犬瘟热病毒TN株血凝基因的克隆与序列分析

用RT PCR方法对分离的TN野毒株H基因进行了扩增 ,并将其克隆到pGEM T载体上 ,进行核苷酸序列测定。结果TN野毒株H基因ORF全长 1 ,81 5bp ,编码 60 4个氨基酸。与GenBank中己报道的 7个CDV毒株相比 ,H基因核苷酸序列的同源性在 92 %～ 99%之间 ,推导的H蛋白氨基酸序列的同源性在 91 %～ 99%之间。TN株H蛋白潜在的N 联糖基化位点为 8个 ,而Onderstepoort弱毒株H蛋白为 4个 ;其中N端第 1 9～ 2 1、 30 9～ 31 1、 5 84～ 5 86位氨基酸所形成的 3个潜在的糖基化位点是野毒株拥有而疫苗株所没有的。预测的TN株和Onderstepoort株H蛋白的疏水性及抗原表位存在一定差异。研究结果提示TN野毒株H蛋白免疫原性可能与弱毒株有较大差别 。

犬Ⅰ型腺病毒TN株的分离鉴定

应用 MDCK细胞采用单层吸附接毒和带毒传代的方法 ,从新疆阿克苏送检的犬粪便中分离出 1株犬腺病毒 ,并对其进行了形态学、理化学、血清学、动物感染试验、分子生物学鉴定。结果证明所分离的 TN株为 1株CAV-

犬瘟热病毒TN野毒株核蛋白基因的克隆与序列分析

根据GenBank中收录的犬瘟热病毒(CDV)Onderstepoort株核蛋白基因(N)序列,设计了1对特异性引物,用该引物对分离的TN野毒株进行了RT PCR扩增;将扩增得到的PCR片段纯化后与pGEM T质粒连接,得到重组质粒pTN。经核苷酸序列测定,CDVTN株N基因的ORF全长1569bp,编码523个氨基酸;将TN野毒株与GenBank中收录的其他CDV毒株进行比较,N基因核苷酸序列的同源性为94%～99%,推导的N蛋白氨基酸序列的同源性为97%～99%。TN株与Onderstepoort疫苗株氨基酸序列的差异主要集中在N端(17～159位)和C端(408～519位),中间的区域则高度保守。此外,在CDVN蛋白N端281～289位上也发现存在与麻疹病毒(MV)N蛋白完全相同的Y P A L G L H E F9肽序列,推测可能是诱导CTL活性的靶蛋白的抗原表位之一。氨基酸组成分析发现,推导的N蛋白氨基酸序列中亮氨酸、丝氨酸和异亮氨酸所占比例很高,提示该蛋白具有高度螺旋和缠绕的分子结构。

10株高效菌株对人工污水净化能力研究

城镇化水污染对中国的水安全压力日益严重,而微生物在净化污水上潜力巨大。为筛选优良净化城市污水的优势真菌和细菌,揭示各菌株去除污水特性及规律,对来源于武夷山市污水处理厂处具有代表性的再力花(Thalia dealbata Link)、香根草(Vetiveria zizanioides L.)、花叶芦荻(Arundo donax var.versicolor)等植物根际土壤中的5株高效细菌(B)和5株高效真菌(F),分别投加到高、中、低质量浓度人工模拟污水和无菌超纯水对照组中,测定经12、24、36、48 h处理后污水中的总氮(TN)、氨氮(NH4+-N)、化学需氧量(COD)和总磷(TP)的质量浓度,并分析各菌株对污染物的去除规律和污水净化效果。结果表明,(1)各菌株对污水有较好的去除效果,且各菌株对污水去除率差异以及与对照之间差异均达到显著水平(P<0.05),去除效果总体表现为TN>NH_(4)^(+)-N>COD>TP,除TP外,均在中质量浓度污水中去除效果最好。各菌株对污染物去除率分别为53.75%—80.67%(TN)、27.5%—72.05%(NH4+-N)、36.55%—68.96%(COD)和22.15%—52.15%(TP)。(2)去除4种污染物优势菌株各不相同,可总结为3个类型组(F_(9)、B_(3)和B_(4);F_(7)、F_(10)和B_(4);F_(9)和B_(1))以及一个独立真菌F7。去污能力方面,真菌去除污水能力(55.27%)优于细菌处理(52.14%)。(3)菌株在不同处理时间下去除效果差异明显,随时间推移TN、NH_(4)^(+)-N、COD和TP质量浓度均呈下降趋势,48 h去除效果最佳。(4)细菌菌株平均降解率符合多项式模型,真菌菌株平均降解率符合幂指数模型。该研究结果表明污水质量浓度大小、菌株自身特性和处理时间可能是影响污染物去除效果存在差异的主要原因。而微生物长时间持续性去污能力和规律还需进一步研究。