TLR9基因rs 187084位点多态性与子宫内膜异位症的相关性研究

目的：探讨Toll样受体（Tol- like receptors/TLRs）9基因rs187084位点多态性与子宫内膜异位症（EMs）发病风险的关系。方法采用DNA直接测序法检测104例EMs患者（EMs组）和100例非EMs患者（对照组）的TLR9基因rs187084位点的多态性，比较各基因型和等位基因的分布情况。结果 EMs组和对照组中，TLR9基因rs187084位点的AA、AG、GG3种基因型频率分别为42.30%、28.85%、28.85%和52.00%、34.00%、14.00%，两组比较差异有统计学意义（P=0.036）；A、G等位基因频率分别为56.73%、43.27%和69.00%、31.00%，两组比较差异有统计学意义（P=0.01）；携带GG基因型明显增加EMs的发病风险（OR=1.911，95％CI 1.113～3.282）。结论 TLR9基因rs187084位点多态性与EMs的发病风险相关。

TLR受体9在急性肺损伤大鼠血清、肺灌注液及肺组织中的表达

目的:TLR受体9(TLR-9)在胸部创伤所致急性肺损伤(ALI)大鼠血清、肺灌注液及肺组织中表达。方法:40只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(8只)和ALI模型组(32只),ALI模型组采用BIM-Ⅱ型水平式生物撞击机持续撞击大鼠的右侧胸部造模,于造模后5、24、48和72 h处死大鼠,取血清及肺组织;计算各组大鼠肺组织的湿/干重比(W/D),HE染色观察各组肺组织变化,ELISA法检测血清及肺泡灌洗液中TLR-9水平,免疫组化染色检测肺组织中TLR-9和IL-6的表达,RT-PCR法检测IL-6 mRNA及TLR9 mRNA的变化。结果:与正常对照组比较,ALI模型组大鼠肺水肿、肺组织充血、中性粒细胞浸润、炎性渗出较明显;与正常对照组比较,ALI模型组造模48、72 h时大鼠肺组织W/D降低,血清及肺泡灌洗液中TLR-9蛋白的表达增高,肺组织中TLR-9、IL-6蛋白和mRNA的表达升高,且造模48 h时达最高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:TLR9可能与胸部创伤所致大鼠ALI时肺部炎症因子的分泌有关。

Toll样受体9依赖的p38MAPK信号通路在原发性舍格伦综合征中的作用机制

目的 :在动物模型NOD鼠中,研究Toll样受体9(Toll like receptor 9,TLR9)依赖的p38MAPK信号通路在原发性舍格伦综合征发病机制中的作用,从而寻找疾病药物治疗的新靶点。方法:选取4、5、8、10、15周龄的NOD雌性小鼠,利用流式细胞学技术检测小鼠外周血单个核细胞中TLR9、p-p38 MAPK双阳性细胞的比率。利用免疫组化检测小鼠下颌下腺TLR9及p-p38 MAPK的表达情况。同时,观察小鼠刺激性唾液流率的改变以及下颌下腺的病理学改变。结果:TLR9、p-p38MAPK双阳性细胞在4、15周龄NOD鼠外周血单个核细胞中的表达,相对于正常对照组Balb/c小鼠无显著性差异。而自第5周开始,NOD鼠中双阳性细胞的比率逐渐升高,到第8周达到最高,第10周后逐渐下降。TLR9在NOD鼠下颌下腺的浸润淋巴细胞和部分腺上皮细胞中呈阳性表达,p-p38在NOD鼠下颌下腺的浸润淋巴细胞和周围少量腺上皮细胞中呈阳性表达。NOD鼠刺激性唾液流率自第5周起逐渐减少,相较于正常小鼠降低50%~60%。结论 :从第5周到第10周,TLR9、p-p38MAPK双阳性细胞在NOD鼠中显著升高,同时伴随着刺激唾液流率的降低以及下颌下腺TLR9、p-p38MAPK阳性的淋巴细胞浸润。结果提示,外周血单个核细胞中TLR9依赖的p38MAPK信号通路的激活,可能在原发性舍格伦综合征发病早期起到重要作用,NOD鼠可用于p38 MAPK或TLR9抑制实验的动物模型。

血浆游离mtDNA及脑组织TLR-9/MAPK的表达在蛛网膜下腔出血中的意义

目的探讨蛛网膜下腔出血(SAH)模型大鼠血浆中游离线粒体DNA(mtDNA)的水平及脑组织中Toll样受体-9/丝裂原蛋白激酶(TLR-9/MAPK)的表达及意义。方法将40只大鼠随机分为SAH组和假手术(Sham)组,每组20只。SAH组采用血管内穿刺法建立SD大鼠SAH动物模型,Sham组仅穿刺但不造成蛛网膜下腔出血。模型建立成功24h后,采用荧光定量实时PCR检测大鼠外周血中血浆游离mtDNA的表达量;采用逆转录PCR(RT-PCR)和免疫组化法分别检测大鼠脑组织中TLR-9、P38 MAPK的表达。结果 SAH组大鼠在建模24h后血浆中游离mtDNA表达量高于Sham组(P<0.05);RT-PCR及免疫组化检测均显示脑组织中TLR9、P38 MAPK表达较Sham组增多(P<0.05)。结论血浆游离mtDNA与脑组织中TLR-9/MAPK的表达存在协同升高的现象,mtDNA可能通过TLR-9/MAPK通路介导脑组织局部及全身性炎症反应的发生。

TLR9基因多态性与子宫腺肌病的相关性研究

目的探讨Toll样受体(Toll-like receptors/TLRs)9基因多态性与子宫腺肌病发病风险的关系。方法采用DNA直接测序法检测50例子宫腺肌病患者(病例组)和50例对照组的TLR9基因rs352139和rs352140位点的多态性,比较各基因型和等位基因的分布情况。结果病例组和对照组中,TLR9基因rs352139位点的TT、CT、CC3种基因型频率分别为38%,40%,22%和48%,32%,20%,两组比较差异无统计学意义(χ2=1.073,P=0.585);T、C等位基因频率分别58%,42%和64%,36%,两组比较差异无统计学意义(χ2=0.757,P=0.384);TLR9基因rs352140位点的TT、CT、CC3种基因型频率分别为20%,40%,40%和18%,38%,44%,两组比较差异无统计学意义(χ2=0.174,P=0.917);T、C等位基因频率分别为40%,60%和37%,63%,两组比较差异无统计学意义(χ2=0.190,P=0.663)。结论 TLR9基因rs352139和rs352140位点多态性与子宫腺肌病的发病风险无关。

CpG-ODN对肾小球肾炎进展的影响

目的观察CpG-ODN对肾小球肾炎进展的影响。方法将Wistar雄性大鼠随机分为N组(正常对照)、M组(模型对照)、CpG组和GpC组。N组大鼠经尾静脉注射生理盐水2.5ml/(kg·d),其余3组大鼠经尾静脉注射抗-thy1.1单克隆抗体2.5ml/(kg·d),隔日1次,共3次。注射抗-thy1.1单克隆抗体后,隔天,CpG组经尾静脉注射CpG-ODN,300μg/只,GpC组经尾静脉注射GpC-ODN,300μg/只,隔日注射,共3次。各组大鼠分别于用药前和第1针注射后1周测定尿蛋白;用药后第8周留取大鼠24h尿、血清及肾脏组织,检测24h尿蛋白定量、血清白蛋白和肾功;肾脏组织用于肾脏病理检查以及RT-PCR法检测TLR-9mRNA的表达。结果CpG组与M组和GpC组相比,血清白蛋白含量明显降低,且差异有显著意义;M组、CpG组和GpC组在给药后1周均出现尿蛋白,在给药后8周,24h尿蛋白含量明显增多;CpG组与M组相比,TLR-9mRNA在肾脏的表达水平明显增加,且差异有显著意义;GpC组与M组相比,差异无显著意义;光镜下可见CpG组肾组织病理改变明显加重。结论天然CpG-ODN可促进肾小球肾炎病情加重,TLR-9可能在其发生机理中起重要作用。

镜下清理富血小板血浆治疗轻中度膝骨关节炎

[目的]探究关节镜下清理术联合富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)治疗轻中度膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)的疗效及可能机制。[方法]2021年1月—2022年4月收治的轻中度KOA患者110例,抽签法随机将其分为两组,每组55例。联合组接受关节镜下清理术联合PRP治疗,清理组仅关节镜下清理术治疗。比较两组围手术期、随访及辅助检查结果。[结果]两组手术时间、切口总长度、术中失血量、下地行走时间、切口愈合等级及住院时间的差异均无统计学意义(P>0.05)。术后7 d联合组肿胀VAS评分[(4.0±1.1)vs(4.5±1.0),P<0.05]显著低于清理组。随访12个月以上,联合组完全负重活动时间显著早于清理组[(45.2±6.2)d vs(50.1±7.2)d,P<0.05]。随时间推移,两组VAS、WOMAC和Lysholm膝关节评分均显著改善(P<0.05)。术后12个月联合组的VAS[(1.3±0.4)vs(2.1±0.6),P<0.05]、WOMAC[(25.0±5.2)vs(31.5±5.0),P<0.05]、Lysholm评分[(90.5±8.0)vs(85.3±8.1),P<0.05]均显著优于清理组。辅助检查方面,与治疗前相比,治疗后1个月两组患者血清TLR-4、MMP-9、SDF-1水平均显著下降(P<0.05);治疗后1个月,联合组的血清TLR-4[(7.0±2.0)ng/ml vs(8.4±2.2)ng/ml,P<0.05]、MMP-9[(26.0±7.0)pg/ml vs(30.1±7.3)pg/ml,P<0.05]和SDF-1[(453.4±47.2)μg/L vs(495.8±52.2)μg/L,P<0.05]显著优于清理组。[结论]关节镜下清理联合PRP治疗可减轻中度KOA患者疼痛,改善其膝关节功能,其机理可能与降低血液TLR-4、MMP-9、SDF-1水平有关。