桔小实蝇takeout基因的克隆和序列分析及时空表达

采用RT-PCR及RACE技术克隆了桔小实蝇(Bactrocera dorsalis(Hendel))takeout基因的cDNA全长序列,命名为BdorTO。测序结果表明:BdorTO开放阅读框全长747 bp,编码248个氨基酸,相对分子质量约为28.15×103,等电点为5.29。Signal P软件分析表明,该蛋白N端具21个氨基酸的信号肽,为分泌型蛋白。氨基酸序列比对表明,BdorTO蛋白与其他昆虫TO蛋白的序列一致性较低,其中与刺舌蝇(Glossina morsitans)的序列一致性最高,一致性值为48.6%。荧光定量PCR分析表明,BdorTO在触角中的表达量最高,推测BdorTO可能参与了桔小实蝇嗅觉感受过程;在雄虫生殖节中的表达量明显高于雌虫生殖节,提示BdorTO可能与桔小实蝇雄虫的生殖生理过程密切相关。

昆虫Takeout蛋白家族的研究进展

Takeout(TO)家族是昆虫在长期进化过程中形成的特有的一个大的蛋白家族,其蛋白包括约250个氨基酸,属于分泌蛋白。目前,对果蝇的TO蛋白的功能了解得最为透彻,主要分布于涉及化学感受和营养的组织,例如果蝇的触角、下唇须、脂肪体及前胃等。另外,在苍蝇、飞蛾、蚊虫、蚜虫、桑蚕、蜜蜂、大花蝶、白蚁等昆虫中也发现了多种TO蛋白家族成员。其主要功能是参与节律调控,调节昆虫摄食与运动,参与味觉和嗅觉系统的化学感受,参与性别分化,有助于雄性果蝇求偶等。本文从TO蛋白的结构特点、分布与表达、作用机制、生理功能等方面着手,阐释了近年来国内外昆虫TO蛋白的研究进展,这对于探明昆虫某些行为规律,从而探索害虫综合防治与治理的新方法有着重要的意义。

意大利蜜蜂Takeout(AmTO1)基因的克隆及序列分析

[目的]克隆意大利蜜蜂Apis mellifera Takeout(AmTO1)基因并进行生信分析。[方法]取蜜蜂样品,提取总RNA,反转录制备cDNA。设计特异性引物,PCR扩增AmTO1基因的ORF序列,利用ProtParam、SignalP和MEGA 6.0等多种生物信息学软件对其理化性质、信号肽、系统进化树等进行预测分析。[结果]获得意大利蜜蜂AmTO1基因的cDNA序列。ORF序列长738 bp,共编码245个氨基酸,蛋白分子量为27.07 kDa,理论等电点PI为8.40。信号肽位于第1-17位氨基酸,无跨膜结构域,剪切位点位于第17和18位氨基酸之间,有相对清晰的疏水区,且含有一个JHBP超家族保守结构域。[结论]AmTO1属于昆虫TO蛋白家族,是一种分泌蛋白。