MOR106通过阻断JAK2/STAT3信号通路抑制IL-17C介导的Tfh细胞分化来减轻特应性皮炎小鼠炎症

目的 探讨特应性皮炎(AD)模型中白细胞介素17C(IL-17C)介导滤泡辅助性T(Tfh)细胞分化的意义。方法BALB/c小鼠分为对照组、AD模型组、低剂量MOR106处理组、高剂量MOR106处理组,每组8只。除对照组外,其余各组均用2,4-二硝基氯苯(DNCB)处理建立AD模型,低剂量和高剂量MOR106处理组分别给与5 mg/kg或10 mg/kg MOR106(抗IL-17C huIgG1)处理。通过流式细胞术分析小鼠外周血中Tfh细胞亚群的分化,并采用Western blot法检测皮肤组织中Janus激酶2/信号转导子与转录激活子3(JAK2/STAT3)信号通路蛋白表达。结果 与对照组相比,AD模型组皮炎严重程度评分、两耳之间的质量差异、脾脏质量、脾脏指数均显著增加,AD组小鼠的Tfh细胞亚群显示去调节分化,导致外周血中CD4^(+)CXC趋化因子受体5(CXCR5)^(+)γ干扰素(IFN-γ)^(+)Tfh1细胞、 CD4^(+)CXCR5^(+)IL-17A^(+)Tfh17细胞和CD4^(+)CXCR5^(+)IL-21^(+)Tfh21细胞的百分比显著增加,以及CD4^(+)CXCR5^(+)IL-10^(+)Tfh10细胞和CD4^(+)CXCR5^(+)叉头盒转录因子3(FOXP3)^(+)滤泡调节性T(Tfr)细胞的百分比显著减少,磷酸化的JAK2(p-JAK2)、 p-STAT3蛋白水平显著增加;与AD模型组相比,MOR106处理组皮炎严重程度评分、两耳之间的质量差异、脾脏质量、脾脏指数均显著降低。MOR106处理有效地逆转AD小鼠外周血中Tfh1细胞、 Tfh10细胞、 Tfh17细胞、 Tfh21细胞和Tfr细胞的这些变化趋势。与AD组相比,低剂量和高剂量MOR106处理组小鼠p-JAK2、 p-STAT3蛋白水平显著降低。结论 MOR106通过阻断JAK2/STAT3信号通路、抑制IL-17C介导的Tfh细胞分化来减轻AD小鼠炎症反应。

益气健脾生津方对气阴两虚证原发性干燥综合征患者Tfr/Tfh细胞平衡及自噬水平影响的研究

目的观察益气健脾生津方对气阴两虚证原发性干燥综合征患者Tfr/Tfh细胞平衡及自噬表达水平的影响,探讨益气健脾生津方可能治疗原发性干燥综合征的干预机制。方法收集安徽省中医院风湿免疫科气阴两虚证的原发性干燥综合征患者60例,随机数字表法分为实验组和对照组,每组各30例。对照组给予硫酸羟氯喹0.2 g bid;实验组在对照组治疗基础上给予益气健脾生津方口服,均连服12周。流式细胞仪检测外周血Tfh细胞、Tfr细胞比例;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-10、IL-21、IL-6水平;免疫印迹法(Western blot)检测Atg5、Beclin1、LC3-Ⅱ/Ⅰ蛋白表达水平;荧光定量PCR法(qPCR)检测Atg5、Beclin1、LC3 mRNA表达水平;统计治疗前后炎症指标、干燥三项、ESSPRI、ESSDAI及中医证候积分。结果1)与治疗前相比,治疗后2组角膜荧光染色评分下降,泪膜破裂时间延长,静态唾液流率增加,相较于对照组,实验组角膜荧光染色评分显著下降,静态唾液流率显著增加(P<0.05);2)与治疗前相比,治疗后2组第4、8、12周中医症候评分、ESSDAI和ESSPRI动态降低,相较于对照组,实验组在治疗后各项积分明显下降(P<0.05);3)与治疗前相比,治疗后2组外周血IL-21、IL-10均降低,相较于对照组,实验组IL-21、IL-10表达降低,IgG降低(P<0.05);4)与治疗前相比,治疗后2组外周血Tfh细胞、Tfr细胞比例、Tfr/Tfh比值均降低,相较于对照组,实验组Tfr细胞显著降低(P<0.01);5)与治疗前相比,治疗后2组外周血CD4+T细胞Atg5、Beclin1、LC3-Ⅱ/Ⅰ蛋白显著降低,外周血CD4+T细胞Atg5、Beclin1、LC3 mRNA显著降低,相较于对照组,实验组自噬蛋白、mRNA表达均显著降低(P<0.01)。结论益气健脾生津方有效重建Tfr/Tfh细胞平衡,调节细胞因子,抑制自噬活性,具备减轻临床症状、延缓疾病活动、改善泪腺、涎腺分泌的功能。

早发性卵巢功能不全患者外周血Tfh占比、功能相关细胞因子表达变化及其与性激素水平的相关性

目的观察早发性卵巢功能不全(POI)患者外周血滤泡辅助性T细胞(Tfh)占比、功能相关细胞因子表达变化,并分析其与性激素水平的相关性。方法POI患者29例(观察组),同期健康体检者31例(对照组),采用流式细胞术检测全血Tfh占比,免疫印迹实验检测外周血单个核细胞(PBMC)CXCR5、BCL-6蛋白,酶联免疫吸附法检测血清IL-6、IL-21,电化学发光法检测血清促卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、泌乳素、孕酮、睾酮、雌二醇(E_(2))、抗缪勒管激素(AMH)水平,Spearman相关分析法分析Tfh、CXCR5蛋白、BCL-6蛋白、IL-6、IL-21与性激素的相关性。结果与对照组比较,观察组全血Tfh占比增加,血清IL-6、IL-21水平升高,PBMC CXCR5、BCL-6蛋白表达升高,血清FSH、LH水平升高,血清E_(2)、AMH水平降低,P均<0.05。全血Tfh占比与血清FSH、LH水平呈正相关(r分别为0.75、0.63,P均<0.05),与血清E_(2)、AMH水平呈负相关(r分别为-0.35、-0.82,P均<0.05);血清IL-6水平与血清FSH、LH水平呈正相关(r分别为0.75、0.62,P均<0.05),与血清E_(2)、AMH水平呈负相关(r分别为-0.47、-0.77,P均<0.05);血清IL-12水平与血清FSH、LH水平呈正相关(r分别为0.68、0.56,P均<0.05),与血清E_(2)、AMH水平呈负相关(r分别为-0.25、-0.73,P均<0.05);PBMC BCL-6蛋白表达与血清FSH、LH水平呈正相关(r分别为0.73、0.60,P均<0.05),与血清E_(2)、AMH水平呈负相关(r分别为-0.27、-0.76,P均<0.05);PBMC CXCR5蛋白表达与血清FSH、LH水平呈正相关(r分别为0.72、0.58,P均<0.05),与血清E_(2)、AMH水平呈负相关(r分别为-0.27、-0.70,P均<0.05)。结论POI患者全血Tfh占比增加,PBMC CXCR5、BCL-6蛋白表达升高,血清IL-6、IL-21、FSH、LH水平升高及E_(2)、AMH水平降低,Tfh及其相关因子与性激素呈正相关或负相关,Tfh及其相关因子可能参与了POI发生过程。

基于营卫学说探究类风湿关节炎与Tfh/Tfr细胞失衡的相关性

目的:从营卫学说角度阐述滤泡辅助性T细胞(Tfh)/滤泡调节性T细胞(Tfr)失衡与类风湿关节炎中医病机之间的联系。方法:选取2021年9月至2022年12月在南京中医药大学附属中西医结合医院风湿免疫科就诊的门诊及住院类风湿关节炎患者62例,搜集患者一般情况、病史资料、中医辨证信息及血清样本。检测符合入选标准患者的空腹Tfh细胞比例、Tfr细胞比例、白细胞介素(IL)-21水平,描述营卫失调证候积分、Tfh细胞比例、Tfr细胞比例、Tfh/Tfr细胞比值与IL-21在类风湿关节炎患者中的分布,分析营卫失调证候积分、Tfh细胞比例、Tfr细胞比例、Tfh/Tfr细胞比值、IL-21等指标之间的相关性。结果:类风湿关节炎患者营卫失调证候积分与年龄、病程、红细胞沉降率、免疫球蛋白A、关节压痛数、健康评估问卷评分、28个关节病情活动指数评分呈正相关(P<0.05);类风湿关节炎患者的Tfh/Tfr细胞比值、IL-21与营卫失调证候积分呈正相关(P<0.05),Tfr细胞与营卫失调证候积分呈负相关(P<0.05)。结论:营卫失和是类风湿关节炎发生、发展的基本病机,影响患者病情。营卫失和可与Tfh/Tfr细胞失衡对应,Tfh/Tfr细胞平衡可能属于营卫和调在现代理论下的具象体现。

类风湿关节炎患者外周血TFH细胞TIGIT和PD1表达及意义

目的探讨含T细胞免疫球蛋白和酪氨酸免疫抑制受体结构域蛋白(TIGIT)和程序性死亡分子(PD1)在类风湿关节炎(RA)患者外周血滤泡辅助性T(TFH)细胞上的表达及其临床意义。方法应用流式细胞仪检测79例RA患者(RA组)和45例对照者(HC组)外周血TFH细胞TIGIT和PD1阳性的百分率和平均荧光强度(MFI),并进行比较,分析其与RA实验室检查指标的相关性。结果①与HC组相比,RA组仅PD1^(+)TFH细胞百分率和PD1表达MFI增高,差异有统计学意义(P<0.01)。②RA组TIGIT^(+)PD1^(-)TFH细胞百分率低于HC组(P<0.01);RA组TIGIT^(+)PD1^(+)TFH细胞百分率、PD1表达MFI和TIGIT^(-)PD1^(+)TFH细胞百分率、PD1表达MFI高于HC组(P<0.05)。③RA组外周血TIGIT^(+)PD1^(+)TFH细胞PD1表达MFI与类风湿因子(RF)呈正相关(P<0.05),TIGIT^(-)PD1^(+)TFH细胞百分率、TIGIT^(-)PD1^(+)TFH细胞和TIGIT^(+)PD1^(+)TFH细胞PD1表达MFI均与阳性的RF呈正相关(P<0.05)。④RA组外周血TIGIT^(+)PD1^(-)TFH细胞百分率与血沉(ESR)呈负相关(P<0.05),TIGIT^(-)PD1^(+)TFH细胞百分率与ESR呈正相关(P<0.05),TIGIT^(+)PD1^(+)TFH细胞百分率与淋巴细胞数量(Lym)呈负相关(P<0.05),TIGIT^(+)PD1^(+)TFH细胞PD1表达MFI与淋巴细胞百分比(Lym%)呈负相关、与中性粒细胞数量(Net)、中性粒细胞百分比(Net%)、中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、系统性免疫炎症指数(SII)、衍生中性粒细胞与淋巴细胞比值(dNLR)、ESR、C-反应蛋白(CRP)呈正相关(P<0.05),TIGIT^(-)PD1^(+)TFH细胞PD1表达MFI与Net、ESR、CRP呈正相关(P<0.05)。⑤RA组外周血TIGIT^(+)PD1^(-)TFH细胞百分率与疾病活动性评分(DAS28)-ESR呈负相关(P<0.05),TIGIT^(+)PD1^(+)TFH细胞PD1表达MFI和TIGIT^(-)PD1^(+)TFH细胞PD1表达MFI均与DAS28-ESR、DAS28-CRP、关节压痛数(PJC)、关节肿痛数(SJC)、视觉模拟评分(VAS)呈正相关(P<0.05)。⑥TIGIT^(+)PD1^(-)TFH细胞百分率降低和TIGIT^(+)PD1^(+)TFH细胞百分率升高为RA发病的危险因素。结论RA患者外周血TIGIT^(+)PD1^(-)TFH细胞百分率降低、TIGIT^(+)PD1^(+)TFH和TIGIT^(-)TPD1^(+)TFH细胞百分率升高,且与该疾病的抗体产生、炎症程度及活动性有关。

原发性干燥综合征患者血中Breg、Tfh及Tfr细胞的表达及意义

目的:研究原发性干燥综合征(pSS)患者外周血中Breg、Tfh及Tfr细胞表达变化及意义。方法:选取2022年3月至2022年7月于包头医学院第一附属医院新诊断为pSS且符合筛选标准的患者20例作为试验组,分别于治疗前与治疗3~6月后收取外周血。同时收取年龄、性别匹配的健康人外周血20例作为对照组。分别收集试验组患者治疗前后疾病活动度ESSDAI、ESSPRI评分、血沉(ESR)、C-反应蛋白(CRP),免疫球蛋白G(IgG)等相关化验结果。采取流式细胞计数的方法观察CD19^(+)CD24^(high)CD27^(+)Breg、CD4^(+)CXCR5^(+)Tfh及CD4^(+)CXCR5^(+)FoxP3^(+)Tfr细胞表达。使用SPSS26进行数据分析。结果:试验组外周血Breg细胞、Tfh细胞较对照组低(P<0.05);试验组外周血中Tfr与对照组差异无统计学意义(P>0.05);试验组外周血中Tfr/Tfh比值较对照组高(P<0.05);治疗后外周血Breg细胞数量较治疗前增加(P<0.05);治疗后外周血Tfh、Tfr细胞数量较治疗前降低(P<0.05);治疗后外周血中Tfr/Tfh比值与治疗前无显著差异。结论:外周血Breg、Tfh可能是提示pSS疾病进展的有效指标,为临床监测疾病进展、分期治疗提供新的思路。而Tfr、Tfr/Tfh参与pSS的发病的机制可能需要更进一步的研究去证实。

流式细胞术检测肉桂活性成分对Tfh细胞的影响

滤泡辅助性T细胞(Follicular helper CD4 T cells,Tfh)是重要的CD4^(+)T淋巴细胞亚群之一,与多种疾病的发生和发展密切相关,其参与疾病发生的机制尚有待深入研究。该研究将分离小鼠脾脏细胞,应用贝克曼Moflo分选系统分选出CD4^(+)T淋巴细胞。使用细胞因子刺激Tfh细胞分化并检测其分化比例,同时采用流式细胞术检测和分析肉桂活性成分对滤泡辅助性T细胞分化的影响。结果表明,贝克曼Moflo XDP分选系统可以显著提高CD4^(+)T淋巴细胞的纯度,且肉桂活性成分可以显著抑制Tfh细胞分化。为新药在Tfh细胞的开发提供一定实验基础,并且为研发肉桂作为新的增强免疫疗效药物提供可靠的实验依据。

重症肌无力患者外周血AIRE、Tfh细胞和Tfr细胞与病情严重性相关分析

目的探讨自身免疫性调节因子(AIRE)、滤泡辅助性T(Tfh)细胞和滤泡调节性T(Tfr)细胞与重症肌无力(MG)患者病情严重程度的相关性。方法收集2015-12—2016-4第四军医大学唐都医院收治的MG患者22例,根据临床表现分为全身型MG(GMG)和眼肌型MG(OMG);同期选取健康体检中心查体者10名作为健康对照。收集MG患者详细临床资料,包括美国MG协会(MGFA)分型及定量MG(QMG)评分。通过流式细胞术分析AIRE阳性细胞比例及Tfh/Tfr比值。结果 (1)AIRE表达在各组间比较差异具有统计学意义(P<0.01)。GMG组和OMG组AIRE表达均较对照组降低(P<0.01,P<0.05),而GMG组与OMG组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。(2)Tfh/Tfr比值在各组间比较差异具有统计学意义(P<0.01)。GMG组和OMG组Tfh/Tfr比值均高于对照组(P<0.01,P<0.05),且GMG组高于OMG组(P<0.05)。(3)MG患者AIRE表达与MGFA分型及QMG评分呈负相关(r=-0.517,P<0.05;r=-0.616,P<0.01),Tfh/Tfr比值与MGFA分型和QMG评分呈正相关(r=0.761,r=0.581,均P<0.01)。结论 AIRE、Tfh/Tfr比值与MG的病情严重程度有一定的相关性,并可能参与了MG的发病。

甲氨蝶呤对胶原诱导的关节炎小鼠Tfh细胞的影响及其机制研究

目的:研究甲氨蝶呤对胶原诱导关节炎(CIA)小鼠Tfh细胞的影响,初步探讨其治疗RA的可能免疫机制。方法:建立CIA小鼠关节炎模型,随机分为对照组、模型组、甲氨蝶呤组和布洛芬组。采用免疫组化方法检测脾脏中CXCR5+Tfh细胞的含量;流式细胞术检测脾脏中Tfh细胞的数量及表型;ELISA法检测血清中IL-21和IL-6水平;RT-PCR法检测滑脾脏中转录因子Bcl-6和IL-21的相对表达量。结果:与模型组相比,甲氨蝶呤组及布洛芬组小鼠关节的肿胀程度减轻,AI评分降低(P<0. 05);脾脏中Tfh细胞数量、转录因子IL-21相对表达量及血清中IL-21和IL-6水平显著减少(P<0. 05)。结论:甲氨蝶呤可能通过调节转录因子IL-21、血清细胞因子IL-21和IL-6表达水平,调节Tfh的数量及表型和分布,从而影响RA的转归。

调控BCL-6信号干预Tfh细胞分化:治疗炎症性肠病新策略

自滤泡辅助性T细胞(follicular helper T cells,Tfh细胞)发现以来,大量证据表明与炎症性肠病的发病有关.Tfh细胞及其亚群分泌不同细胞因子皆可在炎症性肠病的发病过程中扮演重要角色,为靶向治疗炎症性肠病提供重要思路.BCL-6信号作为Tfh细胞分化途径上的关键性转录因子,可调控Tfh细胞的增殖、分化.在BCL-6信号缺乏时无法产生Tfh细胞,且BCL-6信号也可通过正性调控、负性调控以及表观遗传学等多种途径有效调控Tfh细胞的分化.在BCL-6信号调控异常时可导致Tfh的分化异常导致炎症性肠病的发生.因此可以通过干预BCL-6信号来调控Tfh细胞分化来作为治疗炎症性肠病新的有效靶点.

肝移植患者外周血Tfh细胞特征的初步研究

目的检测肝移植术前和术后患者外周血滤泡性辅助性T细胞(Tfh)及其分子表达特点,探讨其在肝移植免疫中的作用。方法肝移植术后患者及健康对照各20例,其中移植术后肝功能稳定者13例,对其进行断面研究;余7例病例资料完整,进行随访研究。应用流式细胞仪检测所有入组者的Tfh细胞频率,并对随访患者进行术后1月的动态监测,同时检测其丙氨酸转氨酶(ALT)水平。结果与移植术前相比,移植术后患者外周血CD4+CXCR5+Tfh和CD4+CXCR5+PD-1+细胞频率明显升高(P<0.05),CD4+CXCR5+ICOS+细胞虽有上升趋势,但无统计学意义。随访发现移植术后肝功能稳定患者CD4+CXCR5+Tfh水平在移植术后明显上升,1周后达峰值随后下降,其ALT水平也在术后第10天达到峰值后降低。随访期间1例患者发生急性排斥反应,其CD4+CXCR5+Tfh水平与ALT水平变化趋势一致。肝功能稳定组与健康对照组相比,CD4+CXCR5+Tfh、CD4+CXCR5+PD-1+和CD4+CXCR5+ICOS+细胞频率均明显升高(P<0.05)。结论外周血CD4+CXCR5+Tfh细胞在肝移植后表达上调,可能参与了肝移植术后的免疫调节。

与滤泡辅助性T(Tfh)细胞分化发育相关的主要转录因子

滤泡辅助性T(Tfh)细胞是一群定位于淋巴滤泡的辅助性T细胞,表型为CD4+CXCR5+ICOS+PD1+,是主要负责辅助B细胞产生抗体的T细胞亚群。多种转录因子对初始T淋巴细胞向各亚群细胞分化至关重要,包括B细胞淋巴瘤因子6(Bcl-6)、淋巴增强结合因子1(LEF-1)、T细胞因子1(TCF-1)、活化性T细胞的核因子(NFAT)、无刚毛鳞甲复合体同源物2(Ascl2)、干扰素调节因子4(IRF4)、细胞肌腱膜纤维肉瘤因子(c-Maf)、B淋巴细胞诱导成熟蛋白1(Blimp1)、碱性亮氨酸拉链转录因子ATF样蛋白(BATF)和信号转导与转录激活子(STAT)等。

AIHA患者外周血Tfh/Treg细胞的检测及临床意义

目的研究自身免疫性溶血性贫血（AIHA）患者外周血CD4＋CXCR5＋T细胞（Tfh）及CD4＋CD25＋FoxP3＋ T细胞（Treg）数量和比例及相关细胞因子的变化，探讨其在AIHA发病机制中的作用。方法选择30例AIHA患者，分离外周血单核细胞（PBMC），采用流式细胞术（FCM）检测Tfh及Treg细胞的数量，ELISA法测定血清中IL-21，IL-10的水平及IL-21／IL-10比值变化，与同期选择的健康对照组比较。结果AIHA患者PBMC中Tfh细胞及IL-21因子的水平均高于健康对照组，而Treg细胞及IL-10水平低于对照组，差异均有统计学意义（P〈0．05），Tfh／Treg与IL-21／IL-10比值均升高（P〈0．05），且IL-21／IL-10比值变化与患者病情呈正相关（P〈0．05）。结论Tfh及Treg细胞的比例异常及相关细胞因子IL-21／IL，10比值变化可能参与AIHA患者的免疫紊乱机制。

人滤泡辅助性T细胞(Tfh)上CD226分子的表达格局

目的:用免疫荧光染色和流式细胞术(FCM)分析鉴定人滤泡辅助性T(Tfh)细胞,对外周血和扁桃体来源的Tfh上CD226分子的表达格局进行研究,采用免疫组化染色的方法,检测异位淋巴组织来源的生发中心中CD226分子的表达情况。方法:采用密度梯度离心法分离人外周血PBMC;扁桃腺经研磨、200目滤网过滤获取扁桃腺细胞,对两种细胞采用不同荧光素标记的抗CXCR5、CD4及CD226抗体进行染色和FCM分析。常规制备类风湿性关节炎(RA)关节滑膜活检组织石蜡切片,采用免疫组化的方法分析CD226分子的表达格局。结果:外周血及扁桃腺Tfh细胞上可以检测到CD226分子,外周血Tfh上CD226阳性率为(91.88±0.52%),MFI值为201.49±6.2;扁桃腺Tfh上CD226表达阳性率为(90.81±0.69%),MFI值为230.81±8.4,表达密度稍高于其他CD4+T细胞。RA患者关节滑膜组织可以观察到异位生发中心(GC),并检测到CD226分子的表达。结论:健康人外周血、扁桃腺及RA患者关节滑膜组织中存在不同比例的Tfh细胞,其膜上CD226分子的表达具有独特的格局,该结果为进一步研究其功能提供了思路。

神香草对哮喘小鼠体内Tfh细胞的改善作用

目的观察神香草预处理对哮喘小鼠的保护作用,并探讨其可能机制。方法将32只Balb/c小鼠随机分为对照组、哮喘组、地塞米松组及神香草组4组,每组8只。除对照组外,其余3组制备哮喘模型。哮喘组于第1天、第15天腹腔注射0.2 mL致敏液,第22天雾化吸入1%卵清蛋白(OVA)溶液,每次30 min,每周3次,连续8周。地塞米松组和神香草组分别于OVA激发前1 h给予地塞米松0.005 mg/10 g和神香草提取液0.04 g/10 g灌胃,每日1次,连续8周。对照组以生理盐水代替OVA处理。8周后,取材,流式细胞术检测外周血中CD4^+CXCR5^+/CD4^+和CD4^+CXCR5^+ICOS^+/CD4^+CXCR5^+的比例,Real-time PCR检测各组肺组织中BCL-6、CXCR5、ICOS、ICOSL和IL-21 mRNA的表达,并观察肺组织病理学改变。结果与哮喘组比较,神香草组外周血CD4^+CXCR5^+/CD4^+和CD4^+CXCR 5^+ICOS^+/CD4^+CXCR5^+的比例减少,并且肺组织中BCL-6、CXCR5、ICOS、ICOSL和IL-21 mRNA的表达亦明显降低(均P<0.05)。结论神香草可能通过减少Tfh细胞的数量和影响其相关分子的表达而在慢性哮喘治疗中发挥作用。

初发性类风湿关节炎患者外周血中Tfh细胞及其相关细胞因子的临床意义

滤泡辅助性T细胞（T follicular helper cells,Tfh细胞）是近年来新发现的,真正意义上辅助B细胞功能的T细胞亚群,其辅助B细胞活化、增殖、分化和分泌免疫球蛋白。在类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis,RA）中,B细胞分泌大量高亲和力抗体可诱发炎性反应,致关节损伤。

重症肌无力患者外周血中Tfh细胞表达的变化及其意义

目的:探讨重症肌无力(MG)患者外周血中Tfh细胞及相关细胞因子在MG发病中的作用。方法:收集40例MG患者和20例健康正常人外周血标本。采用流式细胞术检测外周血单个核细胞(PBMC)中Tfh细胞比例;ELISA法检测血清中IL-21浓度;放射免疫沉淀法检测血清中抗乙酰胆碱受体抗体(AChR-Ab)滴度,并与Tfh细胞比例和IL-21水平进行相关性分析。结果:MG患者外周血中Tfh细胞比例、IL-21水平均较健康对照组显著增高,且与疾病的严重程度呈正相关;MG患者血清中抗AChR-Ab滴度较健康对照组显著增高,与Tfh细胞比例及IL-21水平呈正相关。结论:Tfh细胞参与了MG的病理过程,与自身抗体产生具有密切关系。

补肾健脾-利湿化瘀方对IgA肾病模型大鼠Tfh细胞通路影响的研究

目的通过观察IgA肾病模型大鼠小肠黏膜Tfh通络ICOS、CXCR5、Bcl-6、IL-21的变化,探讨补肾健脾-利湿化瘀方对IgA肾病的治疗靶点。方法采用陆慧瑜改良法制备IgA肾病大鼠模型,随机分为空白组、模型组、洛丁新组、补肾健脾-利湿化瘀方(中药高、中、低)剂量组,各15只。给药7周后检测各组小肠黏膜ICOS、CXCR5、Bcl-6、IL-21的表达及肾脏病理的变化。结果与空白组比较,模型组的Tfh相关细胞在小肠黏膜中表达均显著增强(P<0.05),IgA在肾脏沉积明显增多;与模型组大鼠比较,各治疗组Tfh相关细胞在小肠黏膜表达明显减少,IgA在肾脏沉积明显减少,中药中剂量组减少最为显著(P<0.05)。结论补肾健脾-利湿化瘀方通过抑制小肠黏膜生发中心Tfh的过度活化,使IgA浆细胞生成减少,从而缓解肾脏损伤。

B2型胸腺瘤胸腺Tfr细胞和Tfh细胞与重症肌无力的相关性研究

探讨B2型胸腺瘤胸腺Tfr细胞和Tfh细胞与重症肌无力的相关性及对疾病诊治的决策意义。收集了2005年5月～2015年12月胸外科行胸腺切除术27例住院患者的临床及病理资料。其中合并重症肌无力(MG)12例,不合并MG15例,采用免疫荧光染色方法检测并分析两组胸腺生发中心中Tfr和Tfh细胞数及比值。结果,Tfr在两组间比较差异有统计学意义(P<0.01),B2型胸腺瘤合并MG组Tfr细胞低于对照组;Tfh在两组间比较差异有统计学意义(P<0.01),B2型胸腺瘤合并MG组Tfh细胞高于对照组;Tfh/Tfr比值在两组间比较有统计学意义(P<0.01),B2型胸腺瘤合并MG组Tfh/Tfr高于对照组。因此,B2型胸腺瘤合并MG患者胸腺中的Tfr细胞及Tfh细胞的异常,可能对生发中心形成免疫调控有一定作用,可能参与了MG的发病,从一个侧面加以证实以往研究MG的免疫调控机制,对疾病诊治提供了多维度的决策选择。

不规则抗体阳性患者外周血Tfh、Tfr细胞亚群检测及临床意义

目的研究不规则抗体阳性患者外周血Tfh1、Tfh2、Tfh17、Tfr细胞亚群及相关因子ILN-γ、IL-4、IL-17与IL-10的变化,探讨Tfh细胞亚群平衡在血型抗原同种免疫机制中的作用及临床意义。方法收集定期输血的32例不规则抗体阳性患者作为实验组,同时随机选择32例不规则抗体筛查阴性患者作为对照组,分别采集实验组与对照组患者外周血并分离单核细胞(PBMC),采用流式细胞术(FCM)检测Tfh1、Tfh2、Tfh17、Tfr细胞亚群比例,ELISA法测定细胞因子ILN-γ、IL-4、IL-17、IL-10变化,并分析Tfh1/Tfh2、Tfh17/Tfr、ILN-γ/IL-4、IL-17/IL-10比值变化与不规则抗体总效价的相关性。结果与对照组比较,实验组外周血Tfh2亚群比例升高,Tfr亚群比例降低,差异有统计学意义(P<0.05);两组Tfh1、Tfh17细胞亚群比例无显著性差异(P>0.05);与对照组比较,实验组细胞因子IL-10降低,IL-4升高,差异有统计学意义(P<0.05),两组细胞因子ILN-γ与IL-17无显著性差异(P>0.05);相关性分析表明Tfh17/Tfr、IL-17/IL-10比值变化与不规则抗体效价呈正相关(r=0.59、0.75,P<0.05);外周血Tfh1/Tfh2、ILN-γ/IL-4比值变化与不规则抗体效价呈负相关(r=-0.48、-0.77,P<0.05)。结论不规则抗体阳性患者外周血Tfh1/Tfh2、Tfh17/Tfr细胞亚群比例失调及细胞因子ILN-γ/IL-4、IL-17/IL-10比值变化可能与血型同种免疫机制相关,该研究可为定期输血患者血型不规则抗体的预防提供新思路,具有重要临床意义。