长链非编码RNA TUG1和UCA1在结肠癌组织中的表达及临床意义

目的探究长链非编码RNA TUG1和UCA1在结肠癌组织中的表达及临床意义。方法选取2018年5月—2020年5月收治的80例结肠癌患者为研究对象,利用原位杂交与qRT-PCR法检测TUG1和UCA1的表达,对表达情况和患者病理特征及预后进行研究。结果UCA1和TUG1在结直肠癌组织表达过程中与性别、年龄以及病理情况关系较小(P>0.05),和患者肿瘤大小、是否存在淋巴结转移、疾病的分化情况以及分期情况高度相关(P<0.05)。UCA1和TUG1高表达患者肿瘤更大,淋巴结存在转移情况,分化程度较高且TNM分期以Ⅰ/Ⅱ为主;80例患者进行随访36个月,中位生存时间33.75个月,死亡人数16例,术后总生存率80.00%(64/80);Kaplan-Meier生存分析显示UCA1和TUG1高表达死亡12例,生存38例,生存率76.00%(38/50);UCA1和TUG1低表达死亡4例,生存26例,生存率86.66%(26/30)。结论直肠癌组织中lncRNA TUG1和UCA1高表达与低表达对患者疾病预后有一定影响。

丹蛭降糖胶囊通过LncRNA TUG1/β-catenin信号通路保护线粒体功能减轻血管钙化的机制

目的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)成骨样分化是血管钙化(vascular calcification,VC)细胞学基础。线粒体功能障碍在VSMCs成骨样转化中起重要作用。本研究旨在探讨丹蛭降糖胶囊(Danzhi Jiangtang capsules,DJC)通过调节LncRNA TUG1/β-catenin信号通路保护VSMCs线粒体功能减轻血管钙化的机制。方法使用β-甘油磷酸盐来诱导血管平滑肌细胞的钙化模型,并采用维生素D 3+高脂饲料来诱导糖尿病大鼠的血管钙化模型。Von Kossa染色检测细胞和血管组织钙化;用邻甲酚酞络合物比色法测定钙含量;采用对硝基苯磷酸盐比色法测定碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性;采用RT-qPCR分析VSMCs成骨样转化相关基因骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein2,BMP2)、平滑肌肌动蛋白(smooth muscle actin alpha,ɑ-SMA)及长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(long noncoding RNA taurine up-regulated1,LncRNA TUG1)、β-连环蛋白(β-catenin)表达;Western blot分析BMP2、ɑ-SMA及β-catenin的蛋白表达;JC-1荧光探针检测线粒体膜电位;透射电镜观察线粒体结构。结果DJC降低β-甘油磷酸盐诱导的VSMCs中LncRNA TUG1的表达,下调β-catenin的表达,降低ALP活性和钙沉积,保护线粒体功能,恢复膜电位,减少VSMCs成骨样转化。重要的是,DJC通过下调糖尿病下肢血管组织LncRNA TUG1、β-catenin的表达,上调ɑ-SMA的表达来减轻糖尿病下肢VC。结论DJC对糖尿病下肢VC有明显的改善作用,机制是通过LncRNA TUG1/β-catenin信号保护线粒体功能减少VSMCs成骨细胞转化。

基于lncRNA TUG1介导miR-320调控PTEN/Cosmc通路探讨肾炎止血丸治疗IgA肾病的作用机制

目的:观察肾炎止血丸对IgA肾病(IgAN)模型大鼠的治疗作用及其对lncRNA TUG1介导miR-320-5p调控PTEN/Cosmc通路的影响。方法:采用“牛血清白蛋白+四氯化碳+脂多糖”联用法构建IgAN大鼠模型,32只大鼠随机分为正常对照组、模型组、氯沙坦钾片组[20 mg/(kg·d)]、肾炎止血丸组[3.6 g/(kg·d)],每组8只,均连续给药6周。留取血液、肠黏膜及肾组织标本,分别应用ELISA法检测血清磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)、核心1β1,3半乳糖基转移酶伴侣蛋白(Cosmc)、半乳糖缺陷型IgA1(Gd-IgA1)水平;采用Real-time PCR、Western blot检测肠黏膜组织、肾脏组织lncRNA TUG1、miR-320、PTEN、Cosmc mRNA及蛋白表达。结果:①血清PTEN、Cosmc、Gd-IgA1:与模型组比较,各给药组PTEN、Cosmc升高明显(均P<0.01)、Gd-IgA1减少明显(P<0.01),与氯沙坦钾片组比较,肾炎止血丸PTEN、Cosmc升高及Gd-IgA1减少明显(均P<0.01)。②RT-PCR法检测肠黏膜组织、肾组织lncRNA TUG1、miR-320、PTEN、Cosmc mRNA表达:与模型组比较,氯沙坦钾片组肠黏膜组织及肾组织TUG1升高明显(均P<0.01),miR-320减少明显(P<0.01);与氯沙坦钾片组比较,肾炎止血丸肠黏膜组织及肾组织TUG1、PTEN升高明显,肠黏膜组织Cosmc升高明显(均P<0.01),肾组织miR-320减少明显(P<0.01)。③Western blot检测肠黏膜组织、肾组织PTEN、Cosmc蛋白表达:与模型组比较,各给药组肠黏膜组织PTEN蛋白表达升高(P<0.05),肾炎止血丸组Cosmc表达升高明显(P<0.05);与氯沙坦钾片组比较,肾炎止血丸PTEN升高有显著差异(P<0.05),Cosmc表达升高无显著差异(P>0.05)。各给药组肾组织Cosmc表达升高有极显著差异(P<0.01),与氯沙坦钾片组比较,肾炎止血丸肾组织PTEN升高有显著差异(P<0.05),Cosmc表达升高有极显著性差异(P<0.01)。结论:肾炎止血丸能够改善IgAN大鼠肾损伤;其作用机制可能与参与lncRNA TUG1介导miR-320调控PTEN/Cosmc通路有关。

长链非编码RNA-TUG1在胃癌发生和发展中的作用及其机制

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)TUG1在胃癌发生和发展中的作用及其机制。方法收集2018年10月—2020年9月于上海健康医学院附属嘉定区中心医院普外科行胃癌根治术的60例胃癌患者的肿瘤组织和癌旁组织标本。选取其中3例存在淋巴结转移的患者组织样本进行lncRNA芯片检测,筛查胃癌和癌旁组织样本中的差异表达lncRNA。采用qRT-PCR技术检测TUG1基因在胃癌组织和细胞中的表达水平,分析其表达水平与临床及病理因素之间的关系。采用慢病毒Lenti-TUG1、Lenti-TUG1-shRNA转染胃癌细胞NCI-N87和MGC-803。根据慢病毒转染分为Lenti-TUG1处理组与Lenti-TUG1-shRNA处理组,设计不加慢病毒的细胞为对照组。采用细胞增殖实验和动物模型实验检测TUG1基因在体外和体内对NCI-N87和MGC-803生长的影响;采用细胞迁移和侵袭实验检测TUG1基因对NCI-N87和MGC-803细胞迁移和侵袭的影响;采用细胞凋亡实验检测TUG1基因对NCI-N87和MGC-803细胞凋亡的影响;采用蛋白质印迹法检测TUG1基因对凋亡及上皮间质转化(EMT)相关蛋白质表达的影响。结果lncRNA芯片检测结果显示,与癌旁组织比较,胃癌组织中有11种lncRNAs表达上调,有7种lncRNAs表达下调。根据患者胃癌组织中TUG1的中位相对表达量,将胃癌患者分为高表达组(30例)和低表达组(30例)。TUG1高表达组肿瘤体积≥5 cm^(3)、有淋巴结转移、有远处转移、TNM分期为Ⅲ期的患者构成均显著高于TUG1低表达组(P值均<0.05)。细胞增殖实验结果显示,与对照组比较,Lenti-TUG1处理组NCI-N87细胞和MGC-803细胞的光密度(A)值均显著增高,Lenti-TUG1-shRNA处理组NCI-N87细胞和MGC-803细胞的A值均显著降低(P值均<0.01)。细胞迁移和侵袭实验结果显示,与对照组相比,Lenti-TUG1处理组NCI-N87细胞与MGC-803细胞的迁移数量和侵袭数量均显著增多,Lenti-TUG1-shRNA处理组NCI-N87细胞与MGC-803细胞的迁移数量和侵袭数量均显著减少(P值均<0.01)。细胞凋亡实验结果显示,与对照组相比,Lenti-TUG1处理组NCI-N87细胞和MGC-803细胞的凋亡比例均显著降低,Lenti-TUG1-shRNA处理组NCI-N87细胞和MGC-803细胞的凋亡比例均显著增高(P值均<0.01)。小动物活体成像仪检测结果显示,与对照组相比,Lenti-TUG1处理组的NCI-N87细胞和MGC-803细胞的相对荧光强度均显著增高(P值均<0.01),Lenti-TUG1-shRNA处理组NCI-N87细胞和MGC-803细胞相对荧光强度均显著降低(P值均<0.01)。蛋白质印迹法检测结果显示,与对照组相比,Lenti-TUG1处理组NCI-N87细胞和MGC-803细胞中Bax、caspase-3和E-cadherin的蛋白质相对表达量均显著降低,RAB2A、MMP-14和Bcl-2的蛋白质相对表达量均显著增高;Lenti-TUG1-shRNA处理组NCI-N87细胞和MGC-803细胞中Bax、caspase-3和E-cadherin蛋白质相对表达量均显著增高,RAB2A、MMP-14和Bcl-2蛋白质相对表达量均显著降低(P值均<0.01)。在229例胃癌组织中,TUG1与RAB2A相对表达量呈正相关(r=0.180,P=0.006);miR-186与RAB2A相对表达量呈负相关(r=-0.147,P=0.026)。结论TUG1可能通过调控凋亡、EMT相关信号通路参与胃癌的发生、发展,针对TUG1的靶向治疗设计可能为胃癌治疗提供新的思路。

腹泻型肠易激综合征湿热质与非湿热质患者外周血lncRNA XIST、lncRNA TUG1表达及意义

目的比较腹泻型肠易激综合征湿热质与非湿热质患者外周血长链非编码RNA X染色体失活特异转录因子(lncRNA XIST)、长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(lncRNA TUG1)表达的差异并分析其临床意义。方法选择2021年1月至2023年12月期间江苏省如皋市中医院收治的120例腹泻型肠易激综合征患者作为观察组,根据中医体质分为湿热质亚组和非湿热质亚组;选择同期体检的100名健康者作为对照组。检测外周血lncRNA XIST、lncRNA TUG1表达水平及血清C反应蛋白(CRP)水平并比较差异,分析腹泻型肠易激综合征湿热质的影响因素及诊断指标。结果观察组患者外周血lncRNA XIST的表达水平高于对照组,lncRNA TUG1的表达水平低于对照组,差异有统计学意义(t=8.136、9.324,P<0.05);观察组中湿热质亚组患者外周血lncRNA XIST的表达水平及血清CRP的水平高于非湿热质亚组,lncRNA TUG1的表达水平低于非湿热质亚组,差异有统计学意义(P<0.05);lncRNA XIST是腹泻型肠易激综合征湿热质的危险因素,lncRNA TUG1是腹泻型肠易激综合征湿热质的保护因素(P<0.05);外周血lncRNA XIST、lncRNA TUG1诊断腹泻型肠易激综合征湿热质的ROC曲线下面积分别为0.754和0.810。结论lncRNA XIST表达增加、lncRNA TUG1表达降低与湿热质腹泻型肠易激综合征相关,外周血中两项指标的表达水平对湿热质腹泻型肠易激综合征具有诊断价值。

lncRNA TUG1在IgA肾病患者血清中的表达分析及生物信息学预测

目的:明确lncRNA TUG1在IgAN中差异表达,并预测lncRNA TUG1下游参与IgAN的调控网络。方法:选取2021年9月—2021年12月黑龙江省中医药科学院门诊及住院IgAN患者10例作为试验组,同期健康体检者10例为对照组,清晨抽取受试者空腹静脉血,qRT-PCR法对外周血清lncRNA TUG1进行检测。通过GEO数据库获得IgAN符合要求的miRNA表达数据库GSE25590和mRNA表达数据库GSE73953。利用GEO2R在线分析工具寻找差异表达基因,利用NPlnter V4.0、StarBase V2.0数据库收集TUG1可能结合的下游的miRNA、mRNA靶点。将GSE25590数据集获取的差异表达miRNA与TUG1结合的下游的miRNA靶点进行合并处理,找到共同差异表达miRNAs(DEmiRs),进一步利用miRDB数据进行可能结合的下游的mRNA的预测。再将GSE73953数据集获取的差异表达mRNA、TUG1可能结合的下游的mRNA及GSE25590数据集与TUG1下游共表达miRNA获得mRNA等3组数据集进行合并取交集。最终获得共同差异表达基因(DEGs)。应用DAVID数据库对筛选DEGs进行GO和KEGG分析,最终选取排名前20的GO分析与KEGG通路,OmicShare平台绘制气泡图,Cytoscape 3.6.0软件构建TUG1-DEmiRs-DEGs-KEGG通路多维网络图。结果:(1)与健康对照组相比,IgAN患者外周血样本中lncRNA TUG1极显著低表达(P<0.01);(2)获得TUG1下游结合的221个DEmiRs,GSE25590数据集获取182个DEmiRs,交叉合并获得15个DEmiRs;(3)获取TUG1下游结合的294个DEGs,GSE73953数据集获取14657个DEGs,对TUG1下游结合的15个DEmiRs进行预测,获得6947个DEGs,对以上三组数据进行交叉合并获得90个DEGs;(4)对共同DEGs进行GO和KEGG富集分析,包括细胞对热应激的反应、衰减阶段、Notch信号通路、剪接体等。结论:lncRNA TUG1在IgAN中低表达,TUG1可能通过miR-107、ATXN1L调控的Notch信号通路参与IgAN中发生、发展。

血清Notch1、TUG1、Periostin对支气管哮喘患儿气道炎症程度的诊断价值

目的 分析血清Notch1、牛磺酸上调基因1(TUG1)、骨膜蛋白(Periostin)对支气管哮喘患儿气道炎症程度的诊断价值。方法 选取2020年5月~2023年1月我院收治的115例支气管哮喘患儿为研究组,并选取同期50例健康儿童作为对照组;对比研究组与对照组血清Notch1、TUG1、Periostin水平,对比不同气道炎症程度患儿血清Notch1、TUG1、Periostin水平及血清炎性因子[白介素-17(IL-17)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]和气道重塑因子[骨桥蛋白(OPN)、转化生长因子-β1(TGF-β1)],分析三项血清水平与血清炎性因子、气道重塑因子的相关性,并分析血清Notch1、TUG1、Periostin水平对重度气道炎症的诊断价值。结果 研究组血清Notch1(1.88±0.57)、TUG1(1.87±0.68)、Periostin(164.54±52.33)ng/ml水平均高于对照组[Notch1:(1.04±0.35),TUG1:(1.03±0.12),Periostin:(117.28±27.19)ng/ml],差异具有统计学意义(P<0.05);轻度气道炎症患者血清Notch1(1.46±0.48)、TUG1(1.48±0.59)和Periostin(136.28±34.62)ng/ml均低于中度患者[Notch1:(2.03±0.51),TUG1:(1.92±0.63),Periostin:(195.63±45.72)ng/ml]低于重度患者[Notch1:(3.32±0.55),TUG1:(2.54±0.57),Periostin:(231.10±50.24)ng/ml],差异具有统计学意义(P<0.05);血清Notch1、TUG1、Periostin与血清IL-17、TNF-α、OPN、TGF-β1均呈正相关,差异具有统计学意义(P<0.05);血清Notch1、TUG1、Periostin检测对诊断支气管哮喘患儿重度气道炎症AUC分别为0.781、0.733、0.725,三者联合检测对诊断支气管哮喘患儿重度气道炎症AUC为0.939。结论 血清Notch1、TUG1、Periostin对诊断支气管哮喘患儿气道炎症程度具有较高的临床应用价值。

TUG1通过调控EZH2促进胃癌细胞侵袭转移的机制研究

目的:探讨牛磺酸上调基因1(TUG1)在胃癌细胞侵袭转移中的作用及其调控机制。方法:TCGA数据库分析TUG1在胃癌组织中的表达且与患者预后的关系;qRT-PCR检测胃癌组织和细胞中TUG1表达;细胞转染构建TUG1过表达后敲减细胞系;Transwell实验观察TUG1过表达和敲减对胃癌SGC-7901细胞迁移和侵袭能力的影响;Western Blot检测TUG1过表达和敲减对胃癌SGC-7901细胞中EZH2/STAT3信号通路活性的影响。结果:TUG1在胃癌组织和细胞中表达上调(P<0.01),与患者的预后呈负相关(P<0.01),而与其病理分期和淋巴转移呈正相关(P<0.05)。Transwell实验结果显示,上调TUG1表达促进胃癌细胞的迁移和侵袭(P<0.01)。Western Blot结果显示,上调TUG1表达可促进EZH2表达,并激活STAT3信号通路(P<0.01)。结论:TUG1通过激活EZH2/STAT3信号通路促进胃癌细胞的侵袭转移。

LncRNA TUG1调控miR-142-5p/PD-L1轴促进非小细胞肺癌细胞增殖、迁移与侵袭能力

目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)牛磺酸上调基因1(taurine up-regulated gene 1,TUG1)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞生物学行为的影响及分子机制。方法采用qRT-PCR、Western blot分别检测组织(NSCLC癌组织、癌旁组织)和细胞(人正常气管上皮细胞HBE及NSCLC细胞A549、H2009、H1975)中TUG1、miR-142-5p及PD-L1的表达。将pcDNA-TUG1、si-TUG1、miR-142-5p mimics、si-TUG1+anti-miR-142-5p分别转染于A549,qRT-PCR、Western blot分别检测细胞中TUG1、miR-142-5p及PD-L1表达;CCK-8检测细胞增殖;Transwell检测细胞迁移、侵袭;双荧光素酶基因实验分别检测TUG1和miR-142-5p、miR-142-5p和PD-L1的关系;RNA免疫共沉淀检测miR-142-5p与TUG1的相互作用。结果NSCLC组织中TUG1(2.28±0.23 vs 1.00±0)、PD-L1(0.93±0.11 vs 0.25±0.01)表达高于癌旁组织,miR-142-5p(0.31±0.02 vs 1.00±0)表达低于癌旁组织(P<0.05);与人正常气管上皮细胞HBE比较,NSCLC细胞A549中TUG1(3.21±0.27 vs 1.00±0)、PD-L1(1.12±0.12 vs 0.24±0.01)表达水平最高,miR-142-5p(0.23±0.02 vs 1.00±0)表达水平最低(P<0.05);过表达TUG1促进A549细胞增殖、迁移、侵袭;下调TUG1或上调miR-142-5p表达均对A549细胞增殖、迁移、侵袭能力发挥抑制作用;TUG1负调控miR-142-5p,miR-142-5p负调控PD-L1;下调miR-142-5p减弱了沉默TUG1对A549细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用。结论TUG1在NSCLC组织和细胞中高表达,沉默TUG1通过miR-142-5p/PD-L1轴抑制A549细胞的增殖、迁移与侵袭。

LncRNA TUG1靶向调节miR-21/PTEN轴抑制糖尿病肾病大鼠肾纤维化的作用机制研究

目的:探索LncRNA TUG1在糖尿病肾病(DN)大鼠肾纤维化中的作用及其潜在分子机制。方法:应用链脲佐菌素构建DN大鼠模型,LncRNA表达谱芯片筛选DN大鼠肾脏组织中LncRNA的差异表达。应用慢病毒试验过表达LncRNA TUG1,苏木精-伊红(HE)染色检测过表达LncRNA TUG1对DN大鼠肾脏组织形态学的改变;实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测过表达LncRNA TUG1对miR-21及纤维连接蛋白(FN)、人Ⅳ型胶原(Col-4)和转化生长因子β1(TGFβ1)mRNA表达水平的影响;Western blot检测FN、Col-4、TGFβ1、磷酸酯酶与张力蛋白同源物(PTEN)、磷酸化磷脂肌醇3激酶(p-PI3K)及磷酸化蛋白激酶(p-Akt)蛋白表达水平。应用生物信息软件预测miR-21与LncRNA TUG1的作用关系,双荧光素酶报告基因实验验证miR-21与LncRNA TUG1的相互作用关系。构建高糖诱导的肾小球系膜HBZY-1细胞模型,应用慢病毒试验方法过表达LncRNA TUG1或应用miR-21 mimic处理细胞,采用CCK-8试验检测他们对细胞增殖的影响,使用RT-qPCR实验检测其对HBZY-1细胞FN、Col-4、TGFβ1 mRNA表达水平的影响。结果:DN大鼠肾脏组织中LncRNA TUG1的表达水平显著降低。过表达LncRNA TUG1抑制DN大鼠FN、Col-4、TGFβ1 mRNA以及蛋白表达水平,肾组织病理形态学明显改善。双荧光素酶报告基因实验结果显示,LncRNA TUG1通过直接靶向方式与miR-21结合。过表达LncRNA TUG1能够抑制miR-21表达,上调PTEN并可能抑制磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路。过表达LncRNA TUG1抑制HBZY-1细胞增殖,抑制FN、Col-4、TGFβ1 mRNA在细胞中的表达水平;应用miR-21 mimic处理能够逆转LncRNA TUG1过表达产生的增殖抑制和纤维化抑制效应。结论:LncRNA TUG1靶向调节miR-21/PTEN轴抑制DN大鼠肾纤维化。

lncRNA TUG1在结直肠癌组织和细胞中的表达及其对癌细胞增殖、侵袭能力的影响

目的:探讨lncRNA牛磺酸上调基因1(taurine upregulated gene 1,TUG1)与结直肠癌临床病理因素的相关性及临床意义,以及其促进结直癌细胞增殖和侵袭的生物学功能。方法:实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测结直肠癌组织TUG1的表达水平,并采用卡方检验分析TUG1表达水平与临床资料的相关性。Kaplan-Meier生存曲线和log-rank检验分析TUG1表达水平与结直肠癌预后的相关性。CCK8实验和Transwell实验检测过表达和敲低TUG1后的结直肠癌细胞增殖或侵袭能力的变化。结果:TUG1在结直肠癌组织中表达水平明显升高(P<0.05);TUG1表达水平与肿瘤大小、CEA水平、淋巴结转移、远处转移以及TNM分期密切相关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线和log-rank检验提示,TUG1表达水平越高,结直肠癌患者预后越差(P<0.05)。CCK8和Transwell实验结果表明,与对照组相比,pcDNA3.1-TUG1组结直肠癌细胞中TUG1表达水平明显增高(P<0.05),细胞增殖活性和侵袭数目增多(P<0.05);而siRNA-TUG1组结直肠癌细胞中TUG1表达水平明显降低(P<0.05),细胞增殖活性和侵袭数目减少(P<0.05)。结论:TUG1在结直肠癌组织中呈高表达,且TUG1表达水平越高,患者预后越差。并且,lncRNA TUG1促进结直肠癌细胞的增殖和侵袭能力。

脓毒症患者血lncRNA PVT1、lncRNA TUG1、HMGB1的表达及临床意义

目的 探讨脓毒症患者外周血长链非编码RNA(lncRNA)PVT1、lncRNA TUG1、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的表达及临床意义。方法 选取脓毒症患者87例为脓毒症组,按是否休克将其分为非休克组(54例)和休克组(33例);随机选取同期健康人群50例为对照组。比较各组血清HMGB1、lncRNA PVT1、lncRNA TUG1表达情况,并分析其相关性。结果 与对照组比较,脓毒症组血lncRNA PVT1、HMGB1升高,lncRNA TUG1降低;且休克组较非休克组更为显著(P<0.05)。脓毒症患者HMGB1与lncRNA PVT1呈正相关,与lncRNA TUG1呈负相关(P<0.05)。ROC曲线分析表明,lncRNA PVT1、lncRNA TUG1和HMGB1联合检测对脓毒症的诊断效能最高。结论 lncRNA PVT1、lncRNA TUG1和HMGB1与脓毒症病情严重程度密切相关,三者联合检测对脓毒症患者的诊断有一定预测价值。

长链非编码RNA TUG1对鼻咽癌细胞生物学行为及放射敏感性的影响

目的对长链非编码RNA TUG1进行泛癌分析,并评估其对鼻咽癌生物学行为及放射敏感性的影响。方法基于TCGA数据库检测TUG1在泛癌中的表达情况和预后价值。用qPCR方法检测鼻咽癌组织和鼻咽癌细胞系中TUG1的表达情况。用TUG1 siRNA或阴性对照siRNA转染鼻咽癌CNE-1和CNE-2细胞。采用MTS法、transwell实验和划痕实验检测鼻咽癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力。细胞克隆形成实验测定细胞放射敏感性。流式细胞仪检测细胞周期和凋亡情况。结果基于TCGA数据库的分析发现,在12种癌症类型中TUG1的表达上调。TUG1表达增加与多种癌症类型的较差预后相关。体外实验研究发现lncRNA TUG1在鼻咽癌细胞系和组织中也显著上调。TUG1高表达与TNM分期恶化有显著相关性。TUG1的高表达与鼻咽癌患者不良预后有显著相关性。下调TUG1的表达可抑制鼻咽癌细胞的增殖、迁移和侵袭,促进鼻咽癌细胞凋亡,提高鼻咽癌细胞放射敏感性。结论TUG1在多种癌症类型中发挥重要作用,并与鼻咽癌的不良预后相关。TUG1可能作为鼻咽癌治疗的潜在治疗靶点。

lncRNA-TUG1通过影响eNOS和BDNF介导小鼠心肌梗死后心功能损伤

目的:探讨长链非编码RNA-牛磺酸上调基因1(long non-coding RNA-taurine up-regulated gene 1,lncRNA-TUG1)通过影响内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)和脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)在小鼠心肌梗死(myocardial infarction,MI)后心肌损伤中的作用。方法:将40只C57BL/6小鼠随机分为假手术组、MI组、空载体组及lncRNA-TUG1沉默组(构建lncRNA-TUG1沉默腺病毒并感染小鼠心肌,1周后通过冠状动脉左前降支结扎法构建MI模型)。模型构建1周后使用小动物超声仪测定小鼠心功能变化,检测结束后进行眼眶取血并收集心脏组织。RT-qPCR检测心脏梗死区lncRNA-TUG1的表达;ELISA测定心脏损伤标志物水平;TTC染色比较梗死心肌面积差异;Western blot检测梗死区心肌组织eNOS和BDNF的变化;Western blot、ELISA和RT-qPCR检测炎症因子和线粒体生物合成相关蛋白水平,评估炎症和线粒体生物合成水平。结果:(1)MI后梗死区心脏组织中lncRNA-TUG1的表达显著增多(P<0.01),腺病毒感染能有效减少lncRNATUG1表达(P<0.01);(2)与空载体组相比,沉默lncRNA-TUG1能使小鼠心肌损伤标志物下降,心功能改善,梗死心肌面积显著减少(P<0.05);(3)下调lncRNA-TUG1能显著升高MI后eNOS和BDNF水平(P<0.05);(4)沉默lncRNATUG1能减轻MI诱导的炎症反应,促进线粒体生物合成(P<0.05)。结论:抑制lncRNA-TUG1可以通过影响eNOS和BDNF介导的炎症反应和线粒体生物合成,减轻MI后小鼠的心功能损伤。

维格列汀联合格列美脲对2型糖尿病患者血糖水平、氧化应激及Atg7、lncRNA TUG1表达的影响

目的观察维格列汀联合格列美脲对2型糖尿病(T2DM)患者血糖水平、氧化应激及自噬相关蛋白7(Atg7)、长链非编码RNA(lncRNA)牛磺酸上调基因1(TUG1)表达的影响。方法选取160例北京市通州区中西医结合医院于2019年2月至2021年2月期间收治的T2DM患者,采用随机数字表法分为对照组和研究组,各80例。对照组给予格列美脲治疗,研究组在对照组的基础上联合维格列汀治疗,对比两组疗效、血糖、氧化应激指标、Atg7、lncRNA TUG1表达,观察治疗期间不良反应发生情况。结果研究组临床总有效率95.00%(76/80),高于对照组76.25%(61/80),数据差异有统计学意义(P<0.05)。研究组FBG(6.37±0.48mmol/L)、2hPG(7.88±1.95mmol/L)、HbA1c(6.63%±0.92%)水平相较于对照组FBG(7.39±0.44mmol/L)、2hPG(9.45±2.13mmol/L)、HbA1c(7.56%±1.08%)水平均较低,数据差异有统计学意义(P<0.05)。研究组SOD(147.64±15.24nU/mg)高于对照组SOD(122.38±14.22nU/mg),MDA(3.46±0.94nmol/mL)低于对照组MDA(5.38±1.74nmol/mL),差异有统计学意义(P<0.05)。研究组Atg7(2.54±0.38)、lncRNA TUG1(6.15±1.34)表达水平相较于对照组Atg7(3.37±0.61)、lncRNA TUG1(10.38±1.23)表达水平均较低,差异有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应发生率组间对比差异无统计学意义(P>0.05)。结论维格列汀联合格列美脲治疗T2DM患者,可有效控制血糖,减轻机体氧化应激反应,调节Atg7、lncRNA TUG1表达水平,疗效肯定。

lncRNA-TUG1靶向Zeste同源物增强子2对缺氧心肌细胞的影响

目的:体外探讨长链非编码RNA(lncRNA)牛磺酸上调基因1(TUG1)靶向Zeste同源物增强子2(EZH2)对缺氧心肌细胞的影响。方法:缺氧诱导HL-1细胞建立细胞损伤模型,构建沉默质粒(siTUG1)和阴性对照(siNC)并分别转染至HL-1细胞内,随机分成常氧(normoxia)组、低氧(hypoxia)组、hypoxia+siNC组和hypoxia+si-TUG1组。采用RT-qPCR检测lncRNA-TUG1在各模型组中的表达。通过CCK-8分析细胞活力。ELISA检测心肌损伤标志物和炎症因子水平。RT-qPCR检测线粒体生物合成相关转录调节基因和炎症因子的表达。Western blot检测线粒体生物合成相关转录调节蛋白的表达。通过染色质沉淀(ChIP)检测lncRNA-TUG1、EZH2、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和脑源性神经营养因子(BDNF)间的互作关系。结果:与normoxia组相比,hypoxia组和hypoxia+siNC组细胞的活力、线粒体生物合成相关转录调节基因的表达均显著降低(P<0.05),而心肌损伤标志物和炎症因子水平均显著升高(P<0.05);沉默TUG1可部分逆转上述改变。ChIP结果表明沉默TUG1可能抑制EZH2对eNOS和BDNF启动子区的结合(P<0.05)。结论:lncRNA-TUG1可能通过EZH2途径参与缺氧诱导的HL-1细胞炎症反应以及线粒体功能障碍。lncRNA-TUG1表达降低可进一步影响EZH2与eNOS和BDNF启动子区的结合,这可能是沉默TUG1缓解缺氧诱导的HL-1细胞炎症反应和线粒体功能障碍的潜在机制。

长链非编码RNA TUG1在宫颈癌中的研究进展

长链非编码RNA (lncRNA)是长度大于200 bp且无编码蛋白功能的RNA。研究发现lncRNA在转录、表观遗传学以及转录后水平等方面发挥重要的调控作用,调节机体的病理和生理过程。一些lncRNA在宫颈癌组织中异常表达,且在宫颈癌的发生过程中起到重要作用。而lncRNA TUG1也发现参与多种恶性肿瘤的发生发展,本文就lncRNA TUG1在宫颈癌发生、发展中的作用机制、治疗及预后进行综述。

长链非编码RNA-TUG1调控小梁网细胞内质网应激和炎症的小鼠实验研究

目的观察长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(Lnc-TUG1)对小梁网细胞内质网应激及其主要标志物的影响,并探讨Lnc-TUG1在小梁网功能障碍、细胞凋亡中所起的作用。方法选取C57BL/6J小鼠48只,随机数字表法分为两组,AAV2-Lnc-TUG1组(24只,24眼)单眼前房注射Lnc-TUG1过表达腺病毒,AAV2-GFP组(24只,24眼)单眼前房注射GFP腺病毒。在注射后的不同时间点,分别取AAV2-GFP组和AAV2-Lnc-TUG1组小鼠的前房角组织,用冰冻切片和免疫荧光染色法观察病毒荧光及内质网应激相关蛋白C/EBP同源蛋白(CHOP)的表达;荧光原位杂交法观察Lnc-TUG1的表达和定位。用实时荧光定量PCR法检测炎症因子白细胞介素(IL)-1α、IL-1β、IL-6以及内皮细胞白细胞黏附分子1(ELAM-1)在mRNA水平的表达;用TUNEL染色法观察小梁网细胞的凋亡情况;用超薄切片和透射电镜观察小梁网细胞的超微结构。在注射前及注射后3、7、10、13 d分别用回弹式眼压计测量小鼠的日间及夜间眼压。结果Lnc-TUG1过表达腺病毒在注射后24 h即可观察到注射眼小梁网内的病毒荧光,且AAV2-Lnc-TUG1组的小梁网Lnc-TUG1的表达明显高于AAV2-GFP组,差异有统计学意义(P<0.05)。在注射后3 d,AAV2-Lnc-TUG1组小梁网组织的IL-1α、IL-1β、IL-6、ELAM-1在mRNA水平的表达明显高于AAV2-GFP组,差异有统计学意义(P<0.05)。注射后7 d,与AAV2-GFP组比,AAV2-GFP组和AAV2-Lnc-TUG1组小梁网组织CHOP的表达上调,差异有统计学意义(P<0.05),且小梁网TUNEL阳性细胞数显著增加,小梁网细胞内可见明显扩张的粗面内质网。在注射后7、10、13 d,AAV2-Lnc-TUG1组日间眼压及夜间眼压均高于AAV2-GFP组,但仅术后7 d的差异有统计学意义(P<0.05)。结论单眼前房注射Lnc-TUG1过表达腺病毒可通过上调Lnc-TUG1的表达增加小鼠眼压,并促进小梁网细胞的内质网应激、炎症和细胞凋亡。

绞股蓝皂苷调控长链非编码RNA TUG1/miR-26a干扰线粒体凋亡对ApoE^(-/-)AS小鼠肝脏脂质沉积的影响及机制研究

为探讨绞股蓝皂苷通过影响长链非编码RNA TUG1/miR-26a干扰线粒体凋亡改善ApoE^(-/-)AS小鼠肝脏脂质沉积防治AS机制,本实验将10只C57BL/6J小鼠作为正常对照组,20只健康ApoE^(-/-)小鼠随机分为模型组、绞股蓝皂苷组(高脂饲料喂养12周),灌胃给药4周。HE染色观察小鼠肝脏脂质沉积情况,全自动生化分析仪检测血脂水平,实时荧光定量Q-PCR检测长链非编码TUG1、miRNA-26a表达,实时荧光定量Q-PCR及Wes全自动蛋白质印迹定量分析系统检测Bcl2、Bax、Cytc、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9、cleaved PARP基因及蛋白表达。结果显示模型组ApoE^(-/-)小鼠血脂水平发生紊乱,肝细胞体积变大,脂肪空泡明显,小鼠肝脏Lnc-TUG1表达显著升高,miRNA-26a显著下降(P<0.01);Bax、Cyt-c、cleaved caspase-3、cleaved PARP mRNA及蛋白表达显著升高,Bcl2 mRNA及蛋白显著下降(P<0.01或P<0.05);cleaved caspase-9蛋白表达显著升高(P<0.01或P<0.05),cleaved caspase-9 mRNA仅有上升趋势;绞股蓝皂苷干预后血脂紊乱得以改善,肝细胞脂肪变性程度减轻,脂肪空泡明显减少,小鼠肝脏Lnc TUG1表达有所下降,miRNA-26a表达有所上调(P<0.05),小鼠肝脏Bax、Cyt-c、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9 mRNA及蛋白表达显著下调,Bcl2 mRNA及蛋白显著上调(P<0.01或P<0.05),cleaved PARP蛋白表达显著下调(P<0.05),cleaved PARP mRNA仅有下调趋势;研究结果提示绞股蓝皂苷可能通过影响长链非编码RNA TUG1/miR-26a干扰线粒体凋亡改善ApoE^(-/-)AS小鼠肝脏脂质沉积,进而防治动脉粥样硬化。

干扰长链非编码RNA TUG1上调miR-26a缓解LPS诱导的脓毒症大鼠线粒体损伤和免疫紊乱

目的脓毒症(sepsis)是由感染引起的全身炎症反应综合征。本文主要研究干扰长链非编码RNA TUG1对LPS诱导的脓毒症大鼠线粒体损伤和免疫紊乱影响。方法体内实验选取SD大鼠分为Control组、LPS组、LPS+shRNA-NC组和LPS+sh-TUG1组,LPS+shRNA-NC组和LPS+sh-TUG1组大鼠每周分别尾静脉注射shRNA腺病毒和特异靶向TUG1的shRNA腺病毒1次,连续2周,Control组、LPS组注射等量生理盐水,2周后,LPS组、LPS+shRNA-NC组和LPS+sh-TUG1组大鼠腹腔注射5 mg/kg LPS;体外实验选取10 ng/ml LPS诱导的THP-1细胞分为Control组、sh-TUG1组、miR-26a inhibitor组和sh-TUG1+inhibitor组,分别用sh-TUG1和miR-26a inhibitor单独或联合转染;RT-PCR检测TUG1和miR-26a mRNA表达水平,HE染色观察肺组织纤维化情况,Western blotting检测Bcl-2、Bax、caspase-3和caspase-9蛋白表达,ELISA法检测大鼠血清TNF-α、IL-6、IL-4和IL-10的含量。结果LPS诱导脓毒症大鼠TUG1表达显著上调,miR-26a表达显著下调;sh-TUG1转染后,LPS诱导脓毒症大鼠肺组织纤维化明显减轻,Bax表达显著下调、Bcl-2表达显著上调,TNF-α和IL-6含量显著减少、IL-4和IL-10含量显著增加;LPS诱导的THP-1细胞,sh-TUG1+inhibitor组miR-26a表达比sh-TUG1组显著下调、比miR-26a inhibitor组显著上调,Bax表达比shTUG1组显著上调、比miR-26a inhibitor组显著下调,Bcl-2表达比sh-TUG1组显著下调、比miR-26a inhibitor组显著上调,Caspase-3和Caspase-9表达比sh-TUG1组显著上调、比miR-26a inhibitor组显著下调,TNF-α和IL-6含量比sh-TUG1组显著升高、比miR26a inhibitor组显著降低,IL-4和IL-10的含量比sh-TUG1组显著降低、比miR-26a inhibitor组显著升高。结论干扰长链非编码RNA TUG1可通过上调miR-26a缓解LPS诱导的线粒体损伤、细胞凋亡和炎症反应。