糖肾宝含药血清对高糖培养大鼠系膜细胞细胞外调节蛋白激酶1/2磷酸化及转化生长因子-β1、单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

【目的】探讨中药复方糖肾宝(主要由黄芪、大火草、葛根、莪术、三七组成)对高糖培养的大鼠系膜细胞(MCs)细胞外调节蛋白激酶1/2磷酸化(pERK1/2)及转化生长因子-β1(TGF-β1)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的影响。【方法】体外培养大鼠MCs,随机分为正常组,高糖对照组,糖肾宝低、中、高剂量组(剂量分别为13.5、27、54 g/kg),厄贝沙坦组(剂量为25 mg/kg)。除正常组外,其余各组分别予以30 mmol/L葡萄糖+正常大鼠血清,糖肾宝低、中、高剂量血清,厄贝沙坦血清进行干预48 h。采用Western blot法检测细胞中pERK1/2水平、TGF-β1蛋白变化,RT-PCR法检测TGF-β1、MCP-1 mRNA表达,酶联免疫吸附法检测MCP-1蛋白和纤维连接蛋白(FN)表达。【结果】高糖对照组pERK1/2水平、TGF-β1、MCP-1、FN表达均显著高于正常组(P<0.05或P<0.01);药物干预的各组pERK1/2水平、TGF-β1、MCP-1、FN表达均显著低于高糖对照组(P<0.05或P<0.01);糖肾宝高剂量组pERK1/2水平显著低于厄贝沙坦组(P<0.01),TGF-β1、MCP-1、FN表达与厄贝沙坦组比较差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】中药复方糖肾宝能抑制高糖培养的MCs细胞外基质的分泌,其机制可能与抑制ERK1/2磷酸化,并进而抑制TGF-β1和MCP-1表达有关。

糖肾宝含药血清对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响及机制研究

目的:探讨中药复方糖肾宝(主要由黄芪、大火草、葛根、莪术、三七组成)对高糖培养的大鼠系膜细胞(MCs)增殖的影响及可能作用机制。方法:体外培养大鼠MCs,随机分为正常组、高糖对照组、糖肾宝低、中、高剂量组、厄贝沙坦组。除正常组外,其余各组分别予以30mmol/L葡萄糖+正常大鼠血清、糖肾宝低、中、高剂量血清、厄贝沙坦血清进行干预48h。MTT法检测细胞增殖,RT-PCR法检测单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)mRNA表达,ELISA检测MCP-1蛋白,western印迹检测TGF-β1蛋白表达。结果:高糖作用下的各组MCs增殖、MCP-1和TGF-β1表达均显著高于正常组(P<0.05,P<0.01);药物干预的各组MCs增殖、MCP-1和TGF-β1表达均显著低于高糖对照组(P<0.05,P<0.01);糖肾宝高剂量组MCs增殖、MCP-1和TGF-β1表达与厄贝沙坦组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:中药复方糖肾宝能抑制高糖培养的MCs细胞增殖,其机制可能与抑制炎症反应有关。

糖肾保煎剂对糖尿病大鼠肾皮质氧化损伤的影响

目的研究糖肾保煎剂对糖尿病大鼠肾脏氧化应激反应和病理改变的影响。方法采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病模型,分别给予糖肾保煎剂(中药组)、瑞泰(西药组)治疗8周。检测糖肾保煎剂对糖尿病大鼠肾脏氧化应激反应和病理改变的影响。结果中药组能减少尿白蛋白(UAlb);提高肾皮质超氧化物歧化酶(SOD)活性,降低丙二醛(MDA)含量;减小肾小球平均截面面积(MGA)。在减少氧化损伤方面作用显著。结论糖肾保煎剂能减少糖尿病大鼠24h尿白蛋白排泄,改善肾组织氧化损伤,减轻肾脏病理损害。肾组织内的氧化损伤可能在糖尿病肾病的发生发展中起重要作用。

糖肾宝冲剂对糖尿病肾病患者外周血内皮祖细胞及相关炎性因子的影响

目的观察糖肾宝冲剂对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)患者外周血内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)数量及其增殖能力的影响,探讨其可能的作用机制。方法将92例DN患者,按随机数字表法分为治疗组和对照组,每组46例。对照组采用降血糖、降血压、降血脂等常规治疗,治疗组在对照组疗法基础上加服糖肾宝冲剂,疗程16周。观察两组治疗前后空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、血清肌酐(serum creatinine,SCr)、尿白蛋白排泄率(urinary albumin excretion rate,UAER)、尿N-乙酰β-D氨基葡萄糖苷酶(N-acetylβ-D-glucosaminidase,NAG),血清超敏C-反应蛋白(high-sensitivity C-reactive protein,hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin,IL-6)水平,以及血清EPCs数量及其增殖能力。结果与治疗前比较,治疗后两组UAER、NAG、hs-CRP、TNF-α及IL-6均显著下降(P<0.01),外周血EPCs数量及其增殖能力均显著升高(P<0.01),但治疗组在改善上述指标方面均显著优于对照组(P<0.01)。结论糖肾宝冲剂能显著提高DN患者外周血EPCs数量及其增殖能力,减轻肾损害,其作用机制可能与抑制DN的炎性反应有关。

糖肾宝对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用的机制研究

目的探讨糖肾宝对DN模型大鼠肾损伤的保护作用及其作用机制。方法将SPF级雄性SD大鼠36只按随机数字表法分为正常组6只、造模大鼠30只,采用单次大剂量腹腔注射链脲佐菌素(STZ)方法制备DN大鼠模型。将造模成功大鼠按随机数字表法分为模型组、厄贝沙坦组及糖肾宝低、中、高剂量组,每组6只。药物干预8周。记录各组大鼠一般情况及体重,检测大鼠血糖、肾脏指数、24 h尿蛋白定量(24 h UTP)、SCr、BUN水平,采用PAS染色、透射电镜观察肾组织病理形态;采用实时荧光定量PCR、Western blot检测肾组织E26转录因子-1(Ets-1)、TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA及蛋白表达。结果与模型组比较,糖肾宝低、中、高剂量组及厄贝沙坦组体重均升高(P<0.01),肾脏指数降低(P<0.05或P<0.01),24 hUTP、BUN、SCr均明显降低(P<0.05或P<0.01),肾小球体积明显缩小(P<0.05或P<0.01),肾组织Ets-1[(1.59±0.06)、(1.47±0.04)、(1.31±0.03)、(1.39±0.03)比(1.64±0.04)]、TGF-β1[(1.65±0.05)、(1.59±0.03)、(1.38±0.05)、(1.49±0.04)比(1.77±0.08)]、Smad2[(1.48±0.05)、(1.39±0.05)、(1.22±0.03)、(1.31±0.04)比(1.54±0.05)]、Smad3[(1.57±0.04)、(1.48±0.03)、(1.28±0.03)、(1.39±0.02)比(1.64±0.05)]mRNA水平降低(P<0.05或P<0.01),Ets-1[(1.33±0.32)、(1.16±0.38)、(0.77±0.06)、(0.84±0.06)比(1.97±0.43)]、TGF-β1[(1.35±0.14)、(1.24±0.22)、(0.94±0.13)、(1.07±0.06)比(1.63±0.20)]、Smad2[(1.24±0.26)、(1.14±0.31)、(0.77±0.28)、(0.85±0.19)比(1.72±0.34)]及Smad3[(1.29±0.14)、(1.19±0.21)、(0.85±0.39)、(0.90±0.37)比(1.76±0.21)]蛋白表达降低(P<0.05或P<0.01)。结论中药复方糖肾宝可改善DN大鼠肾损害,其机制可能与抑制Ets-1表达及TGF-β1/Smads信号通路传导有关。

糖肾宝对高糖诱导小鼠肾小球内皮细胞Fli-1、MCP-1及ICAM-1表达的影响

目的:探讨中药复方糖肾宝对高糖环境下肾小球内皮细胞迁移功能、Fli-1及炎症因子表达的影响。方法:合成Fli-1-siRNA并转染小鼠肾小球内皮细胞。体外培养小鼠肾小球内皮细胞分为正常组(正常血清)、高糖组(30mmol/L葡萄糖+正常血清)、高糖+糖肾宝血清组(30mmol/L葡萄糖+糖肾宝血清)、Fli-1-siRNA组(30mmol/L葡萄糖+Fli-1-siRNA+正常血清)、Fli-1-siRNA+糖肾宝组(30mmol/L葡萄糖+Fli-1-siRNA+糖肾宝血清)、空转组(30mmol/L葡萄糖+Control-siRNA+正常血清)。实时定量PCR检测Fli-1、MCP-1、ICAM-1 mRNA表达水平;Western blot法检测Fli-1、MCP-1、ICAM-1蛋白表达水平;Transwell检测小鼠肾小球内皮细胞迁移率。结果:与正常组比较,高糖诱导各组内皮细胞迁移率显著下降(P<0.01);与高糖组比较,高糖+糖肾宝组、Fli-1-siRNA组和Fli-1-siRNA+糖肾宝组内皮细胞迁移率显著升高(P<0.01)。与正常组比较,高糖组、高糖+糖肾宝组及空转组Fli-1、MCP-1、ICAM-1 mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.01,P<0.05);与高糖组比较,高糖+糖肾宝组、Fli-1-siRNA组和Fli-1-siRNA+糖肾宝组Fli-1、MCP-1、ICAM-1 mRNA及蛋白表达水平显著下降(P<0.05,P<0.01)。结论:中药复方糖肾宝可能通过抑制高糖培养小鼠肾小球内皮细胞Fli-1的表达,减少炎症因子的产生,改善内皮细胞迁移率。

归芍伤筋汤内服联合通络止痛散外敷治疗急性腰扭伤45例

目的:探讨归芍伤筋汤内服联合通络止痛散外敷治疗急性腰扭伤的临床疗效及作用机制。方法:将90例急性腰扭伤患者采用随机按数字表法分为对照组和观察组各45例。对照组采用布洛芬片内服,0.2 g/次,3次/d;及双氯芬酸二乙胺乳胶剂外用。观察组采用归芍伤筋汤内服联合通络止痛散外敷。两组疗程均为5 d。记录疼痛、压痛、肿胀和瘀斑评分;进行腰部活动障碍和腰部功能障碍评分;检测血液流变学、β-内啡肽(β-EP)、血栓素B2(TXB2)及6-酮前列腺素Fla(6-KetoPGFla)变化,以上指标治疗前后各评价1次。结果:经Ridit分析,观察组临床疗效优于对照组(P<0.05);治疗后观察组疼痛、压痛、肿胀和瘀斑评分低于对照组(P<0.01);腰部活动障碍和腰部功能障碍评分均低于对照组(P<0.01);观察组全血黏度、血浆黏度、纤维蛋白原、血小板聚集率等血液流变学指标的改善均优于对照组(P<0.01);治疗后观察组β-EP和6-Keto-PGFla水平高于对照组(P<0.01),TXB2水平低于对照组(P<0.01)。结论:归芍伤筋汤内服联合通络止痛散外敷能促进急性腰扭伤患者血液循环,减轻炎症反应,提高β-EP水平,从而起到良好的镇痛、消肿效应,促进患者腰部活动功能的恢复。

糖肾宝复方对高糖培养的小鼠肾小球系膜细胞Ets-1/MCP-1信号通路的影响

目的观察高糖环境下糖肾宝复方含药血清对小鼠肾小球系膜细胞(MCs)增殖及E26转录因子1(Ets-1)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)、纤黏蛋白(FN)表达的影响。方法分别将糖肾宝复方及蒸馏水对SPF小鼠进行灌胃,制备含药血清与正常血清。然后体外培养小鼠MCs,设计合成Ets-1-siRNA并转染小鼠MCs。实验分为6组:正常对照组、高糖组、高糖+糖肾宝血清组、Ets-1-siRNA组、Ets-1-siRNA+糖肾宝组、空转组。药物干预72 h后,采用实时荧光定量PCR和Western Blot法检测各组MCs中Ets-1、MCP-1、FN及ColⅣmRNA水平和蛋白表达;CCK-8法检测24、48、72、96、120 h各时间点MCs增殖情况。结果与正常对照组比较,高糖组及高糖+糖肾宝血清组MCs增殖显著升高(P<0.01),且72 h达到峰值,96 h增殖速率趋于稳定(P<0.01),同时高糖组及空转组Ets-1、MCP-1、FN及ColⅣmRNA水平和蛋白表达均显著升高(P<0.01);与高糖组比较,高糖+糖肾宝血清组、Ets-1-siRNA组和Ets-1-siRNA+糖肾宝组MCs增殖,Ets-1、MCP-1、FN及ColⅣmRNA水平和蛋白表达均显著下降(P<0.01);Ets-1-siRNA组和Ets-1-siRNA+糖肾宝组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论糖肾宝复方能抑制高糖培养的MCs增殖及细胞基质(ColⅣ、FN)分泌,其机制可能与抑制Ets-1/MCP-1炎症信号通路的活化。