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Development of a Liquid Chip Technique to Simultaneously Detect Taura Syndrome Virus( TSV) and Yellow Head Disease Virus( YHDV) 被引量:2
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作者 Yin Weili Zhang Sihua +2 位作者 Yue Zhiqin Zheng Xiaolong Liu Hong 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2014年第5期256-260,共5页
The aim is to develop a liquid chip technique to detect Taura syndrome virus( TSV) and yellow head disease virus( YHDV) on Penaeus orientalis simultaneously. The CP2 gene of TSV and N gene of YHDV in Gen Bank was anal... The aim is to develop a liquid chip technique to detect Taura syndrome virus( TSV) and yellow head disease virus( YHDV) on Penaeus orientalis simultaneously. The CP2 gene of TSV and N gene of YHDV in Gen Bank was analysed by using the software DNAStar 7. 0 to design the TSV-and YHDV-specific primers. The primers were labeled with biotin and subjected to amination modification. They were then coupled with fluorescence-coded microspheres and then used for hybridization with RT- PCR products of TSV and YHDV. The liquid chip detection technique for detection of TSV and YHDV was established by using BD FACSArray to detect fluorescence signal in the reaction system. This assay system had a high sensitivity to TSV and YHDV,with the detection of limit of 100 pg. Moreover,the assay was specific for the detection of TSV,YHDV and was not susceptible to cross with other viruses,including white spot syndrome virus( WSSV),spring viremia of carp virus( SVCV),infectious haematopoietic necrosis virus( IHNV). In conclusion,the liquid chip assay technique established in this study is highly sensitive and specific to TSV and YHDV detection. Moreover,it provides a novel,convenient and rapid approach for the detection of TSV and YHDV. 展开更多
关键词 Penaeus orientalis taura syndrome virus(tsv) Yellow head disease virus(YHDV) Liquid chip Detection
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应用RT-PCR方法从进境南美白对虾亲虾中检出桃拉综合征病毒(Taura syndrome virus) 被引量:4
2
作者 陈信忠 龚艳清 +4 位作者 孔繁德 王景明 周斌华 郑征 黄元成 《中国动物检疫》 CAS 2003年第12期21-22,共2页
应用PCR和RT-PCR技术,对一批进境的南美白对虾亲虾进行了多种病毒性病原的检疫。结果检出桃拉综合征病毒。临床观察也表明,该批亲虾体表散布大量黑色病灶,为TSV感染引起的TS典型病变。
关键词 应用 RT—PCR方法 进口产品 南美白对虾 亲虾 桃拉综合征病毒 检疫
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Molecular Epidemiological Investigation of Infectious Hypodermal and Hematopoietic Necrosis Virus and Taura Syndrome Virus in Penaeus Vannamei Cultured in China 被引量:3
3
作者 Cong ZHANG Jun-fa YUAN Zheng-li SHI 《中国病毒学》 CSCD 2007年第5期380-388,共9页
The Infectious hypodermal and hematopoietic necrosis virus(IHHNV) and Taura syndrome virus(TSV) are two important shrimp viruses in cultured shrimp in America.These two viruses were transmitted to China at the beginni... The Infectious hypodermal and hematopoietic necrosis virus(IHHNV) and Taura syndrome virus(TSV) are two important shrimp viruses in cultured shrimp in America.These two viruses were transmitted to China at the beginning of the 21st century.In this study,214 shrimp samples of Penaeus vannamei were collected from seven different areas of China and tested by PCR for IHHNV and TSV infection.The results showed that there were a high prevalence of IHHNV(65.42%) and low prevalence of TSV(3.27%) in the tested samples.Several samples were found to be co-infected with these two viruses.A 3 kb fragment of 7 positive IHHNV samples and a structure protein region(ORF2) of three TSV positive samples were amplified and sequenced.The sequence comparison indicated that both IHHNV and TSV sequenced in China have a low genetic variations compared with the prototype IHHNV and TSV from Hawaii.Phylogenetic analysis showed that TSV isolates were clustered into two groups,Asia and America group,which was genetically correlated to geographic distribution. 展开更多
关键词 中国 流行病学 基因变异 传染性皮下及造血组织坏死病毒 桃拉综合征病毒 南美白对虾
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Prevalence of Three Shrimp Viruses in Zhejiang Province in 2008 被引量:6
4
作者 Xiao-wei Yu Jian-ping Wang +1 位作者 Wei Zhang Zheng-li Shi 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2011年第1期67-71,共5页
White spot syndrome virus (WSSV),Taura syndrome virus (TSV) and Infectious hypodermal and haematopoietic necrosis virus (IHHNV) are three shrimp viruses responsible for major pandemics affecting the shrimp farming ind... White spot syndrome virus (WSSV),Taura syndrome virus (TSV) and Infectious hypodermal and haematopoietic necrosis virus (IHHNV) are three shrimp viruses responsible for major pandemics affecting the shrimp farming industry. Shrimps samples were collected from 12 farms in Zhejiang province,China,in 2008 and analyzed by PCR to determine the prevalence of these viruses. From the 12 sampling locations,8 farms were positive for WSSV,8 for IHHNV and 6 for both WSSV and IHHNV. An average percentage of 57.4% of shrimp individuals were infected with WSSV,while 49.2% were infected with IHHNV. A high prevalence of co-infection with WSSV and IHHNV among samples was detected from the following samples:Bingjiang (93.3%),liuao (66.7%),Jianshan (46.7%) and Xianxiang (46.7%). No samples exhibited evidence of infection with TSV in collected samples. This study provides comprehensive information of the prevalence of three shrimp viruses in Zhejiang and may be helpful for disease prevention control in this region. 展开更多
关键词 Molecular detection White spot syndrome virus (WSSV) taura syndrome virus (tsv Infectious hypodermal and haematopoietic necrosis virus (IHHNV)
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对虾桃拉病毒(TSV)RT-PCR快速诊断技术的研究 被引量:7
5
作者 徐丽美 吴成林 +3 位作者 邱名毅 王海贵 李丹萍 杨丰 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期264-267,共4页
对虾桃拉病毒(Taura Syndrome Virus,TSV)最早于1992 年在凡纳对虾(Penaeus vannamei)体内发现,此病毒是对虾养殖业危害较严重的病毒之一.将该病毒基因组的一段序列克隆至转录载体 pSP64(PolyA)上,经体外转录、磁珠法分离、纯化获得了... 对虾桃拉病毒(Taura Syndrome Virus,TSV)最早于1992 年在凡纳对虾(Penaeus vannamei)体内发现,此病毒是对虾养殖业危害较严重的病毒之一.将该病毒基因组的一段序列克隆至转录载体 pSP64(PolyA)上,经体外转录、磁珠法分离、纯化获得了人工的TSV RNA模板;用定量的TSV RNA阳性对照模板进行RT PCR条件优化,灵敏度检测以及样品制备方法等试验,结果表明:RT PCR检测的灵敏度可达到0.1 fg,相当于 100 个病毒粒子;所制备的样品对病毒 RNA的逆转录及扩增无抑制,适合于对虾桃拉病毒快速检测. 展开更多
关键词 对虾桃拉病毒 tsv 凡纳对虾 P.vannamei RT-PCR 快速诊断技术 RNA病毒
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二温式RT-PCR检测对虾Taura综合征病毒的研究 被引量:18
6
作者 庞耀珊 谢芝勋 +2 位作者 何竞铭 邓显文 莫友群 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期54-57,共4页
设计了一对能扩增大小为231bp对虾Taura综合征病毒 (TSV)某段基因的特异性引物 ,优化建立了能快速检测TSV的二温式RT-PCR。特异性和敏感性试验结果表明 ,二温式RT-PCR能对3个试验用TSV毒株的RNA进行扩增 ,并得到与预期大小一致的231bp... 设计了一对能扩增大小为231bp对虾Taura综合征病毒 (TSV)某段基因的特异性引物 ,优化建立了能快速检测TSV的二温式RT-PCR。特异性和敏感性试验结果表明 ,二温式RT-PCR能对3个试验用TSV毒株的RNA进行扩增 ,并得到与预期大小一致的231bp的扩增产物 ,而其它3种对虾病原则无相同大小的特异性扩增产物出现 ;RT-PCR最低能检测到1pg的TSVRNA。应用RT-PCR对320份分别来自广西沿海不同对虾养殖场的对虾样品进行检测 ,结果一共有85份检出TSV。这说明了TSV在广西沿海地区养殖对虾中已呈现出区域性流行趋势 ,同时也显示了RT-PCR在TSV临床检测中具有较高的实用性。 展开更多
关键词 南美白对虾 taura综合征病毒 二温式 RT—PCR 检测
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对虾Taura综合症病毒Taqman实时定量RT-PCR检测方法的建立与应用 被引量:4
7
作者 岳志芹 刘荭 +5 位作者 梁成珠 高宏伟 雷质文 徐彪 朱来华 江育林 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期141-144,共4页
建立了Taqman实时定量RT-PCR方法检测对虾的Taura综合症病毒(Taura syndrome virus,TSV)。选取TSV基因组的保守序列,利用Primer Express 2.0软件设计引物和探针,扩增产物长度为73bp。以含有TSV目的扩增片段的质粒为标准品,进行实时定量R... 建立了Taqman实时定量RT-PCR方法检测对虾的Taura综合症病毒(Taura syndrome virus,TSV)。选取TSV基因组的保守序列,利用Primer Express 2.0软件设计引物和探针,扩增产物长度为73bp。以含有TSV目的扩增片段的质粒为标准品,进行实时定量RT-PCR反应,结果表明质粒DNA在6~6×106个拷贝,共7个数量级的范围内有"S"型扩增曲线。根据病毒拷贝数与Ct值制备了标准曲线,可以用于病毒的定量分析。该方法的检测灵敏度为6个病毒粒子。该方法的重现性好,组内的实验变异系数为0.04%~2.70%,组间实验变异系数为0.92%~4.67%。引物和探针对于对虾基因组RNA、黄头病毒RNA都没有扩增反应,表现出良好的特异性。实时定量RT-PCR检测TSV方法的建立,对于虾病的临床诊断及流行病学研究具有重要意义。 展开更多
关键词 tsv 实时定量RT-PCR TAQMAN探针
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广西沿海地区对虾桃拉病毒(TSV)检测及假阳性分析 被引量:6
8
作者 黎铭 陈晓汉 +5 位作者 李咏梅 陈秀荔 曾地刚 蒋伟明 彭敏 马宁 《西南农业学报》 CSCD 2008年第5期1447-1449,共3页
桃拉病毒(TSV)是一种给对虾养殖业造成极大危害的病原。应用RT-PCR方法对采自广西防城港、北海、钦州等地养殖场的疑似病虾进行TSV检测,结果在250份样品中,TSV的检出率为0;有5份病样在目的带位置附近出现明显条带,经测序和NCB I比对,该... 桃拉病毒(TSV)是一种给对虾养殖业造成极大危害的病原。应用RT-PCR方法对采自广西防城港、北海、钦州等地养殖场的疑似病虾进行TSV检测,结果在250份样品中,TSV的检出率为0;有5份病样在目的带位置附近出现明显条带,经测序和NCB I比对,该条带的DNA序列与南美白对虾18S ribosomal RNA 99%吻合。表明广西沿海地区近年来桃拉病的发病率已明显降低,利用国际兽医局O IE推荐的引物检测桃拉病毒有可能造成假阳性。试验结果可为广西TSV的科学检测与防控提供参考。 展开更多
关键词 桃拉病毒 南美白对虾 病原检测
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Taura综合征病毒主要结构蛋白的表达与纯化 被引量:1
9
作者 袁军法 张化俊 +2 位作者 张建红 陈孝煊 石正丽 《武汉大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期731-735,共5页
根据Taura综合征病毒(TSV)基因组,设计特异性引物,从感染病毒组织中提取组织总RNA后扩增,分别将3个主要结构蛋白基因VP1、VP2和VP3克隆到pGEM TEasyVector.与表达载体连接后,导入大肠杆菌中诱导表达,并纯化目的蛋白.诱导表达的融合蛋白... 根据Taura综合征病毒(TSV)基因组,设计特异性引物,从感染病毒组织中提取组织总RNA后扩增,分别将3个主要结构蛋白基因VP1、VP2和VP3克隆到pGEM TEasyVector.与表达载体连接后,导入大肠杆菌中诱导表达,并纯化目的蛋白.诱导表达的融合蛋白分子量分别为54.2×103、43×103和57.1×103,在变性条件下过柱纯化VP1和VP2,一次可以纯化10mg以上纯度较高的蛋白. 展开更多
关键词 taura综合征病毒 结构蛋白 原核表达 纯化
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对虾Taura综合征病毒RT-PCR检测方法的改进及应用 被引量:2
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作者 黎小正 韦信贤 +2 位作者 吴祥庆 黄国秋 黄玉柳 《上海水产大学学报》 CSCD 北大核心 2008年第5期525-529,共5页
Taura综合征病毒(TSV)是世界动物卫生组织(OIE)目录规定的水生动物二类疫病病原体。本研究在RT-PCR方法检测TSV行业标准的基础上,优化建立了能更准确检测TSV的套式RT-PCR。敏感性试验结果表明,所建立的套式RT-PCR的灵敏度大约为常规RT-... Taura综合征病毒(TSV)是世界动物卫生组织(OIE)目录规定的水生动物二类疫病病原体。本研究在RT-PCR方法检测TSV行业标准的基础上,优化建立了能更准确检测TSV的套式RT-PCR。敏感性试验结果表明,所建立的套式RT-PCR的灵敏度大约为常规RT-PCR的103倍,最低可检测到10fg的TSVRNA。分别应用两种RT-PCR方法对180份来自广西沿海不同对虾养殖场的对虾临床样品进行检测,其中套式RT-PCR共有52份检出TSV,而常规RT-PCR仅有23份检出TSV。表明所建立的套式RT-PCR提高了TSV的阳性检出率,较常规RT-PCR有更大的应用价值和意义。 展开更多
关键词 taura综合征病毒 套式RT-PCR 灵敏度 阳性检出率
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荧光定量RT-PCR检测虾Taura综合征病毒方法建立及应用 被引量:2
11
作者 熊炜 邱璐 +5 位作者 李健 蒋静 王巧全 李树清 杨锡铨 胡永强 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2007年第2期26-29,共4页
由Taura综合征病毒(Taura syndrome virus,TSV)引起的虾Taura综合征(Taura syndrome)是世界动物卫生组织(OIE)规定的必需上报的水生动物二类疫病。本研究采用Taqman探针技术建立了快速检测TSV的荧光定量RT-PCR方法,通过与常规RT-PCR方... 由Taura综合征病毒(Taura syndrome virus,TSV)引起的虾Taura综合征(Taura syndrome)是世界动物卫生组织(OIE)规定的必需上报的水生动物二类疫病。本研究采用Taqman探针技术建立了快速检测TSV的荧光定量RT-PCR方法,通过与常规RT-PCR方法对比,证实其检测灵敏度和阳性检出率明显提高。 展开更多
关键词 taura综合征病毒 荧光定量RT—PCR RT—PCR 草虾 虾病
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宁波地区南美白对虾桃拉综合症病毒(TSV)的检测与分析 被引量:3
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作者 王建平 余晓巍 +1 位作者 顾建明 吴雄飞 《广西农业科学》 CAS CSCD 2009年第9期1239-1242,共4页
桃拉综合症病毒(Taura Syndrome Virus,TSV)是对虾养殖业危害较严重的病毒之一。应用RT-PCR技术,对2004~2008年在宁波地区收集的1201份南美白对虾样品进行TSV检测,旨在调查了解该地区TSV的流行情况,为科学防控该病的发生提供参考。结... 桃拉综合症病毒(Taura Syndrome Virus,TSV)是对虾养殖业危害较严重的病毒之一。应用RT-PCR技术,对2004~2008年在宁波地区收集的1201份南美白对虾样品进行TSV检测,旨在调查了解该地区TSV的流行情况,为科学防控该病的发生提供参考。结果表明,被检样品中,44份样品呈现阳性结果,总阳性率为3.66%,且2004~2008年南美白对虾TSV阳性检出率呈逐年降低的趋势。可见,宁波地区南美白对虾桃拉综合症已得到有效防制。 展开更多
关键词 南美白对虾 桃拉综合症病毒(tsv) RT-PCR 检测
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凡纳滨对虾3种主要病毒和虾肝肠胞虫在辽宁地区的流行情况分析 被引量:27
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作者 王博雅 王力 +4 位作者 刘美如 叶仕根 黎睿君 李华 李强 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期150-154,共5页
为解决近年来辽宁地区凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei病害频发的问题,于2015年8月从辽宁省盘锦、营口地区26个发病的凡纳滨对虾养殖池塘中随机采集病虾样本,采用聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)检测对虾传染性皮下及造... 为解决近年来辽宁地区凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei病害频发的问题,于2015年8月从辽宁省盘锦、营口地区26个发病的凡纳滨对虾养殖池塘中随机采集病虾样本,采用聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)检测对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)、对虾白斑综合征病毒(WSSV)和对虾桃拉综合征病毒(TSV),并用环介导等温扩增(Loop-Mediated Isothermal Amplication,LAMP)技术检测虾肝肠胞虫Enterocytozoon hepatopenaei(EHP)的感染情况。结果表明:IHHNV和EHP的检出率较高,分别为65.4%和34.6%,WSSV和TSV的检出率分别为19.2%和7.7%;EHP的检出率与对虾体型大小密切相关,在小虾样本中检出的阳性率高达100%,而大虾样本中均未检出;26份对虾样本中有7份样本同时携带EHP和IHHNV。研究表明,IHHNV和EHP是2015年8月辽宁地区凡纳滨对虾的主要流行病原,发病率可能与对虾生长缓慢、个体大小差异明显相关。 展开更多
关键词 凡纳滨对虾 传染性皮下及造血组织坏死病毒 白斑综合征病毒 桃拉综合征病毒 虾肝肠胞虫
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应用多重PCR检测鉴别对虾白斑综合征病毒和桃拉病毒 被引量:11
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作者 谢芝勋 庞耀珊 +6 位作者 何竞铭 邓显文 唐小飞 刘加波 谢志勤 廖敏 文雪 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期13-15,共3页
研究建立了一种可同时检测对虾白斑综合征病毒 (WSSV)和桃拉病毒 (TSV)的多重聚合酶链式反应 (多重PCR)技术。根据 WSSV和 TSV基因序列 ,设计合成了 2对分别与 WSSV和 TSV某段基因序列互补的引物 ,用这 2对引物对同一样品中的 WSSV DNA... 研究建立了一种可同时检测对虾白斑综合征病毒 (WSSV)和桃拉病毒 (TSV)的多重聚合酶链式反应 (多重PCR)技术。根据 WSSV和 TSV基因序列 ,设计合成了 2对分别与 WSSV和 TSV某段基因序列互补的引物 ,用这 2对引物对同一样品中的 WSSV DNA和 TSV RNA模板进行多重 PCR扩增 ,结果均同时得到了 2条特异的与实验设计相符的 30 6 bp(WSSV)和 2 31bp(TSV)多重 PCR扩增带 ,而对其他对虾病病原的 PCR扩增结果均为阴性 ;敏感性测定结果表明 ,该多重 PCR技术能检出 10 pg的 WSSV DNA和 1pg的 TSV 展开更多
关键词 WSSV 桃拉病 对虾白斑综合征病毒 引物 多重聚合酶 虾病 多重PCR检测 扩增 鉴别 RNA
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多重RT-PCR同时检测鉴别三种对虾病毒的研究与应用 被引量:15
15
作者 谢芝勋 庞耀珊 +2 位作者 邓显文 唐小飞 刘加波 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期393-396,共4页
根据基因库中对虾桃拉综合征病毒(TSV)、白斑综合征病毒(WSSV)、传染性皮下和造血器官坏死病毒(I-HHNV)的基因序列,分别设计了三对特异性引物,通过对多重RT-PCR扩增条件的优化,研究建立了可同时检测鉴别TSV、WSSV和IHHNV的多重RT-PCR。... 根据基因库中对虾桃拉综合征病毒(TSV)、白斑综合征病毒(WSSV)、传染性皮下和造血器官坏死病毒(I-HHNV)的基因序列,分别设计了三对特异性引物,通过对多重RT-PCR扩增条件的优化,研究建立了可同时检测鉴别TSV、WSSV和IHHNV的多重RT-PCR。该技术对同一样品中的TSV RNA、WSSV DNA和IHHNV DNA模板进行扩增,结果均同时得到3条大小与实验设计相符的231bp(TSV)、593bp(WSSV)和356bp(IHHNV)的特异性多重RT-PCR扩增带,对其它对虾病原核酸的扩增结果为阴性。敏感性试验结果表明,该技术最低能检测到10pg TSV RNA、100pg WSSV DNA和100pg IHHNV DNA。临床检测试验结果表明,该技术对TSV、WSSV和I-HHNV的检出率明显高于传统的临床症状观察和组织病理学检查,提示该技术适用于这三种病毒的临床快速检测和鉴别诊断。 展开更多
关键词 多重聚合酶链式反应 对虾 桃拉综合征病毒 白斑综合征病毒 传染性皮下和造血器官坏死病毒
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二温式多重PCR检测对虾白斑综合征病毒和桃拉病毒的研究 被引量:4
16
作者 谢芝勋 庞耀珊 +2 位作者 邓显文 唐小飞 刘加波 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期595-597,共3页
对虾白斑综合征(WSS)和桃拉病(TS)是两种严重危害当前对虾养殖业的对虾病毒性疾病.目前对虾病毒病的诊断手段主要包括病理学和生物学方法、免疫学方法、分子杂交方法及PCR方法等[1-4].其中PCR方法是这些方法中特异性最强、敏感最高的病... 对虾白斑综合征(WSS)和桃拉病(TS)是两种严重危害当前对虾养殖业的对虾病毒性疾病.目前对虾病毒病的诊断手段主要包括病理学和生物学方法、免疫学方法、分子杂交方法及PCR方法等[1-4].其中PCR方法是这些方法中特异性最强、敏感最高的病原检测手段,在国外已被广泛应用于对虾病毒病的检测和诊断.多重PCR是一种特殊PCR形式,其最突出特点,即一次PCR反应,就可同时检测、鉴别出多种病原体,在临床混合感染的鉴别诊断上具有其独特优势和很高的实用价值[5,6]. 展开更多
关键词 多重聚合酶链式反应 检测 对虾 白斑综合征病毒(WSSV) 桃拉病毒(tsv)
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浙江地区凡纳滨对虾苗3种对虾病毒携带情况研究 被引量:10
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作者 施慧 谢建军 +2 位作者 许文军 余方平 郭闯 《浙江海洋学院学报(自然科学版)》 CAS 2013年第1期25-30,共6页
对虾养殖过程中病毒病的频发是导致对虾养殖失败的最重要原因之一,其中对虾的白斑综合症病毒病(Whitespot syndrome virus,WSSV)、对虾传染性皮下及造血组织坏死病病毒(Infectious hypodermal&haematopoietic necrosis virus,IHHNV... 对虾养殖过程中病毒病的频发是导致对虾养殖失败的最重要原因之一,其中对虾的白斑综合症病毒病(Whitespot syndrome virus,WSSV)、对虾传染性皮下及造血组织坏死病病毒(Infectious hypodermal&haematopoietic necrosis virus,IHHNV)和对虾桃拉病毒(Taura syndrome virus,TSV)每年给海水养殖造成的经济损失巨大。对2009-2010年间浙江地区近22家对虾苗种生产场的对虾苗种携带WSSV、IHHNV和TSV病毒情况进行调查,并对采用携带病毒的苗种进行养殖的3个对虾养殖场进行后期跟踪调查。调查共采集凡纳滨对虾苗种样品118份,其中80%样本来自福建,10%来自海南,10%来自广东。检测方法采用世界动物卫生组织(OIE)推荐的PCR方法,检测结果显示:被检样品中32份呈现WSSV阳性结果,占27.1%;46份呈现IHHNV阳性,占38.98%;WSSV和IHHNV同时呈现阳性的有20份,占16.95%,而TSV均未分离到。后续跟踪调查发现采用携带WSSV病毒苗种进行养殖的对虾养殖塘均在8月上中旬陆续爆发对虾白斑病,造成极大经济损失。 展开更多
关键词 虾苗 对虾白斑综合征病毒 对虾传染性皮下及造血组织坏死病病毒 对虾桃拉病毒 聚合酶链式反应
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多重RT-PCR体系检测4种虾病毒的方法 被引量:4
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作者 乌日琴 但学明 +4 位作者 刘中勇 林志雄 陈芳 刘芸莉 张艺宜 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期438-445,共8页
根据多重RT-PCR的技术原理,利用对虾传染性表皮与造血组织坏死症病毒、白斑综合征病毒、黄头病毒和桃拉综合征病毒的基因序列分别设计了4对特异引物,建立多重RT-PCR体系用于虾4种病毒的检测。多重RT-PCR体系能特异地扩增出IHHNV、WSSV、... 根据多重RT-PCR的技术原理,利用对虾传染性表皮与造血组织坏死症病毒、白斑综合征病毒、黄头病毒和桃拉综合征病毒的基因序列分别设计了4对特异引物,建立多重RT-PCR体系用于虾4种病毒的检测。多重RT-PCR体系能特异地扩增出IHHNV、WSSV、YHV和TSV的目的片段:TSV特异性扩增片段508 bp,WSSV特异性扩增片段435 bp,IHHNV特异性扩增片段301 bp和YHV。特异性扩增片段614 bp。结果表明,多重PCR虾病毒检测系统具有较高的特异性和敏感性,并对其它对虾病原呈阴性。IHHNV、TSV、WSSV和YHV模板在多重PCR虾病毒检测体系中的检测下限分别为0.1,1,0.02和0.2 pg。病毒感染病料检测试验中,该检测体系的检测结果与单纯PCR的检测结果呈现出较好的吻合度。 展开更多
关键词 传染性表皮与造血组织坏死症病毒 桃拉综合征病毒 白斑综合征病毒 黄头病毒 多重RT-PCR
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RT-PCR法检测我国东南沿海凡纳滨对虾的桃拉综合征病毒 被引量:9
19
作者 黄新新 莫胜兰 陆承平 《中国病毒学》 CSCD 2005年第5期546-548,共3页
Taura syndrome virus(TSV) is one of the important pathogenic agents of Penaeus vannami,which causes prawn infection with serious disease in China in recent years.245 samples collected from 26 farms of Zhangzhou,Xiamen... Taura syndrome virus(TSV) is one of the important pathogenic agents of Penaeus vannami,which causes prawn infection with serious disease in China in recent years.245 samples collected from 26 farms of Zhangzhou,Xiamen,Shenzhen,Yangjiang,Ningbo and Guangzhou.were detected for TSV with RT-PCR,the positive rates were 100%,33.3%,40.7%,50% and 40%,respectively.Southern blotting and nucleotide sequencing were performed to confirm the specificity of the amplified RT-PCR products.The homology of 231bp nucleotide sequences reached 98.3%-100% when analysed and compared with the GenBank using the BLAST program.Phylogenetic analyses clustered the TSV isolates into two groups: one contained USA and Chinese Taiwan isolates;the other contained Vietnam isolate(YN1) and 21 isolates of China's Mainland.The 21 China isolates clustered into one branch,while the YN1 distributed in another branch.5 strains from Guangzhou and 2 strains from Shenzhen constituted one subcluster of the China branch. 展开更多
关键词 凡纳滨对虾 RT—PCR 桃拉综合征病毒(tsv) 核酸测序
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广东省粤西地区凡纳滨对虾3种主要病毒的PCR与LAMP检测及流行病学特点分析 被引量:2
20
作者 江晓 任春华 +1 位作者 胡超群 赵哲 《热带海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期97-103,共7页
应用聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)和环介导等温扩增(Loop-Mediated Isothermal Ampli-cation,LAMP)两种检测技术分别对2009年广东省粤西地区养殖体系中凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei白斑综合症病毒(White Spot Synd... 应用聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)和环介导等温扩增(Loop-Mediated Isothermal Ampli-cation,LAMP)两种检测技术分别对2009年广东省粤西地区养殖体系中凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei白斑综合症病毒(White Spot Syndrome,WSSV)、桃拉病毒(Taura Syndrome Virus,TSV)和传染性皮下及造血组织坏死病毒(Infectious Hypodermal and Hematopoietic Necrosis Virus,IHHNV)的携带情况进行了调查。结果显示,WSSV和TSV的携带率较高,是该地区凡纳滨对虾的主要流行病毒种类;LAMP检测方法与PCR方法具有相当的灵敏度和特异性,但LAMP检测方法更加简单方便、快速且成本低。 展开更多
关键词 凡纳滨对虾 白斑综合症病毒 传染性皮下及造血组织坏死病毒 桃拉病毒 聚合酶链式反应 环介导等温扩增 检测
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