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细胞外基质分子Tenascin-R的研究进展 被引量:1
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作者 黄文辉 廖红 +1 位作者 牛蕤 张陆勇 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期375-379,共5页
Tenascin-R是Tenascin家族中的一员,是一种细胞外基质糖蛋白,主要在中枢神经系统表达,具有复杂的生理功能。本文拟对近年来对Tenascin-R的表达与分布、结构以及体内外生物学功能的研究做一综述,旨在较全面的认识Tena-scin-R多样的生物... Tenascin-R是Tenascin家族中的一员,是一种细胞外基质糖蛋白,主要在中枢神经系统表达,具有复杂的生理功能。本文拟对近年来对Tenascin-R的表达与分布、结构以及体内外生物学功能的研究做一综述,旨在较全面的认识Tena-scin-R多样的生物学特性,并为以Tenascin-R为靶点研发新的药物提供一定的思路。 展开更多
关键词 tenascin-r 细胞外基质 神经细胞
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人Tenascin-R_(aa454-1069)蛋白的原核表达及多克隆抗体制备 被引量:1
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作者 吕俊 徐如祥 +6 位作者 姜晓丹 胡昌辰 柯以铨 蔡颖谦 杜谋选 邹雨汐 秦玲莎 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期1017-1020,共4页
目的表达和纯化带多聚组氨酸(6×His)标签的人Tenascin-R EGFL结构域(Tenascin-Raa454-1069)的融合蛋白,并制备相应的兔源性多克隆抗体(pAb)。方法利用PCR从PMD18-T-TNR获得Tena-scin-Raa454-1069编码序列,将其亚克隆至原核表达载体... 目的表达和纯化带多聚组氨酸(6×His)标签的人Tenascin-R EGFL结构域(Tenascin-Raa454-1069)的融合蛋白,并制备相应的兔源性多克隆抗体(pAb)。方法利用PCR从PMD18-T-TNR获得Tena-scin-Raa454-1069编码序列,将其亚克隆至原核表达载体pET30a(+),构建重组表达质粒pET30a(+)-Tenascin-Raa454-1069;将阳性重组质粒转化大肠杆菌,IPTG诱导表达6×His-Tenascin-Raa454-1069融合蛋白,经Ni-NTA螯合树脂纯化,纯化蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗血清,Protein A Sepharose柱纯化获得多抗,ELISA法检测抗体效价,Western blot法检测抗体特异性。结果成功构建了pET30a(+)-Tenascin-Raa454-1069原核表达载体,原核蛋白Tenascin-Raa454-1069以包涵体形式在大肠杆菌高水平表达,通过复性与亲和层析获得纯度在90%以上的融合蛋白,蛋白浓度为1 600 mg/L,制备的抗Tenascin-Raa454-1069多抗效价高达1∶1.6×106,Western blot鉴定其具有良好的特异性。结论获得高纯度Tenascin-Raa454-1069蛋白并成功制备特异性pAb,为进一步研究Tenascin-R的生物学功能提供实验基础。 展开更多
关键词 hLINGO-1 原核表达 多克隆抗体 中枢神经系统
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肌腱蛋白R(Tenascin-R)研究进展 被引量:1
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作者 肖华胜 陈镔复 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1998年第1期45-48,共4页
肌腱蛋白R(tenascinR,TNR)是一种重要的细胞外基质糖蛋白(extracelularmatrix,ECM).分布于中枢神经系统,主要在髓鞘形成早期的少突胶质细胞中表达,成熟的胶质细胞及某些神经元(如脊髓... 肌腱蛋白R(tenascinR,TNR)是一种重要的细胞外基质糖蛋白(extracelularmatrix,ECM).分布于中枢神经系统,主要在髓鞘形成早期的少突胶质细胞中表达,成熟的胶质细胞及某些神经元(如脊髓,视网膜,小脑和海马的中间神经元)也有表达.TNR具有复杂的结构,由三种不同的结构域组成,从氨基端到羧基端依次为:类似于表皮生长因子的重复片段,类似于Ⅲ型纤连蛋白重复片段,类似(血)纤维蛋白原片段组成.TNR具有多种复杂的功能,对神经元具有排斥作用,促进或抑制神经元突起的生长,诱导神经元形态的极性化,并和髓鞘的形成有关,TNR结构的复杂性和功能的多样性提示,TNR有多个受体存在,已经发现的受体有F3/F11,MAG,XL1,Xprocan等. 展开更多
关键词 肌腱蛋白R 结构 功能 受体
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Tenascin-r基因在斑马鱼胚胎发育中时空表达规律
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作者 龚春华 李军 +2 位作者 秦玉明 赵庆顺 王大为 《四川动物》 CSCD 北大核心 2008年第2期277-279,共3页
Tenascin-r(TNR)是一种脊椎动物细胞外基质糖蛋白,在不同的物种间具有高度保守性,主要表达于神经系统,通过调节基质粘附状态和基质间相互作用而促进细胞的迁移、增殖和分化。在小鼠等动物模型中,TNR在中枢神经系统的发育中起重要作用,... Tenascin-r(TNR)是一种脊椎动物细胞外基质糖蛋白,在不同的物种间具有高度保守性,主要表达于神经系统,通过调节基质粘附状态和基质间相互作用而促进细胞的迁移、增殖和分化。在小鼠等动物模型中,TNR在中枢神经系统的发育中起重要作用,能控制大脑活动、调节适应性行为。而在斑马鱼研究中,TNR仅在视神经的发育和修复中起作用,通过对TNR在斑马鱼胚胎发育时期时空表达规律的研究,可以为利用斑马鱼进一步研究TNR的功能建立一个平台。 展开更多
关键词 斑马鱼 中枢神经系统 Tenascin—r
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Effects of different fragments of tenascin-R on neuron morphology in vitro
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作者 许汉鹏 肖华胜 +2 位作者 王浩军 梁哲 鞠躬 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 1998年第4期272-275,共4页
To investigate the effects of different tenascin-R fragments on morphological changes of neurons in vitro. Methods: Cell suspension was prepared from E14-15 mouse embryo spinal cords by mechanical dissection and tryps... To investigate the effects of different tenascin-R fragments on morphological changes of neurons in vitro. Methods: Cell suspension was prepared from E14-15 mouse embryo spinal cords by mechanical dissection and trypsin digestion. The cells were cultured in dishes coated with different bacterial expressed tenascin--R fragments. After being cultured in serum-free medium for 26 h, the cells were fixed and stained by ABC immunocytochemistry method for NSE. The cell number and neurites length were measured by a stereological method using an image analysis system, and the data was analyzed statistically. Results:The cells grew well in the serum-free medium for 26 h. Three types of cells were identified: ①phase-bright cells with single or double neurites; ②phasedark cells with well branching neurites; ③flat cells with 2-4 round vesicles in the cell body and radiotlike neurites. The cell number and the neurites length were influenced by different tenascin-R fragments. It was found that FN1-2 fragment inhibited neurite outgrowth. Conclusion: Different tenascin-R fragments that were used as substrate exert varying effects on cultured neural cells, adhesion or anti-adhension of cells, promotion or inhibition of the growth of neurites. These influences were mediated through receptors on the cell membrane. This study may provide some clues to the search for the search for the different receptors which may play essential roles in neuronal development and plasticity. 展开更多
关键词 SPINAL CORD cell culture tenascin-r ECM STEREOLOGY
全文增补中
重组肌腱蛋白-R不同功能片段的表达、纯化和生物学功能 被引量:2
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作者 肖华胜 杨浩 +4 位作者 金卫林 黄文晋 段小莉 陈镔复 鞠躬 《第四军医大学学报》 2000年第10期1182-1184,共3页
:目的 将肌腱蛋白 - R不同功能片段在原核中表达、纯化 ,并研究其初步的生物学功能 .方法 将编码肌腱蛋白 - R不同功能片段的表达质粒 p GEX- EGFL ,p GEX- EGFS,p GEX- FN1- 2 ,p GEX- FN6 - 8,p GEX- FG及空载 p GEX- KG转化入 E.Co... :目的 将肌腱蛋白 - R不同功能片段在原核中表达、纯化 ,并研究其初步的生物学功能 .方法 将编码肌腱蛋白 - R不同功能片段的表达质粒 p GEX- EGFL ,p GEX- EGFS,p GEX- FN1- 2 ,p GEX- FN6 - 8,p GEX- FG及空载 p GEX- KG转化入 E.Coli JM10 9中 .用 IPTG诱导表达 ,以谷胱甘肽琼脂糖为填充料进行亲合层析 ,纯化所表达的融合蛋白 .以纯化的融合蛋白作为培养液成分 ,GST为对照 ,观察纯化的肌腱蛋白 - R各功能片段对体外培养脊髓细胞活性及突起生长的影响 .结果 肌腱蛋白 R的 5个片段在大肠杆菌中都有表达 ,通过谷胱甘肽琼脂糖亲合层析 ,都得到了初步纯化 .通过对培养细胞进行 MTT染色 ,NSE染色后图像分析 ,结果表明 ,EGFL ,FN1- 2促进神经元的存活 ,EGFL ,EGFS和 FN6 - 8对突起的生长有明显的促进作用 .结论 肌腱蛋白 - R的不同功能片段可以通过大肠杆菌表达 ,经纯化获得蛋白 ,肌腱蛋白 展开更多
关键词 肌腱蛋白-R 细胞外基质 表达 纯化 生物学功能
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人TN-R蛋白及其EGF-L片段抗血清对大鼠皮层神经元的影响
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作者 赵海林 酉建 +3 位作者 唐国强 张茂营 姜晓丹 徐如祥 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期217-221,共5页
目的制备Tenascin-R(TN.R)蛋白的EGF-L功能片段及该片段抗血清,联合TN-R蛋白研究其在体外对大鼠皮层神经元的作用,探讨该功能片段抗血清用于治疗中枢神经系统(CNSl损伤后轴突再生的可行性。方法制备人TN-R蛋白EGF-L片段抗血清,... 目的制备Tenascin-R(TN.R)蛋白的EGF-L功能片段及该片段抗血清,联合TN-R蛋白研究其在体外对大鼠皮层神经元的作用,探讨该功能片段抗血清用于治疗中枢神经系统(CNSl损伤后轴突再生的可行性。方法制备人TN-R蛋白EGF-L片段抗血清,再以该抗血清联合TN-R蛋白包被多孔板形成不同的铺板状态,分EGF.L抗血清组、TN-R蛋白组、TN-R蛋白+EGF-L抗血清组,仅包被有多聚赖氨酸(PLL)处为对照组。单细胞悬液法原代培养大鼠皮层神经元24h后免疫荧光染色检测β-Ⅲ-tubulin,比较不同的铺板状态下所黏附的细胞数;7d后免疫荧光染色检测β-Ⅲ-tubulin,观察神经元的形态并比较神经元突起主干、分支点数量及突起总长度。小组织块法培养大鼠皮层神经元7d后观察包被的蛋白与PLL之间形成的边界对神经元突起生长的影响。结果成功制备高浓度的TN-R蛋白EGF-L片段抗血清。4组所黏附的细胞密度不同,比较差异有统计学意义(P〈0.05)。与EGF-L抗血清组和对照组比较,TN-R蛋白组所黏附的细胞密度、神经元的突起主干、分支点数量及突起总长度较低,TN-R蛋白+EGF-L抗血清组上述指标均较高,差异有统计学意义(P〈0.05);TN-R蛋白组从组织块中迁徙出的细胞及细胞突起均几乎不能越过边界,TN-R蛋白+EGF-L抗血清组可见有少量的细胞突起越过边界生长。结论TN-R蛋白EGF-L片段抗血清在体外能削弱TN-R蛋白对于神经元生长的抑制功能,有望将该抗血清用于体内,为CNS损伤后轴突再生创造有利的内环境。 展开更多
关键词 tenascin-r蛋白 EGF-L抗血清 神经元 轴突再生
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