基于网络药理学探讨桃红四物汤促进骨折愈合的主要活性成分及作用机制

目的运用网络药理学探索“桃红四物汤”的主要活性成分,以及促进骨折愈合的作用机制。方法利用中药系统药理数据库与分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP)检索“桃红四物汤”(THSWT)中所有药物对应的活性成分,并筛选出其活性成分所对应的作用靶点。运用GeneCards数据库平台挖掘与骨折愈合(fracture healing,FH)相关作用靶点,构建“药物-疾病”共同靶点Venn图。利用Cytoscape 3.8.2软件,绘制“药物活性成分-靶点-疾病”的网络调控图,借助String 11.5构建蛋白-蛋白相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络,获得PPI网络核心基因的邻接节点数目,再运用Cytoscape 3.8.2对PPI网络进行拓扑分析,最终获取核心基因。通过R语言包clusterProfiler进行基因本体(gene ontology,GO)功能注释和基于京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析,预测“桃红四物汤”对促进骨折愈合的作用机制。结果研究预测得到“桃红四物汤”有效成分69个,涉及5345个作用靶点。确定骨折愈合靶点2383个,得到共同靶点基因140个,运用PPI分析确定ALB、AKT1、VEGFA、MMP2、MMP9、CASP3、JUN、MYC等是促进骨折愈合的核心靶点。富集分析GO条目2258项(P<0.05),KEGG信号通路151条(P<0.05),主要富集通路有PI3K-Akt信号通路、AGE-RAGE信号通路、IL-17信号通路等。结论“桃红四物汤”可通过多靶点、多通路促进骨折愈合,为深入揭示其作用机制提供了研究方向,后续可继续通过体内外实验进一步验证靶点的有效性。

从肝脾失调论治心脏神经官能症

心脏神经官能症可归属"惊悸""怔忡""胸痹"等范畴,肝郁气滞、脾气虚弱、心血亏虚是心脏神经官能症的病理基础,血瘀痰浊是病理产物。治疗以疏肝解郁为主,兼血虚,疏肝健脾养血,逍遥散加减;兼血瘀,疏肝健脾,化瘀通络,逍遥散合桃红四物汤加减;兼痰浊,疏肝健脾,逍遥散合二陈汤加减。辨证论治,疗效显著。

桃红四物合六味地黄汤加减治疗黄褐斑临床疗效评价

目的:评价桃红四物合六味地黄汤加减治疗黄褐斑的临床疗效。方法:选取2015年5月-2017年5月陕西省第四人民医院皮肤科收治的黄褐斑患者80例,将患者随机分为研究组和对照组,每组40例。研究组采用桃红四物合六味地黄汤加减治疗,对照组采用维生素治疗,治疗后对两组患者的皮损面积、临床疗效、全身症状改善情况、血清SOD、CAT、MDA水平进行统计分析。结果:研究组患者的皮损面积显著小于对照组(P<0.05),总有效率92.5%显著高于对照组57.5%(P<0.05),月经不调、白带异常、腰膝酸软、神疲乏力改善率72.5%、65.0%、77.5%、72.5%,均显著高于对照组20.0%、22.5%、7.5%、12.5%(P<0.05),血清SOD、CAT水平均显著高于对照组(P<0.05),MDA水平显著低于对照组(P<0.05)。结论:桃红四物合六味地黄汤加减治疗黄褐斑临床效果优于维生素治疗。

基于网络药理学探讨桃红四物汤治疗骨质疏松症的主要活性成分及药理作用机制

目的:从网络药理学角度研究桃红四物汤治疗骨质疏松症的主要活性成分及多维药理作用机制。方法:从中药系统药理学数据库和分析平台中提取桃红四物汤的化学成分,以口服生物利用度(OB)≥30%和类药性(DL)≥0.18筛选活性成分,通过该数据库提取活性成分作用靶点,以GeneCards和OMIM在线分析平台挖掘靶点相关疾病,采用Cytoscape 3.7.2软件构建活性成分−作用靶点网络,String10.0构建蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络,最后通过基因本体(GO)和基因组百科全书(KEGG)富集分析桃红四物汤治疗骨质疏松症的药理作用机制。结果:共筛选得到桃红四物汤69个活性成分,涉及5346个作用靶点,主要涉及破骨细胞分化,激素,相关炎症因子,甲状旁腺激素的合成、分泌及作用等生物过程,通过调节白细胞介素-17、辅助性T细胞17、T细胞受体、Toll样受体、雌激素、丝裂原活化蛋白激酶、PI3K-Akt、甲状腺激素、FoxO、Wnt等信号通路发挥治疗骨质疏松症的作用。结论:本研究体现了桃红四物汤多成分−多靶点−多途径的作用特点,为进一步开展桃红四物汤治疗骨质疏松症作用机制的研究提供了新的思路与方法。

中药治疗四肢骨折后期关节僵硬52例

采用中药熏洗(处方:川芎、红花、伸筋草、透骨草、海桐皮、威灵仙、苏木等)、内服《中医伤科学》肢伤二方或桃红四物汤合八珍汤化裁,并配合手法治疗四肢骨折后期关节僵硬52例,治愈33例,显效13例,好转3例,无效3例,总有效率94%。

基于“成分群协同”与“生物过程网络”解析桃红四物汤抗血栓作用机制

目的 通过重启随机游走(random walk with restart,RWR)算法解析桃红四物汤药味配伍、成分群协同抗血栓作用的生物过程网络与关键成分群,揭示其“多成分-多靶点-多途径”抗血栓作用机制。方法 结合文献和课题组前期研究基础,通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、本草组鉴(HERB)等4个数据库,获取桃红四物汤活性成分、成分群及对应靶标基因;在人类基因数据库(Genecards)、人类孟德尔遗传综合数据库(OMIM)等4个数据库收集血栓相关基因;首先将血栓相关基因、中药和成分群靶标基因导入Metascape平台进行生物过程富集,采用Cytoscape 3.9.1软件将血栓生物过程进行聚类,初步分析桃红四物汤中药配伍、成分群协同抗血栓作用;进一步整合RWR算法、Pearson相关性分析与Z得分显著性分析,定量分析复方、单味药与成分群对血栓生物过程网络影响的相关性及显著性,筛选成分群协同抗血栓的关键生物过程、关键成分群;最后构建桃红四物汤抗血栓关键生物过程网络,分子对接筛选核心成分与核心靶点。结果纳入桃红四物汤9类成分群,血栓生物过程聚类为4类,桃红四物汤抗血栓生物过程显著性影响大小依次为氧化应激>炎症反应>细胞内信号传导>细胞活化,氧化应激与炎症反应是其抗血栓的关键生物过程;黄酮类、有机酸类、生物碱类、苯乙醇苷类、萜类、香豆素类、苯酞类是其协同抗血栓的关键成分群;生物网络构建与分子对接筛选出10个核心靶点(TNF、HMGB1、NLRP3、PARP1、PPARA、GAPDH、MMP9、IFNG、IL17A、HRAS)、6个核心成分(川芎哚、儿茶素、绿原酸、毛蕊花糖苷、羟基红花黄色素A、芍药苷)。结论 通过整合生物过程网络和机器学习算法,定量解析桃红四物汤成分群协同抗血栓的关键生物过程和核心成分、靶点,为其临床应用和基础研究提供参考。

桃红四物汤配方颗粒与水煎方剂指标性成分差异研究

目的:通过测定桃红四物汤配方颗粒与水煎方剂中指标性成分的含量,研究两种剂型的化学成分差异。方法:采用HPLC法,使用Agilent Ecplipse C18色谱柱(4.6×250mm,5μm),乙腈-0.1%磷酸水溶液(v/v)为流动相,流速1.0mL/min,进样量10μL,柱温25℃,检测波长214nm;测定10批配方颗粒及其所用药材制备的汤剂中芍药苷、苦杏仁苷及阿魏酸的含量并计算转移率。结果:10批配方颗粒及其所用药材制备的汤剂中芍药苷、苦杏仁苷及阿魏酸的平均含量分别为0.0882、0.1107、0.0795mg/g,转移率分别为69.27%、69.29%、81.91%。结论:配方颗粒制备工艺能够较好地转移各指标性成分;本研究所用测定方法准确、快速,能够全面、科学地评价桃红四物汤配方颗粒的质量。

基于G蛋白偶联雌激素受体介导的EGFR/PI3K途径探讨四物汤对MC3T3-E1细胞增殖的影响

目的探讨四物汤通过G蛋白偶联雌激素受体(GPER)介导的表皮生长因子受体(EGFR)/磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)途径影响小鼠胚胎成骨细胞(MC3T3-E1)的增殖效应及其分子机制。方法将40只SD雌性大鼠随机分为5组:正常组,雌二醇组,四物汤高、中、低剂量组,每组8只。以雌二醇药物血清为阳性对照,用高、中、低剂量四物汤药物血清干预MC3T3-E1细胞,以MTT细胞增殖实验检测各药物血清干预24 h对MC3T3-E1细胞增殖的影响;Western blot及免疫荧光技术检测高剂量四物汤对MC3T3-E1细胞EGFR、PI3K、cyclin B1、cyclin D1蛋白表达情况的影响;并应用GPER激动剂G1、拮抗剂G15,EGFR抑制剂AG1478,PI3K抑制剂LY294002进一步检测高剂量四物汤影响MC3T3-E1细胞增殖的作用途径和分子机制。结果与正常血清组比较,高、中、低剂量四物汤药物血清均能促进MC3T3-E1细胞的增殖(P<0.01),加入G1可使高剂量四物汤促增殖作用提高(P<0.01),而加入G15、AG1478、LY294002使高剂量四物汤的促增殖作用减弱(P<0.01)。Western blot和免疫荧光结果均显示,四物汤药物血清增加MC3T3-E1细胞EGFR、PI3K、cyclin B1、cyclin D1的蛋白表达,与正常血清组比较差异有统计学意义(P<0.01),G1同时干预时上述蛋白表达量较高剂量四物汤增加(P<0.01),分别加入G15、AG1478、LY294002后上述蛋白的表达量较高剂量四物汤组降低(P<0.01或P<0.05)。结论四物汤对小鼠MC3T3-E1细胞增殖有明显的促进作用,其作用机制可能为GPER介导的EGFR/PI3K信号通路的传导。

Coronary Heart Disease Complicating With Impaired Glucose Tolerance and Constipation:A Case Report Cured by Integrated Chinese-Western Medicine

Complications are more frequent in elderly patients with coronary heart disease （CHD）, such as impaired glucose tolerance and constipations. It is always difficult to cure these complications in clinical practice. In this case we had successfully cured an eighty-three years old man with CHD complicating impaired glucose tolerance and constipation by integrated Chinese-Western medicine.