Gly33的缺失和突变对hTrx-1抗氧化活性的影响

为探讨人硫氧还蛋白hTrx-1活性位点保守序列中Gly33残基在还原氧化性蛋白过程中是否必不可少,通过合成突变基因对hTrx-1的Gly33残基进行缺失和替换(G→A)。合成的突变基因随后在原核细胞中表达并进一步纯化及检测抗氧化活性,结果表明,无论是Gly33残基的缺失还是突变为Ala,突变的hTrx-1均能在原核细胞中高效表达,暗示2种突变型hTrx-1均能形成“Trx折叠”结构。抗氧化活性检测表明Gly33残基缺失的情况下,其抗氧化能力有所下降,当Gly33突变为Ala时,其抗氧化能力大幅下降到接近失去抗氧化能力。推测Trx-1活性中心保守氨基酸残基的改变影响了活性中心区域的几何构象,从而导致底物蛋白难以从空间上靠近。参与形成二硫键巯基的含量检测结果表明,突变型hTrx-1中形成二硫键巯基的含量明显低于野生型hTrx-1中形成二硫键巯基的含量,推测突变型hTrx-1的Cys32与Cys35形成二硫键的能力受到影响。

姜黄素调控Trx-1/TXNIP复合体防治对乙酰氨基酚诱导小鼠肝损伤的研究

为了探讨姜黄素(CUR)对对乙酰氨基酚(APAP)诱导小鼠肝脏损伤的保护作用及机制,试验将60只ICR小鼠随机分成正常对照组、模型组、N-乙酰半胱氨酸组(按体重150 mg/kg灌胃N-乙酰半胱氨酸)、姜黄素低剂量组(按体重50 mg/kg灌胃CUR)、姜黄素中剂量组(按体重100 mg/kg灌胃CUR)和姜黄素高剂量组(按体重200 mg/kg灌胃CUR),对模型组、N-乙酰半胱氨酸组及姜黄素低、中、高剂量组连续灌胃10 d,然后一次性按体重300 mg/kg腹腔注射APAP诱导小鼠急性肝损伤,24 h后,摘眼球取血并处死各组小鼠,计算小鼠肝脏指数,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)活性,以及肝脏组织中过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性,谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量,活性氧(ROS)水平;并取肝脏组织进行H.E.染色,观察小鼠肝脏病理组织学变化。通过RT-qPCR方法检测肝脏中Trx-1/TXNIP/NLRP3通路mRNA相对表达量。结果表明:与正常对照组比较,模型组小鼠的肝脏指数,血清ALT、AST、LDH活性,肝脏组织MDA含量、ROS水平显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),肝脏组织GSH含量和CAT、SOD活性显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01),Trx-1 mRNA相对表达量极显著降低(P<0.01),TXNIP、NLRP3、ASC、Caspase-1和IL-1β的mRNA相对表达量极显著增加(P<0.01)。与模型组相比,姜黄素低中高剂量组小鼠血清ALT、AST、LDH活性,肝脏指数和肝脏组织MDA、ROS含量极显著降低(P<0.01),肝脏组织CAT、SOD活性和GSH含量显著或极显著提高(P<0.05或P<0.01),Trx-1的mRNA相对表达量显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),TXNIP、NLRP3、ASC、Caspase-1和IL-1β的mRNA相对表达量显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01)。模型组肝脏组织肝索紊乱,肝细胞大量坏死,核溶解,肝窦炎性浸润和充血;姜黄素各剂量组肝索结构基本正常,肝细胞坏死减少。说明姜黄素通过抗氧化和抗炎作用对APAP诱导的小鼠急性肝损伤发挥保护作用,其机制可能与Trx-1表达量增加和TXNIP表达量降低有关。

川芎嗪通过调控Txnip/TRX/NF-κB通路对急性肺损伤小鼠的保护作用研究

目的探索川芎嗪对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)小鼠的保护作用,并探寻其可能的作用机制。方法选取50只健康BABL/c小鼠,随机分为对照组、模型组、地塞米松组(2 mg/kg)、川芎嗪低剂量组(20 mg/kg)和川芎嗪高剂量组(40 mg/kg)。对照组和模型组给予生理盐水,地塞米松组(2 mg/kg)、川芎嗪组(20、40 mg/kg)灌胃给予相应药物。给药1 h后,除对照组外,其余各组小鼠气管滴注20μg LPS。测定小鼠肺湿/干质量比,观察肺组织病理学变化,相应试剂盒检测肺组织超氧化物歧化酶(SOD)水平和丙二醛(MDA)含量,ELISA法检测白细胞介素-1β(1L-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达,Western blotting检测Txnip、TRX和p-NF-κB p65蛋白表达。结果川芎嗪可显著缓解LPS诱导的ALI小鼠的肺水肿程度(P<0.01);显著上调SOD活力,下调MDA含量(P<0.05);有效降低小鼠肺组织炎性细胞因子表达水平(P<0.05);降低Txnip、pNF-κB p65的表达,上调TRX的表达(P<0.05)。结论川芎嗪可能通过Txnip/TRX/NF-κB信号通路缓解LPS诱导的ALI。

姜黄素通过抑制TXNIP/TRX-1/GPX4通路介导的铁死亡减轻脓毒症小鼠肺损伤

目的探究姜黄素(Cur)是否通过调控TXNIP/TRX-1/GPX4通路抑制铁死亡减轻脓毒症肺损伤。方法雄性C57BL/6小鼠随机分为Sham组、脓毒症(盲肠结扎穿孔术,CLP)组、CLP+各浓度Cur(50、100和200 mg/kg)组、CLP+Cur(200 mg/kg)+TRX-1抑制剂PX-12(25 mg/kg)组,10只/组,检测各组小鼠肺组织炎症因子及铁死亡关键因子MDA、MPO、GSH水平。Beas-2B细胞分为Con组、脂多糖组(LPS,1μg/mL)、LPS+各浓度Cur(2.5、5、10μmol/L)及LPS+Cur(10μmol/L)+PX-12(5μmol/L)组,检测MDA和Fe^(2+)水平,DHE染色评估ROS变化。Western blotting检测肺组织和Beas-2B细胞TXNIP、TRX-1、GPX4和X-CT蛋白表达水平。结果与Sham组相比,CLP组小鼠肺损伤严重,IL-6、IL-1β、TNF-α、MDA、MPO含量增加,GSH含量下降(P<0.01);与CON组相比,LPS组MDA、Fe^(2+)、ROS水平升高;CLP组肺组织和LPS组Beas-2B细胞TXNIP蛋白表达增加,TRX-1、GPX4及X-CT蛋白表达减低(P<0.01);与CLP组相比,CLP+Cur各浓度组肺损伤减轻,炎症因子和脂质过氧化因子含量降低,GSH水平升高;与LPS组相比,LPS+Cur各浓度组Fe^(2+)、MDA和ROS水平下降(P<0.05);TXNIP蛋白表达降低,TRX-1、GPX4及X-CT蛋白表达增加(P<0.01)。PX-12干预后,取消了Cur对脓毒症肺组织和Beas-2B细胞的保护作用(P<0.05)。结论姜黄素通过升高TRX-1、GPX4,降低TXNIP抑制铁死亡,减轻脓毒症肺损伤。

拟南芥TRX-h5基因的克隆和表达分析

硫氧还蛋白(TRX-h)是一类催化二硫键还原的小分子蛋白,在调控氧化应激响应中发挥重要作用。为了研究硫氧还蛋白的结构及其功能,文章以野生型拟南芥(Arabidopsis thaliana)Columbia(Col-0)为研究材料,通过反转录-聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)技术获得TRX-h5基因的编码序列(coding sequence,CDS),体外构建pET28a(+)-TRX-h5及pET28a(+)-TRX-h5M(第39位和第42位半胱氨酸位点突变)的原核表达载体,转化至大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)中,诱导后经镍柱纯化得到带有6个His标签的融合蛋白。通过SDS-PAGE电泳技术检测到14 kDa处的目的条带,与理论值预测一致。运用生物信息学分析得出,TRX-h5基因编码118个氨基酸,相对分子质量为13122.32,理论等电点为5.19,该蛋白的不稳定参数为26.74,属于稳定性蛋白。点突变分析发现,TRX-h5的第39位和第42位半胱氨酸位点决定了该蛋白的催化活性,为进一步探究TRX-h5的蛋白功能和高等植物氧化还原系统的研究提供了新思路。

消渴安糖方对2型糖尿病肾病患者血清Trx、Txnip的影响

研究2型 DN (2型 DN)中硫氧还蛋白(Trx)和硫氧还蛋白(Txnip)对 DN (2型 DN)中 Trx和 Txnip的调控作用。方法 选择广西中医学院瑞康人民医院内分泌内科门诊和入院的2型 DN病人69例,根据纳入条件,将其分成2组:普通疗法+止渴安糖方34例,普通疗法35例。比较两组的疗效。结果 两组患者术后 Trx和 Txnip均显著高于对照组,差异有统计学意义。结论 我们提出“消渴安糖方剂”通过调控 Trx和 Txnip表达,提高2型 DN (气阴夹瘀),为中药防治 DN开辟新途径。

姜黄素通过调控Trx-1/TXNIP/NLRP3通路减轻对乙酰氨基酚诱导的大鼠急性肾损伤

目的探究姜黄素(curcumin,CUR)对对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)诱导的大鼠急性肾损伤的保护作用及机制。方法48只雄性SD大鼠随机均分为正常组、模型组、阳性药NAC组、CUR低(50 mg/kg)、中(100 mg/kg)、高(200 mg/kg)剂量组。NAC及CUR灌胃给药10 d后,一次性灌胃给予2 g/kg APAP建立急性肾损伤模型,造模24 h后,取血并分离大鼠,计算肾指数;检测血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平;HE染色评价大鼠肾病理变化;检测大鼠肾组织谷胱甘肽(GSH)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)水平;Western blot检测大鼠肾组织Trx-1、TXNIP、NLRP3炎症小体等蛋白的表达水平。结果与正常组相比,模型组大鼠肾指数显著增加(P<0.01),血清Cr、BUN水平显著升高(P<0.01),病理切片显示大鼠肾组织出现明显的损伤,大鼠肾组织中GSH、T-SOD、CAT的活性显著降低(P<0.01),MDA的含量显著升高(P<0.01),大鼠肾组织中Trx-1的表达明显下调(P<0.05),TXNIP、NLRP3、ASC、Cleaved caspase-1、mature IL-1β蛋白的表达明显上调(P<0.01)。与模型组相比,CUR中、高剂量组肾指数显著降低(P<0.01),病理损伤改善,血清Cr、BUN水平显著降低(P<0.01),肾组织中GSH、T-SOD、CAT活性显著升高,MDA含量显著降低(P<0.05或P<0.01),Trx-1的表达明显上调(P<0.05或P<0.01)、TXNIP、NLRP3、ASC、Cleaved caspase-1、mature IL-1β蛋白表达明显下调(P<0.01)。结论姜黄素预防性给药通过调控Trx-1/TXNIP/NLRP3通路减轻APAP诱导的大鼠急性肾损伤。

TRX悬吊训练在体育领域的应用进展

近年来,体育运动、体育健身、体育保健、体育健康等有关于体育的热点词汇层出不穷,一方面突显出国家对于人民健康的重视程度;另外一方面说明人民对体育与健康的认识程度也逐渐加深。随着技术的更新以及研究体育锻炼不断深入、方法层出不穷,TRX悬吊作为一种新兴并具有广泛应用前景的训练方法,具有使用方便、训练负荷小、成本低、易于与各项运动项目相结合的优势。本文采用文献资料法,介绍TRX悬吊训练的发展过程及其应用,对未来在体育领域完善其系统性与科学性,加深对TRX悬吊训练的研究以及进一步加强其多样性应用做出展望。

Trx-1在脓毒症小鼠内皮细胞铁死亡中的表达

目的研究脓毒症小鼠血管内皮细胞是否存在铁死亡以及硫氧还蛋白-1(thioredoxin-1,Trx-1)在这一过程中的表达。方法采用盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP)构建脓毒症小鼠模型。将动物随机分成3组:假手术组(Sham组)、CLP组、铁死亡抑制剂组(Fer-1组)。观察12h后,取外周血制备血清,采用ELISA法检测各组小鼠外周血中Trx-1、血管内皮生长因子(VEGF)及内皮素-1(ET-1)的表达。提取及培养小鼠原代内皮细胞,应用荧光探针技术测定内皮细胞内Fe^(2+)及ROS的水平,试剂盒法测定内皮细胞内谷胱甘肽(glutathione,GSH)及丙二醛(malondialdehyde,MDA)的水平。结果与Sham组相比,CLP组内皮细胞内GSH含量降低,Fe^(2+)、ROS、MDA含量升高,Fer-1预处理能够缓解这一过程;与Sham组相比,CLP组Trx-1、ET-1及VEGF含量升高,Fer-1组较CLP组降低。结论脓毒症小鼠内皮细胞存在铁死亡,Trx-1在脓毒症铁死亡中高表达。

颅脑外伤患者围手术期Trx1、NGF、hs-CRP动态变化对预后的预测效能探讨

目的 探讨颅脑外伤患者围手术期硫氧还蛋白1(Trx1)、神经生长因子(NGF)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)动态变化对预后的预测效能。方法 选取2019年3月—2021年5月空军军医大学第二附属医院收治的105例颅脑外伤患者,根据预后不同分为预后不良组(28例)、良好组(77例),比较两组临床资料、术前、术后3 d、术后7 d Trx1、NGF、hs-CRP水平,应用Pearson及偏相关性分析各指标与格拉斯哥预后量表(GOS)评分关系,采用受试者工作特征曲线(ROC)及ROC下面积(AUC)分析术后7 d Trx1、NGF、hs-CRP预测预后效能。结果 不良组入院时APACHEⅡ评分与良好组比较,差异有统计学意义(P<0.05);不良组术后3 d、术后7 d Trx1、NGF低于良好组,hs-CRP高于良好组(P<0.05);术后3 d、术后7 d Trx1、NGF与GOS评分呈正相关,术后3 d、术后7 d hs-CRP与GOS评分呈负相关(P<0.05);将混杂因素控制后,术后7 d Trx1、NGF、hs-CRP仍与GOS评分相关(P<0.05);术后7 d Trx1、NGF联合hs-CRP预测预后的AUC为0.890,大于Trx1的0.771、NGF的0.753,hs-CRP的0.858,预测敏感度为71.43%,特异度为90.91%。结论 颅脑外伤患者术后Trx1、NGF降低及hs-CRP升高与预后不良有关,联合检测三者水平有望成为预测预后的一个可靠方案,为临床干预、决策、监护等提供参考。

TRX悬吊训练对健美操运动员核心稳定性的影响研究

目前健美操项目的身体素质训练基本采用传统的训练方法,但是对于运动员更快地适应健美操项目的发展较为不利,更快且安全地提升健美操运动员核心稳定性是当前急需解决的问题。该文通过对高校健美操运动员进行12周的TRX悬吊训练与传统腰腹训练,研究两种方法对健美操运动员的核心稳定性影响差异。经过训练后得出:两种训练方法对于健美操运动员核心稳定性都有较大幅度的提升,将两组运动员实验后各项成绩进行对比分析发现,1 min仰卧两头起、30 s团身跳以及星形偏移平衡测试的成绩具有显著性差异(P<0.05),表明TRX悬吊训练相对传统的核心力量训练,对健美操运动员核心稳定性与核心力量提升效果更好。建议将TRX悬吊训练运用在健美操项目的训练之中,丰富健美操训练的内容与手段,增强训练的趣味性,最终提升健美操运动员的竞技能力。

基于Trx2/ASK1信号通路探讨补骨颗粒对软骨细胞凋亡的调控机制

目的:观察补骨颗粒对软骨细胞凋亡及对Trx2/ASK1/Caspase-3表达的影响,从而探讨补骨颗粒对软骨细胞凋亡影响机制,为进一步研究补骨颗粒防治骨关节炎奠定实验基础。方法:将20只SD大鼠随机分为空白对照组,补骨颗粒低、中、高剂量组,每组5只。适应性喂养7 d,空白对照组给予蒸馏水2 m L·kg^(-1)灌胃,补骨颗粒低、中、高剂量组给予补骨颗粒1.54 g·kg^(-1)、3.08 g·kg^(-1)、6.16 g·kg^(-1)灌胃。干预14 d后,抽取血液经离心获得血清。通过酶联免疫吸附试验检测血清中Trx2、ASK1、Caspase-3表达量,采用MTT法检测血清干预后的细胞增殖活性,采用流式细胞仪检测血清干预后的软骨细胞凋亡率。结果:与空白对照组比较,补骨颗粒低、中、高剂量组Trx2、ASK1与Caspase-3含量明显减少,差异均有统计学意义(P <0.05);与补骨颗粒中剂量组比较,补骨颗粒低剂量组和高剂量组Trx2与ASK1含量明显增多,补骨颗粒低剂量组Caspase-3含量明显增多,差异均有统计学意义(P <0.05)。与空白对照组比较,补骨颗粒低、中、高剂量组OD值明显升高(P <0.05);补骨颗粒低、中、高剂量组组间比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。流式细胞仪检测发现,不加入硝普钠时(对照组1)软骨细胞的凋亡率最低为4.25%,加入硝普钠后(空白对照组1)软骨细胞的凋亡率变为46.86%,补骨颗粒低剂量组1软骨细胞的凋亡率(30.15%)高于补骨颗粒中剂量组1(27.77%)和高剂量组1(27.41%)。结论:补骨颗粒将会调控Trx2表达,并且不同剂量补骨颗粒将会通过Trx2-ASK1解离度调控Caspase-3活化程度而影响软骨细胞的凋亡,这将有助于进一步认识补骨颗粒对骨关节炎防治过程。

TRX悬吊训练对健美健身运动肩关节稳定性的影响研究

目的:研究TRX悬吊训练对健美健身运动肩关节稳定性的影响,旨在为健美健身运动的科学训练提供参考。方法:选取20名健美健身专项的大学生作为研究对象,随机分成对照组和实验组,两组均进行常规训练,实验组进行为期8周的TRX悬吊训练干预。采用等速肌力测试、闭合动力链上肢稳定性测试及Y-Balance(UQ)测试对实验组和对照组分别进行实验前后的肩关节稳定性测试。结论:(1)实验组等速肌力肩关节右侧ER/IR具有明显改善效果。左侧ER/IR在T检验中不具备显著性,但其比值较前测有所提升,数据变化有趋于平衡的趋势,肩关节稳定性在增强。左侧测试结果不理想,可能与本次干预周期时间较短、部分受试者左侧肩关节功能异常、左侧神经—肌肉募集能力较低等因素有关。(2)TRX悬吊训练不仅可以改善肩关节稳定性,而且对于Y平衡上肢测试中还涉及的本体感觉、核心肌群稳定性、运动控制、肩关节和胸椎灵活性等运动能力也产生了积极作用。(3)TRX悬吊训练可以改善肩关节前后力量失衡状态,提升闭合动力链上肢稳定性,强化肩胛骨肌群辅助、适应盂肱关节运动的能力。

LPS-RS、mNGF对致痫幼鼠保护性研究及TRX、NSE监测

目的:研究戊四氮(PTZ)诱导的慢性癫痫模型幼鼠血清和海马中硫氧还原蛋白(TRX)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达水平及球形红假单胞脂多糖(LPS-RS)、鼠神经生长因子(mNGF)对其表达的影响,对比LPS-RS与mNGF干预后的差异大小。方法:清洁级wistar雄性幼鼠130只,随机分为4组:A组(空白对照组,n=31只)、B组(EP癫痫组,n=33只)、C组(mNGF组,n=33只)、D组(LPS-RS组,n=33只)。A组幼鼠每天给予9g/L生理盐水,B、C、D组3组的幼鼠每天给予PTZ 40mg/kg腹腔注射,给药14d后B、C、D组3组建立慢性癫痫模型。第15~21天为干预阶段(共7d):A、B组幼鼠每天予等量9g/L生理盐水,C组幼鼠每天腹腔注射mNGF 4μg/kg,D组幼鼠每天腹腔注射LPS-RS 0.1mg/kg,给药后均观察1h,记录其行为学表现;末次干预结束后A、B、C、D 4个小组每组随机取27只幼鼠进行标本采集,每组于3h、24h、72h三个时段各随机采集9个标本,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测血清及海马中TRX、NSE的浓度。结果:血清及海马的TRX浓度检测结果提示:各个时间段B、C、D三组TRX浓度均高于A组,其中B组最高,C组高于D组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。血清及海马的NSE浓度检测结果提示:各个时间段B、C、D三组NSE浓度均高于A组,其中B组最高,C组高于D组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:(1)LPS-RS对癫痫的神经损伤起保护作用,可作为癫痫治疗研究的靶点。(2)mNGF能够修复癫痫反复发作后的神经损伤,对神经元起保护作用。(3)血清TRX、NSE可以作为癫痫治疗监测的指标。

八周TRX训练对警校生综合素质影响的浅现研究

文章以山东警察学院40名男生为研究对象,以随机方式分为TRX训练组20名(TRX实验组)及器械抗阻训练组20名(ART对照组),通过对其实施8周的TRX训练干预,探究TRX 训练对警校生综合素质影响的展现,为公安院校体能训练方法多样性提供理论参考。研究结果显示,8周实验干预后,实验组综合素质成绩各指标高于对照组。由此确定,TRX训练与ART训练对综合素质能力的训练效果皆有进步影响,但TRX训练的效果优于ART训练。

Trxs过量表达对大麦成熟种子生理生化活性及蛋白组分的影响

为进一步了解硫氧还蛋白过量表达促进大麦种子萌发的机理,以硫氧还蛋白S基因(Trxs)过量表达的转基因大麦纯合株系(LSY-11-1-1)及其非转基因对照(CK)为试验材料,研究了Trxs过量表达对大麦成熟种子中硫氧还蛋白h(Trxh)催化活性、巯基含量、激素含量、蛋白组分及吸水速率的影响。结果显示:①转基因大麦成熟种子中Trxh催化活性显著高于CK(P<0.01);转基因大麦种子的还原状态增强,LSY-11-1-1种子中巯基含量显著高于CK(P<0.01);转基因大麦成熟种子的激素含量增加,其中LSY-11-1-1的赤霉素(GA)与生长素(IAA)含量显著高于CK(P<0.05)。②转基因大麦成熟种子中醇溶蛋白与CK明显不同,高分子量蛋白条带数与丰度高于CK。③转基因大麦的吸水速率比CK快,在萌发10、30和50 h时,LSY-11-1-1的含水量分别比CK增加了21.87%、15.38%和11.11%,差异显著(P<0.05)。上述结果表明,Trxs过量表达可以通过改变转基因大麦成熟种子中巯基含量、激素含量和醇溶蛋白组分等方式影响大麦种子萌发过程中的C、N转移效率,从而促进萌发进程。

拟南芥AtTrx5增强植物菌核病的抗性研究

核盘菌是危害十字花科作物生产的重要病原菌。核盘菌诱导寄主产生过量活性氧(ROS),造成寄主细胞死亡,硫氧还蛋白(Trx)在寄主抗氧化过程中起重要作用。筛选并鉴定硫氧还蛋白(Trx),分析其与核盘菌抗性的关系,将为植物抗菌核病育种提供基因资源。本研究通过生物信息学及转录组数据分析,从拟南芥中筛选到一个关键Trx基因AtTrx5。AtTrx5与甘蓝型油菜BnaA08g04320D的亲缘关系最近,氨基酸相似性为85%。油菜同源基因Trx5表现出上调表达。AtTrx5超表达植株在接种核盘菌24 h后的菌斑面积相比野生型(WT)减小30%~39%,而At-Trx5基因T-DNA突变体的菌斑面积比WT增加39.2%。在侵染过程中超表达转基因拟南芥中AtTrx5的表达量均高于WT,而T-DNA突变体中AtTrx5的表达量则低于WT。DAB染色、H2O2含量、·O2-含量测定结果表明,侵染过程中拟南芥T-DNA突变体中积累的ROS高于WT,超表达转基因拟南芥中积累的ROS少于WT。

Trx及其抑制因子TXNIP基因在发育不同阶段牛体外胚胎中的转录与表达

【目的】研究Trx及其抑制因子TXNIP基因在牛卵母细胞及不同发育阶段体外受精胚胎中的表达变化.【方法】采用实时荧光定量PCR方法,检测牛GV期卵母细胞、MⅡ期卵母细胞、受精卵、2-4细胞胚胎、8-16细胞胚胎、桑椹胚和囊胚中Trx1、Trx2和TXNIP基因mRNA的相对表达量.【结果】Trx1和Trx2基因在GV期卵母细胞和不同发育阶段的胚胎均有不同程度的表达.GV期卵母细胞Trx1mRNA表达量最高,随着卵母细胞的成熟及受精后胚胎的发育逐渐降低,囊胚期胚胎表达量又急速升高.Trx2基因在受精前的卵母细胞中高表达,受精后表达量逐渐下降,囊胚期胚胎Trx2 mRNA的表达量最低.内源性抑制因子TXNIP基因在2-4细胞胚胎阶段之前都是高表达,从8-16细胞胚胎阶段表达下降,在囊胚期胚胎表达量最低.【结论】牛卵母细胞及附植前胚胎自身的抗氧化能力在发育的不同阶段可能有所不同,而Trx1、Trx2及TXNIP基因在卵母细胞和不同发育阶段胚胎中的表达模式可能起到了重要的调控作用.

转反义trxs基因小麦籽粒蛋白组分的巯基含量与α-淀粉酶活性的关系

利用反义trxs基因特异引物,对扬麦5号转反义trxs基因株系00TY5的T4和T5代进行了PCR分子鉴定,并对其纯合株系籽粒蛋白质组分的巯基含量、α-淀粉酶活性及二者的相关性进行了测试。结果表明,00TY5的T4和T5代PCR分子检测均呈阳性。与非转基因植株相比,在籽粒成熟和后熟过程中,籽粒清蛋白巯基含量在开花后30 d至成熟后5 d平均降低33.2%,球蛋白巯基含量在开花后20 d至成熟后5 d平均降低42.5%,均达极显著水平(P<0.01);醇溶蛋白和谷蛋白巯基含量有下降的趋势,但降低幅度较小;α-淀粉酶活性低,变异小,尤其在开花后35 d至成熟后10 d,平均比非转基因植株下降36.5%。各种蛋白质组分的巯基含量与α-淀粉酶的活性呈正相关关系,清蛋白巯基含量在成熟前与α-淀粉酶活性相关性达极显著水平(P<0.01);球蛋白巯基含量在成熟前10 d至成熟后10 d达显著水平(P<0.05);贮藏蛋白巯基含量与α-淀粉酶活性的相关性在各时段均较高。

弥漫大B细胞淋巴瘤中Trx、TrxR-1及TXNIP的表达及临床意义

目的探讨硫氧还蛋白(Trx)、硫氧还蛋白还原酶1(TrxR-1)及硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)在弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)中的表达及临床意义。方法采用免疫组化法检测60例DLBCL和20例淋巴结反应性增生组织中Trx、TrxR-1及TXNIP的表达,并分析三者表达与DLBCL临床病理特征的关系。结果DLBCL中Trx和TrxR-1的阳性率分别为68.33%和76.67%,淋巴结反应性增生组织中Trx和TrxR-1的阳性率分别为25.00%、35.00%,DLBCL中Trx和TrxR-1的阳性率均明显高于淋巴结反应性增生组织,差异有统计学意义(P<0.05);TXNIP在DLBCL中的表达(20.00%,12/60)低于淋巴结反应性增生组织(80.00%,16/20),差异有统计学意义(P<0.05)。DLBCL中Trx、TrxR-1和TXNIP的表达与临床分期、IPI评分有关(P<0.05),与患者性别、年龄、乳酸脱氢酶水平无关(P>0.05)。ROC结果显示,Trx、TrxR-1单项检测曲线下面积(AUC)分别为0.717与0.708,而两者联合检测AUC为0.767,高于单独检测。结论Trx、TrxR-1及TXNIP表达异常可能与DLBCL发生、发展有关,联合检测Trx和TrxR-1表达可为DLBCL的诊断提供参考价值。