他仑帕奈对脑缺血再灌注大鼠脑组织内Caspase-3表达及血清炎性因子的影响

目的 通过观察大鼠脑缺血再灌注损伤(CIR)后脑组织内半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)及血清肿瘤坏死因子(TNF-a)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平,探究他仑帕奈(TAL)对脑缺血再灌注后神经损伤的保护作用。方法 将90只SD大鼠分为假手术组、模型组及TAL治疗0h、1h、3h、5h组,每组各15只。通过线栓法构建大脑中动脉闭塞模型,依次在血流复灌注后0h、1h、3h和5h经尾静脉注射TAL(12mg/kg),24h后采用Longa评分法进行神经功能损伤评分,TTC染色测量脑梗死体积,免疫组化染色检测梗死周围区Caspase-3的表达及梗死皮质区神经元的存活情况,ELASA法检测血清TNF-a、IL-1β水平,综合评价TAL的神经保护作用。结果 与模型组及假手术组相比,TAL各治疗组大鼠脑梗死体积减小,神经功能损伤程度明显改善,海马CA1区神经元细胞凋亡减少,梗死周围区Caspase-3、血清TNF-α和IL-1β明显下降,且呈时间依赖性,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 TAL能降低脑缺血再灌注区域Caspase-3的表达以及血清炎性因子的浓度,起到一定的神经保护作用,且早期应用效果更优,随时间延长,这种作用明显减弱。

他仑帕奈调控PI3K/Akt通路保护缺血性脑卒中大鼠神经功能的作用机制

目的 探讨新型非竞争性α氨基-3-羟基-5-甲基异噁唑-4丙酸(AMPA)受体拮抗剂他仑帕奈(TAL)对大鼠脑梗死缺血/再灌注(I/R)损伤的脑保护作用机制.方法 构建缺血性脑卒中大鼠模型,实验分为假手术(Sham)组、模型(Mod)组、他仑帕奈治疗组(TAL组),其中治疗组分为TAL 1 h、3 h、5 h 3个亚组,每组15只.Longa法评估神经功能;干/湿比重法计算脑组织含水量;氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测脑梗死率;苏木素-伊红(HE)染色海马组织,观察神经元形态;比色法检测海马组织天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(caspase-3和caspase-9)蛋白表达;蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测海马组织磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)磷酸化表达水平.结果 与Sham组相比,Mod组大鼠的神经功能受到严重损伤〔Longa评分(分):2.40±0.51比0±0,P<0.05〕,脑组织含水量显著增加〔(86.45±3.12)%比(70.96±2.04)%,P<0.05〕,脑梗死率显著上升〔(31.54±4.52)%比(0±0)%,均P<0.05〕;海马组织中caspase-3和caspase-9蛋白表达水平显著升高〔吸光度(A)值:3.19±0.44比1.05±0.12,2.18±0.21比0.76±0.09,均P<0.05〕,p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt表达水平显著降低(p-PI3K/PI3K:0.31±0.02比1.23±0.14,p-Akt/Akt:0.25±0.02比0.92±0.11,均P<0.05).与Mod组相比,TAL组大鼠神经功能损伤减轻,以1 h最为显著(1.27±0.59比2.40±0.51);脑组织含水量和脑梗死率显著下降,以1 h最为显著〔含水量:(75.68±1.46)%比(86.45±3.12)%,脑梗死率:(14.18±1.32)%比(31.54±4.25)%,均P<0.05〕;海马组织中caspase-3和caspase-9蛋白表达水平显著降低,以1 h最为显著(A值:1.98±0.16比3.19±0.44,1.09±0.07比2.18±0.21);p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt表达水平显著升高,以1 h最为显著(0.91±0.13比0.31±0.02,0.68±0.09比0.25±0.02,均P<0.05),1 h组更接近Sham组.结论 他仑帕奈可能通过激活PI3K/Akt通路,保护缺血性脑卒中大鼠神经功能.

新型AMPA受体拮抗剂对脑梗死再灌注损伤的保护作用

目的探讨新型AMPA受体拮抗剂他仑帕奈(Talampanel,TAL)对缺血性脑卒中的脑保护作用及其可能机制。方法实验大鼠分为假手术组(Sham组)、模型组(MCAO组)、TAL组,根据TAL组给药时间的不同,分TAL0 h、TAL1 h、TAL3 h、TAL5 h 4个亚组。利用线栓法建立大脑右侧中动脉脑梗死模型。Z-Longa评分; TTC染色比较各组大鼠脑梗死体积; HE染色观察海马CA_1区神经元的形态变化;免疫组织化学方法观察脑梗死周围区caspase-3的表达及梗死皮质区神经元数量。结果与MCAO组相比,TAL各组海马CA_1脑水肿和神经元病理损害程度明显减轻,神经功能损伤评分及脑梗死体积明显降低(P <0. 05),梗死周围区caspase-3阳性细胞数明显减小(P <0. 05),梗死皮质区存活神经元数量明显增加(P <0. 05),而TAL5 h组较TAL0 h、TAL1 h、TAL3 h给药组相比,脑保护作用减弱(P <0. 05)。结论他仑帕奈可通过减少缺血再灌注大鼠神经功能损伤评分,缩小脑梗死体积,减少caspase-3阳性细胞表达,对脑缺血再灌注损伤具有很好的保护作用,对脑保护作用具有一定的时间依赖性,随着时间延长,脑保护作用会减弱。