LncRNA TUC338通过激活EGFR/PI3K/AKT信号通路促进肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的探讨长链非编码RNATUC338(lncRNA TUC338)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、迁移、侵袭及表皮生长因子受体(EGFR)/磷酸肌醇3激酶(PI3K)/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)通路的影响。方法收集2019年7月—2021年6月我院胸外科手术切除的37例NSCLC患者肺癌组织与癌旁组织标本,RT-qPCR检测组织标本及NSCLC细胞中lncRNA TUC338表达;对NCI-H157细胞进行干预,将si-TUC338、si-NC、pcDNA-TUC338、pcDNA-NC质粒转染细胞及EGFR与PI3K双重抑制剂MTX-211(MTX-211)、pcDNA-TUC338与MTX-211共同处理细胞,CCK-8法检测细胞增殖,Transwell小室法检测细胞迁移与侵袭,Western blot检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9蛋白及EGFR、PI3K、AKT相关蛋白表达。结果LncRNA TUC338在肺癌组织与细胞中高表达;抑制lncRNA TUC338表达可显著抑制NCI-H157细胞增殖、迁移与侵袭及EGFR/PI3K/AKT通路激活(P<0.05);过表达lncRNA TUC338可促进NCI-H157细胞增殖、迁移与侵袭及EGFR/PI3K/AKT激活(P<0.05)。结论LncRNA TUC338在肺癌中呈高表达,可能通过激活EGFR/PI3K/AKT信号通路促进肺癌NCI-H157细胞增殖、迁移与侵袭。

长链非编码RNA-TUC338通过PI3K/AKT信号通路对淋巴瘤细胞迁移和增殖的影响

目的:探讨长链非编码RNA-TUC338对淋巴瘤细胞增殖和迁移的影响。方法:采用荧光定量PCR检测不同淋巴瘤细胞中TUC338表达,磺酰罗丹明B实验检测细胞增殖能力,细胞迁移侵袭实验检测淋巴瘤细胞迁移能力,蛋白免疫印迹实验检测PI3K/AKT信号通路蛋白表达情况。结果:与人正常T淋巴细胞H9相比,淋巴瘤细胞Daudi、U937、BC-3和Raji中TUC338表达水平均明显提高(t=13.277、10.103、16.200和26.687,P=0.002、0.005、0.001和0.000)。与NC-siRNA组相比,TUC338-siRNA组穿过小室细胞数明显减少(t=30.508,P=0.000),p-PI3K和p-AKT蛋白表达量明显下降(t=16.872、18.371,P=0.000、0.000),在24、48和72 h的OD_(530)吸光值均明显偏低(P<0.05)。结论:在淋巴瘤细胞中TUC338表达量明显增加,沉默TUC338表达能够有效抑制PI3K/AKT信号通路的激活,进而抑制淋巴瘤细胞的增殖和迁移,在淋巴瘤诊断和治疗中具有潜在应用价值。

TUC338在膀胱癌中的表达及作用机制研究

目的:探讨膀胱癌中长链非编码RNA(lnc RNA)TUC338的表达及作用机制。方法 :收集安徽医科大学一附院收治的30例膀胱癌手术患者的癌变组织和癌旁组织,通过实时定量PCR检测TUC338的表达水平并分析其临床病理特征之间的关联。运用RNA干扰(si-TUC338)的方法检测敲减TUC338,采用CCK8和半胱天冬酶3酶联免疫吸附测定法的方法分别检测TUC338对膀胱癌细胞的增殖、凋亡的影响。结果:相对于膀胱癌旁组织,TUC338 m RNA在膀胱癌组织中高表达。敲减TUC338后,细胞增殖被抑制,细胞凋亡增加。结论:TUC338是一个潜在的治疗膀胱癌的药物作用靶点。

靶向长链非编码RNA TUC338的人工合成四环素调控系统在膀胱癌细胞中的作用

目的:探讨应用四环素调控长链非编码RNA TUC338在膀胱癌细胞内的表达及抗肿瘤作用。方法:将针对TUC338的sh RNA序列插入到四环素诱导系统的下端,构建四环素诱导的TUC338 sh RNA并转染细胞。应用实时荧光定量PCR检测细胞内TUC338的表达水平,采用CCK8和半胱天冬酶3酶联免疫吸附测定法的方法分别检测细胞的增殖和凋亡。结果:四环素诱导的TUC338 sh RNA可以降低TUC338的表达,抑制膀胱癌细胞增殖和促进膀胱癌细胞的凋亡。结论:通过构建四环素基因表达调控系统,可精确控制TUC338在膀胱癌细胞内表达,并发挥杀伤肿瘤细胞功能,为进一步构建特异、高效的膀胱癌合成生物治疗器件提供理论基础。

食管鳞癌患者血浆lncRNA TUC338表达变化及其临床意义

目的观察食管鳞癌(ESCC)患者血浆长链非编码RNA(lncRNA)TUC338表达变化,并探讨其诊断ESCC的潜在价值。方法选择ESCC患者116例(ESCC组)、体检健康者39例(对照组),收集两组空腹静脉血,离心留取血浆;选择ESCC组织及其配对的癌旁正常组织。采用实时荧光定量PCR法检测两组血浆和ESCC组织及癌旁正常组织lncRNA TUC338表达。随机选择46例ESCC患者,采用Spearman秩相关分析法分析血浆与肿瘤组织lncRNA TUC338表达的关系。分析血浆lncRNA TUC338表达与ESCC患者临床病理参数的关系。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血浆lncRNA TUC338表达诊断ESCC的价值。结果 ESCC组血浆lncRNA TUC338相对表达量明显高于对照组(P<0.01)。ESCC组织lncRNA TUC338相对表达量明显高于癌旁正常组织(P<0.01)。血浆与肿瘤组织lncRNA TUC338表达呈正相关关系(r=0.643,P<0.01)。血浆lncRNA TUC338表达与ESCC患者TNM分期及淋巴结转移有关(P均<0.05)。ROC曲线分析显示,血浆lncRNA TUC338表达诊断ESCC的曲线下面积为0.684;其cut off值为1.415,此时其诊断ESCC的敏感性为63.4%,特异性为78.1%。结论 ESCC患者血浆lncRNA TUC338高表达,其表达变化与肿瘤TNM分期、淋巴结转移有关;血浆lncRNA TUC338有可能作为诊断ESCC的潜在生物标志物。

Lnc RNA TUC338影响人类宫颈癌细胞的蛋白组学分析

目的探究长链非编码RNA TUC338影响人类宫颈癌细胞的分子机制。方法将人类宫颈癌细胞Hela细胞分为实验组(TUC338组)与对照组(rLV组),分别感染rLV-hTUC338-ZsGreen-Puro慢病毒及rLV-ZsGreen-Puro慢病毒,RT-PCR检测两组细胞Lnc RNA TUC338表达量,并对两组细胞进行蛋白质谱分析。结果感染慢病毒后所有细胞均有绿色荧光显示,RT-PCR结果显示TUC338组Lnc RNA TUC338表达量较rLV组增加,两组均显示较多的蛋白条带;非标记定量法蛋白测序共检测到4323个蛋白。蛋白差异分析显示:与rLV组比较,在TUC338组中下调的蛋白有194个,上调的蛋白有225个。其中,重要的下调蛋白有:LAMB1、HNRNPH3、COX2等,上调蛋白有:EPPK1、ITPR1、AKR1C2等。最显著的下调GO为磷酸化修饰功能,上调GO为细胞骨架功能,最显著的下调KEGG通路为半乳糖代谢通路,上调KEGG通路为肌动蛋白细胞骨架调节通路。共检测到含WD40 repeat结构域(WD40 repeat)等20个蛋白结构域。rLV组和rLV-TUC338组中有显著差异的结构域包括Haem peroxidase,animal等。主要亚细胞成分及主要差异亚细胞成分均为核蛋白,分别占34.23%、24.22%。rLV组和rLVTUC338组中下调的互作网主要包括:prot1(P37268)-prot2(O95864)、prot1(Q6FGH9)-prot2(Q13363)等。上调的互作网主要包括:prot1(P60520)-prot2(A0A024RBQ5)、prot1(P60520)-prot2(Q06330)等。结论Lnc RNA TUC338影响了人类宫颈癌细胞的蛋白组学,是宫颈癌的抑癌基因,并通过糖代谢、磷酸化、细胞骨架这3个通路抑制肿瘤发展。