梅毒螺旋体 Tp0844重组蛋白的表达、纯化及免疫反应性研究

目的：克隆、表达梅毒螺旋体重组蛋白 Tp0844，纯化表达产物并进行免疫反应性分析，筛选与宿主具有高反应性的 Tp 主要蛋白。方法通过生物信息学分析，获取 Tp0844基因序列，构建原核载体进行诱导表达；Ni-NTA 亲合层析柱纯化重组蛋白，Western 印迹法检测其重组蛋白与梅毒阴阳性血清的反应情况。结果成功构建 PET-30a（＋）-Tp0844原核表达重组体，经诱导表达后发现该重组体可高表达出可溶性的重组蛋白，经亲和层析纯化后获得了相对分子质量为43000的重组蛋白；以梅毒 IgG 抗体阴、阳性血清为一抗，采用 Western 印迹法检测发现，Tp0844重组蛋白与梅毒阳性血清能发生明显特异反应，而与健康阴性血清未出现反应条带。结论可溶性重组表达的 Tp0844蛋白具有较好的免疫反应性，可作为梅毒发病机制研究的候选抗原。