上调IL-37a表达对急性呼吸窘迫综合征大鼠肺功能及Th1/Th2平衡的影响

目的探究上调白细胞介素-37a(IL-37a)表达对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)大鼠肺功能及Th1/Th2平衡的影响。方法构建过表达IL-37a的间充质干细胞(MSC),并与单个核细胞共培养,流式细胞术检测过表达IL-37a对Th1、Th2表达影响,ELISA检测培养基上清液IFN-γ、IL-4水平。取30只SD大鼠随机分为Control组(假手术)、ARDS组(脂多糖诱导建立ARDS模型)、IL-37a组(建模+尾静脉注射10μg/kg IL-37a重组蛋白)各10只,建模12 h后,血气分析仪检测大鼠动脉氧分压(PaO2)、氧合指数(PaO2/FiO2),并测定肺干/湿(W/D)比,HE染色观察肺组织病理并评估肺部病理损伤评分,ELISA检测肺泡灌洗液(BALF)及血清中IL-4、IFN-γ表达,流式细胞术检测脾脏Th1/Th2,Westernblot检测肺组织NF-κB、NLRP3蛋白表达。结果过表达IL-37a组细胞外周Th1、Th1/Th2、IL-4表达低于阴性对照组细胞,Th2、IFN-γ表达高于阴性对照组细胞(P<0.05);与Control组比较,ARDS组和IL-37a组PaO2、PaO2/FiO2、BALF及血清IL-4表达降低,W/D、肺部病理损伤评分、BALF及血清IFN-γ、脾脏Th1/Th2、肺组织NF-κB、NLRP3蛋白表达升高;与ARDS组比较,IL-37a组PaO2、PaO2/FiO2、BALF及血清IL-4表达升高,W/D、肺部病理损伤评分、BALF及血清IFN-γ、脾脏Th1/Th2、肺组织NF-κB、NLRP3蛋白表达降低(P<0.05)。结论上调IL-37a表达可改善ARDS大鼠肺部损伤,这可能与IL-37a能影响MSC免疫调节功能,促进Th1/Th2恢复平衡有关。

脑组织GDF-15水平与脑梗死大鼠血管新生以及Th1/Th2免疫平衡轴的关系

目的:探讨脑组织GDF-15水平与脑梗死大鼠血管新生以及Th1/Th2免疫平衡轴的关系。方法:45只雄性SD大鼠随机分为脑梗死模型组、假手术组以及正常对照组,15只/组。模型组采用线栓法建立脑梗死模型,假手术组仅暴露颈内动脉后直接缝合皮肤,建模成功后1周评估大鼠改良神经功能缺损(mNSS)评分。采用HE染色检测脑组织病理学变化情况,Western blot法检测大鼠脑组织中组织生长分化因子-15(GDF-15)蛋白水平,RTPCR测定脑组织中GDF-15 mRNA水平。采用ELISA法检测脑组织INF-γ、IL-4表达情况,采用Spearman相关性分析大鼠脑组织中GDF-15蛋白、mRNA表达水平分别与mNSS评分、微血管密度(MVD)、INF-γ/IL-4水平之间的相关性。结果:模型组大鼠mNSS评分明显高于假手术组和正常对照组(P<0.001),模型组脑梗死面积比为(24.45±4.15)%,假手术组和正常对照组未发现脑梗死区域。模型组大鼠脑组织GDF-15蛋白、mRNA、MVD、INF-γ/IL-4水平均明显高于假手术组和正常对照组(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,模型组大鼠脑组织中GDF-15蛋白、mRNA表达水平分别与mNSS评分、MVD、INF-γ/IL-4水平呈正相关关系(P<0.001)。结论:脑梗死大鼠脑组织中GDF-15处于高表达状态,且与神经功能密切关联,其作用机制可能与血管新生以及调控Th1/Th2免疫平衡轴有关。

过敏性紫癜患儿血清miR-125b、HIF-1α表达水平及其与Th1/Th2平衡的关系

目的检测过敏性紫癜患儿血清microRNA-125b(miR-125b)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达水平,并探讨其与辅助性T细胞1(Th1)/辅助性T细胞2(Th2)(Th1/Th2)平衡的关系。方法选择2021年5月至2022年12月三门峡市中心医院收治的94例过敏性紫癜患儿作为研究组,另选择同期在我院体检的88例健康儿童作为对照组。所有受检者入院后均采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测外周血miR-125b水平,采用酶联免疫吸附试验检测血清HIF-1α、IFN-γ、IL-4水平,利用流式细胞仪检测Th1、Th2细胞水平并计算Th1/Th2比值。采用Pearson相关分析探讨过敏性紫癜患儿血清miR-125b、HIF-1α表达水平与Th1/Th2比值的关系,采用受试者工作特征曲线(ROC)评估血清miR-125b、HIF-1α表达水平对过敏性紫癜发生的预测价值。结果研究组患者的血清miR-125b、HIF-1α及外Th2细胞水平分别为(0.80±0.18)、(122.54±20.54)pg/L、(7.04±1.57),明显高于对照组的(0.38±0.11)、(48.58±8.99)pg/L、(4.22±0.55),Th1细胞水平、Th1/Th2比值分别为(7.55±1.66)、(1.07±0.11),明显低于对照组的(12.01±2.80)、(2.85±0.58),差异均有统计学意义(P<0.05);研究组患者的血清IFN-γ水平为(19.28±2.66)pg/mL,明显低于对照组的(26.64±3.41)pg/mL,血清IL-4水平为(28.44±3.87)ng/L,明显高于对照组的(17.66±2.99)ng/L,差异均有统计学意义(P<0.05);经Pearson相关分析结果显示,过敏性紫癜患儿血清miR-125b与IFN-γ、Th1/Th2比值均呈负相关(r=-0.447、-0.516,P<0.05),与IL-4呈正相关(r=0.521,P<0.05);血清HIF-1α与IFN-γ、Th1/Th2比值均呈负相关(r=-0.511、-0.445,P<0.05),与IL-4呈正相关(r=0.495,P<0.05);经ROC分析结果显示,血清miR-125b预测小儿过敏性紫癜的曲线下面积(AUC)为0.841,敏感度、特异度分别为90.01%、64.41%;HIF-1α预测小儿过敏性紫癜的AUC为0.764,敏感度、特异度分别为90.02%、58.78%;两者联合预测小儿过敏性紫癜的AUC为0.910,敏感度、特异度为88.74%、87.19%。结论过敏性紫癜患儿血清miR-125b、HIF-1α表达水平均升高,且两者与Th1/Th2比值呈负相关,两者可通过调节Th1/Th2、介导炎症反应参与疾病发展,有望作为预测小儿过敏性紫癜发病的有效指标。

脓毒症急性肺损伤患者外周血IFN-γ/IL-4、Th1/Th2水平与疾病预后的关系

目的探讨脓毒症急性肺损伤(ALI)患者外周血γ干扰素(IFN-γ)/白细胞介素-4(IL-4)、辅助性T淋巴细胞(Th)1/Th2水平与疾病预后的关系。方法选取2020年1月—2023年1月我院收治的脓毒症ALI患者104例作为观察组,单纯脓毒症患者104例作为对照Ⅰ组,同期体检健康者104例作为对照Ⅱ组。对比3组外周血IFN-γ/IL-4、Th1/Th2水平。观察组根据治疗28 d疾病预后分为生存组(n=74)与病死组(n=30),分析脓毒症ALI患者外周血IFN-γ/IL-4、Th1/Th2水平与C反应蛋白、急性生理与慢性健康状况系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分间相关性,单因素及多因素Logistic回归分析28 d生存情况的影响因素,限制性立方样条图分析外周血IFN-γ/IL-4、Th1/Th2水平与28 d生存情况的剂量-效应关系,受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析外周血IFN-γ/IL-4、Th1/Th2水平对疾病预后的评估价值。结果观察组外周血IFN-γ、Th1、IFN-γ/IL-4、Th1/Th2水平低于对照Ⅰ组、对照Ⅱ组,IL-4、Th2水平高于对照Ⅰ组、对照Ⅱ组(P<0.05),对照Ⅰ组外周血IFN-γ、Th1、IFN-γ/IL-4、Th1/Th2低于对照Ⅱ组,IL-4、Th2水平高于对照Ⅱ组(P<0.05);观察组28 d后病死率28.85%,病死组外周血IFN-γ、Th1、IFN-γ/IL-4、Th1/Th2水平低于生存组,IL-4、Th2水平高于生存组(P<0.05);病死组吸烟比率、APACHEⅡ评分、动脉血乳酸、C反应蛋白、降钙素原水平高于生存组,氧合指数低于生存组(P<0.05);外周血IFN-γ/IL-4、Th1/Th2水平与APACHEⅡ评分呈高度负相关(r=0.844,0.878,均P<0.001),外周血IFN-γ/IL-4、Th1/Th2水平与C反应蛋白呈中度负相关(r=0.778,0.763,均P<0.001);动脉血乳酸、降钙素原是脓毒症ALI患者28 d生存情况的独立危险因素,氧合指数、IFN-γ/IL-4、Th1/Th2是脓毒症ALI患者28 d生存情况的独立保护因素(P<0.05);当外周血IFN-γ/IL-4水平<2.5、Th1/Th2水平<0.43时,脓毒症ALI患者28 d病死风险显著增加,外周血IFN-γ/IL-4、Th1/Th2水平联合评估脓毒症ALI患者28 d生存情况的AUC值大于外周血IFN-γ/IL-4、Th1/Th2水平单独评估(Z=2.215,P=0.027;Z=1.961,P=0.049)。结论脓毒症ALI患者外周血IFN-γ/IL-4、Th1/Th2水平与疾病预后关系密切,且外周血IFN-γ/IL-4、Th1/Th2水平均与疾病预后呈非线性关系,当外周血IFN-γ/IL-4水平<2.5、Th1/Th2水平<0.43时对临床评估预后具有较高价值。

Th1/Th2细胞因子、白细胞介素-17和血清肿瘤标志物在乳腺癌诊断、预后与复发中的应用价值研究

目的:探究Th1/Th2细胞因子、白细胞介素-17(IL-17)和血清肿瘤标志物在乳腺癌诊断、预后与复发中的应用价值。方法:选取2021年12月至2022年12月于北京大学肿瘤医院内蒙古医院收治的200例乳腺癌患者为研究对象,并将其按免疫组织化学指标检测后分为阴性组(60例)、弱阳性组(80例)及阳性组(60例);另选60名体检健康人员为健康对照组。观察Th1/Th2、IL-17、糖类抗原(CA125)、细胞角质蛋白19片抗原21-1(CYFRA21-1)、糖类抗原(CA153)、癌胚抗原(CEA)水平变化,探究6项指标联合检测预测乳腺癌预后及复发的临床价值。结果:对比分析临床病理特征与复发、组织学分级、肿瘤直径、淋巴结转移有关,差异有统计学意义(x^(2)=7.552、12.037、12.063、8.543,P<0.05)。多因素分析显示,肿瘤复发、组织分级、肿瘤直径、淋巴结转移为乳腺癌患者预后的重要因素(OR=3.096、3.050、3.425、3.031,P<0.05)。与Th1/Th2、IL-17、CA125、CYFRA21-1、CA153、CEA单项预测相比,6项指标联合预测对乳腺癌患者预后及复发临床价值较高,灵敏度96%,准确率93.46%,特异度85%。结论:观察乳腺癌患者体内Th1/Th2、IL-17、CA125、CYFRA21-1、CA153及CEA的6项指标联合预测水平变化,联合检测具有高灵敏度和高准确率的特点,其高效便捷的检测方式可以为改善预后,降低复发,提升评估准确率提供参考。

宣肃止咳汤联合吸入型糖皮质激素治疗小儿支气管肺炎疗效及对血清VCAM-1、Th1/Th2细胞因子的影响

目的探讨宣肃止咳汤联合吸入型糖皮质激素治疗小儿支气管肺炎的疗效及对血清血管细胞间黏附分子-1(VCAM-1)、Th1/Th2细胞因子的影响。方法选择2021年5月—2023年5月府谷县中医医院收治的80例支气管肺炎患儿作为研究对象,依据随机数表法将其分为对照组与试验组,各40例。对照组予以吸入型糖皮质激素治疗,试验组予以吸入型糖皮质激素联合宣肃止咳汤治疗。记录两组患儿临床症状消失时间,评价临床疗效,并检测治疗前后血清血管细胞间黏附分子-1(VCAM-1)、干扰素(IFN)-γ、白介素(IL-4)水平。结果与对照组比较,试验组咳嗽、喘鸣音、气促消失时间明显缩短,差异有统计学意义(P<0.05);两组发热消失时间比较,差异无统计学意义(P>0.05);试验组的总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);与治疗前相比,两组治疗后血清VCAM-1、IFN-γ、IL-4及IFN-γ/IL-4比值均明显改善,且试验组治疗后血清IFN-γ、IL-4及IFN-γ/IL-4比值改善明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组血清VCAM-1比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组患儿均未见明显不良反应。结论宣肃止咳汤联合吸入型糖皮质激素治疗小儿支气管肺炎可有效促进症状改善,提高临床疗效,并能调节Th1/Th2细胞失衡。

干扰素-α致大鼠抑郁症模型制备前后血清Th1/Th2细胞因子和甲状腺激素水平的检测

目的探讨干扰素(IFN)-α诱导抑郁症的发生机制。方法 SD大鼠30只随机分为IFN组、慢性不可预知温和应激(CUMS)组、正常组各10只。IFN组皮下注射IFN-α,CUMS组进行孤养给予CUMS,正常组给予等剂量生理盐水皮下注射。造模后4、8、12 w时,通过糖盐水实验、旷场试验和新环境进食抑制时间进行大鼠行为学实验。造模后12 w时,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组血清Th1/Th2细胞因子的表达水平;应用电化学发光法检测各组血清甲状腺激素水平。结果与正常组和IFN组比较,CUMS组首先在4 w时,大鼠的行为学实验出现显著性差异(P>0. 05),随着时间延长,逐渐增强;与正常组比较,IFN组在应用IFN皮下注射第4周时,大鼠的行为学实验没有明显改变(P>0. 05),到第8周时开始出现行为学异常(P<0. 05),到12 w时,行为学变化与CUMS组差异无统计学意义(P>0. 05)。与正常组比较,IFN组和CUMS组大鼠血清Th1类细胞因子IFN-γ和TNF-α的表达水平显著增高,Th2类细胞因子IL-4和IL-10的表达水平降低(P <0. 05),IFN组和CUMS组差异无统计学意义(P>0. 05)。与正常组比较,CUMS组和IFN组在处理因素实施12 w时均出现甲状腺激素减低,促甲状腺激素(TSH)升高,游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)降低,差异有统计学意义(P<0. 05),IFN组与CUMS组比较差异无统计学意义(P>0. 05)。结论 IFN-α能够成功制备大鼠抑郁症模型可能是IFN-α通过调节Th1/Th2平衡导致大鼠甲状腺功能低下诱发抑郁。

CD86协同刺激信号在孕早期母-胎界面Th1/Th2型细胞因子表达调控中的作用

目的 :探讨CD86协同刺激信号在孕早期母 胎界面Th1 Th2型细胞因子表达调控中的作用。方法 :建立正常妊娠模型CBA×Balb c和自然流产模型CBA×DBA 2。于孕第 4、6、8、10天给CBA孕鼠腹腔注射大鼠IgG作为对照组 ;仅于孕第 4天或于孕第 4、6、8、10天给CBA孕鼠腹腔注射大鼠抗小鼠CD86mAb。孕第 14天计算两种模型各实验组胚胎吸收率R。ELISA法测定孕第 9和第 14天各实验组母 胎界面组织体外培养上清中Th1 Th2型及相关细胞因子 (IL 2、IFN γ、TNF α、IL 4、IL 10、TGF β2 )表达水平。 结果 :孕早期干预CD86协同刺激信号 ,对正常妊娠模型母 胎界面孕第 9和第 14天IL 4、IL 10、TGF β2以及IFN γ、TNF α表达均无显著影响 ,其胚胎吸收率亦无显著变化。自然流产模型中 ,孕早期干预CD86协同刺激信号后 ,孕第 9、第 14天母 胎界面IL 4、IL 10、TGF β2表达均显著增加 (P <0 0 5 ) ;而IFN γ、TNF α表达显著下降 (P <0 0 5 )。胚胎吸收率亦显著下降 (P <0 0 5 )。结论 :孕早期母 胎界面CD86协同刺激信号的调节紊乱可能是触发母体对胚胎产生免疫排斥的重要病理因素 ,于孕早期干预CD86协同刺激信号能够恢复母 胎界面Th1型 Th2型免疫调节的生理平衡 ,从而诱导母 胎免疫耐受。

20(S/R)-人参皂苷Rg_3的制备及调节Th1/Th2免疫失衡活性

采用醋酸溶液作为提取溶剂,使西洋参叶中的二醇组人参皂苷在提取过程中发生降解,从而直接获得20(S)-人参皂苷Rg_3和20(R)-人参皂苷Rg_3,并对其调节Th1/Th2免疫失衡活性进行了研究.正交实验结果表明,当醋酸浓度为50%(体积分数),提取温度为80℃,提取时间为1 h时,20(S)-人参皂苷Rg_3和20(R)-人参皂苷Rg_3的转化率最高,分别为12. 30%和14. 80%.将20(S)-人参皂苷Rg_3和20(R)-人参皂苷Rg_3处理后的朗格汉斯状树突细胞(LDCs)分别作用于小鼠抗原诱导的Th1/Th2免疫失衡模型,发现细胞上层清液中IL-4的水平均显著降低,说明20(S)-人参皂苷Rg_3和20(R)-人参皂苷Rg_3对小鼠Th1/Th2免疫失衡具有调节作用.本文不仅建立了一种制备20(S)-人参皂苷Rg_3和20(R)-人参皂苷Rg_3的新方法,也为人参皂苷Rg_3在免疫系统疾病中的应用提供了新的科学依据.

小青龙汤对过敏性鼻炎大鼠Th1/Th2细胞因子失衡及SP、Annexin1、VCAM-1表达的影响

目的探讨小青龙汤对过敏性鼻炎大鼠Th1/Th2细胞因子失衡及P物质(SP)、膜联蛋白1(Annexin1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)表达的影响。方法选取SPF级SD大鼠48只,采用随机数字表法分为正常组、模型组、苍耳子鼻炎胶囊组和小青龙汤高、中、低剂量组,每组8只。正常组大鼠给予常规饲养,其余5组大鼠采用卵白蛋白腹腔注射致敏、双侧鼻腔滴鼻激发方法复制过敏性鼻炎模型。模型复制成功后,苍耳子鼻炎胶囊组大鼠给予苍耳子鼻炎胶囊溶液0.28 g/kg灌胃,小青龙汤高、中、低剂量组分别给予小青龙汤14 g/kg、7 g/kg、3.5 g/kg灌胃,均每日1次,连续灌胃14 d。灌胃结束后,对各组大鼠进行行为学评分,HE染色观察大鼠鼻黏膜组织病理变化,ELISA法检测大鼠血清免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)水平,免疫组化法检测大鼠鼻黏膜组织中SP、Annexin1、VCAM-1表达情况。结果与模型组比较,小青龙汤高、中剂量组和苍耳子鼻炎胶囊组大鼠行为学评分明显降低(P均<0.05),鼻黏膜病理改变减轻,血清IgE、IL-4水平及鼻黏膜组织中SP、VCAM-1平均光密度值均明显降低(P均<0.05),血清IFN-γ水平及鼻黏膜组织中Annexin1平均光密度值均明显升高(P均<0.05);与小青龙汤中剂量组比较,小青龙汤高剂量组和苍耳子鼻炎胶囊组大鼠行为学评分均更低(P均<0.05),鼻黏膜病理改变更轻,血清IgE、IL-4水平及鼻黏膜组织中SP、VCAM-1平均光密度值均更低(P均<0.05),血清IFN-γ水平及鼻黏膜组织中Annexin1平均光密度值均更高(P均<0.05);小青龙汤高剂量组与苍耳子鼻炎胶囊组上述指标比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论小青龙汤可呈剂量依赖性改善过敏性鼻炎大鼠的鼻黏膜炎性症状,其作用机制可能与抑制大鼠炎症介质SP、VCAM-1表达,上调Annexinl表达,调节Th1/Th2细胞因子失衡有关。

α-干扰素治疗慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞TLR4表达和血清Th1/Th2型细胞因子的变化

目的探讨慢性乙型肝炎患者在α-干扰素治疗前后外周血单个核细胞Toll样受体4(TLR4)的表达及血清Thl/Th2型细胞因子水平的变化及其临床意义。方法 50例HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者予以普通α-干扰素治疗。在治疗前及治疗后3月和6月,使用流式细胞仪检测外周血单个核细胞表面TLR4表达;采用ELISA法检测血清IFN-γ和IL-4水平,并同时检测ALT、HBV DNA水平。结果在治疗3个月和6个月时,早期应答组和无应答组患者血清IFN-γ水平均升高,IL-4水平均降低;两组TLR4水平较治疗前均下降,但应答组患者TLR4下降更明显,有显著性差异(P<0.05);IFN-γ和IL-4的变化与TLR4的变化无明显相关(P均>0.05),TLR4与ALT呈正相关(r=0.78,P<0.01),TLR4的变化与HBV DNA变化无相关(P>0.05)。结论在干扰素-α治疗后,慢性乙型肝炎患者Thl/Th2型细胞因子的变化可能与TLR4表达的变化无相关,而对干扰素治疗的疗效可能与TLR4表达的变化有关。

TIM-1对哮喘小鼠气道MUC5AC及Th2细胞因子表达的影响

目的研究T细胞免疫球蛋白-黏蛋白-1(TIM-1)表达对哮喘小鼠气道MUC5AC及Th2细胞因子的作用,探讨气道黏液高分泌的机制。方法30只健康雌性C57BL/6小鼠,按随机数字表法分为正常、哮喘模型组(哮喘组)和哮喘模型+TIM-1抗体处理组(TIM-1抗体组),每组10只。检测小鼠外周血单个核细胞(PBMCs)TIM-1+细胞比例、气道MUC5AC mRNA表达、肺泡灌洗液(BALF)中IL-13、IL-4、IL-5水平及黏液细胞数量和细胞体积的改变。结果 (1)哮喘组及TIM-1抗体组小鼠外周血PBMCs中TIM-1+细胞比例(11.20%,5.11%)均高于正常组(0.64%,P<0.05),且TIM-1抗体组低于哮喘组(P<0.05)。(2)哮喘组及TIM-1抗体小鼠气道黏液细胞MUC5AC mRNA相对表达(17.3±1.4,5.6±0.3)及IL-13[(16.80±0.63)ng/ml,(5.70±0.64)ng/ml]、IL-4[(614.72±117.39)pg/ml,(325.78±86.54)pg/ml]、IL-5[(1 681.13±613.55)pg/ml,(513.42±86.87)pg/ml]水平均高于正常组[1,(1.09±0.25)ng/ml,(17.56±3.01)pg/ml,(30.78±9.67)pg/ml],TIM-1抗体组小鼠上述指标低于哮喘组(P<0.05)。(3)气道MUC5AC及IL-13表达与TIM-1+细胞表达均呈正相关(r1=0.946,P1=0.004;r2=0.984,P2=0.000)。结论哮喘小鼠外周血TIM-1+细胞升高,可致气道黏液过度分泌;抑制TIM-1表达可减少哮喘气道黏液高分泌。调节TIM-1表达有可能成为减少黏液高分泌及治疗哮喘的新途径。

慢性乙型肝炎患者血清HBVDNA含量和IL-12对其PBMC产生Th1/Th2类细胞因子影响的相关性研究

目的：研究慢性乙型肝炎患者血清ＨＢＶＤＮＡ含量对ＩＬ－１２诱导其ＰＢＭＣ产生Ｔｈ１／Ｔｈ２类细胞因子协同效应的影响。方法：分离 ５０例慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞，分别与 ＰＨＡ（１００ ｕｇ／ｍｌ）、ＨＢｃＡｇ（１ｕｇ／ｍｌ）、ＨＢｅＡｇ（ １ ｕｇ／ｍｌ）单独或联合ＩＬ－１２（１０ ｎｇ／ｍｌ）体外培养４８ ｈ，ＥＬＩＳＡ法检测培养上清液细胞因子 ＩＬ－２、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－４、ＩＬ－１０。荧光定量ＰＣＲ检测患者血清 ＤＮＡ含量，并分成 ＨＢＶＤＮＡ小于１０３拷贝／ｍｌ、１０３～１０５拷贝／ｍｌ、１０５～１０７拷贝／ｍｌ、大于 １０７拷贝／ｍｌ４组。结果：以 ＨＢＶＤＮＡ小于１０３拷贝／ｍｌ组做对照组，比较发现无论抗原（ＰＨＡ、ＨＢｃＡｇ、ＨＢｅＡｇ）单独诱导还是联合ＩＬ－１２共同诱导，随着血清ＨＢＶＤＮＡ含量的增高，ＰＢＭＣ产生ＩＬ－２和ＩＦＮ－γ水平逐渐降低，产生ＩＬ－４和ＩＬ－１０水平逐渐升高，并且ＩＬ－１２对ＰＢＭＣ产生ＩＦＮ－γ的增殖效应逐渐减弱，特别是血清ＨＢＶＤＮＡ大于 １０７拷贝／ｍｌ患者几乎无明显增殖效应。结论：高水平血清ＨＢＶＤＮＡ含量对ＩＬ－１２诱导慢性乙型肝炎ＰＢＭＣ产生ＩＦＮ－γ协同效?

体外光分离置换疗法对皮肤移植小鼠IL-12p70和Th1/Th2类细胞因子产生的影响

目的探讨输注体外光分离置换疗法处理的脾淋巴细胞对皮肤移植小鼠白细胞介素(IL)-12p70和辅助性T细胞(Th)1/Th2类细胞因子产生的影响。方法以C57BL/6小鼠为供体,BALB/c小鼠为受体,建立小鼠皮肤移植模型。分离C57BL/6和BALB/c小鼠脾淋巴细胞(CSP、BSP),制备经8-甲氧基补骨脂素联合长波紫外线(PUVA)处理的小鼠脾淋巴细胞(PUVA-SP)。根据受体静脉输注的成分将实验动物随机分为5组(每组12只):PUVA-BSP组、PUVA-CSP组、BSP组、CSP组及磷酸盐缓冲液(PBS)对照组,每组受体分别于术前7 d、手术当日和术后7 d按组别从尾静脉注入PUVA-BSP、PUVA-CSP、BSP、CSP或PBS。观察经PUVA处理脾淋巴细胞凋亡情况,检测受体小鼠外周血中IL-12p70和Th1/Th2类细胞因子产生的情况。结果移植术后,PUVA-BSP组和PUVA-CSP组小鼠外周血的IL-12p70表达水平明显低于BSP组、CSP组和PBS对照组(均为P<0.01);PUVA-BSP组和PUVA-CSP组的Th1类细胞因子IL-2、干扰素(IFN)-γ表达水平均明显低于BSP组、CSP组和PBS对照组(均为P<0.01);PUVA-BSP组和PUVA-CSP组的Th2类细胞因子IL-10表达水平明显高于BSP组、CSP组和PBS对照组(均为P<0.01)。结论输注足够数量的PUVA-SP可诱导受体体内低表达IL-12p70,并且诱导产生Th2免疫偏移。

不同HBV感染时期患者DNA载量与外周血AFP、GP-73及Th1/Th2细胞因子的关系分析

目的探究不同乙型肝炎病毒(HBV)感染时期患者DNA载量与外周血细胞甲胎蛋白(AFP)、高尔基体糖蛋白-73(GP-73)及Th1/Th2细胞因子表达水平的关系。方法选取2019年11月至2020年11月在本院就诊的HBV感染患者117例,根据患者感染的自然史分期准则分为免疫耐受期组(n=32)、免疫清除期组(n=45)、低复制期(n=23)和再活动期组(n=17)。比较各组患者的HBV-DNA载量、外周血AFP、GP-73和Th1/Th2细胞因子表达水平,分析HBV感染患者HBV-DNA载量与AFP、GP-73和Th1/Th2细胞因子表达水平的关系,评估AFP、GP-73和Th1/Th2细胞因子诊断预测HBV感染再活动期的价值。结果不同HBV感染时期患者的HBV-DNA载量、AFP、GP-73、Th1、Th2和Th1/Th2水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05),各组患者的HBV-DNA载量、AFP、GP-73和Th2表达水平比较,免疫耐受期组>免疫清除期组>再活动期组>低复制期组(P<0.05);Th1、Th1/Th2水平比较,免疫耐受期组<免疫清除期组<再活动期组<低复制期组(P<0.05)。多元线性回归分析结果显示,HBV感染患者的HBV-DNA载量与AFP、GP-73呈正相关,与Th1/Th2呈负相关(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,AFP、GP-73及Th1/Th2细胞因子对预测HBV感染再活动期均具有诊断价值(P<0.05),且GP-73的诊断价值高于AFP和Th1/Th2(P<0.05)。结论不同HBV感染时期患者的HBV-DNA载量、外周血AFP、GP-73及Th1/Th2细胞因子表达水平各不相同,患者HBV-DNA载量与AFP、GP-73和Th1/Th2存在明显相关性,AFP、GP-73和Th1/Th2可作为预测HBV感染再活动期的良好指标。

干扰素-α致老年丙型肝炎患者抑郁与Th1/Th2型细胞因子的相关分析

目的探讨干扰素-α致老年丙型肝炎患者抑郁症时Th1/Th2细胞因子失衡的变化情况。方法用半定量逆转录聚合酶链反应技术检测20例正常对照、54例丙型肝炎患者干扰素-α治疗12周时外周血单个核细胞内干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-4(IL-4)、白介素-10(IL-10)mRNA表达水平变化情况,同时应用Zung抑郁症自测量表(ZDS)对患者进行心理评估,然后对两组数据分析比对,进行相关性研究。结果老年女性丙型肝炎患者经过干扰素-α治疗后,抑郁积分数值明显增加,与中青年女性组患者以及老年男性组患者相比有显著性差异,且存在Th1/Th2细胞因子失衡,倾向于Th1,两者之间存在一定相关性。结论干扰素-α治疗丙型肝炎过程中,在老年女性患者更容易出现Th1/Th2细胞因子失衡和抑郁症状。

IFN-α对老年女性丙型病毒性肝炎患者Th1/Th2型细胞因子的影响

目的观察分析干扰素α治疗老年慢性丙型肝炎(CHC)时Th1/Th2细胞因子表达的变化并分析其临床意义。方法用半定量逆转录聚合酶链反应技术检测20例正常对照、54例CHC患者(老年女性组13例、老年男性组15例和中青年组26例)外周血单个核细胞内IFN-γ、TNF-αI、L-4I、L-10 mRNA表达水平的相对含量。结果 CHC患者中老年女性组更容易出现Th1类细胞因子IFN-γ和TNF-α的表达水平显著升高,Th2类细胞因子IL-4和IL-10的表达水平无显著变化,与正常对照组、老年男性组和中青年组存在显著差异(P<0.01,P<0.05)。结论干扰素α在治疗老年女性丙型肝炎患者发挥抗病毒治疗作用的同时,能够引起Th1/Th2细胞因子失衡,可能是导致自身免疫疾病原因之一。

IL-11对ITP患者Th1、Th2细胞及T-bet、GATA-3 mRNA的影响

目的:研究白细胞介素-11(IL-11)对免疫性血小板减少症(ITP)患者Th1、Th2细胞亚群及其调控因子T-bet mRNA和GATA-3 mRNA表达的影响。方法:从10例ITP患者静脉中抽取外周血提取单个核细胞,加入不同浓度IL-11(0、25、50、100、200 ng/mL)培养4 d后,应用流式细胞术和实时荧光定量反转录-多聚酶链反应法检测Th1、Th2细胞亚群比例及T-bet mRNA、GATA-3 mRNA表达水平。结果:当IL-11浓度为100 ng/mL时,与浓度为0的对照组差异最明显,表现为Th1比例及Th1/Th2比值下降,Th2比例升高,差异有统计学意义(P<0.01),同时T-bet mRNA表达下降,GATA-3 mRNA表达增加,T-bet/GATA-3比值显著下降,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:一定浓度的IL-11在体外培养中能促使ITP患者Th1细胞向Th2细胞转化,同时GATA-3 mRNA表达增加、T-bet mRNA表达下降。

基于NF-κB通路调控Th1/Th2平衡探讨三子汤治疗支气管哮喘急性发作期的临床研究

目的观察三子汤治疗支气管哮喘急性发作期的临床疗效及对核转录因子-κB(NF-κB)通路及Th1/Th2失衡的影响。方法将2020年12月-2022年11月广州中医药大学东莞医院收治的60例哮喘急性发作期患者随机分为治疗组和对照组,每组各30例。对照组给予西医常规治疗,治疗组在对照组治疗基础上给予三子汤治疗,2组均治疗2周。观察比较2组中医证候疗效及治疗前后中医证候积分、外周血嗜酸性粒细胞(EOS)计数、呼出气一氧化氮(FeNO)水平、最大呼气流速(PEF)、第1秒用力呼气容积(FEV_(1))及血清白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)、NF-κB p65水平。结果治疗组总有效率为96.7%(29/30),明显高于对照组的80.0%(24/30),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后2组中医证候积分、外周血EOS计数、FeNO水平及血清IL-4、NF-κB p65水平均较治疗前明显下降(P均<0.05),且治疗组均明显低于对照组(P均<0.05)。治疗后2组PEF、FEV_(1)及血清IL-2、IFN-γ水平均较治疗前明显升高(P均<0.05),且治疗组均明显高于对照组(P均<0.05)。结论三子汤可有效改善支气管哮喘急性发作期患者症状、气道炎症及肺功能,其作用机制与调控NF-κB通路,从而调节Th1/Th2平衡有关。

脑缺血/再灌注损伤大鼠脑组织Th1/Th2细胞平衡与PARP-1表达的相关性

目的:探讨大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型脑组织Th1/Th2细胞平衡与二磷酸腺苷核糖多聚酶-1(Poly(ADP-ribose)polymerase-1,PARP-1)表达是否存在相关性。方法:将健康雄性SD大鼠随机分成正常对照组、假手术组、模型组、PARP-1抑制剂PJ34组,按再灌注不同时间点分为6、12、24、48、72 h五个亚组,各组取材前进行神经功能损伤评分,氯化三苯基四氮唑(triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色评价脑梗死体积,RT-PCR技术检测脑缺血/再灌注损伤病灶中PARP-1 m RNA的表达,Western Blot技术检测PARP-1聚合体蛋白的表达,ELISA技术测定干扰素-γ(interferon-γ,INF-γ)、白介素4(interleukin4,IL-4)水平。结果:与假手术组比,模型组神经功能损伤评分、脑梗死体积、PARP-1表达及炎性反应效应细胞(helper T cell 1,Th1)与辅助性效应细胞(helper T cell 2,Th2)的比值均显著增加(P<0.01);与模型组比,PJ34组梗死体积明显减小(P<0.01),PARP-1表达、Th1/Th2比值均显著降低(P<0.01);Th1/Th2与PARP-1水平呈显著正相关(r=0.984,P<0.05)。结论:MCAO大鼠脑组织Th1/Th2细胞平衡状态与PARP-1表达存在相关性。