三叶青大孔树脂乙醇洗脱部位UPLC-Q-TOF-MS指纹图谱的建立及抗氧化谱效关系研究

目的:研究三叶青提取物与其抗氧化活性的谱效关系,初步明确其发挥抗氧化活性的质量标志物。方法:制备三叶青提取物上大孔树脂柱,分别使用浓度为10%、30%、50%、70%、90%和100%的乙醇进行洗脱,得到6个不同洗脱部位;采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)建立三叶青提取物及各洗脱部位的指纹图谱并筛选特征峰;以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除率为抗氧化指标,考察三叶青提取物及各洗脱部位的抗氧化活性;再综合Pearson相关系数法和正交偏最小二乘(OPLS)法分析研究特征峰与抗氧化活性的谱效关系,筛选其质量标志物并分析鉴定其化学成分。结果:在正、负离子模式下,三叶青提取物及各洗脱部位分别筛选出57、92个特征峰;综合Pearson相关系数与OPLS分析结果,其中14个离子峰对抗氧化活性贡献较大,分别为香兰素(P2)、儿茶素(P13、N19)、芦丁(P27、N54)、异槲皮苷(P28)、山奈酚-3-O-芸香糖苷(P33、N61)、原花青素B(N18)、原花青素C(N22)以及离子峰N23、N25、N26、N29。结论:建立了三叶青提取物及各洗脱部位的UPLC-Q-TOF-MS指纹图谱,揭示了三叶青抗氧化活性的质量标志物,为三叶青的质量标准制定及资源开发利用提供技术支撑。

基于MALDI-TOF-MS技术筛选及鉴定大曲中芽孢杆菌

该研究对基质辅助激光解吸电离-飞行时间-质谱(MALDI-TOF-MS)技术体系进行改进与优化,创新性地引入浓香型大曲中芽孢杆菌(Bacillus)的筛选及鉴定,并结合分子生物学技术对该技术鉴定结果进行验证。结果表明,采用传统微生物培养分离法从大曲中分离得到126株菌株,其中125株通过MALDI-TOF-MS技术筛选鉴定获得9.0以上可信度分值,其中目标菌株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)及地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)的鉴定结果与分子生物学鉴定结果一致,说明该技术历经5~6 d可以准确地完成大曲样品中目标菌株的筛选鉴定,比传统微生物筛选鉴定方法至少节约1~2周时间。因此,基于MALDI-TOF-MS技术参与复杂样品中目标菌株的筛选与鉴定是一条高效的、可行的路径。

基于特征图谱及化学模式识别的当归补血汤质量评价研究

目的:建立当归补血汤超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)的特征图谱,综合评价其质量。方法:采用Waters Acquity UPLC BEH C18柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)溶液为流动相,梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,进样量2μL;使用电离子喷雾源(ESI),负离子模式扫描。并以指纹图谱相似度评价软件结合聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)和偏最小二乘判别分析(PLS-DA)对11批当归补血汤进行评价。结果:通过对照品比对及软件预测,从当归补血汤中鉴别出24种成分。图谱标定出41个共有峰,指认出6个色谱峰,分别为毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、黄芪甲苷、芒柄花素。HCA、PCA和PLS-DA3种方法均将11批样品分为3类,对黄芪统货、选货和精品饮片进行了明显区分,说明当归补血汤的特征图谱与原药材的质量和等级具有强相关性。结论:构建的高分辨质谱的特征图谱结合化学模式识别方法快速高效全面,适用于当归补血汤整体质量的评价,同时也为中药复方质量标准建立与全程质量控制提供了重要支撑。

MALDI-TOF-MS在鉴定进口甲鱼卵病原菌中的应用

目的应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)仪器和Biotyper分析软件对台湾进口的甲鱼卵进行携带病原菌的检测。方法选用合适的培养基对进境甲鱼卵进行细菌分离培养,选取可疑菌株,纯化后接种肉汤培养,然后按照MALDI-TOF-MS要求进行样品制备,点靶并获取样品质谱图,并运用Biotyper分析软件对所获取的质谱图进行分析。同时用全自动微生物鉴定系统进行辅助分析鉴定。结果应用MALDITOF-MS方法从台湾输入大陆的73批甲鱼卵中分离出绿脓杆菌、奇异变形杆菌、肺炎克雷伯氏菌、霍乱弧菌、沙门氏菌等25个属49个种242株致病菌,其中大部分是对人和动物的条件致病菌。结论当前进境甲鱼卵携带病原菌形势严峻,需引起进出口商、检验机构及其他相关部门重视。本研究对规范甲鱼卵贸易、保障人民健康都有着重要的作用。

MALDI-TOF MS和电子光谱技术研究海兔肝铁蛋白亚基电离和释放铁动力学特性

选用肽质量指纹谱(peptide mass fingerprint,PMF)技术鉴定质谱纯海兔肝铁蛋白(liver ferritin ofAplysia,ALF)。来源于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)仪中的激光和基质芥子酸协同解吸海兔肝铁蛋白(ALF)为带双电荷、单电荷[M+H]+和二聚体的亚基离子,并可供质谱分析。ALF亚基的质荷比m/z分别为9784.03[M+2H]2+、19678.42[M+H]+和39387.80[2M+H]+,其中亚基分子量[M+H]+略小于鲨鱼肝铁蛋白(liver ferritin of shark,SLF)。在弱碱介质(pH8.0)条件下,电子光谱技术研究指出,抗坏血酸以1/2级反应方式参与ALF释放铁全过程,同时又使ALF以一级反应动力学方式释放铁,呈现两种不同的速率。推测这一异常现象可能与ALF含低铁量、亚基调节能力和海兔的进化地位有关。

基于UPLC-Q-TOF-MS法对中药山绿茶化学成分分析

目的建立测定山绿茶提取物化学成分的超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOFMS)分析方法。方法采用Agilent poroshell SB-C_(18)色谱柱(4.6 mm×50 mm,2.7μm),以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,采用电喷雾(ESI)离子源,进行负离子扫描采集数据,通过Agilent Qualitative Analysis数据分析定性软件,进行色谱峰的提取和匹配。结果通过质谱信息并结合对照品与相关文献、数据库分析检索,共鉴别出27个化合物。结论该方法能够快速、灵敏、全面地分析山绿茶提取物的化学成分,为阐明山绿茶的药效物质基础提供有力的证据。

蜂胶样品乙醇提取物的UPLC-Q-TOF-MS指纹特征

探索蜂胶质谱指纹在建立蜂胶品质和真实性判别模型的可行性,对9个国内外蜂胶样品用体积分数75%热乙醇溶液提取,提取液用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用仪进行一级阳离子化总离子流色谱和总质谱(色谱和质谱指纹)的采集分析。从总离子流图指纹发现2个广东成品蜂胶色谱指纹与其余7个极为不同,判断为异常蜂胶;9个蜂胶样品均未检出芦丁和槲皮素。总离子流图指纹结合峰内分子的质荷比可直观对比蜂胶样品的相同和差异,能克服色谱峰的漂移,比单用液相色谱指纹特征判别更可靠。总质谱指纹主成分分析对2个异常蜂胶的判别与色谱指纹结果一致,表明色谱和质谱指纹结合有望建立更稳健的蜂胶鉴别方法。

利用MALDI-TOF MS技术简便、快速检测水华蓝藻的方法研究

以水华蓝藻为研究对象,用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术对其进行测定分析并获得了蛋白质指纹图谱。对铜绿微囊藻标准株(NIES-843)样品通过3种前处理方法得到的质谱图进行对比,确定了质谱分析的样品前处理方法,建立了利用MALDI-TOF MS技术简便、快速检测水华蓝藻的方法。对在水华中出现的4种不同蓝藻进行MALDI-TOF MS分析,结果表明各种蓝藻具有其特征性波谱,可据此对水华蓝藻进行区分和鉴定。该方法快速、简便、精确、可程序化,具有广泛的应用前景。

双环醇、联苯双酯、五味子丙素的UHPLC-ESI-Q-TOF-MS分析及其应用

目的:分析双环醇、联苯双酯和五味子丙素的质谱裂解规律,鉴定双环醇原料药中的杂质。方法:采用超高效液相色谱-电喷雾-四极杆-飞行时间质谱法,以电喷雾电离源为离子源,在正离子模式下,利用飞行时间质谱对双环醇、联苯双酯和五味子丙素的准分子离子及其特征碎片离子信息进行分析,根据碎片质量变化推测可能的裂解途径,分析总结其质谱裂解规律;双环醇原料药样品首先通过液相色谱分离,寻找其中的杂质峰,然后利用质谱对杂质峰进行分析,结合裂解规律辅助鉴定杂质的结构。结果:3种化合物在正离子模式下均产生[M+H]+的准分子离子,经碰撞诱导解离后发生C—O键、C—C键的简单断裂以及氧环的开环断裂,并伴随以CH2O为主,CO2、CO、CHO为辅的中性碎片丢失,解离均集中在中高质量区。3种化合物只有支链结构和/或氧环结构发生C—C、C—O键的简单断裂,而联苯母核结构未曾改变。其中,双环醇由于含有苄位羟基结构,故在酸性流动相条件下,会以[M+H-H2O]+的形式稳定存在;五味子丙素因其含有八元环结构,故碰撞电压下率先出现开环,继而再出现中性碎片丢失。双环醇原料药中杂质的二级质谱与联苯双酯的二级碎片表现出的质谱裂解行为基本一致。结论:本研究归纳了3种五味子衍生物的质谱裂解规律。双环醇原料药中出现的杂质可能为联苯双酯。

^(252)Cf快响应电离室裂变中子、γ飞行时间谱测量

介绍了252Cf快响应电离室裂变中子、γ飞行时间谱的测量系统的组成及工作原理,并给出了测量结果。这个系统测得的中子、γ飞行时间谱,其γ峰的半高宽达到0.9ns,可应用于探测系统的定时精度测量、n-γ分辨效果的检验等。

基于高压液相色谱法的地沟油聚类分析方法研究

目的建立基于高压液相色谱法的地沟油聚类分析方法,对地沟油进行行之有效的测定。方法假设目标油样的主要成分分为甘油三酯和其他杂质两大类,通过对其MALDI-TOF质谱峰的分析及高压液相色谱峰(HPLC)的聚类判别,实现地沟油的分析检测。首先利用MALDI-TOF质谱对油样进行初步分析;然后根据出峰时间选取了14个特征高压液相色谱峰,得到其面积百分比,并对其进行标准化处理;采用聚类分析技术将41个已知油样聚成六大类,建立样品数据库;对未知样品数据进行判别分析,可以对其进行检测。结果该方法可以检测到食用油中掺入10%的地沟油含量。将该方法用于26个盲样,结果显示,准确率为92.3%。结论该方法可以对地沟油进行有效地测定。

飞行时间质谱峰值的漂移

飞行时间质谱仪(ti me-of-flight mass spectrometer,TOF-MS)在分子团簇的激光电离/解离动力学研究中广泛使用。文章报道了在用脉冲355nm的YAG激光进行水/甲醇二元团簇的多光子电离研究中,发现在电离激光相对于脉冲分子束的不同延时下,即激光作用于脉冲束的不同位置,飞行时间质谱仪测得的离子的质谱峰值发生漂移。在激光作用于脉冲束的中段时,离子的信号最强,同时离子的峰值漂移达到最大。分析认为:这种峰值漂移不是因为新质量数谱峰的出现,而是离子在穿越质谱仪的离子引出区和加速区极板时发生部分离子吸附,引起极板间电压的起伏造成的。离子在电场起伏下的数值模拟与实验中观测到的离子峰值漂移规律一致。

内包金属富勒烯衍生物La@C_(82)-(C_4N_2H_8)_mH_n的合成与表征

在常温、Ar气保护下研究了金属富勒烯与哌嗪(Piperazine)的反应,并用硅胶柱分离了3种金属富勒烯衍生物.用激光解析飞行时间质谱、紫外-可见-近红外光谱和傅里叶变换红外光谱等手段分析确定其结构分别为La@C82-C4N2H8,La@C82-C4N2H8-H8和La@C82-(C4N2H8)2-H6.对比C60与哌嗪的反应结果发现,与空富勒烯相比,金属富勒烯反应活性更高,产物加成数目更多.

激光光解NO_2产物—NO分子NO(X^2П)与氧原子O(~3PJ″)的REMPI离子谱研究

利用激光光解NO2 分子 ,通过共振增强多光子电离 (REMPIresonanceenhancedmultiphotoionization)及飞行时间 (TOFtimeofflight)质谱技术 ,获得了振转态分辨的NO(X2 Π ,υ″,J″)与自旋 轨道分辨的氧原子O(2P3PJ″ =2 ,1,0 )离子谱 NO分子与O原子的离子信号强度与UV电离激光能量之间的关系分别能用二次方和三次方曲线很好拟合 ,它表明 :光解产物NO分子和氧原子是分别通过 (1+1)和 (2 +1)多光子吸收过程而被电离的 由氧离子信号得到的氧原子基态三个自旋 轨道支能级布居比f1与f0 分别为 0 .5 4± 0 .0 9和 0 .2 0± 0 .0 4 ,这一比值与统计分布计算的值为 0 .6和 0 .

粘胶纤维工艺过程中VOCs的排放特征

为了研究再生纤维素纤维生产过程VOCs的排放影响,选择四川宜宾某纤维生产企业为重点监测对象,对企业厂界上下风向以及侧边界设监测点采样。对工艺车间无组织排放VOCs进行采样,利用在线仪器TT24-7-TOF-MS对采集的样品进行VOCs定量分析。结果表明:无组织排放源的主要特征VOCs包括二硫化碳、1,2,4-三甲基苯、苯乙烯、对二甲苯、间二甲苯、甲苯、邻二甲苯、乙苯、氯甲苯、丙酮等。黄化车间、纺丝车间、厂界上下风向空气中CS2的最高浓度分别为71.53μg/m^3、127.21μg/m^3、152.60μg/m^3、368.89μg/m^3,分别占VOCs总量的41.29%、41.18%、74.36%、76.85%。为了更好的模拟和计算,应该建立一套测试成分谱的标准方法,将VOCs成分谱数据本地化。

蛋白质组学方法筛选肺腺癌相关蛋白

目的寻找肺腺癌的相关蛋白标志物,为肺腺癌的诊断、监测及治疗提供新的途径。方法提取肺腺癌和癌旁正常组织中可溶性蛋白质,应用双向凝胶电泳技术筛选两者间的差异表达蛋白,基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱结合生物信息学技术鉴定在肺腺癌组织中高表达的蛋白质。应用免疫组织化学技术验证分析差异蛋白grp94的表达情况。结果应用蛋白质组学技术从肺腺癌组织中成功筛选出grp94等6种蛋白,其在癌组织的表达明显高于癌旁正常组织。免疫组化技术也证实grp94在肺腺癌组织中的表达比例明显高于癌旁正常组织。所鉴定的蛋白功能分别涉及细胞内蛋白的合成、装配,体内超氧自由基的清除、细胞凋亡等与肿瘤生物学特性密切相关的方面。结论蛋白质组学技术可有效从组织中筛选肺腺癌相关蛋白。筛选出的蛋白标志物包括铜锌超氧化物岐化酶、热休克蛋白27、磷酸丙糖异构酶B链、膜联蛋白Ⅰ、94ku糖调节蛋白和热休克蛋白90-β,为肺腺癌进一步的分子诊断和治疗提供了参考靶点。

运用多谱学分析技术测定高黏聚α烯烃的结构

为探究典型的高黏聚a烯烃的精细结构，采用飞行时间质谱、核磁共振波谱和红外光谱方法表征了一种高黏度聚α烯烃（PAO）的结构，确定了该PAO样品主要为聚1-癸烯烃类聚合物，并测定了碳数分布、双键类型以及蒸馏受热后裂解产物的结构信息。质谱结果显示：该PAO聚合度为2～21，其最强峰为五聚1-癸烯；各聚合度PAO几乎都可以检出单烯与链烷烃两类分子。核磁共振氢谱中可见亚乙烯基的同碳偶合烯氢双峰，表明该PAO中存在微量端烯键。经高真空度蒸馏后，蒸馏产物中烯键峰显著增强，表明蒸馏过程产生大量的热裂解产物。红外分析结果表明，PAO样品中的烯键为亚乙烯基双键型，进一步证明了PAO经加氢饱和后残余双键及热解新生成双键皆为端烯类，而非内烯类。

氩在超短脉冲强激光场中电离电子剩余能的研究

利用带有抛物面反射电镜的无磁场TOF(Time-Of-Flight)电子能谱仪 ,以氩气作为工作介质 ,测量了不同功率密度、不同气压、不同偏振条件下氩的电子能谱 .结果表明激光脉冲能量 (峰值光强 )增强则相应的电子能谱的幅值会有所增强 ,且会出现新的电子峰 ,即有新的机制参与电离 .充气气压较高时产生了许多低气压时所没有的高能电子 ,而低能电子峰增强幅度不大 .圆偏振光相对于线偏振光有利于高能电子的产生 .

激光光解NO_2产物的NO分子之离子谱研究

利用Nd:YAG激光器三倍频,输出波长为λ=355nm的激光光解NO2分子所产生的NO分子,通过共振增强多光子电离及飞行时间质谱技术,获得了振转态分辨的NO(X2∏,υ″,J″)离子谱NOγ(0,0),γ(1,0),γ(1,1)。NO分子的离子信号强度与UV电离激光能量(λ≈226nm)之间的关系能用二次方曲线很好拟合,它表明光解产物NO分子是通过(1+1)多光子吸收过程而被电离的。上述结果对NO2分子光解动力学及其产物NO的电离动力学提供了十分有益的信息。

北京典型城区冬季PM2.5水溶性离子特征

为了全面了解北京市煤改气后冬季大气细颗粒PM2.5中无机水溶性离子及其来源,于2017年冬季供暖期间在北京市海淀区连续采集了41个PM2.5样品,采用离子色谱分析了其中10种水溶性离子(Na+、NH4+、K+、Ca2+、Mg2+、F-、Cl-、NO2-、NO3-、SO42-)的浓度。结果表明:采样期间北京市PM2.5的日均质量浓度范围为(94.28±52.49)μg/m3,相较于2016年,2017年冬季PM2.5日均质量浓度降低了29μg/m3,减少幅度达28.2%,污染天数明显降低;污染期颗粒物中NO3-、SO42-、NH4+显著高于优良期;质量浓度比ρ(NO3-)/ρ(SO42-)大于1,移动源贡献相对较大,反映出"煤改气"政策实施引起燃煤等固定源排放硫酸盐减少。采用飞行时间二次离子质谱(TOF-SIMS)结合质量高分辨模式与正负离子成像模式表征了PM2.5。结果显示NH4+在污染期倾向以分子硫酸铵或硫酸氢铵的形态存在。