基于超高效液相色谱-串联质谱检测三黄膏主要成分

目的:采用超高效液相色谱-串联质谱(Ultra Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry,UPLC-MS/MS)对三黄膏的化学成分进行分析和鉴定。方法:取三黄膏50 mg加入甲醇内标提取液,涡旋后取上清液,用微孔滤膜过滤后准备检测。液相条件:Agilent SB-C18 1.8μm,2.1 mm×100 mm色谱柱,以超纯水(加入0.1%的甲酸)和乙腈(加入0.1%的甲酸)为流动相,梯度洗脱,流速0.36 mL/min,柱温40℃,进样量2μL。质谱条件:电喷雾离子源温度500℃;离子喷雾电压5 500 V(正离子模式)/–4 500 V(负离子模式);离子源气体I(GSI)、气体II(GSII)和气帘气分别设置为50、60和25 psi,碰撞诱导电离参数设置为高。三重四级杆扫描使用多反应检测(Multiple Reaction Monitoring,MRM)模式,并将碰撞气体(氮气)设置为中等。通过进一步的去簇电压(Declustering Potential,DP)和碰撞能(Collision Energy,CE)优化,完成了各个MRM离子对的DP和CE。根据每个时期内洗脱的代谢物,在每个时期监测一组特定的MRM离子对。采用电喷雾离子源,正负离子模式下采集数据。结果:共鉴定和推测出30个化合物,包括11种生物碱类、11种黄酮类、3种萜类、5种酚酸类。结论:通过UPLC-MS/MS鉴定的30种化合物与黄芩、黄连、黄柏主要化合物进行对比后发现,经过加工处理后的三黄膏保留了黄芩、黄连、黄柏的主要化学成分。为今后三黄膏的物质基础研究奠定了基础。

液相色谱串联质谱法和化学发光微粒子免疫法测定人血清中卡马西平血药浓度的一致性评价

目的比较液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)与化学发光微粒子免疫法(CMIA)两种方法检测人血清中卡马西平浓度的一致性。方法收集118例临床血清样本,分别用LC-MS/MS和CMIA两种方法检测卡马西平。采用Passing-Boblok回归分析两种方法之间的相关性,采用Bland-Altman及Mountain plot评估两种方法的一致性,使用Kappa分析判断两种方法检测卡马西平浓度是否在有效范围的符合率。结果LCMS/MS与CMIA法检测卡马西平结果分别为(5.68±2.36)μg/mL和(6.45±2.69)μg/mL,Passing-Bablok回归分析显示两种方法检测卡马西平浓度的回归方程为yCMIA=-0.04885+1.1538xLC-MS/MS,斜率为1.1538(95%CI:1.0887~1.2244)不包含1,截距为-0.04885(95%CI:-0.4559~0.2792)包含0,P>0.1,线性度无明显偏差。Bland-Altman图显示两种方法差值的均值为-0.77,界外点数(比率)为5.08%;山形图的山顶值为-0.74μg/mL,偏离0较小,表明两种方法测量的结果一致性较好。两种方法判断卡马西平治疗浓度水平Kappa系数为0.693,诊断符合率为89.93%。结论CMIA与LC-MS/MS两个检测系统检测结果一致性较好。

中国北方3-羟基异戊酰肉碱异常患儿代谢及遗传分析

目的 研究血3-羟基异戊酰肉碱(C5OH)增高对诊断相关遗传代谢病(IMD)的意义,并探讨北方人群中该指标异常患儿的疾病谱及遗传学特点。方法 回顾性分析2012年11月至2021年10月住院患儿的IMD筛查诊断资料,包括干血斑串联质谱(MS/MS)、尿液气相质谱(GC-MS)检测以及基因变异的高通量测序结果。分析C5OH指标异常患儿的血、尿代谢谱及基因变异谱。结果 53 119例0~7岁住院患儿检出C5OH增高48例(0.090%),结合尿GC-MS分析生化诊断相关IMD 9例(0.017%),且均基因验证。提示多种羧化酶缺乏(MCD)的4例患儿中,2例检出HLCS变异,确诊为全羧化酶合成酶缺乏;2例检出BTD变异,确诊为生物素酶缺乏。提示β-酮硫解酶缺乏症的2例均检出ACAT1变异;提示3羟基3甲基戊二酸尿症的1例检出HMGCL变异。生化诊断未分型疑似MCD或3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏的2例,1例检出HLCS变异,另1例检出BTD变异,最终确诊MCD。C5OH单一指标假阳性率0.073%,阳性预测值18.75%;合并多指标(C4OH、C3、C5:1)假阳性率0.009%,阳性预测值58.33%;合并尿GC-MS分析无一假阳性,阳性预测值达100%。结论 MCD是血C5OH增高患儿中的主要疾病类型。对于C5OH相关IMD,MS/MS联合GC-MS的代谢分析具有较高的诊断效率及提前指导干预的临床价值。

碰撞反应池-电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定三氧化钨中钠钾铜砷钼锑磷硫

三氧化钨作为制备纯钨的原料,对其杂质元素含量的把控是非常有必要的。采用氨水溶解三氧化钨,通过柠檬酸对其不稳定杂质元素络合,用电感耦合等离子体质谱仪对其杂质元素进行测定。选择^(23)Na、^(39)K、^(65)Cu、^(75)As、^(95)Mo、^(121)Sb为待测同位素,通过调节氦气流量、以氦气碰撞模式消除质谱干扰;对于S和P两种元素,由于氨水环境中存在^(14)N^(16)OH^(+)及^(16)O_(2)^(+)的干扰,通过EXPEC 7350三重四极杆ICP-MS(ICP-MS/MS)中CRC可控的化学反应有效、可靠地消除多原子干扰。采用O_(2)作为反应气体在质量转移模式下分别测定质量数为47和48处的P(以^(31)P^(16)O^(+)形式测定)和S(以^(32)S^(16)O^(+)形式测定),配合内标元素Sc、Rh来消除基体效应,建立了碰撞反应池-电感耦合等离子体质谱法测定三氧化钨中钠、钾、铜、砷、钼、锑、磷、硫8种杂质元素的方法。在优化实验条件下,采用氨水对三氧化钨进行溶解,8种元素的检出限为0.01~0.17 mg/kg,定量限为0.03~0.56 mg/kg。8种元素测定结果相对标准偏差(RSD,n=6)均小于7.8%,加标回收率在97.0%~111%。方法可以快速、准确测定三氧化钨中钠、钾、铜、砷、钼、锑、磷、硫8种杂质元素,适用于工业生产流程中对三氧化钨质量的把控。

全氟丁烷磺酸对其耐受菌胞外聚合物特征的影响

为确定在全氟丁烷磺酸(PFBS)胁迫下两种耐受菌胞外聚合物(EPS)的组分变化特征,从阜新某氟化工污水处理厂污泥中分离出两种PFBS耐受菌株,通过生长量(OD600)和代谢活性(ETSA)测定、16S rDNA序列系统发育树分析、总有机碳测定、PFBS去除率测定、三维荧光光谱和红外光谱分析,研究了100μg·L^(-1) PFBS胁迫下两菌株的生长量与代谢活性,EPS产量、组成特征、官能团的变化及其对PFBS的去除作用。结果表明:这两种耐受菌被鉴定为Pseudomonas(假单胞菌属)和Serratia(沙雷氏菌属),它们能在100μg·L^(-1) PFBS胁迫下正常生长,且对PFBS均有去除效果,去除率分别为33.18%和19.95%,在100μg·L^(-1) PFBS胁迫下,两种耐受菌的EPS产量、蛋白质含量、多糖含量均降低,而蛋白质/多糖比值增加,EPS的蛋白峰(色氨酸和酪氨酸)、腐植酸和富里酸强度均降低,C O、O H和N H等官能团峰强度降低。研究表明100μg·L^(-1) PFBS对两种耐受菌株的EPS组分有抑制作用。

河南省10648例0~14岁儿童血清25-羟基维生素D检测结果分析

目的调查河南省0~14岁儿童血清25-羟基维生素D水平(25OHD),为儿童合理补充维生素D及防治维生素D缺乏提供依据。方法选取10648例0~14岁河南省儿童为研究对象,采用液相色谱串联质谱法检测血清样本中25OHD。根据性别、年龄及季节进行分组,比较不同状况下其维生素D的缺乏率、不足率、充足率及过量率情况。结果10648例河南省0~14岁儿童血清25OHD水平为(25.56±12.06)ng/mL,其中缺乏者2063例(19.37%),不足者1823例(17.12%),充足者6753例(63.42%),过量者9例(0.08%)。按性别分组,维生素D缺乏率男童(18.33%)低于女童(20.93%),组间差异有统计学意义(χ^(2)=11.685,P<0.05)。按年龄分组,随着年龄的增长维生素D缺乏率升高,组间差异有统计学意义(χ^(2)=2638.87,P<0.05)。按季节分组,夏季维生素D营养状况相对最好,维生素D缺乏率最低(5.87%),冬季缺乏率最高(37.18%),组间差异具有统计学意义(χ^(2)=1151.30,P<0.05)。结论河南地区0~14岁儿童随着年龄增加维生素D缺乏率增高,女童缺乏率高于男童,在冬季维生素D缺乏率最高,因此,有必要依年龄、季节适时补充维生素D,并加强户外活动。

气相色谱/质谱测定水产品中氯霉素残留量

样品经均质后,用乙酸乙酯提取,正己烷脱脂,C18小柱净化,衍生后用GC ECD,NCI GC MS,NCI GC MSMS多种方法定性及定量测定,外标法定量。在0.1μg/kg水平,回收率为72%～110%,平行测定9次后相对标准偏差为16 5%。质量浓度在0～10μg/L范围内呈良好线性关系,相关系数r=0.9997。

加速溶剂萃取-高效液相色谱-串联质谱法同时测定减肥保健食品中11种食欲抑制剂

建立了测定减肥保健食品中11种非法添加食欲抑制剂(芬氟拉明、苯丙醇胺、西布曲明、舍曲林、利莫那班、安非他酮、西酞普兰、氟西汀、苯氟雷司、托吡酯、唑尼沙胺)的高效液相色谱-串联质谱分析方法。不同类型的减肥保健食品经加速溶剂萃取后,以Waters AtlantisT3柱(150mm×2.1mm,3μm)分离,采用HPLC-MS/MS电喷雾电离,多反应监测模式检测,以保留时间和子离子比定性,外标法定量。11种食欲抑制剂的检出限为0.05～4.0mg/kg;在低、中、高3个添加水平范围内的平均回收率为78.3%～103.6%;日内精密度均小于12%,日间精密度均小于15%。本方法分析速度快、灵敏度高、重现性好,可用于不同减肥保健食品中非法添加食欲抑制剂的检测。

基质分散固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法同时测定减肥保健食品中20种违禁添加药物

建立了测定减肥保健食品中20种违禁添加药物（芬氟拉明、苯丙醇胺、西布曲明、舍曲林、利莫那班、安非他酮、西酞普兰、氟西汀、苯氟雷司、托吡酯、唑尼沙胺、咖啡因、酚酞、大黄素、吲达帕胺、布美他尼、托拉塞米、三氨喋啶、奥利司他、苯乙双胍）的基质分散固相萃取-高效液相色谱-电喷雾串联质谱分析方法。不同类型的样品经乙醇-丙酮（7∶3,V/V）超声提取后,提取液经N-丙基乙二胺（PSA）、十八烷基硅烷（ODS）净化,以Waters Atlantis T3柱（150 mm×2.1 mm,3μm）分离,采用HPLC/MS/MS电喷雾电离,多反应监测模式检测,以保留时间和子离子比进行定性分析,外标法进行定量分析。20种减肥药物的检出限为0.05~3.0 mg/kg,在不同添加水平范围内的回收率为67.1%~101.4%,日内精密度均小于10%,日间精密度均小于15%。本方法分析速度快,适用于减肥保健食品的实际检验工作。

藜芦人参配伍对大鼠肝功能及肝组织蛋白质表达的影响

目的利用差异蛋白质组技术,探讨藜芦人参配伍对肝功能及蛋白质表达的影响。方法大鼠雌雄各半,ig给予藜芦0.27 g·kg-1、藜芦0.09 g·kg-1+人参0.24 g·kg-1、藜芦0.27 g·kg-1+人参0.71 g·kg-1、藜芦0.81 g·kg-1+人参2.13 g·kg-1,每天1次,连续8周。收集血清及肝组织。采用全自动生化仪测定谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)的水平,并对肝组织进行常规HE染色观察组织病理变化。通过差异凝胶电泳技术(DIGE)分离大鼠肝组织总蛋白,基质辅助激光解吸电离时间飞行串联质谱及数据库查询鉴定差异表达蛋白质。结果血生化指标检测结果表明,只有藜芦0.81 g·kg-1+人参2.13 g·kg-1检测到GOT没有升高的趋势;而GPT明显升高(P<0.05)。病理学结果显示,正常对照、藜芦0.27 g·kg-1、藜芦0.09 g·kg-1+人参0.24 g·kg-1及藜芦0.27 g·kg-1+人参0.71 g·kg-1组大鼠肝组织无明显病理变化;藜芦0.81 g·kg-1+人参2.13 g·kg-1有2例(8.7%)样本分别出现肝窦扩张淤血及淋巴细胞浸润的病理改变。藜芦人参合用前后大鼠肝组织差异蛋白质经DIGE进行分离后,成功获得了分辨率高、重复性好的双向凝胶电泳图谱;经DeCyder6.5软件分析获得差异>1.5倍的蛋白质点共30个;质谱鉴定去冗余后得到4种差异蛋白质,其中二硫键异构酶A3前体和碳酸酐酶Ⅲ明显降低;谷氨酸脱氢酶1及氨甲酰磷酸合成酶1明显升高。结论藜芦0.81 g·kg-1和人参2.13 g·kg-1合用可能影响大鼠肝内与pH自稳、蛋白折叠及氨基酸代谢相关酶的表达。

新生儿肝内胆汁淤积症患者21例质谱检测结果

目的:分析希特林蛋白患儿血Met、Phe、Tyr、Arg、Cit、Orn、Ser、Thr、C0、C2、C3、C14、C14∶1、C16、C16∶1、C18、C18∶1及尿气相质谱4-羟基苯乳酸、4-羟基苯丙酮酸的水平分布,探讨各指标在新生儿肝内胆汁淤积症(NICCD)患者诊断中的应用价值。方法:2011年5月至2015年5月期间,本筛查中心共确诊21例患儿,将其作为观察组,同时随机抽取100例正常儿童为对照组,分析两组血串联质谱Met、Phe、Tyr等指标及尿气相质谱4-羟基苯乳酸、4-羟基苯丙酮酸的水平,比较其差异性。结果:较正常对照组,观察组血Met、Phe、Tyr等多种指标及尿气相质谱4-羟基苯乳酸、4-羟基苯丙酮酸检测结果偏高,Orn/Cit结果偏低,差异均有统计学意义,而C2和Cit/Arg检测结果有升高趋势,但差异无统计学意义。结论:NICCD患儿存在生化指标代谢异常,血串联质谱及尿气相质谱检测对患儿的诊断具有重要意义。

串联质谱检测氨基酸和酰基肉碱的室间质量评价

目的调查我国部分新生儿筛查实验室串联质谱检测氨基酸和酰基肉碱的水平和现状。方法向19家新生儿筛查实验室发放5个批号（201211、201212、201213、201214、201215）的血斑质控品,收集实验室回报的氨基酸和酰基肉碱检测值,对回报的结果按照方法分组进行统计分析,并评价其检测水平。结果 18家实验室回报了检测结果,回报率为94.7%。回报结果的18家实验室中有14家实验室采用衍生非配套的试剂检测氨基酸和酰基肉碱,有3家实验室采用衍生配套的试剂检测氨基酸和酰基肉碱,有1家实验室采用非衍生的方法检测氨基酸和酰基肉碱。按照方法学分组同时考虑是否使用配套试剂计算各组及格率,其中,瓜氨酸项目及格率为71.4%～100.0%,亮氨酸项目的及格率为71.4%～100.0%,甲硫氨酸项目的及格率为42.5%～100.0%,苯丙氨酸项目及格率为71.4%～100.0%,酪氨酸项目及格率为71.4%～100.0%,缬氨酸项目的及格率为66.7%～100.0%,游离肉碱项目的及格率为42.9%～100.0%,丙酰肉碱项目的及格率为28.6%～100.0%,异戊酰肉碱项目的及格率为33.3%～92.9%,辛酰肉碱项目的及格率为28.6%～100.0%,月桂酰肉碱项目的及格率为46.2%～100.0%,棕榈酰肉碱项目的及格率为64.3%～100.0%,十八碳酰肉碱项目的及格率为71.4%～100.0%。结论目前串联质谱检测氨基酸和酰基肉碱的质量水平差异较大,开展室间质评项目计划有利于提高我国遗传代谢病的检测领域整体水平。

稳定同位素iTRAQ标记/高效液相色谱-串联质谱法同时定量分析人体中42种氨基酸及典型病例

建立稳定同位素iTRAQ标记/高效液相色谱-串联质谱法同时定量分析人体中42种氨基酸的方法。人生物样本经磺基水杨酸沉淀蛋白,稳定同位素iTRAQ-115衍生化后,加入iTRAQ-114同位素标记的氨基酸内标液进样,选用AAA-C18色谱柱,以水-乙腈(含有0.01%七氟丁酸、0.1%甲酸)为流动相,采用梯度洗脱进行分离,选用3200QTRAP型质谱仪的多重反应监测(MRM)扫描方式进行检测。同位素内标消除了系统误差,实现了氨基酸的定量分析,42种氨基酸及同分异构体均能基线分离。本方法快速、灵敏、专属性强、高通量,可用于临床氨基酸代谢疾病的诊疗和营养评估。

电子电气产品中多溴联苯和多溴二苯醚的高效液相色谱/串联质谱法测定

样品经超声提取后,用液相色谱-串联质谱法分析,采用同位素质量数定性,外标法定量。本法对五溴联苯(5-PBB)、八溴联苯(8-PBB)、十溴联苯(10-PBB)、五溴二苯醚(5-PBDE)、八溴二苯醚(8-PBDE)、十溴二苯醚(10-PBDE)定量限为50 mg.kg-1;对以上六种多溴联苯、多溴二苯醚分别添加50 mg.kg-1、100 mg.kg-1、150 mg.kg-1并进行10次测定的回收率为85.5%～107%;精密度为1.10%～6.60%;采用标准品加入法对塑料、橡胶的空白样品分别添加5-PBB、8-PBB、10-PBB、5-PBDE、8-PBDE、10-PBDE各0 mg.kg-15、0 mg.kg-1、100 mg.kg-1、150 mg.kg-1、200 mg.kg-1,并进行测定,得到线性相关系数在0.9963～0.9995。

应用TMT结合质谱技术筛选高原红细胞增多症患者血浆差异表达蛋白

目的:应用串联质谱标签(TMT)结合质谱技术比较高原红细胞增多症(HAPC)患者和健康对照者血浆中的差异表达蛋白。方法:收集HAPC患者血浆4例,与之相匹配的健康对照组血浆5例,组内等量混合后利用多重免疫亲和层析柱去除14种高丰度蛋白,TMT试剂标记后样本进行液相色谱分离,采用HPLC-MS/MS质谱鉴定及相对定量;获取HAPC患者和健康对照血浆各20例,ELISA方法验证部分筛选的差异蛋白。结果:共鉴定和定量了1 094种蛋白,差异表达的蛋白有249种,其中HAPC组较健康对照组表达量≥1.5倍的上调蛋白质有162种,表达量≤67%的下调蛋白质有87种;C反应蛋白和血清淀粉样蛋白A在HAPC组中较健康对照组表达量均上调(P<0.05)。结论:筛选出多种与炎症相关的差异表达蛋白,为深入研究HAPC发生机制奠定了良好基础。

组织中全基因组DNA甲基化的液相色谱-串联质谱分析

建立液相色谱-串联质谱测定组织中全基因组DNA甲基化水平的方法。采用苯酚氯仿提取组织DNA,提取的DNA用88%甲酸在140℃下裂解,DNA裂解液加入同位素胞嘧啶作内标,经N2吹干后,用甲醇溶解,以液相色谱-串联质谱检测胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶的含量,并计算全基因组中DNA甲基化的水平。结果表明,胞嘧啶的线性范围为1～100μg·L^-1相关系数为0.997 4,相对标准偏差为0.70%～4.09%;5-甲基胞嘧啶的线性范围为1～50μg·L^-1相关系数为0.994 8,相对标准偏差为0.60%～4.81%。胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶的检出限为1 pg,日内相对标准偏差为1.86%～4.67%,日间相对标准偏差为3.72%～4.68%,胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶的加样回收率为86.52%～105.14%。本研究所建立的方法检测组织中DNA甲基化程度,具有专一性强、操作简便的优点,能较好的满足全基因组DNA甲基化检测的要求。

柱切换LC-MS/MS分析吸毒尿样中的吗啡、O^6-单乙酰吗啡、可待因、乙酰可待因

建立在线固相萃取即柱切换LC-MS/MS方法,分析吸毒者尿样中的吗啡、O6-单乙酰吗啡、可待因、乙酰可待因。以吗啡-d3为内标,预处理柱为Oasis(HLB 2.1 mm×20 mm×25μm,分析柱为Xterra(MS C182.1 mm×150 mm×3.5μm,用水作预处理流动相,分析流动相用含甲酸铵和甲酸的水、乙腈梯度洗脱,质谱采用电喷雾离子源,正离子MRM扫描。100μL尿样直接进样分析,尿样中吗啡、O6-单乙酰吗啡、可待因、乙酰可待因的检测限为0.3~1μg/L,线性关系良好,相关系数γ在0.999 1以上。

液相色谱-质谱联用法测定水-沉积物系统中四氟醚唑的残留量

建立了水一沉积物系统中四氟醚唑的液相色谱-质谱联用（LC-MS／MS）测定方法。沉积物样品依次经y（丙酮）：V（水）=9：1混合提取和二氯甲烷萃取后，中性氧化铝与弗罗里硅土层析柱净化，用LC-MS／MS测定；水样经二氯甲烷萃取后直接用LC-MS／MS测定。结果表明：在0．5～5μg/L或0．5～5μg／kg添加水平下，四氟醚唑在水中的平均回收率为89％～98％，相对标准偏差（RSD）为1．8％～13％，在沉积物中的平均回收率为97％～103％，RSD为6．3％～11％。该方法中四氟醚唑的最小检出量为2．OPg，四氟醚唑在水中最低检测浓度（LOQ）为0．5μg/L，在沉积物中的LOQ为0．5μg/kg。该方法选择性好、灵敏度高、重现性好、基质干扰小，适用于水一沉积物系统中四氟醚唑残留的检测。

福建泉州地区新生儿氨基酸代谢障碍的筛查结果分析

目的了解福建省泉州地区新生儿氨基酸代谢障碍(amino acid disorders,AAD)的总体筛查概况。方法应用串联质谱技术对泉州地区2014年1月~2018年11月期间364545例新生儿进行遗传代谢病筛查,对可疑阳性患儿进行相关致病基因检测,统计分析确诊AAD的种类、疾病构成和发病率。结果共确诊AAD患儿42例,AAD总发病率为1∶8680。确诊10种不同的AAD,其中最常见的苯丙氨酸羟化酶缺乏症14例(33.3%),其次为希特林蛋白缺乏症10例(23.8%),其余的分别为四氢生物蝶呤缺乏症4例(9.5%)、非酮性高甘氨酸血症3例(7.1%)、甲硫氨酸腺苷转移酶I/III缺乏症3例(7.1%)、瓜氨酸血症I型2例(4.8%)、精氨酰代琥珀酸尿症2例(4.8%)和鸟氨酸氨甲酰转移酶缺乏症2例(4.8%);氨甲酰磷酸合成酶缺乏症和高脯氨酸血症较罕见,各确诊1例。结论福建省泉州地区新生儿AAD的疾病构成和发病率等特征的阐明可为该地区的出生缺陷防控提供科学依据与指导。

超高效液相色谱串联四极杆质谱联用分析番茄酱中苏丹红Ⅰ～Ⅳ含量

The method of simultaneous analysis of Sudan Red Ⅰ-Ⅳ residues in ketchup was developed with an ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrum.Acetonitrile was used to extract the substance from the ketchup,and the upper layer was detected by the UPLC-MS/MS after refrigeration and centrifuge.The sample was separated on a Waters Acquity BHE C18 column,and detected by the MRM mode of the mass spectrum.The LOD was 2 ng/mL and the LOQ was 5 ng/mL all of the four substances.The average recoveries were between 67.42%-84.59% of the 100,200,300 μg/kg three spiked concentration levels and the RSD values were between 2.87%-9.57%.