天水小陇山红豆杉(Taxus chinensis(Pilg.) Rehd)林土壤真菌多样性及其与生态因子的相关性

采用GPS系统采集了天水小陇山红豆杉林9块样地的土样,用稀释平板法对该区域真菌进行分离计数,进一步鉴定到属,并分析了真菌数量和类群与土壤养分、水分和pH等生态因子的相关性.结果表明,该区域土壤真菌数量和类群组成存在较大的空间变异,土壤真菌优势菌群的构成有相似性,青霉属、毛霉属为所有样地的优势菌群.真菌多样性分析表明,小陇山红豆杉物种多样性较丰富,不同样地多样性指数差异明显.土壤真菌总数、类群和多样性与土壤生态因子间的相关性分析表明,真菌总数与土壤pH呈显著负相关(R=-0.796),与水分和有机质呈显著正相关;Shannon-Wiener指数与土壤有机质呈显著正相关;各属与土壤生态因子呈现不同的相关性.

中国红豆杉中主要紫杉烷类物质的分布研究

对中国红豆杉[Taxus chinensis(Pilg.)Rehd.]中的紫杉烷类化合物紫杉醇及两种重要前体巴卡亭III(B III)和10-脱乙酰巴卡亭III(10-DAB)的分布进行了研究.结果表明,紫杉醇的含量在同一棵树中的分布依主干皮、根皮、侧枝树皮、种子、须根、嫩枝、叶的次序递减,并发现侧枝茎中紫杉醇在横截面方向呈梯度分布,且紫杉醇含量最高部位是在次生木质层.10-DAB和B III在叶中含量最高,在须根中含量最低,叶子中10-DAB的含量达0.02%～0.03%,高于B III的含量.在2～3 a生的小树枝、叶中未检测到紫杉烷类物质,提示其合成可能与植株发育有关.紫杉醇在30 a 树龄的当年生嫩叶中春季高于秋季,而10-DAB在当年生和多年生的叶中积累都较多,且秋季比春季含量高.

曼地亚红豆杉研究进展

曼地亚红豆杉Taxus media是东北红豆杉T.cuspidata和欧洲红豆杉T.baccata的天然杂交种。其枝叶中的紫杉醇量较高,是利用红豆杉树皮提取抗癌药物紫杉醇的最佳替代原料。综述了曼地亚红豆杉的生物学特性及品系、生理生态、繁殖技术、细胞培养、紫杉醇生物合成相关酶基因的克隆及表达和分离纯化工艺等方面的研究进展。

HPLC测定曼地亚红豆杉枝叶中紫杉醇含量

曼地亚红豆干杉枝叶粗提液采用正己烷萃取,碳酸钾水溶液碱洗两步除杂处理后,再用HPLC测定分析紫杉醇含量。采用外标峰面积法进行定量分析。经分析曼地亚红豆干杉枝叶中紫杉醇含量为0.012%,RSD为1.46%。

曼地亚红豆杉双黄酮结构表征和Taxol定量

目的：对曼地亚红豆杉黄酮类成分进行研究，对其不同药用部位紫杉醇含量进行测定。方法：采用反复硅胶柱层析进行分离纯化，根据理化性质、光谱特征鉴定其结构。采用HPLC法测定曼地亚红豆杉枝叶、主根、须根三种药用部位中紫杉醇的含量，色谱柱为C18ODS（150mm×4．6mm，5μm），流动相：甲醇-水（3：1），流速0．8ml／min，检测波长228nm。结果：从曼地亚红豆杉中分离得到三个双黄酮类化合物并进行结构鉴定为金松双黄酮（Ⅰ）、银杏黄素（Ⅱ）、7，7″，4＇-Tri—O—Methylamentoflavone（Ⅲ）。曼地亚红豆杉枝叶、主根、须根中紫杉醇含量依次为：0．0308、0．02191、0．01983mg／g。结论：化合物Ⅰ～Ⅲ为首次从该种植物中得到；曼地亚红豆杉中除树皮外的药用部位枝叶的含量最高，主根次之，须根含量最低。

HPLC测定比较曼地亚红豆杉和南方红豆杉不同部位的紫杉醇含量

目的:分析和比较曼地亚红豆杉和南方红豆杉不同部位的抗癌活性成分紫杉醇的含量。方法:利用85%乙醇提取和CH2Cl2萃取得到相关成分;通过高效液相色谱法进行了方法学研究并对紫杉醇含量进行了测定和比较。结果:得到了紫杉醇等相关成分,建立了一个简单而可靠的方法学研究,以此为基础,检测分析并比较了两种植物不同部位中紫杉醇的含量,其中以南方红豆杉的树叶中紫杉醇含量最高,达到了5.18×10-5(w/w)。结论:该方法能准确简便地提取红豆杉植物中的紫杉醇并分析其含量,可为合理开发红豆杉提供一定的科学依据。

红豆杉种子发育及幼苗生长动态

对红豆杉〔Ｔａｘｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ（Ｐｉｌｇｅｒ）Ｒｅｈｄ．〕种子发育及１～５年生实生苗生长动态进行了观测，在秦岭山区，红豆杉成年树３～５月开花，５～９月胚珠逐渐发育，９月下旬种子成熟。实生苗在２龄内地上部生长缓慢，根系生长迅速；自第３年起地上部生长旺盛，地下部则稳定生长。文中就红豆杉人工育苗及家化栽培的问题进行了讨论。

红豆杉提取物和纳米乳包裹红豆杉提取物作为流感疫苗佐剂的初步研究及其LD_(50)的测定

目的本研究旨在探讨红豆杉提取物和纳米乳包裹红豆杉提取物作为裂解灭活H3N2流感疫苗的佐剂对小鼠模型的免疫作用及其毒性程度。方法取ICR小鼠完全随机平均分组后,分别将红豆杉提取物和纳米乳包裹红豆杉提取物作为佐剂与H3N2灭活流感疫苗混合免疫小鼠,同时以相应剂量的单独疫苗组、氢氧化铝佐剂组、生理盐水空白免疫组作为对照组。所有动物于第1周和第3周进行肌内注射免疫,共2次。于初次免疫后每周取血收集血清,测定血凝抑制(HI)抗体效价,并考察每组小鼠的生长状况。同时,进一步观察红豆杉提取物和纳米乳包裹红豆杉提取物的小鼠半数致死量(LD50)。结果红豆杉提取物和纳米乳包裹红豆杉提取物能显著增强血清HI抗体效价,高于单独疫苗组,并且小鼠体重增长正常,结合二者LD50(红豆杉提取物的LD50为295.43mg/kg,纳米乳包裹红豆杉提取物LD50为7.33g/kg)。认为红豆杉提取物和纳米乳包裹红豆杉提取物作为流感疫苗佐剂具有安全有效性,有望成为流感灭活疫苗的新型免疫佐剂。结论本实验首次证实了红豆杉提取物和纳米乳包裹红豆杉提取物可以有效增强对流感抗原的免疫性,并为进一步研究开发提供了毒性依据。鉴于红豆杉提取物和纳米乳包裹红豆杉提取物所表现出的佐剂效应,二者值得做更进一步的研究以便提高疫苗的质量。

中国湖北红豆杉属一新变型

报道了红豆杉属1新变型——保康红豆杉[Taxus chinensis(Pilger)Rehd f.baokangsis Y.J.Fei]。该变型与原变种南方红豆杉[Taxus.chinensis(Pilger)Rehd.var.mairei(Lemee et Lévl.)Cheng et L.K.Fu]主要区别在于其雄株上有部分枝条发育成雌性枝条或雌雄球花在同一果枝上,呈现雌雄同株现象。凭证模式标本藏于武汉植物园标本馆(编号Y.J.Fei001,HIB)。

中国红豆杉叶浸膏中紫杉烷的分离纯化及成分鉴定

以中国红豆杉 [Taxuschinensis(Pilger)Rehd .]叶为原料 ,利用甲醇或乙醇为溶剂制备浸膏。甲醇浸膏中的浆果赤霉素Ⅲ和紫杉醇的含量高于乙醇浸膏。采用萃取和层析方法相结合的分离纯化工艺 ,从甲醇浸膏中获得 10个化合物纯品。利用NMR ,IR ,MS和HPLC等方法对其成分进行结构鉴定 ,确定 5个化合物分别为紫杉醇、1 乙酰基 5,7,10 去乙酰基浆果赤霉素I、浆果赤霉素Ⅲ、浆果赤霉素VI和 7,9,10 ,13 去乙酰基浆果赤霉素VI ,HPLC检测它们的纯度相应为 98.4 % ,98.7% ,99.1% ,99.6 5%和 92 .94 %。分离的紫杉醇和浆果赤霉素Ⅲ得率分别为 6 2 .6 %和 57.6 %。这些结果表明所建立的制备及分离纯化的工艺可用于红豆杉叶生产紫杉醇及其前体物。

红豆杉迁地保护中天然种群的形成

０年代自庐山植物园引种栽培于南京中山植物园的１１株红豆杉〔Ｔａｘｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ（Ｐｉｌｇｅｒ）Ｒｅｈｄ．〕幼苗组成的栽培种群，在４０多年的迁地保护过程中，生长发育正常，且在邻近的自然生境中繁衍出一个含有４６１株幼苗及小树的天然红豆杉种群，树高１０～３４５ｃｍ，树龄１～１５年，主要散生于海拔３５～６０ｍ的山坡麻栎群落及山溪边的枫杨群落中。栽培种群中雌树５株，雄树６株，栽培红豆杉在３０年左右开花结实。该天然种群的形成过程是：红豆杉成熟种子被鸟类取食，其肉质假种皮被消化后，在鸟类的栖息范围内随着鸟粪被随机散布，经过生境选择、适应，于适宜的生境条件下萌发生长成幼苗及小树。此外，讨论了天然红豆杉种群的形成和发展，对于植物迁地保护研究与实践的重要意义。

曼地亚红豆杉与南方红豆杉不同部位中紫杉醇含量比较研究

目的:比较曼地亚红豆杉和南方红豆杉不同部位抗癌活性成分紫杉醇的含量,为红豆杉资源开发利用提供依据。方法:利用丙酮和乙酸乙酯混合溶剂提取有效成分,用中性Al2O3吸附柱色谱法粗提紫杉醇,用高效液相色谱法测定紫杉醇含量。结果:曼地亚红豆杉各部位紫杉醇含量均高于南方红豆杉,根皮中紫杉醇含量最高,达0.043 9%,约是南方红豆杉茎皮中紫杉醇含量的88倍。结论:曼地亚红豆杉根皮、茎皮、叶、幼枝、果实中均含有紫杉醇,其含量高于南方红豆杉茎皮中紫杉醇含量,可以对曼地亚红豆杉进行综合开发利用。

红豆杉细胞提取物抑制肿瘤细胞增殖及诱导凋亡的实验研究

目的 研究红豆杉细胞提取物对肝癌细胞 SMMC- 772 1的生长抑制作用及其机制。方法 运用台盼蓝拒染法测定肿瘤细胞生长曲线 ,流式细胞仪和 Giem sa染色分析肿瘤细胞周期和细胞凋亡。结果 红豆杉细胞二氯甲烷提取物对肝癌细胞 SMMC- 772 1的生长有明显的抑制作用 ,流式细胞仪分析发现 G2 / M期肿瘤细胞数量增多 ,经 Giem sa染色发现肿瘤细胞有凋亡发生。结论 红豆杉细胞提取物可以通过诱导细胞发生凋亡而抑制肝癌细胞SMMC- 772

红豆杉的愈伤组织诱导及培养研究（初报）

以红豆杉雄球花、茎切段等为外植体诱导产生了愈伤组织。适宜愈伤组织诱导及其生长的培养基为１／２ＭＳ培养基附加２，４—Ｄ２．０ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ。在不同浓度激素配比的培养基上均未观察到愈伤组织发生再分化。

红豆杉中二个新紫杉烷二萜化合物的分离与测定

从红豆杉Taxus chinensis(Pilger)Rehd。树皮中得到二个新的紫杉烷类化合物,它们的结构为1-羟基-7,9-二去乙酰基巴卡亭Ⅰ(1—hydroxy-7,9—dideacetyl—baccatin Ⅰ)和7,9-二去乙酰基巴卡亭Ⅵ(7,9-dideacetyl baccatin Ⅵ)

红豆杉育苗栽培及苗木生长动态

The seed of \%Taxus chinensis \%(Pilger) Rehd.\ has a long postmature duration only with the germination of 29.5%～37.5% after 40～70 d when its dormancy is relieved. The low limit of mean temperature for shooting is 15℃, the mean height of 1\|year\|old and 2\|years\|old seedlings is 8.12 cm and 16.10 cm respectively, mean basal diameter of 2\|years\|old seedling is 0.19 cm. Soft\|wood + 50 mg/kg ABT + sandy bed in spring and hard\|wood + 100 mg/kg NAA + sandy bed in autumn are the best treatments for cutting propagation, the survival rate of afforestation may reach 100%. Their mean height is 70.48 cm, basal diameter is 1.01 cm, and branch is 40～50 cm in second year for plantation.

遮荫对云曼红豆杉活性成分10-DAB及矿质营养累积的影响

光照是植物生长的必要环境因子,揭示不同遮荫处理对云曼红豆杉苗木活性成分10-DAB、矿质营养累积和光合作用的影响,为云曼红豆杉林下综合利用和林-草复合生态系统的构建提供科学依据。以2年生云曼红豆杉实生苗为材料,设置5种光强条件,阐明云曼红豆杉对不同光照环境的响应策略。结果表明,遮荫对云曼红豆杉苗木各生长时期10-DAB累积具有显著影响(P<0.05),10-DAB产量在4-10月呈上升趋势,10月达到最大值;随着遮荫的增强,各部位矿质元素的累积量均呈先增加再降低的趋势,其中,N和P在75%遮荫处理下最高,含量大小依次为叶>根>茎,K在50%遮荫处理下最高,含量大小依次为叶>茎>根;遮荫可以显著提高云曼红豆杉光合色素含量(P<0.05),随遮荫的增强呈“先升后降”的变化规律,75%遮荫下最大,净光合速率(P_(n))、气孔导度(G_(s))和蒸腾速率(T_(r))的变化规律同光合色素相一致,胞间CO_(2)浓度(C_(i))则是先降低后增加,在95%遮荫下的各指标(除C_(i))均最低。重度遮荫抑制了云曼红豆杉光合作用,遮荫强度可以有效提高云曼红豆杉苗木(枝叶)10-DAB产量及矿质营养累积,云曼红豆杉苗木培育宜选50%-75%遮荫。

中国红豆杉中多种紫杉烷同时检测的液质联用方法的建立

目的:建立能同时检测中国红豆杉中微量紫杉醇、10-去乙酰巴卡亭Ⅲ(10-DAB)、巴卡亭Ⅲ(B-Ⅲ)、巴卡亭Ⅵ(B-Ⅵ)和1-乙酰-5,7,10-去乙酰巴卡亭Ⅰ(DAB-Ⅰ)等多种紫杉烷的方法,了解该植物中重要紫杉烷的分布和代谢特征。方法:采用电喷雾质谱(ESI-MS)和多级离子阱技术摸索紫杉烷的加合离子峰和碎裂离子出现规律,利用反相高效液相色谱法同时测定植物样品中5种紫杉烷的含量。植物样品用液氮快速研磨,甲醇浸提,固相萃取方法制样。色谱柱为 HypersilODS C_(18)(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-甲醇-水(32:20:48),等度洗脱,流速为1mL·min^(-1),检测波长为227nm。结果:具有多个乙酰取代基的紫杉烷在 ESI-MS 正离子扫描时,产生强的铵加合离子峰,含羟基的紫杉烷易产生质子加合峰。最低检测限为0.5～1.5mg·L^(-1),紫杉醇在2.0～180mg·L^(-1)(r=0.9993),10-DAB 在2.0～166.0mg·L^(-1)(r=0.9975),B-Ⅲ在6～170mg·L^(-1)(r=0.9937),B-Ⅵ在7.0～200.0mg·L^(-1)(r=0.9921),DAB-Ⅰ在1.0～130mg·L^(-1)(r=0.9945)范围内具有良好的线性关系。紫杉醇回收率为98%±1.5%,日内 RSD 为1.8%,日间 RSD 为2.5%。结论:应用该方法测定了中国红豆杉不同组织中相应紫杉烷的含量,得到了良好的结果。

粤北南方红豆杉HPLC指纹图谱研究

目的:建立粤北南方红豆杉不同采收季节、不同采收部位的HPLC指纹图谱分析方法,为南方红豆杉的综合利用提供科学依据。方法:采用超临界CO2萃取技术提取南方红豆杉有效部位,按HPLC法建立指纹图谱,使用指纹谱图相似度软件进行评价分析。结果:建立了粤北南方红豆杉指纹图谱,对不同采收季节、不同采收部位的12批南方红豆杉样品提取物进行了指纹图谱分析,得出主要共有峰相对保留时间、相对峰面积作为南方红豆杉指纹图谱相关技术参数。结论:南方红豆杉指纹图谱可用于评价其药材质量。

红豆杉中紫杉烷类成分含量测定方法研究进展

紫杉醇是红豆杉(Taxus chinensis(Pilger)Rehd.)中一种优良的天然抗癌成分,但因其在红豆杉中的含量极少而不能得到广泛推广应用。紫杉烷类化合物作为合成紫杉醇的前体,近年来备受关注。对紫杉烷类化合物含量测定方法的研究进展进行了综述。