β-榄香烯对人胃癌细胞SGC7901作用的蛋白质组学研究

目的探讨β-榄香烯对胃癌细胞作用的蛋白质分子基础。方法采用MTT法观察β-榄香烯对SGC7901胃癌细胞活性的影响;iTRAQ蛋白质组学筛选β-榄香烯作用SGC7901胃癌细胞蛋白质表达变化;Western blot对所筛选差异表达蛋白质进行验证。结果β-榄香烯显著抑制SGC7901胃癌细胞活性;β-榄香烯干预引起SGC7901细胞147个蛋白质表达上调,86个蛋白质表达下调。Western blot对PAK1IP1(p21-activated protein kinase-interacting protein 1)、BTF(Bcl-2-associated transcription factor 1)和TOPIIα(topoisomerase 2-alpha)表达验证显示,PAK1IP1和BTF表达上调,TOPIIα表达下调,与蛋白质组学结果一致。筛选出的差异表达蛋白所涉及信号通路主要包括核糖体信号通路、过氧化物酶体增殖物活化受体信号、细胞骨架肌动蛋白调节信号、细胞吞噬以及氨基酸的合成代谢。结论β-榄香烯对胃癌细胞具有显著的抑制作用,筛选的差异表达蛋白对研究β-榄香烯抗肿瘤作用机制具有重要的参考价值。

胃癌患者术后多项免疫分子表达对预后的影响

目的总结手术切除Ⅰ-Ⅲ期胃癌的临床特点,探讨胃癌术后常规检测分子表皮生长因子受体1(HER1)、HER2、P53、血管内皮生长因子(VEGF)、拓扑异构酶IIα(TOPIIα)、Ki67、P糖蛋白(P170)的表达及对预后的影响。方法回顾性分析41例I-III期胃癌手术病例,综合临床、病理特征及术后7项常规分子标记物的免疫组织化学指标,对患者无疾病生存时间(DFS)采用SPSS 17.0软件包进行单因素及多因素分析。结果全部病例术后随访时间为36个月,中位随访期18个月,1年总生存率为95.12%,中位DFS为17个月,1年DFS生存率为70.59%。术后患者HER1、HER2、P53、P170、Ki67、VEGF和TOPIIα均有阳性表达,HER2、P53、VEGF和TOPIIα高表达DFS降低(P<0.05)。结论 HER2、P53、VEGF和TOPIIα阳性表达DFS降低。

二甲双胍下调谷胱甘肽S转移酶和拓扑异构酶Ⅱα对SiHa/cDDP增殖的抑制作用

目的探讨二甲双胍下调谷胱甘肽S转移酶(GSTpi)和拓扑异构酶Ⅱα(TopIIα)对顺铂(cDDP)耐药的宫颈癌细胞系SiHa/cDDP增殖的抑制作用。方法构建SiHa/cDDP耐药细胞株并进行鉴定。CCK8法测定cDDP对Si Ha和Si Ha/c DDP细胞的抑制率;绘制SiHa、SiHa/cDDP细胞的生长曲线,按Patterson公式计算Si Ha和Si Ha/c DDP细胞的群体倍增时间;观察c DDP对SiHa、SiHa/cDDP细胞形态的影响;CCK8法测定不同浓度二甲双胍对SiHa和SiHa/cDDP细胞的抑制率;细胞迁移实验、Transwell细胞侵袭实验分别检测二甲双胍对SiHa、SiHa/cDDP细胞侧向迁移能力及纵向迁移能力的影响;RT-qPCR法检测SiHa/cDDP细胞较SiHa细胞GSTpi、TopIIαmRNA的表达变化,以及二甲双胍对SiHa/cDDP细胞作用后GSTpi、TopIIαm RNA的表达变化。结果 cDDP对SiHa、SiHa/cDDP细胞的抑制作用与cDDP的浓度正相关,相同浓度下对SiHa/cDDP细胞的抑制率明显低于对SiHa细胞的抑制率(P<0.01);SiHa、SiHa/cDDP细胞的群体倍增时间分别为(30.69±0.58)、(38.39±1.05)h,比较差异具有统计学意义(P<0.001);顺铂对SiHa细胞形态的影响较大,而对SiHa/cDDP细胞基本没有影响;二甲双胍对SiHa、SiHa/cDDP细胞生长均有抑制作用,抑制率与二甲双胍浓度正相关,相同浓度下对SiHa/cDDP细胞的抑制率明显高于对SiHa细胞的抑制率(P<0.01);与SiHa细胞相比,二甲双胍能更明显抑制SiHa/cDDP细胞迁移和侵袭(P<0.01);RT-qPCR结果显示,与SiHa细胞相比,SiHa/cDDP中GSTpi、TopIIαm RNA的表达明显升高(P<0.01、0.05),且二甲双胍能抑制SiHa/cDDP细胞中GSTpi、Top IIαm RNA的表达(P<0.01)。结论二甲双胍能通过下调GSTpi、Top IIα的表达抑制Si Ha/c DDP的增殖、侵袭和迁移。