TORCH-IgM捕获法ELISA试剂盒的研制和应用

目的 为了发展TORCH近期感染的IgM酶免疫诊断技术。方法 以抗人IgMMcAb包板 ,加待检血清、TORCH抗原 ,接着加酶标记的抗TORCH McAb ,最后加 3,3’ ,5 ,5’ 四甲基联苯胺 (TMB)显色。用这种自制的捕获法ELISA(C ELISA)试剂盒和HOPE公司的间接法ELISA(I ELISA)试剂盒平行检测 1196份孕妇血清TORCH IgM。结果 C ELISA试剂盒检出阳性血清 6 7份 ,并经其他试验证实为阳性。其中 4份用I ELISA试剂盒检测为阴性。由乳胶凝集试验诊断为类风湿因子(RF)阳性的 2份血清 ,经I ELISA试剂盒检测为阳性 ,但经C ELISA试剂盒检测为阴性。结论 在检测孕妇TORCH IgM方面 ,C ELISA比I ELISA有更强的敏感性和更高的特异性。C

快速酶联免疫吸附试验检测TORCH-IgM抗体的研究

目的建立快速检测TORCH-IgM抗体的方法。方法利用聚乙二醇(PEG)能加速抗原、抗体反应的特点,在常规间接EL ISA法检测TORCH-IgM抗体基础上,在样本稀释液、酶标记物稀释液中各加入3%PEG,以缩短反应时间。结果温育时间缩短到15 m in(37℃)的快速EL ISA法对检测人TORCH-IgM抗体强阳性、弱阳性、阴性标本具有稳定性好,精密性、特异性强的特点;稀释液中不加PEG的常规15 m in法,采用37℃、15 m in试验条件,可能会造成弱阳性标本漏检情况。结论快速EL ISA法的建立为TORCH病原体感染的快速检测和流行病学调查提供了新的手段。

育龄妇女TORCH-IgM检测及不良妊娠与TORCH感染关系

目的:分析正常育龄妇女TORCH-IgM检测的意义,探讨不良妊娠史与TORCH感染的关系。方法:选取在2016年1月—2020年3月本院行TORCH-IgM抗体检测的正常育龄妇女6000例,采集血样酶联免疫吸附法检测TORCH-IgM抗体,分析弓形虫(Tox)、风疹病毒(RV)、巨细胞病毒(CMV)、单纯疱疹病毒(HSV)及其他微生物(O)筛查阳性率。另外检测不良妊娠史孕妇60例及胎儿脐血TORCH感染情况,与同期正常妊娠孕妇相比较。结果:6000例正常育龄妇女TORCH-IgM检测阳性率为2.23%,其中HSV-IgM阳性率(1.37%)高于TOX-IgM(0.23%)、RV-IgM(0.30%)、CMV-IgM(0.33%)(P<0.05)。不良妊娠史孕妇Tox、RV、CMV、HSV感染率(8.33%、11.67%、10.00%、25.00%)均高于正常妊娠孕妇(0、0、0、1.67%),有不良妊娠史孕妇新生儿脐血Tox、RV、CMV、HSV感染率(6.67%、10.0%、8.33%、20.00%)均高于正常妊娠新生儿感染率(0、0、0、0),其孕中期、孕晚期TORCH感染阳性率(18.33%、20.00%)高于孕早期(6.67%)(P<0.05)。结论:正常育龄妇女应在孕前进行TORCH-IgM检测,尤其是有不良妊娠史待孕女性,需将其作为产前筛查常规项目,以降低出生缺陷发生。

抗ToRCH-IgM型抗体临床对比检测研究

ＴｏＲＣＨ系列病原微生物（包括弓形虫Ｔｏｘ、风疹病毒ＲｕＶ、巨细胞病毒ＣＭＶ、单纯疱疹病毒ＨＳＶ Ⅰ／Ⅱ等）是一组具有致畸作用的病原体，孕妇感染可导致流产 、早产、畸形甚至死胎。目前ＴｏＲＣＨ ＩｇＭ型抗体的检测都在不同程度上受到非特异性的干扰，采用有效方法消除干扰对ＴｏＲＣＨ ＩｇＭ型抗体检测的准确性至关重要。为此我们对比了多种消除ＩｇＭ检测中非特异性干扰 的方法，并以最佳方法对２５６例女性献血者、１４３例正常妊娠和６１例异常妊娠标本进行ＴｏＲＣＨ ＩｇＭ抗体的对比检测。结果显示健康人群中ＴｏＲＣＨ活动性感染率较高，健康孕妇ＴｏＲＣＨ ＩｇＭ的 总阳性率高达２３．１％（其中Ｔｏｘ５．６％、ＣＭＶ９．８％、ＲｕＶ８．４％、ＨＳＶ４．９％）；而异常妊娠则显著上升 （ ｐ＜０．０１），其中Ｔｏｘ、ＣＭＶ、ＲｕＶＩｇＭ阳性率上升明显（ｐ＜０．０５），分别为１９．７％、２６．２％、２４．６％ 。 由此可见孕期ＴｏＲＣＨ病原微生物活动感染是致异常妊娠的主要因素之一，应严密监视孕期ＴｏＲ ＣＨ病原微生物活动性感染，特别是弓形虫、风疹病毒和巨细胞病毒的感染。

大连市5208例育龄妇女TORCH-IgM检测结果分析

目的：了解大连市育龄妇女TORCH感染情况及意义。方法：采用酶联免疫斑点技术（EUSPOT），对2005年6月-2006年5月进行产前检查的5208例育龄妇女进行TORCH—IgM抗体的检测。结果：TOX、RV、CMV、HSV的IgM阳性检出率分别为0．10％，0．12％，0．15％及0．84％。结论：对育龄妇女进行TORCH—IgM检测，可降低和阻止缺陷儿的出生，以提高优生优育质量。

TORCH-IgM阳性孕妇胎儿产前超声诊断分析

目的探讨TORCH-IgM阳性孕妇胎儿产前超声检查的诊断价值.方法对724名孕妇采用酶联吸附法检测血清TORCH-IgM抗体,并进行超声检查,统计本组孕妇TORCH-IgM抗体阳性率,比较不同孕周孕妇TORCH-IgM抗体阳性率,比较TORCH-IgM抗体阳性及阴性孕妇超声异常检出率,观察TORCH感染胎儿产前异常超声表现及妊娠结局.结果本组孕妇中TORCH-IgM抗体阳性孕妇107例,阳性率为14.78%,其中TOX-IgM27例,RV-IgM28例,CMV-IgM22例,HSV-IgM30例.不同孕周孕妇TORCH-IgM抗体阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05).不同孕周孕妇TORCH各病原体IgM阳性率比较差异均无统计学意义(P>0.05).TORCH-IgM抗体阳性孕妇超声异常检出率显著高于阴性孕妇(P<0.05).20例TORCH感染胎儿中,TOX感染4例、RV感染6例、CMV感染3例、HSV感染7例,共有4例孕妇选择引产,5例胎死宫内,11例妊娠结局良好.结论产前超声检查可以为妊娠期TORCH感染孕妇的临床处理提供参考依据,值得推广应用.

抗TORCH-IgM型抗体检测中类风湿因子RF清除的实验研究

目的探讨在抗ＴＯＲＣＨ－ＩｇＭ型抗体检测中排除ＲＦ和特异ＩｇＧ产生的假阳性和假阴性结果的方法。方法在抗ＴＯＲＨ－ＩｇＭ型ＥＬＩＳＡ试剂的研究过程中．用羊抗人ＩｇＧ（γ特异）抗血清消除ＲＦ干扰。结果弱阳性ＯＤ_(４５０)下降不超过５０％而非特异性下降约８０％左右的情况下有效地消除了ＲＦ和特异ＩｇＧ的干扰．结论在调整好特异性和敏感性关系的前提下，用羊抗人ＩｇＧ（γ特异）抗血清，能有效地消除ＲＦ和特异ＩｇＧ的干扰，使弱阳性不漏检而假阳性被剔除。

两种试剂盒检测TORCH-IgM的比较性研究

用自制试剂盒和 HOPE试剂盒检测 1 1 96份孕妇血清 TORCH- Ig M,共检出阳性血清 67份 ,在67份阳性血清中 ,有 4份血清用自制试剂盒检测为阳性血清 (A值虽大于临界值 ,但比较低 ,为 0 .2 1 5～0 .2 31 ) ,而用 HOPE试剂盒检测为阴性。所有这 67份阳性血清均经其它试验证实为阳性。两者阳性、阴性的符合率分别为 94%、99%。结果表明 :自制试剂盒是初筛孕妇血清 TORCH- Ig M的一个具有敏感、特异、简便等特点的良好工具。

2 962例孕早期女性TORCH-IgM筛查结果分析

目的探讨该地区孕早期女性TORCH(弓形虫、风疹病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒Ⅱ型等总称)感染状况及临床意义,为优生优育提供参考依据。方法采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测2 962例孕早期女性血清TORCH-IgM抗体。结果 2 962例孕早期女性血清标本检测出51例TORCH-IgM抗体阳性,总感染率为1.72%,TOX-IgM、RV-IgM、CMV-IgM、HSV-Ⅱ-IgM的阳性率分别为0.27%、0.24%、0.34%、0.88%。结论该地区孕早期女性TORCH筛查感染率处于较低水平,HSV-Ⅱ型的感染率最高,为0.88%(26/2 962),对筛查阳性的患者进行全面系统地评价,采取早期干预措施,在改善妊娠和新生儿结局、提高该地区出生人口素质有重要的临床意义。

241例孕妇血清中人微小病毒B_(19)-IgM与其他TORCH抗体检测结果的分析与比较

本文报告241例孕妇血清中人微小病毒B19－IgM及其他TORCH抗体（包括风疹病毒－IgM、巨细胞病毒－IgM、单纯疱疹病毒Ⅱ－IgM及弓形体抗体）的检测结果．其中B19－IgM阳性率为7．05％，与其余四项抗体阳性率比较，均呈显著性差异，表明我地区孕妇中人微小病毒B19。较其余四项TORCH因子有着较高的新近感染率，从而提示有必要将B19－IgM列为孕妇TORCH监测项目之一。

脑瘫患儿血清TORCH抗体及IL-4、IFN-γ、TNF-α水平检测

目的:检测脑瘫患儿TORCH抗体及血清IL-4、IFN-γ和TNF-α水平。方法:应用ELISA法对128例脑瘫患儿血清CMV-IgM、TOX-IgM、RV-IgM和HSV2-IgM进行检测,对血清细胞因子IL-4、IFN-γ和TNF-α水平进行检测。130例正常儿作对照。结果:脑瘫患儿中CMV-IgM、TOX-IgM、HSV2-IgM、RV-IgM阳性率分别为41.4%、32.8%、14.8%、8.6%,均高于正常儿(P<0.05)。与TORCH-IgM阴性脑瘫患儿和正常儿比较,TORCH-IgM阳性脑瘫患儿血清IL-4水平较低(P<0.05),TNF-α和IFN-γ水平较高(P<0.05)。结论:脑瘫患儿TORCH感染以CMV为主。脑瘫患儿TORCH感染后,细胞因子分泌失衡,免疫平衡遭到破坏,易致脑损伤。

妊娠期ToRCH感染特异性IgM抗体调查

本文采用ELISA试剂盒法检测了福州地区592例各期孕妇血清ToRCH感染IgM抗体，结果如下：Toxo、RubV、CMV、HSV－IgM阳性率分别为3．4％、8．1％、3．9％、5．4％；56例咨询病人的阳性率则分别为12．5％、8．9％、19．6％、7．1％；并且发现RubV的感染1～6月份较7～12月份高（P＜0．01），CMV的感染1～2月份呈逐渐上升趋势。

中华鳖免疫球蛋白的理化特性——中华鳖IgM对2-巯基乙醇敏感性、与人IgM的同源性及其相对分子质量的研究

凝集法发现 ,当鳖抗嗜水气单胞菌的血清与 2 -巯基乙醇一起孵育后 ,再与嗜水气单胞菌反应 ,无凝集现象 ,说明鳖免疫球蛋白对 2 -巯基乙醇敏感。用交叉免疫扩散法 ,发现鳖 Ig M与羊抗人 Ig M血清无沉淀反应 ,只与兔抗鳖 Ig M血清出现沉淀反应 ,而人 Ig M只与羊抗人 Ig M血清发生沉淀反应 ,不与兔抗鳖 Ig M血清反应 ,这些表明鳖 Ig M与人 Ig M之间无免疫同源性。用 SDS- PAGE电泳检测到中华鳖免疫球蛋白的相对分子质量约为 8.7× 10 5,重链约为 6 .3× 10 4 ,轻链约为 2 .2× 10

慢性支气管炎肺气虚证患者支气管-肺泡灌洗液中白细胞计数和IgA、IgM含量的变化

目的 :探讨中医肺气虚证的微观辨证标准。方法 :对 2 6例慢性支气管炎肺气虚证患者支气管 -肺泡灌洗液中计数嗜中性粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞的比例进行观察 ,检测IgA、IgG的含量 ,并与正常人和慢支肺气未虚的患者对照。结果 :肺气虚证组嗜中性粒细胞和巨噬细胞比例显著下降 ,淋巴细胞比例显著升高 ,IgA含量有下降的趋势 ;而慢支患者不论肺气已虚或未虚 ,其IgG含量都显著增加。结论 :BALF中嗜中性粒细胞降低 ,淋巴细胞升高 。

细胞融合法制备抗人CD3-抗人IgMμ链双特异性抗体

目的制备抗人CD3-抗人IgMμ链双特异性抗体(Bispecificantibody,BsAb)的细胞株,并对建株的杂交-杂交瘤的稳定性及活性进行鉴定。方法将抗人CD3单克隆抗体细胞株采用8-AG诱变成HAT敏感杂交瘤细胞株,再通过FuGENETM6转染含neo基因质粒pCDaA3,制备成具有双标记杂交瘤αCD3HATS G418R亚系,与抗人IgMμ链单克隆抗体细胞株融合,通过ELISA法及流式细胞仪筛选,制备分泌BsAb的细胞株。结果融合6次,共接种1080孔,共得5株抗CD3-抗IgM杂交-杂交瘤。经亚克隆后,其中2株体外连续传代培养2月仍保持良好的分泌BsAb功能。结论采取细胞融合法可成功制备分泌BsAb的杂交-杂交瘤,其稳定性及效价与亲本杂交瘤相似。

带状疱疹患者皮损程度与血清特异性IgG抗体、IgM抗体、IL-2、IL-10关系的研究

目的 :了解带状疱疹患者不同皮损状态下血清水痘 -带状疱疹病毒IgG抗体、IgM抗体、IL -2、IL -1 0的表达情况。方法 :应用ELISA方法对带状疱疹 3 0例早期轻症患者、3 0例早期重症患者、2 6例恢复期患者和 3 0例正常对照血清IgG抗体、IgM抗体进行检测 ,同时检测了部分患者和健康者IL -2、IL -1 0的水平。结果 :IgG抗体在早期轻症组与早期重症组、正常对照组之间有差异 ,与恢复期之间无差异 ,但在早期重症组与恢复期、正常对照组三者之间也无差异 ;IgM抗体、IL -2在四组之间无差异 ;IL -1 0在早期重症组高于早期轻症组 ,恢复期组和正常对照组与其相比均有显著性差异 ,而早期轻症组、恢复期组、正常对照组三者之间并无差异 ;IgG抗体、IgM抗体与IL -2、IL -1 0以及IL -2 /IL -1 0之间经相关分析均无相关性。结论 :带状疱疹患者血清IgG抗体、IgM抗体和IL -2水平与皮损严重程度之间无明显关系 ,IL -1 0水平在早期重症患者明显升高。