T多态性。结果... 目的探讨吉林地区汉族人群TLR4基因多态性与与冠心病的关系。方法运用单核苷酸多态性分析技术在328例无亲缘关系的吉林地区汉族人群(正常对照人群172例,冠心病156例)中检测TLR4基因3号外显子的SNP896A>G、SNP1196C>T多态性。结果吉林地区汉族人群中TLR4基因多态性SNP1196C>T的基因型频率和等位基因频率在冠心病组和正常对照组间的分布存在显著性差异(P<0.05)。结论吉林地区汉族人群TLR4基因多态性位点SNP1196C>T与冠心病有相关性。 展开更多
关键词 tlr4 基因 多态性 冠心病
下载PDF
绵羊TLR4基因的遗传多态性分析 被引量:2
19
作者 吕伟丽 马小军 +1 位作者 张小丽 张国华 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第4期790-795,共6页
为了研究永昌羊、小尾寒羊、白萨福克羊和特克塞尔羊4个品种的舍饲绵羊TLR4基因的遗传多态性及变异特征,采用PCR-SSCP方法,检测这4种绵羊(共404只)TLR4基因第3外显子部分基因片段的多态性以及产生变异的各等位基因序列。结果显示,4种绵... 为了研究永昌羊、小尾寒羊、白萨福克羊和特克塞尔羊4个品种的舍饲绵羊TLR4基因的遗传多态性及变异特征,采用PCR-SSCP方法,检测这4种绵羊(共404只)TLR4基因第3外显子部分基因片段的多态性以及产生变异的各等位基因序列。结果显示,4种绵羊中共发现6种等位基因控制的7种基因型,永昌羊、白萨福克羊和特克塞尔羊均未检测到E和F等位基因,小尾寒羊未检测到D等位基因;与GenBank中羊TLR4基因序列比对发现,扩增片段中有19个核苷酸多态位点,编码的氨基酸序列中有9个氨基酸多态位点;经χ2适应性检验,4个绵羊品种均位于Hardy-Weinberg平衡(P>0.05),其中白萨福克羊、特克塞尔羊和小尾寒羊处于高度多态(PIC>0.50),而永昌羊处于中度多态(0.25<PIC<0.50)。 展开更多
关键词 绵羊 tlr4基因 遗传多态性 聚合酶链式反应-单链构象多态( PCR-SSCP)
下载PDF
人TLR4胞外段的克隆、表达及功能活性分析 被引量:2
20
作者 王凡平 王明永 +5 位作者 孙瑞利 郭庆合 张婧婧 杨景瑞 张新富 段巨洪 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期818-822,共5页
目的:获得高纯度、高活性的人TLR4胞外段蛋白。方法:采用PCR方法从含人TLR4 cDNA的质粒pCDNA3-TLR4中扩增人TLR4胞外段基因片段,将其插入载体pET32a并导入大肠杆菌BL21(DE3)plysS中表达。用Ni2+-NTA琼脂糖柱纯化融合蛋白。SDS-PAGE和免... 目的:获得高纯度、高活性的人TLR4胞外段蛋白。方法:采用PCR方法从含人TLR4 cDNA的质粒pCDNA3-TLR4中扩增人TLR4胞外段基因片段,将其插入载体pET32a并导入大肠杆菌BL21(DE3)plysS中表达。用Ni2+-NTA琼脂糖柱纯化融合蛋白。SDS-PAGE和免疫印迹分析目的蛋白的相对分子质量和抗原性,ELISA和FCM鉴定其功能活性。结果:获得1 911 bp的人TLR4胞外段基因片段,构建成重组表达载体pET32a-TLR4并在大肠杆菌中表达。TLR4-Trx融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的12%,其纯度较高。ELISA和FCM检测显示,TLR4-TrX融合蛋白不仅与配体LPS结合,还能竞争性抑制LPS与THP1细胞结合。结论:所获TLR4-Trx融合蛋白纯度高,功能活性好,为进一步研究TLR相关的免疫调节机制提供物质基础。 展开更多
关键词 tlr4胞外段蛋白 基因克隆 重组表达 功能活性
下载PDF
上一页 1 2 5 下一页 到第
使用帮助 返回顶部