糖皮质激素对支气管哮喘小鼠Th 17细胞的调节作用

目的探讨地塞米松对支气管哮喘小鼠辅助性T细胞(Th)17表达的影响。方法 36只BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组和地塞米松组,每组12只。建立哮喘小鼠模型;采用肺功能仪测定气道呼气阻力(Re);HE染色观察肺组织炎症改变;收集BALF进行细胞计数;酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺匀浆中IL-17和IL-23水平;流式细胞术检测脾脏单个核细胞中Th17细胞比例。结果地塞米松组Re及气道炎症较哮喘组明显减轻;哮喘组IL-17和IL-23水平明显高于对照组,地塞米松组明显低于哮喘组;哮喘组Th17细胞显著高于对照组,地塞米松组则明显低于哮喘组。结论地塞米松可下调哮喘小鼠中Th17细胞数量及相关细胞因子IL-17和IL-23水平,减轻哮喘小鼠的气道炎症。

Th 17/Treg、IL-17在近交系BALB/C小鼠大肠癌肝转移模型中表达及意义

目的研究Th 17/Treg、IL-17在近交系BALB/C小鼠大肠癌肝转移模型中的表达及意义。方法采用近交系BALB/C小鼠脾内种植法建立大肠癌肝转移模型,用免疫组化方法检测肝转移瘤及血清中IL-17、Treg细胞和Th 17细胞的分布,比较其在肝转移初期和晚期的差别。结果晚期结肠癌肝转移瘤组织中Th 17低于早期肝转移瘤,P<0.05,差异具有统计学意义,而IL-17、Treg细胞在晚期肝转移瘤组织中高于早期,P<0.05,差异具有统计学意义。结论 IL-17、Th 17/Treg细胞在大肠癌肝转移瘤中的表达,可能对评估病情进展有一定意义。且早期肝转移瘤中Th 17细胞增高,并具有抗肿瘤活性,这可能是大肠癌免疫治疗的新策略。

杞精明目汤联合人工泪液对肝肾阴虚型结膜松弛症患者泪液中Th17相关细胞因子的影响

目的:观察中药杞精明目汤联合人工泪液治疗对肝肾阴虚型结膜松弛症(CCH)患者泪液中Th17相关细胞因子的改变。方法:收集56例56眼Ⅱ-Ⅲ级肝肾阴虚型CCH患者,随机分为治疗组(杞精明目汤联合人工泪液)26例26眼和对照组(单纯人工泪液)30例30眼,疗程1 mo,观察治疗前后患者的国际眼表疾病指数(OSDI)、泪膜破裂时间(BUT)、泪河高度(TMH)、球结膜充血指数。采集治疗前后CCH患者的泪液,通过流式免疫荧光发光法对患者泪液中Th17相关细胞因子进行检测和分析。结果:治疗组与对照组CCH患者治疗后OSDI、BUT、球结膜充血指数均较治疗前均明显改善(均P<0.01);治疗后治疗组患者TMH较治疗前显著降低(P<0.01),对照组患者治疗前后TMH无差异(P=0.41)。治疗组CCH患者在治疗后泪液中Th17相关细胞因子IL-17A、IL-22、IFN-γ、IL-17F、IL-1β水平较治疗前明显降低(均P<0.01),且治疗组的变化更为显著(均P<0.05);而对照组治疗前后泪液中Th17相关细胞因子无差异(均P>0.05)。治疗后两组CCH患者泪液中IL-6、TNF-α均较治疗前降低(均P<0.05),但治疗组的变化更为显著(均P<0.01)。结论:杞精明目汤联合人工泪液治疗可有效改善肝肾阴虚型结膜松弛症患者眼表微环境,提高泪膜稳定性,抑制眼表炎症,可能与其降低泪液中Th17相关细胞因子的分泌相关。

基于正邪理论探讨Th17/Treg细胞在慢性心衰中的作用

慢性心力衰竭是多种心血管疾病的终末期阶段,心肌损伤后,免疫介导的Th17、Treg细胞在心衰的发病机制具有关键作用,通过分泌炎症因子,导致心肌纤维化、心室重塑。中医正邪理论内涵丰富,对于认识Th17/Treg细胞与心衰的发展及相互作用具有指导意义,隶属于正邪理论范畴,即Th17/Treg细胞平衡,有利于维持机体的免疫平衡,属于“正气”范畴;Th17/Treg细胞失衡可能破坏机体内环境的稳定,导致免疫异常,促进疾病的发生,属于“邪气”范畴。基于此,作者以正邪理论为切入点,从宏观、微观角度来阐述Th17/Treg细胞在慢性心力衰竭发展中的作用,提出心衰早期,正虚为主,邪实为辅;心衰中期,正虚邪实;心衰晚期,邪实为主,正虚为辅;心衰终末期,正虚为主。临床通过扶正祛邪,调整机体正邪平衡,恢复机体Th17/Treg细胞的动态平衡,以期为中医理论阐述Th17/Treg在心衰的发展作用的现代研究奠定基础,为心衰的诊治提供新的理论依据。

清热化瘀方调控Th17对小鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

目的 探索清热化瘀方通过调控T辅助细胞17(Th17)对小鼠心肌缺血再灌注损伤(I/R)的影响。方法 45只小鼠随机分为假手术组、模型组和清热化瘀方低、中、高剂量组(13、26、52 g/kg),各组小鼠灌胃给予不同剂量清热化瘀方或蒸馏水7 d,通过左冠状动脉结扎30 min再灌注24 h建立心肌缺血再灌注损伤模型。术后24 h采用心脏超声检测心功能,HE染色观察心脏组织病理改变,TTC染色观察心脏梗死面积,试剂盒检测血清乳酸脱氢酶(LDH)、白介素17(IL-17)和白介素6(IL-6)水平,Western blot和RT-qPCR法检测心脏组织中RORγt mRNA和蛋白表达,流式细胞术检测外周血中Th17、Treg和Th17/Treg细胞比例。结果 与模型组比较,清热化瘀方组小鼠心功能提高,梗死面积减少,Th17细胞比例降低,促炎因子IL-17和IL-6水平降低,Th17/Treg动态平衡得到恢复(P<0.05)。结论 清热化瘀方可通过调节Th17恢复Th17/Treg稳态,从而减轻心肌缺血再灌注损伤。

银杏提取物对UC大鼠肠黏膜屏障功能的改善作用及对Th17/Treg细胞免疫稳态的影响

目的:探究银杏提取物对溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠黏膜屏障功能的改善作用及对Th17/Treg细胞免疫稳态的影响。方法:雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组及银杏提取物低、中、高剂量组,除正常对照组外其余各组大鼠均给予硝基苯磺酸、乙醇复合诱导建立UC大鼠模型。造模成功后各给药组灌胃相应剂量药物,正常对照组和模型组大鼠灌胃相应体积生理盐水,共给药14 d。记录各组大鼠一般状态,并追踪记录疾病活动指数(DAI),采用腹壁回撤反应(AWR)检测大鼠内脏敏感程度,检测各组大鼠外周血Th17、Treg细胞比例和血清IL-2、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α水平,检测肠道菌群及结肠组织中TLR4、NOD2 mRNA及蛋白表达。结果:与治疗前比较,各给药组大鼠饮水量、体质量、肛温显著升高,DAI显著降低(P<0.05)。与正常对照组比较,模型组大鼠饮水量、体质量、肛温显著降低,DAI、AWR显著升高,外周血Treg细胞比例及血清IL-2、IL-10水平显著降低,外周血Th17细胞比例及Th17/Treg和血清IL-6、IL-8、TNF-α水平显著升高,肠道大肠杆菌、肠球菌水平显著升高,乳酸杆菌、双歧杆菌水平显著降低,结肠组织中TLR4、NOD2 mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.05)。与模型组比较,银杏提取物各剂量组大鼠饮水量、体质量、肛温显著升高,DAI、AWR显著降低,外周血Treg细胞比例及血清IL-2、IL-10水平显著升高,外周血Th17细胞比例及Th17/Treg和血清IL-6、IL-8、TNF-α水平显著降低,肠道大肠杆菌、肠球菌水平显著降低,乳酸杆菌、双歧杆菌水平显著升高,结肠组织中TLR4、NOD2 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05)。银杏提取物的作用呈现剂量依赖性。结论:银杏提取物可降低UC大鼠结肠组织TLR4、NOD2 mRNA及蛋白表达,改善肠黏膜屏障功能,维持Th17/Treg细胞免疫稳态,抑制其炎症反应。

栀子苷调节PI3K/AKT/mTOR信号通路在动脉粥样硬化形成过程中对Th17/Treg功能的影响

目的:观察栀子苷对载脂蛋白E缺乏(ApoE^(-/-))小鼠Th17/调节性T(Treg)细胞失衡的影响及其作用机制。方法:将50只纯合子ApoE^(-/-)雌性小鼠随机分为对照组、模型组和栀子苷低剂量组、栀子苷中剂量组、栀子苷高剂量组。对照组小鼠喂养普通饲料,模型组和栀子苷组小鼠喂养高脂饲料。从第8周开始,栀子苷各剂量组每日灌胃栀子苷(25、50、100 mg/kg),连续8周。试验结束时,采用油红O染色评估主动脉及其根部动脉粥样硬化(AS)病变面积比。采用定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)分析主动脉组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-17A和IL-10 mRNA表达;采用流式细胞仪分析脾脏中Th17和Treg细胞百分比;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测主动脉组织磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白表达。结果:油红O染色病变显示,栀子苷中剂量组、栀子苷高剂量组病变百分比低于模型组(P<0.05)。与对照组比较,模型组主动脉TNF-α、IL-6和IL-17A mRNA表达水平升高(P<0.05);栀子苷各剂量组主动脉TNF-α、IL-6和IL-17A mRNA表达水平降低(P<0.05)。与对照组比较,模型组主动脉抗炎细胞因子IL-10 mRNA表达水平降低(P<0.05);栀子苷各剂量组主动脉抗炎细胞因子IL-10 mRNA表达水平升高(P<0.05)。与对照组比较,模型组小鼠脾脏中Th17细胞百分比升高,Treg细胞百分比降低(P<0.05)。栀子苷处理恢复了AS小鼠Th17和Treg细胞的平衡。栀子苷抑制PI3K的表达及AKT和mTOR的磷酸化,MHY1485(mTOR活化剂)减弱了栀子苷对T细胞分化的影响。结论:栀子苷抗AS作用机制可能与抑制PI3K/AKT/mTOR信号引起的Treg细胞增多和Th17细胞减少有关。

芍药苷对慢性支气管炎模型大鼠Th17及Treg细胞亚群的影响

目的:探究芍药苷对慢性支气管炎(CB)大鼠Th17、Treg细胞亚群、肺功能的影响以及药理作用。方法:将SD大鼠采用复合诱导法建立CB模型,随机分成CB组(生理盐水)、低剂量芍药苷组(50 mg/kg)、中剂量芍药苷组(100 mg/kg)、高剂量芍药苷组(200 mg/kg)和核酪组(阳性对照,核酪口服液),10只;另设对照组(生理盐水)10只,造模后按照分组灌胃2 ml/100 g相应药物。给药完成后,观察大鼠一般情况并进行肺功能及血气分析;HE染色观察肺组织形态;流式细胞仪检测大鼠肺组织CD4^(+)T、CD8^(+)T、Th17(CD4^(+)IL-17^(+)T)、Treg(CD4^(+)CD25^(+)FOXP3^(+)T)细胞;ELISA法检测肺组织中IL-10、IL-22、IL-17水平。结果:CB组大鼠活动迟缓,毛色暗淡,身体卷缩,伴咳嗽、鼻腔潮湿,肺组织可见淋巴细胞浸润、支气管壁变形、黏膜阻塞等病变;芍药苷各组及核酪组上述症状及损伤不同程度缓解,高剂量组最轻。与对照组比较,CB组气道阻力、动脉血二氧化碳分压(Pa‐CO_(2))、IL-17、IL-22水平及CD4^(+)T、CD8^(+)T、Th17细胞、Th17/Treg、CD4^(+)T/CD8^(+)T均升高,动脉血氧分压(PaO_(2))、IL-10水平及Treg细胞均降低(P均<0.05);与CB组比较,低、中、高剂量芍药苷组气道阻力、PaCO_(2)、IL-17、IL-22水平及CD4^(+)T、CD8^(+)T、Th17细胞、Th17/Treg、CD4^(+)T/CD8^(+)T水平依次降低,PaO_(2)、IL-10水平及Treg细胞依次升高(P均<0.05);中剂量芍药苷组气道阻力等以上指标与核酪组相比差异无统计学意义(P均>0.05)。结论:芍药苷可调节T淋巴细胞活化,减少Th17细胞分化,增加Treg细胞分化,减轻CB大鼠炎症水平及肺损伤。

Th17/Treg、Th1/Th2联合NEWS2评分预测肺炎病情进展效能研究

目的研究辅助性T淋巴细胞17/调节性T淋巴细胞(Th17/Treg)、辅助性T淋巴细胞1/辅助性T淋巴细胞2(Th1/Th2)联合国家早期预警评分2(NEWS2)预测肺炎病情进展的效能。方法选取2020年4月—2023年3月收治的105例肺炎,根据病情进展情况分为未进展组、进展组,比较2组Th17/Treg、Th1/Th2、NEWS2评分,采用多因素Logistic回归分析建立多指标联合预测肺炎病情进展的模型,使用Stata 10.0软件确定最佳截断值及该位置的预测准确度,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,用曲线下面积(AUC)评价各协变量及联合预测因子预测肺炎病情进展的效能。结果进展组Th17/Treg、NEWS2评分高于未进展组,Th1/Th2低于未进展组(P<0.01);Th17/Treg、NEWS2评分升高是肺炎病情进展的独立危险因素,Th1/Th2升高是肺炎病情进展的独立保护因素(P<0.01);将原始协变量拟合,生成新联合预测因子New-pre,其最佳截断值为0.102,此时预测准确率为97.00%;绘制ROC曲线显示,New-pre预测肺炎病情进展的AUC(0.916)高于Th17/Treg(0.704)、Th1/Th2(0.747)、NEWS2评分(0.819)(P<0.05)。结论肺炎病情进展患者Th17/Treg、NEWS2评分升高,Th1/Th2降低,三者联合可作为预测个体病情进展定量方案,可为临床治疗、病情进展评估提供参考依据。

苦参碱调节RhoA-ROCK信号通路对冠心病模型大鼠Th17/Treg细胞平衡的影响

目的探讨苦参碱(Matrine)对冠心病(coronary heart disease,CHD)大鼠辅助T细胞17(helper T cell 17,Th17)/调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)细胞平衡及Ras同源基因家族成员A(RhoA)-Rho相关的卷曲螺旋激酶(ROCK)信号通路的影响。方法建立冠心病模型,将实验大鼠分为对照组、模型组、苦参碱低剂量(50 mg·kg^(-1))组、苦参碱高剂量(200 mg·kg^(-1))组及苦参碱高剂量(200 mg·kg^(-1))+LPA组(10 mg·kg^(-1))。超声心动图进行大鼠心功能检测;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法进行白细胞介素17(IL-17)、转化生长因子β(TGF-β)水平检测;流式细胞术检测Th17、Treg数量及Th17/Treg比值;免疫组化进行内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、内皮素1(ET-1)蛋白表达水平检测;Masson染色进行大鼠心肌组织的病理形态变化观察;TTC染色检测各组大鼠心肌梗死情况;TUNEL染色进行心肌组织中细胞凋亡情况检测;试剂盒检测RhoA活性;Western Blot法进行半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达水平检测。结果与对照组比较,模型组心肌组织有大量蓝色胶原纤维沉积,左室舒张末期容积(left ventricular end-diastolic volume,LVEDV)、左室收缩末期容积(left ventricular end-systolic volume,LVESV)、IL-17、Th17、Th17/Treg、ET-1、心肌梗死面积、细胞凋亡率、TUNEL阳性率、Bax、Caspase-3、RhoA活性、RhoA、ROCK1、ROCK2表达水平明显升高,左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、左室缩短分数(left ventricular shortening fraction,LVFS)、TGF-β、Treg、eNOS、Bcl-2表达水平明显降低(P<0.05)。与模型组比较,Matrine-L组、苦参碱高剂量组心肌组织蓝色胶原纤维逐渐减少,LVEDV、LVESV、IL-17、Th17、Th17/Treg、ET-1、心肌梗死面积、细胞凋亡率、TUNEL阳性率、Bax、Caspase-3、RhoA活性、RhoA、ROCK1、ROCK2表达水平依次明显降低,LVEF、LVFS、TGF-β、Treg、eNOS、Bcl-2表达水平依次明显升高(P<0.05)。与苦参碱高剂量组比较,苦参碱高剂量+LPA组心肌组织蓝色胶原纤维增多,LVEDV、LVESV、IL-17、Th17、Th17/Treg、ET-1、心肌梗死面积、细胞凋亡率、TUNEL阳性率、Bax、Caspase-3、RhoA活性、RhoA、ROCK1、ROCK2表达水平明显升高,LVEF、LVFS、TGF-β、Treg、eNOS、Bcl-2表达水平明显降低(P<0.05)。结论苦参碱通过抑制RhoAROCK信号通路调节Th17/Treg细胞平衡,改善冠心病大鼠心肌损伤。

基于Th1/Th2和Treg/Th17探讨芪箭消瘿方对实验性自身免疫性甲状腺炎大鼠的影响

目的基于Th1/Th2和Treg/Th17探讨芪箭消瘿方对自身免疫性甲状腺炎的干预机制。方法将40只雌性SD大鼠分为对照组、EAT模型组、芪箭消瘿方低、中、高剂量组,每组8只。采用猪甲状腺球蛋白与弗氏佐剂皮下免疫注射联合高碘水喂养制备EAT大鼠模型。HE染色观察甲状腺组织形态学变化;ELISA检测各组大鼠血清TSH、TGAb、TPOAb、TNF-α、IL-4的水平;流式细胞术检测Treg和Th17的百分比。结果与EAT模型组比较,芪箭消瘿方各组滤泡结构较为完整,淋巴细胞浸润减少,血清TGAb、TPOAb水平、Th17细胞百分比降低(P<0.05、P<0.01),芪箭消瘿方中、高剂量组较模型组TSH、IL-4、TNF-α水平显著降低(P<0.05、P<0.01),芪箭消瘿方中、高剂量组Treg细胞百分比及Treg/Th17比值升高(P<0.05、P<0.01)。结论芪箭消瘿方可能通过调节CD_(4)^(+)T细胞的异常分泌,维持Th1/Th2和Treg/Th17免疫平衡,而降低EAT大鼠甲状腺相关抗体TGAb、TPOAb滴度,改善甲状腺组织炎症反应,减轻甲状腺组织的病理损伤。

当归多糖对再生障碍性贫血小鼠骨髓Th17/Treg细胞平衡及相关炎性因子蛋白表达的影响

目的探究当归多糖(Angelica polysaccharide,APS)对再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)小鼠骨髓Th17/Treg细胞平衡及相关炎性因子蛋白表达的影响。方法50只雄性BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、环孢素A组、APS低、高剂量组,利用射线照射联合异源淋巴细胞输注的方法制备再生障碍性贫血小鼠模型。建模后灌胃给药28 d,观察小鼠一般情况、体重变化、脾指数,检测外周血基本血液学参数变化,HE染色评价小鼠骨髓组织病理变化;ELSIA法检测骨髓TGF-β1、IL-10、IL-17A、IL-6等蛋白表达水平;FCM检测骨髓Th17、Treg细胞比例及Th17/Treg细胞平衡变化。结果与正常组相比,模型组小鼠活动笨拙,精神萎靡,眼睑唇色耳廓颜色苍白,进食饮水量减少;体重及脾指数均明显下降;外周血红细胞、白细胞、血小板计数及血红蛋白浓度均明显降低;骨髓组织结构紊乱,造血组织增生度明显减低;IL-17A、IL-6蛋白表达明显上调,TGF-β1、IL-10蛋白表达明显下调;骨髓Th17细胞比例明显增高,Treg细胞比例明显降低,Th17/Treg细胞比值显著升高(P<0.01)。与模型组相比,APS低、高剂量组一般状况均改善,进食量及饮水量增加,体重、脾指数明显升高,外周血红细胞、白细胞、血小板计数及血红蛋白浓度明显升高(P<0.05),骨髓组织结构改善,造血组织增生度升高(P<0.05);IL-17A、IL-6蛋白表达明显下调,TGF-β1、IL-10蛋白表达明显上调(P<0.05或P<0.01);骨髓Th17细胞比例明显降低,Treg细胞比例明显升高,Th17/Treg细胞比值显著下降(P<0.01)。结论当归多糖能改善AA小鼠骨髓造血功能,其机制可能是通过调节Th17/Treg细胞平衡来实现。

非小细胞肺癌不同胸腔积液严重程度及预后患者lncRNA MEG3表达及其与Th17/CD4^(+)T细胞的关系

目的:研究非小细胞肺癌(NSCLC)不同胸腔积液严重程度及预后患者lncRNA MEG3表达及其与Th17/CD4^(+)T细胞的关系。方法:选取2020年1月至2022年12月福建医科大学附属泉州第一医院收治的104例NSCLC恶性胸腔积液患者作为研究对象,根据胸腔积液量分为3组:少量胸腔积液组(35例)、中量胸腔积液组(42例)、大量胸腔积液组(27例)。根据患者疾病实际发展转归分为预后良好组(29例未出现复发和转移)和预后不良组(75例出现复发和转移)。另选取同期于福建医科大学附属泉州第一医院治疗的60例肺炎良性胸腔积液患者作为对照组。实时荧光定量PCR检测两组胸腔积液中MEG3表达。收集受试者外周静脉血,流式细胞术检测外周血Th17细胞、CD4^(+)T细胞比例,并计算Th17/CD4^(+)T。对比各组患者lncRNA MEG3及外周血Th17、CD4^(+)T细胞水平。Logistic回归分析NSCLC胸腔积液及预后的影响因素。结果:NSCLC组胸腔积液lncRNA MEG3表达及CD4^(+)T细胞百分比低于对照组,Th17细胞百分比、Th17/CD4^(+)T高于对照组(P<0.05)。大量胸腔积液组lncRNA MEG3表达及CD4^(+)T细胞百分比低于少量胸腔积液组、中量胸腔积液组,中量胸腔积液组lncRNA MEG3表达及CD4^(+)T细胞百分比低于少量胸腔积液组,大量胸腔积液组Th17细胞百分比、Th17/CD4^(+)T高于少量胸腔积液组、中量胸腔积液组,中量胸腔积液组Th17细胞百分比、Th17/CD4^(+)T高于少量胸腔积液组(P<0.05)。预后不良组lncRNA MEG3表达及CD4^(+)T百分比低于预后良好组,而Th17细胞百分比、Th17/CD4^(+)T高于预后良好组(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,lncRNA MEG3为NSCLC胸腔积液的保护因素,Th17/CD4^(+)T为危险因素(P<0.05);lncRNA MEG3为NSCLC预后的保护因素,Th17/CD4^(+)T为危险因素(P<0.05)。结论:NSCLC不同胸腔积液严重程度及预后患者lncRNA MEG3表达及Th17/CD4^(+)T不同,且lncRNA MEG3为NSCLC胸腔积液及预后的保护因素,Th17/CD4^(+)T为危险因素,可作为胸腔积液严重程度及预后诊断的有效生物标志物。

祛寒逐风合剂对寒湿痹阻证类风湿关节炎大鼠及其Th17/Treg平衡的影响

目的 观察祛寒逐风合剂对寒湿痹阻证类风湿关节炎大鼠模型的作用以及对其Th17/Treg相关细胞因子与转录因子平衡的影响。方法 SD大鼠随机分出12只作为正常对照组,其余65只大鼠通过尾根部皮下注射Ⅱ型胶原乳剂并人工模拟寒湿刺激制备寒湿痹阻型RA大鼠模型。选取造模成功的60只大鼠随机分为模型对照组、甲氨喋呤组(1.4 mg·kg^(-1))、祛寒逐风合剂低、中、高剂量组(20.1、40.2、80.5 g·kg^(-1)),各组灌胃给予相应药物,正常对照组和模型对照组给予等容量生理盐水,连续28 d。实验过程中,观察各组大鼠的一般状况,于造模前、造模后、给药后每周测量各组大鼠踝关节周长。给药结束后,检测胸腺和脾脏指数,HE检测踝关节病理学变化,ELISA检测血清Th17/Treg相关细胞因子TNF-α、IL-6、IL-17、IL-10的含量,RT-qPCR检测滑膜组织中Th17/Treg相关转录因子维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)、叉状头/翅膀状螺旋转录因子3(Foxp3)mRNA的表达量。结果 与正常对照组比较,模型对照组大鼠关节肿胀明显,脾脏指数和胸腺指数升高(P<0.01),踝关节炎性细胞浸润、滑膜细胞增生严重,血清TNF-α、IL-6、IL-17水平显著升高(P<0.01),IL-10水平显著降低(P<0.01),RORγt mRNA表达升高(P<0.01),Foxp3 mRNA表达降低(P<0.01);与模型对照组比较,祛寒逐风合剂低、中、高剂量组均能抑制关节肿胀(P<0.05或P<0.01),祛寒逐风合剂中、高剂量组大鼠胸腺和脾脏指数显著降低(P<0.05或P<0.01),祛寒逐风合剂低、中、高剂量组均能改善踝关节病理损伤,降低TNF-α、IL-6、IL-17水平,升高IL-10水平(P<0.01),祛寒逐风合剂中、高剂量组RORγt mRNA表达显著降低(P<0.01),Foxp3 mRNA表达显著升高(P<0.01)。结论 祛寒逐风合剂具有调节Th17/Treg平衡的作用,其机制可能与其调控Th17/Treg相关细胞因子及转录因子有关。

骨化三醇联合钙剂对肾病综合征患儿Th17/Treg免疫及骨代谢的影响

目的分析骨化三醇联合钙剂辅助治疗肾病综合征(NS)患儿的临床疗效及可能作用机制。方法收集2020年1月至2021年9月接受治疗NS患儿63例临床资料,根据治疗方法分为观察组(32例)、对照组(31例)。所有患儿均给予常规糖皮质激素治疗及营养干预。对照组同时给予维生素D联合钙剂辅助治疗,观察组同时给予骨化三醇联合钙剂辅助治疗。治疗12个月,比较两组Th17/Treg细胞、血钙磷、骨代谢、临床疗效等指标。结果观察组Th17、Th17/Treg低于对照组,Treg高于对照组(P<0.05)。观察组血钙、25-羟维生素D3[25(OH)D3]、白蛋白(ALB)高于对照,24 h-尿蛋白定量(24-UTP)低于对照组(P<0.05)。观察组骨钙素(BGP)高于对照组,甲状腺旁激素(PTH)、碱性磷酸酶(AKT)、Ⅰ型胶原氨基端延长肽(P1NP)、β-胶原特殊序列(β-CTX)低于对照组(P<0.05)。观察组完全及显著缓解率81.25%高于对照组58.06%(χ^(2)=4.019,P<0.05)。结论骨化三醇联合钙剂辅助治疗能够提高NS患儿临床疗效,可能与矫正Th17/Treg免疫失衡、改善血钙磷及骨代谢紊乱等因素有关。

复方苦参注射液联合DCF化疗方案对胃癌术后患者并发症及Th17/Treg平衡的影响

目的:探讨复方苦参注射液联合DCF化疗方案对胃癌术后患者并发症及Th17/Treg平衡的影响。方法:选取2022年10月至2023年8月于该院进行手术治疗的胃癌患者96例,根据治疗方案的不同分为复方苦参注射液组和对照组,每组48例。两组患者均接受根治性手术治疗,对照组患者采用DCF化疗方案(多西他赛+顺铂+5-氟尿嘧啶)治疗,复方苦参注射液组患者在对照组的基础上加用复方苦参注射液治疗。比较两组患者并发症发生率,Th17、Treg和Th17/Treg指标变化情况。结果:复方苦参注射液组患者的并发症发生率为10.42%(5/48),低于对照组的35.42%(17/48),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患者Th17、Th17/Treg指标高于治疗前,且复方苦参注射液组患者明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组患者Treg指标低于治疗前,且复方苦参注射液组患者明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:复方苦参注射液能够调节胃癌术后患者体内T细胞亚群失衡,改善机体免疫功能,减轻术后并发症发生率,更有利于患者预后。

中医药调控白癜风Th17/Treg细胞失衡的研究进展

白癜风是一种临床常见的慢性炎症性色素脱失性皮肤疾病,在世界范围内的患病率约为0.5%~2%^([1])。目前对于本病的发病机制尚不清楚,有多种学术假说被提出来进行解释,如氧化应激理论、神经体液假说等,但是自身免疫学说是最被认可的一种,同时动物模型和人体研究也都强调了免疫系统在白癜风中的重要作用^([2-4])。皮肤作为人体最大的器官,是机体抵御外来感染的第一道防线。

寿胎丸加减治疗复发性流产的疗效及对患者凝血功能、Th17细胞相关因子的影响

目的:探究寿胎丸加减治疗复发性流产的疗效及其对患者凝血功能、辅助T淋巴细胞17(Th17)细胞相关因子的影响。方法:对2021年3月—2022年3月石家庄市第六医院收治的120例复发性流产患者相关资料予以回顾性分析,按治疗方式将患者分为对照组与研究组,对照组57例接受黄体酮治疗,研究组63例在对照组基础上加用寿胎丸加减治疗。比较两组临床疗效,治疗前后中医证候积分、凝血功能、Th17与调节性T细胞(Treg)水平、Th17/Treg细胞相关因子,以及不良反应发生率。结果:研究组患者临床总有效率90.48%高于对照组75.44%(P<0.05);两组患者治疗后中医证候积分、凝血功能、Th17与Treg水平、Th17/Treg细胞相关因子均明显改善(P<0.01),研究组患者治疗后中医证候积分均明显低于对照组(P<0.01),研究组患者治疗后中医证候积分、凝血功能、Th17与Treg水平、Th17/Treg细胞相关因子等改善均优于对照组(P<0.01);研究组患者治疗期间不良反应发生率7.94%低于对照组12.28%,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:应用寿胎丸加减治疗复发性流产疗效显著,有助于减轻患者凝血功能障碍,纠正患者Th17细胞相关因子水平异常,临床应用效果良好。

枯芩与条芩提取物对湿热型溃疡性结肠炎大鼠Th17/Treg免疫失衡的调节机制研究

目的比较枯芩、条芩提取物对湿热型溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠模型辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)细胞因子及转录因子维甲酸相关孤儿受体(ROR-γt)/叉头翼状螺旋转录因子3(Foxp3)表达的影响。方法50只健康SD大鼠随机分为5组:正常组、模型组、枯芩组、条芩组和美莎拉嗪组,每组10只。采用高脂高糖饲料喂养+高度白酒灌胃+5%葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)联合诱导法,建立湿热型UC大鼠模型;各组分别于造模第1天开始灌胃给药,枯芩组、条芩组给药剂量均为5.25 g·kg^(-1)·d^(-1),美沙拉嗪组给药剂量为0.266 g·kg^(-1)·d^(-1),正常组、模型组灌服等体积生理盐水。连续给药28 d。给药结束后,麻醉大鼠,腹主动脉取血,分离血清,Elisa法检测大鼠血清白介素-6(IL-6)、IL-17A、IL-10、转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))水平;分离脾脏和结肠组织,采用流式细胞术检测脾脏Th17、Treg细胞比例,计算Th17/Treg比值;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测结肠组织ROR-γt、Foxp3 mRNA表达水平;免疫蛋白印迹(western blot)法检测结肠组织ROR-γt、Foxp3蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组大鼠血清IL-6、IL-17A、脾脏Th17细胞比例、Th17/Treg、结肠组织ROR-γt mRNA和蛋白表达水平均显著增加(P<0.01),血清IL-10、IL-35、TGF-β_(1)、脾脏Treg细胞比例、结肠组织Foxp3 mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.01);给药28 d后,与模型组比较,各给药组大鼠血清IL-6、IL-17A、脾脏Th17细胞比例、Th17/Treg、结肠组织ROR-γt mRNA和蛋白表达水平出现不同程度的降低(P<0.05或P<0.01),血清IL-10、IL-35、TGF-β_(1)、脾脏Treg细胞比例、结肠组织Foxp3 mRNA和蛋白表达水平出现不同程度的升高(P<0.05或P<0.01);与枯芩组比较,条芩组、美沙拉嗪组在降低IL-6、IL-17A,增加IL-10、IL-35、TGF-β_(1)水平,调节ROR-γt mRNA和蛋白表达方面(P<0.05或P<0.01)均优于枯芩组。结论枯芩、条芩可能通过调控转录因子ROR-γt、Foxp3表达,恢复Th17/Treg免疫失衡,抑制炎症反应,从而保护肠道黏膜屏障受损,发挥治疗湿热型UC的作用。

miR-155通过SOCS1/STAT3途径调控类风湿性关节炎中炎症反应和Th17/Treg失衡

目的在类风湿性关节炎(RA)中探究miR-155和细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS1)的表达及作用机制。方法采用RT-PCR和流式细胞术检测miR-155和Th17、Treg细胞在RA患者(RA组)和对照组(HC组)外周血中的表达差异;生物信息学和双荧光素酶基因报告实验检测miR-155和SOSC1的调控关系;分离RA患者外周CD4^(+)T细胞,将沉默miR-155与SOCS1表达的miR-155 inhibitor和si-SOCS1及各自的阴性对照序列分别或联合转染入CD4+T细胞中,并将细胞分为:miR-NC组、miR-155 inhibitor组、miR-155 inhibitor+si-NC组和miR-155 inhibitor+si-SOCS1组。使用Th17诱导分化液处理上述细胞后,采用流式细胞术检测各组CD4+T细胞中Th17比率,Western blot实验检测细胞中p-STAT3/STAT3比值。结果与HC组相比,RA患者中miR-155、Th17比率升高(P<0.01),Treg细胞比率降低(P<0.01);miR-155可靶向抑制SOCS1表达。与miR-NC组相比,miR-155 inhibitor组、miR-155 inhibitor+si-NC组和miR-155 inhibitor+si-SOCS1组中Th17比率、p-STAT3/STAT3比值均降低(P<0.01);与miR-155 inhibitor组相比,miR-155 inhibitor+si-SOCS1组CD4^(+)T细胞中Th17比率、p-STAT3/STAT3比值均升高(P<0.05)。结论在RA患者中表达升高的miR-155可能通过SOCS1/STAT3途径来介导CD4^(+)T细胞的Th17分化,从而参与RA患者外周Th17/Treg细胞失衡。