TMEFF1对神经母细胞瘤细胞系增殖的调控

目的探究具有表皮生长因子结构域和两个卵泡抑素样结构域的跨膜蛋白1(TMEFF1/tomoregulin1)对神经母细胞瘤(NB)细胞系SN-K-BE(2)增殖和迁移的调控效应。方法RT-qPCR检测神经母细胞瘤细胞系SN-K-BE(2)、IMR32、SK-N-SH、SK-N-AS和正常细胞系MCF 10A、hTERT RPE-1中TMEFF1 mRNA表达量。利用小分子干扰RNA(siRNA)瞬时敲低MCF 10A、hTERT RPE-1细胞和SN-K-BE(2)NB细胞中TMEFF1表达,RT-qPCR检测TMEFF1 mRNA瞬时敲低效果后,结晶紫染色、实时无标记细胞分析(RTCA)检测细胞增殖;CellTiter-Glo(CTG)检测细胞活性。利用短发夹RNA(shRNA)稳定敲低正常细胞系和NB细胞系中TMEFF1表达,进一步通过集落形成实验、RTCA、CTG检测细胞增殖和活性,此外,通过免疫荧光检测Ki-67细胞阳性率,细胞划痕实验检测细胞迁移率。结果与正常细胞系相比,NB细胞系中TMEFF1 mRNA表达量显著较高(P<0.001)。敲低TMEFF1对正常细胞系增殖影响无统计学意义,但在SN-K-BE(2)细胞中敲低TMEFF1,RTCA和集落形成实验结果显示细胞增殖能力减弱(P<0.05),免疫荧光结果显示Ki-67阳性细胞率减少(P<0.001),CTG结果显示细胞活性降低(P<0.01),细胞划痕实验结果显示敲低组细胞迁移率显著低于对照组(P<0.01)。结论TMEFF1是一种特异在NB细胞中高表达的膜蛋白,TMEFF1敲低后不影响正常细胞系的增殖,但显著抑制NB细胞系的增殖、迁移,提示TMEFF1可能在NB发生发展中发挥重要作用,可能成为NB靶向治疗的潜在新靶点。

TMEFF1在卵巢上皮性浆液性肿瘤中的表达及其临床意义

目的:检测TMEFF1(tomoregulin-1)在卵巢上皮性浆液性肿瘤中的表达,探讨其临床意义。方法:采用免疫组化SP法检测卵巢上皮性浆液性囊腺癌、卵巢上皮性交界性肿瘤、卵巢上皮性良性肿瘤以及正常卵巢组织中TMEFF1的表达情况,分析其与卵巢上皮性浆液性囊腺癌临床病理参数及预后的关系。结果:TMEFF1以胞膜着色为主,亦有胞浆着色。TMEFF1在卵巢上皮性浆液性囊腺癌中的表达率(90.24%)明显高于卵巢上皮性交界性肿瘤(45.45%)、卵巢上皮性良性肿瘤(33.33%)及正常卵巢(26.67%)(P均<0.05)。在卵巢上皮性浆液性囊腺癌中,TMEFF1表达随FIGO分期增加而逐渐增加(P<0.05),TMEFF1为影响卵巢上皮性浆液性癌预后的独立危险因素(P<0.05)。结论:TMEFF1的表达与卵巢癌的发生、发展及预后相关。

miR-129-5p在卵巢癌组织中的表达及其生物学作用

目的探讨miR-129-5p在卵巢癌中的表达及生物学作用。方法收集川北医学院附属医院手术切除的正常卵巢和癌组织。检测组织中miR-129-5p和TMEFF1的表达水平,并分析其相关性。将SKOV3细胞分为NC mimics组、miR-129-5p mimics组、NC inhibitors组、miR-129-5p inhibitors组和miR-129-5p mimics+TMEFF1组。检测miR-129-5p和TMEFF1 mRNA及蛋白的表达,进一步检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并验证其靶向关系。结果卵巢癌组织中miR-129-5p的表达下调,TMEFF1的表达上调(P <0.01),两者呈负相关(r=-0.848,P <0.01),且均与淋巴转移和FIGO分期有关联(P <0.05)。过表达miR-129-5p降低SKOV3中TMEFF1 mRNA和蛋白的表达水平、抑制SKOV3增殖、迁移和侵袭能力(均P <0.01),而抑制miR-129-5p表达则呈现出相反的效果。过表达TMEFF1可逆转miR-129-5p mimics对SKOV3的抑制作用。结论 miR-129-5p调控TMEFF1抑制卵巢癌的进展。