ADM、TfR1、VEGF在骨肉瘤组织中的表达及其对患者预后判断的价值

目的探讨ADM、TfR1、VEGF在骨肉瘤组织中的表达及其对患者预后判断的价值。方法收集骨肉瘤患者60例,所有患者均同意手术治疗,且术中获取癌组织及癌旁组织。观察ADM、TfR1、VEGF在骨肉瘤组织中的表达及与临床病理参数的关系,同时观察患者预后与ADM、TfR1、VEGF表达的相关性。结果癌组织ADM、TfR1、VEGF表达(78.33%、73.33%、76.67%)均显著高于癌旁组织,差异均具有统计学意义(χ^(2)=48.348、34.286、51.400,P均<0.05)。骨肉瘤组织中ADM、TfR1、VEGF表达均与组织分化、是否转移以及Enneking分期有关(P<0.05),但与性别、肿瘤大小均无关(P>0.05)。ADM、TfR1、VEGF中高表达组患者2年累积存活率均显著低于低表达组(P<0.05)。ADM蛋白表达分别与TfR1、VEGF蛋白表达呈正相关(γ=0.621,γ=0.553,P均<0.05),TfR1蛋白表达与VEGF蛋白表达呈正相关(γ=0.671,P<0.05)。结论ADM、TfR1、VEGF在骨肉瘤组织中阳性表达率较高,且与骨肉瘤患者预后有关。

CD146和TfR1在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义

目的检测细胞黏附分子CD146及转铁蛋白受体(TfR1)在上皮性卵巢癌的表达,探讨其与上皮性卵巢癌临床病理学特征的关系,进一步了解上皮性卵巢癌的发病机制。方法采用免疫组化方法,检测正常卵巢组织、卵巢上皮性良性肿瘤及上皮性卵巢癌中CD146和TfR1的表达。结果 CD146及TfR1的表达水平随着正常、良性及恶性上皮性卵巢肿瘤组织的变化而升高,各组间差异有统计学意义(P<0.05);CD146及TfR1的阳性表达率随着上皮性卵巢癌国际妇科联盟(FIGO)分期升高、组织学分化程度降低而升高(P<0.05);与年龄及病理类型均无关(P<0.05)。在上皮性卵巢癌中,CD146、TfR1蛋白的阳性表达率间呈正相关(P<0.05,rs=0.532)。二者联合检测的敏感度为82.4%,特异性为75.0%。结论 CD146和TfR1的高表达与上皮性卵巢癌的发生、发展及转移有关,CD146和TfR1联合检测可以作为其诊断和判断预后的指标,并为上皮性卵巢癌的靶向治疗提供可能。

TfR1/CD71在甲状腺乳头状癌中表达的意义

目的探讨TfR1/CD71在甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达和鉴别诊断中的价值。方法复习60例PTC、32例结节性甲状腺肿伴乳头状增生(NGWPH)及18例滤泡性腺瘤(FA)患者的资料,观察HE切片并运用免疫组织化学方法检测TfR1/CD71的表达并与CK19、34βE12、HBME-1、Galectin-3和CD56的表达作比较。结果 TfR1/CD71在PTC组、NGWPH组和FA组的阳性率分别为93.3%、9.4%、11.1%,在甲状腺良恶性病变中的表达有明显差异性(P<0.05),其诊断PTC的敏感度为93.3%,特异度为90.0%,准确度为91.8%。CK19、34βE12、HBME-1、Galectin-3和CD56诊断PTC的敏感度、特异度和准确度分别为98.3%,86.0%,92.7%;71.7%,98.0%,83.6%;85.0%,92.0%,88.2%;90.0%,78.0%,84.5%;96.7%,100.0%,98.2%。结论 TfR1/CD71在PTC的诊断与鉴别诊断中具有一定的价值。

上皮性卵巢癌组织中miR-26b、CD146和TfR1的表达及临床意义

目的:探究与分析上皮性卵巢癌组织中miR-26b、CD146和TfR1的表达情况。方法:选取2015年7月至2017年2月华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院(武汉市妇幼保健院)妇产科收治的78例上皮性卵巢癌患者设为观察组、78例卵巢良性疾病患者设为对照组,检测与比较两组患者的组织miR-26b、CD146和TfR1表达情况,并比较观察组中不同FIGO分期与病理分型患者的表达情况,采用Logistic回归分析处理上述指标与上皮性卵巢癌的关系。结果:观察组患者的组织miR-26b、CD146和TfR1阳性率均高于对照组(均P<0.05),且观察组中FIGO分期较高者阳性率高于分期较低者(P<0.05),低分化患者则高于高分化和中分化患者(P<0.05),中分化患者高于高分化患者(P<0.05)。Logistic回归分析显示,上述指标均与上皮性卵巢癌有密切的关系。结论:上皮性卵巢癌组织中miR-26b、CD146和TfR1呈现高表达状态,不同FIGO分期与病理分型患者的表达情况也存在明显差异,其对于疾病的诊断和FIGO分期、病理分型的了解具有较高的临床意义。

卵巢癌组织中Numb、TFR1表达量的变化及其临床病理价值研究

目的:探讨卵巢癌组织中Numb、TFR1表达量的变化及其临床病理价值。方法:选择在本院及成都医学院附属医院、绵阳市中心医院接受根治性手术治疗的卵巢癌患者90例,同期接受手术治疗的卵巢巧克力囊肿患者115例,留取两组术中病灶组织标本分别作为卵巢癌组、卵巢巧克力囊肿组。检测卵巢病灶组织中Numb、TFR1基因、卵巢癌相关增殖、侵袭及自噬基因表达量。采用Pearson检验评估卵巢癌组织中Numb、TFR1基因表达量与癌细胞增殖、侵袭、自噬活力的相关关系。结果:卵巢癌组病灶中Numb mRNA的表达量低于卵巢巧克力囊肿组,TFR1 mRNA的表达量高于卵巢巧克力囊肿组;增殖基因C3G、Clusterin、FUNDC1、PIWIL4、TNFAIP8 mRNA的表达量高于卵巢巧克力囊肿组,Let-7i mRNA的表达量低于卵巢巧克力囊肿组;侵袭基因BRMS1、XAV939、OVCA1 mRMA的表达量低于卵巢巧克力囊肿组,CUL4A、MTA1 mRNA的表达量高于卵巢巧克力囊肿组;自噬基因FTY720、Beclin1 mRNA的表达量低于卵巢巧克力囊肿组,NAC-1 mRNA的表达量高于卵巢巧克力囊肿组。相关性分析显示,卵巢癌组织中Numb、TFR1基因表达量与癌细胞的增殖、侵袭、自噬活力直接相关。结论:卵巢癌组织中Numb基因表达量异常降低、TFR1基因表达量异常增高,与癌细胞的恶性生物学行为直接相关。

Changes of Numb and TFR1 expression in ovarian cancer tissue and their clinical pathological value

Objective:To investigate the changes of Numb and TFR1 expression in ovarian cancer tissue and their clinical pathological value.Methods:90 patients with ovarian cancer underwent radical operation in Pidu District People's Hospital,the First Affiliated Hospital of Chengdu Medical College and Mianyang Central Hospital between August 2015 and April 2018,115 patients with ovarian chocolate cyst underwent surgery during the same period,and intraoperative lesion tissue samples of the two groups were collected and enrolled in ovarian cancer group and ovarian chocolate cyst group respectively.The expressions levels of Numb,TFR1 gene as well as ovarian cancer-related proliferation,invasion and autophagy genes in ovarian lesions were detected.Pearson test was used to evaluate the correlation of Numb and TFR1 gene expression in ovarian cancer tissues with proliferation,invasion and autophagy activity of cancer cells.Results:Numb mRNA expression in lesions of ovarian cancer group was lower than that of ovarian chocolate cyst group whereas TFR1 mRNA expression was higher than that of ovarian chocolate cyst group;proliferation genes C3G,Clusterin,FUNDC1,PIWIL4 and TNFAIP8 mRNA expression were higher than those of ovarian chocolate cyst group whereas Let-7i mRNA expression was lower than that of ovarian chocolate cyst group;invasion genes BRMS1,XAV939 and OVCA1 mRMA expression were lower than those of ovarian chocolate cyst group whereas CUL4A and MTA1 mRNA expression were higher than those of ovarian chocolate cyst group;autophagy genes FTY720 and Beclin1 mRNA expression were lower than those of ovarian chocolate cyst group whereas NAC-1 mRNA expression was higher than that of ovarian chocolate cyst group.Correlation analysis showed that the Numb and TFR1 gene expression in ovarian cancer tissues were directly correlated with the proliferation,invasion and autophagy activity of cancer cells.Conclusion:The abnormal decrease of Numb gene expression and the abnormal increase of TFR1 gene expression in ovarian cancer tissues are directly correlated with the malignant biological behaviors of cancer cells.

基于转铁蛋白受体(TfR1)的肿瘤与脑部疾病靶向治疗研究进展

人转铁蛋白受体(TfR1)在不同组织器官中普遍表达,其主要功能是协助转铁蛋白在细胞和血脑屏障内外转运,维持细胞铁平衡。在肿瘤细胞中以及血脑屏障中,TfR1的表达水平明显高于正常细胞组织,因此,TfR1被认为是肿瘤靶向治疗和脑部疾病靶向治疗的重要靶点。基于TfR1靶向治疗的药物载体主要有转铁蛋白(Tf)、抗TfR1抗体、TfR1结合肽,这些生物大分子能与TfR1特异性结合,结合之后可以通过受体介导的跨胞转运机制进入细胞或穿过血脑屏障。将小分子药与这些载体偶联可以促进许多亲水性的化疗药物或神经治疗药物进入肿瘤细胞或血脑屏障,而许多中枢神经治疗性大分子则主要通过融合蛋白的方式与抗TfR1抗体连接转运进入中枢神经系统。

毕赤酵母工程菌人hepcidin的纯化及部分铁代谢活性研究

采用摇瓶培养重组毕赤酵母(Pichia pastoris)表达并分泌重组人hepcidin至胞外,经等电沉淀,凝胶过滤纯化,电泳检测样品纯度,通过Western blot检测小鼠内皮细胞中hepcidin对GFP-FPN1及TfR1表达的影响。研究发现发酵hepcidin产量达150mg/L,纯化后经Tricine-SDS-PAGE检测为单一条带,分子质量与理论质量一致,具有抗菌活性,转染内皮细胞证实重组hepcidin可影响内皮细胞GFP-FPN1及TfR1的表达,具有调节铁代谢活性,对研究hepcidin与铁代谢的相关分子吸收机制及药物开发应用奠定了基础,对潜在的医学诊断治疗具有重要意义。

不同负荷耐力训练中NO对大鼠腓肠肌铁代谢的影响

目的:研究不同负荷耐力训练对大鼠腓肠肌铁贮量、铁转运蛋白表达及NO(nitric oxide)含量的影响,阐明运动中NO对骨骼肌铁代谢的调节机制。方法:18只雄性Wistar大鼠随机分为对照组(CG)、适度运动组(MG)、运动性低血色素组(SG)。于运动5周后取材,测定腓肠肌、肝脏及骨髓铁含量,血清及肌组织NO含量;用Western Blot方法检测腓肠肌铁转运相关蛋白:二价金属离子转运体1(divalent metal transporter1,DMT1)、转铁蛋白受体1(transferrin receptor,TfR1)及膜铁转运蛋白1(ferroportin1,FPN1)表达的变化。结果:适度运动组大鼠腓肠肌铁含量和NO含量均比对照组升高(P<0.01),运动性低血色素组血清NO显著高于对照组和适度运动组;运动性低血色素组骨髓铁贮量急剧下降,肝铁变化不明显;一定范围内,大鼠腓肠肌铁含量与NO含量线性相关(r=0.81,P<0.01);与对照组相比,适度运动组和运动性低血色素组大鼠腓肠肌DMT1(IRE)、TfR1表达增加,FPN1减少(P<0.05),而DMT1(non-IRE)的表达无明显变化。结论:中等强度运动可使腓肠肌细胞膜上向细胞内转运铁的TfR1和DMT1(IRE)蛋白表达增加,而向细胞外转运铁的FPN1表达降低,增加腓肠肌铁含量。运动中腓肠肌的铁代谢可能受到NO调控。而长时间大强度的运动则会引发机体铁代谢紊乱,可能与过量NO有关。

乐孕宁口服液对妊娠缺血性贫血大鼠的作用机制研究

目的:基于多项评价指标系统研究乐孕宁口服液对妊娠期缺铁性贫血的改善作用,并初步探索其作用机制。方法:采用低铁饲料干预联合定期放血的方式建立大鼠缺铁性贫血模型,将造模成功的大鼠与雄鼠按照2:1比例合笼,使其受孕。观测不同时期大鼠的形态和外观变化,并称定不同阶段大鼠的体重。采用全自动血球分析仪检测不同时期大鼠血液的血红蛋白(Hb)、红细胞(RBC)、平均红细胞体积(MCV),红细胞压积(Hct),红细胞体积分布宽度(RDW)等各项血液学指标;测定不同分组大鼠的心肌和肝脏指数;采用ELISA法测定FEP、血清铁和组织中铁的含量,并测定血清中Fn的含量;免疫组化法检测心肌Tfr1和Tfr2表达。结果:乐孕宁口服液不同剂量给药组均可不同程度改善妊娠IDA引起的体重增长迟缓,对心肌和肝脏指数有一定的影响;可显著升高Hb、RBC、Hct、MCV指标,降低RDW;妊娠IDA给予不同剂量乐孕宁口服液后,血清和组织中铁的含量均有不同程度的升高,且血清中Fn含量也有升高趋势;免疫组化测定结果显示,给药组心肌组织中TfR1和Tfr2水平相较于Model组有一定程度的升高。结论:乐孕宁口服液可在一定程度上改善妊娠铁缺乏,若与补铁剂联合使用效果更佳,可达到事半功倍的效果。

黄鳝转铁蛋白受体1基因的克隆及表达分析

旨在研究黄鳝转铁蛋白受体1基因的功能及其组织表达特异性,采用同源克隆结合RACE技术从黄鳝肝脏中分离其转铁蛋白受体1基因,用生物信息学方法对获得的氨基酸序列进行分析,用半定量RT-PCR技术研究各组织中Tf R1表达水平。结果表明,克隆获得黄鳝Tf R1,Gen Bank注册序列号为KF819396。该c DNA全长2 839 bp,5'UTR长134 bp,3'UTR长380 bp,编码一个长774个氨基酸的多肽链。氨基酸多序列比对结果表明,黄鳝Tf R1基因推断的氨基酸序列同其他鱼类的同源性较高,达55.68%-68.41%;而同哺乳动物的Tf R1基因同源性较低。半定量RT-PCR分析表明,黄鳝Tf R1基因转录本在不同组织表达量有明显差异;在血细胞中表达量最高,而在肾脏、脾脏和小肠中表达中等,在肝脏、胃、皮肤、脑、心脏和肌肉中表达量很低。

胎盘铁转运的分子机制研究进展

铁从母体向胎儿的转运过程至今并不完全清楚。铁经过胎盘向胎儿的转运首先由位于胎盘滋养细胞母体面转铁蛋白受体1的吸收，然后来自母体的转铁蛋白再返回到母体血循环中。遗传性血色素沉着病缺陷蛋白可能参与了转铁蛋白受体1对转铁蛋白铁吸收的调节。滋养细胞顶端的铁蛋白受体也可能参与了胎盘的部分铁吸收。吸收入内吞小体里的铁很可能通过二价金属离子转运蛋白1转入胞浆。进入胞浆后，铁或以铁蛋白的形式贮存、或参与生物合成、或被转出滋养细胞，具体机制尚不清楚。铁转出滋养细胞很可能是通过位于其基底膜的膜铁转运蛋白1，但似乎还存在其它的转出路径。另外，参与胎盘输出铁氧化的铜氧化酶可能与膜铁转运辅助蛋白和血浆铜蓝蛋白都不同，且目前研究定位也不清楚。至于在滋养细胞基底面发现的转铁蛋白受体1、金属离子转运蛋白1、铁蛋白和遗传性血色素沉着病缺陷蛋白等是否参与胎盘铁的输出目前尚无支持的证据。因此。对于胎盘铁转运过程的理解还有许多工作要做。

亚铁螯合酶对人多发性骨髓瘤RPMI8226细胞的影响及作用机制研究

目的探讨亚铁螯合酶(FECH)对人多发性骨髓瘤RPMI8226细胞的影响及作用机制。方法设计并合成靶向FECH的短发夹RNA(shRNA),转染至RPMI8226细胞,并用Western blot法验证。采用CCK-8法测定FECH shRNA RPMI8226细胞和空载对照RPMI8226细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞活性氧(ROS)产生情况,Western blot法检测细胞铁调节蛋白2(IRP2)、转铁蛋白受体1(TfR1)、过氧化氢酶(Catalase)的表达情况。结果与空载对照RPMI8226细胞相比,FECH shRNA RPMI8226细胞增殖能力减弱(P<0.05),ROS产生增多(P<0.05),IRP2、TfR1表达上调(均P<0.05),Catalase表达下调(P<0.05)。结论FECH对维持RPMI8226细胞氧化还原的动态平衡起重要作用。FECH表达受抑制后,RPMI8226细胞IRP2、TfR1表达上调,细胞内铁过载,ROS产生增多,同时抗氧化蛋白Catalases表达下调,细胞抗氧化能力下降,引发细胞氧化应激,抑制细胞增殖。

活血化瘀中药通过抑制铁死亡对MCAO大鼠脑缺血损伤的保护作用机制

目的:探讨活血化瘀中药丹红注射液通过抑制铁死亡保护大鼠脑缺血损伤机制。方法:雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、丹红组(丹红注射液,0.72 mL/kg)、阳性药组(金纳多注射液,0.45 mL/kg)。通过大脑中动脉闭塞(MCAO)法制备脑缺血模型,术后24 h进行指标检测。神经功能评分检测神经功能;TTC法检测脑梗死率;苏木素-伊红染色和尼氏染色观察大脑皮层组织形态;生化检测组织铁(Fe)含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)活性;RT-qPCR、Western Blot分别检测溶质载体家族7成员11(SLC7A11)抗体、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)、转铁蛋白受体(TFR1)抗体、转铁蛋白(TF)mRNA和蛋白表达量。结果:与模型组比较,丹红组脑梗死率和神经功能评分显著降低(P<0.01,P<0.05),病理学改变减轻,Fe含量显著下降(P<0.01),GSH-PX、SOD活性显著增加(P<0.01),SLC7A11、GPX4 mRNA和蛋白相对表达量显著增加(P<0.01,P<0.05),TF、ACSL4 mRNA和蛋白及TFR1 mRNA相对表达量显著减少(P<0.01,P<0.05)。结论:活血化瘀中药可能通过抑制铁死亡抗脑缺血。

TNF-α诱导的信号转导中乙酰化蛋白质全谱及其功能的探索

通过将体内稳定同位素标记细胞培养技术(AACT/SILAC)与LC-MS/MS联用,对哺乳动物细胞中TNF-α/NF-κB信号通路相关蛋白在TNF-α及TSA存在情况下乙酰化变化情况进行了研究.在TSA协同处理的、TNF-α刺激的细胞中鉴定到3个乙酰化蛋白,其中核糖体蛋白L4(60SRibosomal Protein L4,RPL4)已被报道存在乙酰化的后修饰,转铁蛋白受体1(Transferrin Receptor Protein 1,TfR1)和凋亡诱导因子3(ApoptosisInducing Factor,Mitochondrion-associated,3,AIFM3)尚未见报道.